酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量PCR法对乙型肝炎的诊断价值比较

目的比较酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法在乙型肝炎诊断中的应用价值。方法选取120例疑似乙型肝炎患者作为本次研究对象,分别进行酶联免疫吸附测定法以及实时荧光定量PCR法检验。以病理检查为金标准,分析酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量PCR法的检查结果,对比两种检查方法的诊断效能,包括特异度、灵敏度以及准确度。结果120例疑似患者经病理检查确诊75例为乙型肝炎。酶联免疫吸附测定法检出阳性74例,阴性46例;实时荧光定量PCR法检出阳性75例,阴性45例。实时荧光定量PCR法检测乙型肝炎的特异度、灵敏度以及准确度分别为93.33%、96.00%、95.00%,均明显高于酶联免疫吸附测定法的73.33%、82.67%、79.17%,差异有统计学意义(χ^(2)=6.4800、6.9963、13.3724,P<0.05)。结论采用实时荧光定量PCR法进行乙型肝炎的检测具有较高的准确率,可以为医生诊断和治疗方案的制定及调整提供良好的依据。

生物检测技术在食品检验中的应用分析

本文通过对酶联免疫吸附技术、聚合酶链式反应技术、生物传感器技术和生物芯片技术等主流生物检测技术的原理和特点进行介绍,并结合这些技术在食品农药残留检测、食品中微生物检测、食品过敏原检测和食品营养物质检测方面的具体应用实例进行分析,揭示了生物检测技术凭借其高效、灵敏、特异、快速等优点在食品安全检测领域的广阔应用前景。研究表明,生物检测技术的应用极大地提高了食品安全检测的效率和准确性,为保障食品安全、维护消费者健康提供了有力的技术支撑。

研究ELISA联合荧光定量PCR检测丙型肝炎病毒的效果

目的评估丙型肝炎病毒检测应用酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)联合荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测的应用价值。方法选取2022年8月—2023年8月滕州市疾病预防控制中心接诊的90例疑似丙型肝炎病毒患者为研究对象,采用ELISA联合荧光定量PCR检测,以丙型肝炎病毒(Hepatitis Virus C,HCV)RNA检测结果作为“金标准”,分析检测方式的应用价值。结果HCV RNA检测结果显示,阳性率为47.78%,ELISA检测的阳性率40.00%,荧光定量PCR检测发现阳性量率42.22%,联合检测的阳性率46.67%。ELISA检测与荧光定量PCR检测在灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值以及阴性预测值方面比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。联合检测的灵敏度为93.02%、准确度为94.44%、阳性预测值为95.24%以及阴性预测值为93.75%,显著高于ELISA检测的67.44%、76.67%、80.56%、74.07%,联合检测的灵敏度、准确度显著高于荧光定量PCR检测(76.74%、83.33%),差异有统计学意义(P均<0.05)。结论丙型肝炎病毒检测应用ELISA联合荧光定量PCR检测检出率高。

南疆某规模化猪场猪瘟病原与抗体的检测分析

研究旨在调查南疆某规模化猪场免疫猪群的猪瘟抗原与抗体水平,为制定适应当地生产条件的免疫程序提供参考。试验运用酶联免疫吸附试验(ELISA)对该场免疫猪群的480份血清样品进行抗体检测与分析,并采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对采集的24份猪瘟疑似病料进行抗原检测。结果显示,对随机采集的480份血清样品进行猪瘟抗体检测,其中449份为阳性样品,阳性率为93.5%;不同类别群体中以母猪的抗体阳性率最高,为97.2%;2~4胎母猪与5~6胎母猪的抗体阳性率为97.8%;22~28 d的阳性率最低,为76.9%;36~50 d的仔猪抗体阳性率最高,为92.3%。对采集的24份猪瘟疑似病料进行抗原检测,显示均为阴性。研究表明,该规模化猪场的猪瘟免疫情况良好,未出现感染情况。

实时荧光定量聚合酶链反应对乙型肝炎病毒DNA的检验效果

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)对乙型肝炎(乙肝)患者进行乙肝病毒(HBV)DNA检验的效果。方法选择2020年9月—2022年10月在菏泽市第三人民医院进行健康体检的1000名受检者作为研究对象,其中500名纳入对照组,依托酶联免疫吸附法(ELISA)法对HBV-DNA开展检测操作;其余500名纳入观察组,运用实时荧光定量PCR法对HBV-DNA开展检测操作,比较两组HBV标志物[包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝炎e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]的检出率,分析不同阳性组合分布情况。结果观察组的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检出率均明显高于对照组(HBsAg:1.40%比0.20%,HBsAb:1.80%比0.40%,HBeAg:1.80%比0.20%,HBeAb:1.20%比0.00%,HBcAb:1.40%比0.00%,均P<0.05)。观察组的大三阳(HBsAg、HbeAg、HbcAb均阳性)、小三阳(HBsAg、HbeAb、HbcAb均阳性)检出率均明显高于对照组(大三阳:1.60%比0.20%,小三阳1.40%比0.20,均P<0.05)。对照组和观察组HBsAg及HBcAb均阳性、HBsAg及HBeAg均阳性、五项均阳性的检出率比较差异均无统计学意义(HBsAg及HBcAb均阳性:0.20%比0.20%,HBsAg及HBeAg均阳性:0.00%比0.20%,五项均阳性:0.20%比0.40%,均P>0.05)。结论应用实时荧光定量PCR法开展对HBV-DNA的检测效果较为突出,有较高的准确度,与ELISA相比应用价值理想。

食品微生物检测技术应用探讨

食品微生物检测对保障食品安全具有重要意义。本文概述了食品微生物检测技术的发展现状,重点阐述了聚合酶链式反应、酶联免疫吸附测定、生物传感器等常用检测技术的原理、步骤、应用情况,分析了各技术的优势和局限性,为食品微生物检测技术的选择提供参考。

微生物检测技术在食品检验中的应用探讨

随着人们对食品安全关注度的不断提高,微生物检测技术在食品检验中的应用越来越广泛。本文介绍了常见的微生物检测方法,探讨了其在食品检验中的应用情况和优势,并分析了当前微生物检测技术面临的挑战和未来发展方向。

生殖器疱疹病毒抗原ELISA与PCR检测结果的对比研究

目的:研究对比酶联免疫吸附法(ELISA法)及聚合酶链反应法(PCR法)在生殖器疱疹病毒抗原检测中的应用价值。方法:随机选取2017年1月至2022年10月在临沂市皮肤病医院进行诊治的疑似生殖器疱疹患者87例,采集患者标本并分别应用ELISA法及PCR法进行单纯疱疹病毒抗原检测。以病毒培养法检测结果作为金标准,分析ELISA法及PCR法在生殖器疱疹病毒抗原检测中的应用效果。结果:两种检测方法对HSV-1感染、HSV-2感染、混合感染的检出率以及总阳性检出率的差异均无统计学意义(P>0.05)。以病毒培养法检测结果为金标准,ELISA法检测与PCR法检测诊断生殖器疱疹灵敏度、准确度、特异度、阳性预测值、阴性预测值的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:ELISA法及PCR法在生殖器疱疹病毒抗原检测中的应用价值均较高,但是ELISA法具有经济实用、操作简单等特点,更加适合基层医院推广和应用。

不同检验方法对丙型肝炎的诊断效果分析

目的:分析不同检验方法对丙型肝炎的诊断效果。方法:选取2020年3月—2022年3月天水市第一人民医院收治的丙型肝炎患者90例作为研究对象。均采用酶联免疫吸附法、化学发光免疫分析法检测血清中的抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测血清中的HCV-RNA表达情况。结果:化学发光免疫分析法HCV-RNA阳性率高于酶联免疫吸附法、荧光定量PCR法,差异有统计学意义(P=0.019)。化学发光免疫分析法的灵敏度、准确性高于酶联免疫吸附法、荧光定量PCR法,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:在丙型肝炎的诊断中应用化学发光免疫法检测的阳性率、灵敏度、准确性较高,值得推广。

比较不同方法筛查无偿献血者人类免疫缺陷病毒抗体的效果

目的:分析血站无偿献血者人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体采用不同方法筛查的结果,为临床合理选择HIV检测方法提供依据。方法:抽取2022年1至12月在南阳市中心血站无偿献血者血液样本28000份,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)初筛、ELISA复查和核酸检测法筛查HIV抗体,并采用蛋白免疫印迹法进行确证,比较其一致性。结果:初筛28000份无偿献血者血液样本中的HIV抗体,ELISA法测定阳性率为0.100%,ELISA复查阳性率为0.075%,核酸测定阳性率为0.068%;确证试验阳性率为0.050%,0.018%为阴性,0.007%为不确定。ELISA复查阳性、ELISA初筛阳性、核酸阳性与确证试验阳性一致性好。初筛阳性样本中10份(35.71%)确证试验为阳性,其中7份(25.00%)S/CO值为1~<6;17份(60.71%)确证试验为阴性,其中9份(32.14%)S/CO值为1~<6;1份(3.57%)不确定,S/CO值为1~<6。ELISA复查阳性样本中14份(66.67%)确证试验为阳性,其中2份(9.52%)S/CO值为6~<10,12份(57.14%)S/CO值≥10;5份(19.05%)确证试验为阴性,其中3份(14.29%)S/CO值为0.8~<1,1份(4.76%)S/CO值为1~<6,1份(4.76%)S/CO值为6~<10;2份(9.52%)不确定,S/CO值为6~<10。核酸样本14份确证试验为阳性,其中9份(47.37%)S/CO值为1~<6,3份(15.79%)S/CO值6~<10,2份(10.53%)S/CO值为≥10;3份确证试验阴性,其中1份(5.26%)S/CO值为0.8~<1,2份(10.53%)S/CO值为1~<6;2份(10.53%)不确定,S/CO值为1~<6。HIV确证阳性无偿献血者,<35岁占57.14%,首次献血者所占比例更高(85.71%),HIV病毒主要通过性接触进行传播。结论:HIV抗体、核酸检测阳性、确证试验阳性之间保持比较高的一致性,都可以准确检出血液HIV感染;要重视35岁以下和首次献血者的HIV筛查。

孕妇TORCH感染与胎儿畸形的关系

目的 :探讨孕妇TORCH感染与胎儿畸形的关系 .方法 :采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测 10 0 0例孕妇血清TORCH的特异性抗体IgM ,对检测抗体阳性者和有畸胎史、不良孕产史的孕妇 ,用PCR法来检测TORCHDNA .结果 :孕妇TORCHIgM阳性率为 11.6 % ,其TOX ,RV ,HCMV ,HSVIgM阳性率分别为 3.6 0 % ,2 .5 0 % ,3.4 0 % ,2 .10 % ;母婴垂直传播率为 33.33% ,其中TOX ,RV ,HCMV ,HSV的垂直传播率分别为 4 3.33% ,2 6 .32 % ,34.6 2 % ,18.18% ;孕妇妊娠期间有上感症状者感染TORCHIgM阳性率 2 1.5 1%显著高于无上感症状者 9.34% (P <0 .0 1) ;有畸胎史TORCHIgM阳性率4 2 .10 %、不良孕产史 2 5 .4 0 % ,显著高于正常妊娠者 8.13% (P<0 .0 1) ;TORCH感染孕妇其胎儿畸形率 12 .37%显著高于无感染组 1.0 7% (P <0 .0 1) .结论 :孕妇TORCH感染是导致胎儿畸形的重要因素 .

PCR-ELISA法检测食品中空肠弯曲菌

针对空肠弯曲菌16S rRNA基因应用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,核酸探针5’端标记生物素,将聚合酶链式反应(PCR)、核酸液杂交以及酶联显色技术结合,对检测条件进行优化,建立食品中空肠弯曲菌的聚合酶链式反应-酶联免疫吸附分析法(PCR-ELISA)。该方法特异性强、灵敏度高(比PCR高10倍),可以快速、准确检测食品中污染的空肠弯曲菌。该方法可应用于临床诊断、食品卫生监控及出口食品的病原微生物检测等各个领域。

90例病毒性胃肠炎患者粪便中诺如病毒检出情况分析

目的了解病毒性胃肠炎患者中诺如病毒感染情况。方法收集北京市2007年2月5～17日共计90例病毒性胃肠炎患者的粪便标本,应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测粪便中诺如病毒核酸或抗原,并对RT-PCR阳性标本的PCR产物进行克隆测序。结果90例病毒性胃肠炎患者的粪便标本中,35例(38.89%)RT-PCR为诺如病毒核酸阳性,序列分析结果显示,诺如病毒GⅡ型34例(97.14%),GⅠ型1例(2.86%);90例中,39例(43.33%)为ELISA检测诺如病毒抗原阳性。以RT-PCR检测结果作为金标准进行比较,ELISA的灵敏度和特异度分别为97.14%(34/35)和90.91%(50/55)。结论诺如病毒是病毒性胃肠炎的主要病原,以GⅡ型流行为主。ELISA快速、简便,其灵敏度和特异度较高,可作为诺如病毒感染的初筛试验。

4种方法联合检测在菌阴肺结核临床诊断价值的研究

目的 探讨痰聚合酶链反应———微孔板杂交技术 (PCR ELISA)、抗脂阿拉伯甘露糖(LAM IgG)抗体、结核菌素 (PPD) 1TU皮试以及血清可溶性白细胞介素 2受体 (sIL 2R)水平 ,4种方法联合检测对初治菌阴肺结核患者临床诊断的意义。方法 以上述 4种方法检测初治菌阳肺结核57例 ,初治菌阴肺结核 58例 ,非结核肺疾病 41例 ,健康对照 36例。分别进行单项与联合检测 ,观察初治菌阴肺结核的特异性与敏感性。结果 PCR ELISA、LAM IgG、TB PPD及sIL 2R单项检测对菌阴肺结核的阳性检出率依次分别为 43 .1 % ,37.9% ,31 .0 % ,50 .0 %。联合检测对菌阴肺结核的阳性检出率 2联、3联及 4联依次分别为 56 .9% ,70 .7% ,84.5 % ,与单项检测的最高阳性检出率相比由50 .0 %提高到 84.5 % ;联合检测的特异性分别为 92 .2 % ,88.3 %和 84.4%。结论 通过 4种方法联合检测能显著提高菌阴肺结核的阳性检出率 ,同时也保持了相对高的特异性。联合检测对于菌阴肺结核的诊断 。

乙型肝炎病毒外膜大蛋白的检测及其临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)与乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)的相关性,及其检测对诊断乙型肝炎病毒复制的临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对180例HBsAg阳性血清标本进行HBV-LP和HBV-DNA的平行检测。结果在乙型肝炎病毒感染者血清中,HBV LP含量与HBV-DNA拷贝数间具有良好的正相关性(r=0.85,P<0.001);不同HBV-DNA拷贝数组别间HBV-LP含量差异具有统计学意义(P<0.01);在180例HBeAg阳性标本中,HBV-DNA阳性率为79.4%,HBV-LP的阳性率为83.9%,二者差异无统计学意义(P>0.05);在90例HBeAg阳性标本中,HBV-DNA、HBV-LP阳性率分别为94.4%(85/90)、95.6%(86/90),二者差异无统计学意义(P>0.05);在90例HBeAg阴性标本中,HBV-DNA与HBV-LP的阳性检出率分别为41.1%(37/90)、77.8%(70/90),差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 HBV-LP是判断乙型肝炎病毒感染者体内病毒复制程度的可靠指标,尤其是HBeAg阴性患者体内病毒复制及预后判断良好的血清学检测指标。

免疫渗滤与胶体金快速检测在筛查甲型流感中诊断效率分析

目的评价胶体金和免疫渗滤法在筛查临床甲型流感病毒感染中的诊断效率。方法收集2009.6～2009.10我院发热门诊流感样病例咽拭子标本297例,分别用免疫渗滤法和胶体金法进行快速检测,同时采用实时荧光定量PCR和测序进行验证,以评价两种方法的诊断效率。结果在实时荧光定量PCR法及测序证实为甲型流感166份,其中免疫渗滤法灵敏度为54.82%(91/166),与PCR法符合率为66.67%,Kappa值为0.35;胶体金法灵敏度为4.22%(7/166),符合率为45.79%,Kappa值为0.02;在131份甲型流感病毒阴性的标本中,免疫渗滤法特异性为81.68%(107/131),胶体金法特异性为98.47%(129/131);在实时荧光定量PCR检测为甲型H1N1阳性的99份标本中,免疫渗滤法检出率为67.3%,胶体金检出率为5.1%;在两种方法结果不符合108份标本中,免疫渗滤法阳性而胶体金阴性的标本107份,实时荧光定量PCR法并序列测定显示其中84份为甲型流感病毒阳性,23份为阴性;免疫渗滤法阴性而胶体金阳性的1份标本,甲型流感病毒实时荧光PCR检测为阴性。免疫渗滤法在甲型流感病毒的检出率和与PCR方法的符合率方面明显高于胶体金法(P<0.05)。结论免疫渗滤法在甲型流感病毒筛查中优于胶体金法,显示出良好的临床应用前景。

人巨细胞病毒宫内感染产前诊断方法的研究

目的:探索人巨细胞病毒(HCMV)宫内感染产前诊断的最佳方法。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、巢式PCR(N-PCR)和逆转录PCR(RT-PCR)对比分析武汉、上海和沈阳3地3908例孕妇HCMV感染状况及其对妊娠结局的影响。结果:孕妇HCMV IgM检出率为6.24%,与HCMV DNA和晚期mRNA的检测符合率分别为59.03%和56.49%。活动性感染孕妇的宫内传播率(41.58%)明显高于对照组(15.87%)。HCMV晚期mRNA阳性的宫内感染儿流产、早产发生率明显升高。采集绒毛、羊水和脐血进行产前诊断的安全性良好。结论:在应用ELISA法进行初筛的基础上,联合应用N-PCR和RT-PCR技术检测HCMV DNA和晚期mRNA表达,是产前诊断HCMV宫内感染安全而可靠的方法之一。

氟对大鼠成骨细胞Ⅰ型胶原表达的影响

目的研究不同剂量的氟对体外培养大鼠乳鼠成骨细胞中Ⅰ型胶原表达的影响。方法体外培养Wistar大鼠乳鼠成骨细胞,给予不同剂量的氟,提取RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ⅰ型胶原mRNA:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测培养液上清中的Ⅰ型胶原蛋白质。结果与对照组相比,1、2及4 mg／L F-均能促进Ⅰ型胶原表达,但在蛋白质表达方面培养48 h后只有2、4 mg／L F-组与正常对照组差异有统计学意义(P<0．05),而在培养72 h后各加氟组与正常对照组相比差异均有统计学意义(P< 0．01);在mRNA表达方面培养48 h后只有2 mg／L F-组与正常对照组差异有统计学意义(P<0．01),而在培养 72 h后2 mg／L F-和4 mg／L F-组与正常对照组相比差异均有统计学意义(P<0．01)。结论氟可促进成骨细胞Ⅰ型胶原的表达,且与氟化物水平以及作用时间有关。

2012年江西地区重症手足口病病原分析

目的分析2012年度江西地区重症手足口病（HFMD）的病原学及流行病学特征，为重症HFMD的诊治及预防提供实验依据。方法收集江西省儿童医院2012年1～12月211侧重症HFMD患儿咽部拭子和血清，实时定量PCR方法检测咽拭子肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒16型（CA16）及肠道病毒通用型（EVU）核酸，ELISA捕获法检测血清EV71-IgM和CA16-IgM抗体。结果211例重症HFMD患儿中，男性占63．0％（135／211），且1～2岁比例最高，为31．7％（67／211）；重症HFMD除12月份外全年均有发生，5月份达全年最高峰；病原体以EV71型为主，阳性率达70．6％（149／211）；CA16阳性率为8．1％（17／211）；非EV71／CA16型EVU阳性率为8．1％（L7／2U）；EV71、CA16IgM抗体检测与核酸检测方法一致程度较好，Kappa值分剐为0．722和0．815（P％0．01）。结论2012年度江西地区儿童重症HFMD以EV71感染为主，2岁以下男性儿童为重症HFMD高发人群；EV71、CA16IgM抗体测定与检测方法一致程度较高，在重症HFMD诊断中具有重要意义。

氧化苦参碱对人胃癌细胞杀伤作用的机制

目的:探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OM)对人胃癌细胞株MKN45的杀伤作用及其抗肿瘤作用的机制.方法:培养人胃癌MKN45细胞,以0.5,1,2,4,6 g/L OM处理.采用四唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪、聚合酶链反应(PCR),酶联免疫吸附测定(ELISA)和RT-PCR法检测OM对MKN45细胞的杀伤作用、细胞周期分布、端粒酶活性和端粒酶逆转录酶(hTERT)及其上游调控基因(c-myc,p53,mad1)表达的影响.结果:OM对MKN45细胞具有剂量依赖性杀伤作用,半数抑制浓度(IC_(50))78 g/L.OM作用48 h后,与对照组相比,在2 g/L剂量组,MKN45 G0/G1期细胞增加(62.2%±1.3% vs 56.7%±4.0%,P<0.05)、G2/M期细胞减少(5.4%±1.1% vs 10.0%±2.8%,P<0.05);在4 g/L剂量组,S期细胞减少(30.5%±1.3% vs 33.4%±1.2%,P<0.05).OM可抑制MKN45细胞的端粒酶活性,其作用呈剂量依赖性.OM可引起MKN45细胞hTERT基因表达下调,p53和mad1基因的表达升高,对c-myc基因的表达无影响.结论:OM对人胃癌细胞株MKN45具有杀伤作用,可能通过影响hTERT及其上游调控基因的表达来抑制肿瘤细胞端粒酶活性,发挥其抗肿瘤作用.