白头翁汤通过保护微血管内皮细胞的完整性及PMNs迁移杀菌功能的影响

本研究旨在研究白头翁汤(PD)对脂多糖(LPS)诱导内皮细胞损伤的保护作用,从而揭示白头翁汤的药理作用。分别采用水溶性四氮唑(WST^(-1))、乳酸脱氢酶(LDH)、苏木素伊红(HE)和Hoechst33342染色法检测PD和LPS对大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(RIMVECs)增殖、细胞毒性、细胞连接和细胞核变化的影响;建立中性粒细胞(PMNs)跨RIMVECs迁移的Transwel模型,检测PD对LPS损伤的RIMVECs后PMNs细胞内和细胞外细菌数量的影响。结果显示,LPS(1μg·mL^(-1))致RIMVECs细胞核萎缩、细胞膜损坏,细胞毒性百分比达53.2%;细胞连接破坏导致细胞脱落,脱落率为39.6%。PD(20μg·mL^(-1))对上述损伤有明显的保护作用。在20μg·mL^(-1)PD作用下,LPS诱导的跨内皮迁移的PMNs细胞内外细菌的存活明显减少(P<0.01)。结果揭示PD可以有效保护LPS损伤的RIMVECs从而增强PMNs的杀菌能力,为临床治疗动物细菌性疾病用药提供理论依据。

白头翁汤对大鼠跨内皮迁移的中性粒细胞溶菌酶的影响

为研究白头翁汤(PD)的抗菌机制,利用Transwell体系建立细菌脂多糖(LPS)诱导的白细胞迁移模型,在20μg·mL^-1PD作用下,采用琼脂糖火箭电泳和荧光测定的方法,对穿过和不穿过大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(RIMECs)的中性粒细胞(PMNs)溶菌酶浓度和活性测定,并对测定结果进行统计学检验。结果表明跨内皮迁移的PMNs中,PD+L,PS组与对照组、LPS组和PD组相比溶菌酶浓度极显著升高(P<0.01),其溶菌酶活性显著升高(P<0.05);不跨内皮迁移的PMNs各组溶菌酶浓度和活性无显著差异(P>0.05)。结果表明白头翁汤治疗动物细菌性疾病机理之一是与其保护RIMECs不受LPS损伤和激活跨内皮PMNs溶菌酶密切相关。

溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠中性粒细胞凋亡的影响及其机制

探讨溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜外周血中性粒细胞(PMN)的作用及其机制。采用5%2,4,6三硝基苯磺酸100 mg/kg灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,动物分为模型组、治疗组(高、中、低剂量)和阳性对照组。第3天开始,除正常组外,各组分别按剂量给予生理盐水、美沙拉嗪(阳性对照)、溃结灵处理,至第10天后处死动物。肉眼结合显微镜观察结肠组织,进行形态学评分;采用流式细胞仪检测动物外周血PMN凋亡,ELISA法检测IL-8、NO、ICAM-1水平。结果发现,中、高剂量(每日9.2、18.3 g/kg)溃结灵具有改善大鼠UC和提高外周血PMN凋亡率的效果(P<0.05);凋亡率随炎症好转有上升趋势并与溃结灵的使用剂量呈正相关;与模型组比较,溃结灵中、高剂量组和美沙拉嗪组均显著降低IL-8、NO和ICAM-1的水平(P<0.01),且IL-8、NO和ICAM-1水平降低与溃结灵剂量呈正相关;PMN凋亡率与IL-8、NO和ICAM-1相关系数分别为:-0.792 6、-0.705 1、-0.593 7。结果提示溃结灵对UC有明显治疗效果,并可能通过下调IL-8、NO、ICAM-1水平进而提高PMN凋亡率来发挥治疗作用。

牙科粘结剂对人中性粒细胞的影响

目的:研究3种固定修复用粘结剂对人中性粒细胞(polymorph nuclear neutrophils,PMNs)相关活性以及致炎性等方面的影响。方法:在24孔板底部铺上玻璃离子水门汀、聚羧酸锌水门汀、光固化树脂水门汀,采集健康成人志愿者静脉血分离提纯PMNs,将PMNs与3种粘结剂接触培养4 h后,检测细胞的早期凋亡率、坏死率以及存活率的变化,产生的活性氧簇(reactiveoxygen species,ROS)以及分泌白介素(IL)-8的量。结果:3组粘结剂的早期凋亡率、坏死率和存活率两两比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中聚羧酸锌水门汀组早期凋亡率、坏死率最高,存活率最低;玻璃离子水门汀组早期凋亡率、坏死率最低,存活率最高。玻璃离子水门汀组的早期凋亡率与存活率与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而3组粘结剂的坏死率均高于空白对照组(P<0.05)。PMNs释放IL-8的量,3组粘结剂均高于空白对照组,其中聚羧酸锌水门汀组最高,玻璃离子水门汀组最低,差异有统计学意义(P<0.05)。PMNs的ROS产生强度,只有玻璃离子水门汀组高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:3种粘结剂对人中性粒细胞的相关活性以及致炎性均有影响,其中玻璃离子水门汀的致炎性相对较低,抗菌性能相对较高。

粘结剂对人中性粒细胞活力影响的实验观察

目的探讨3种固定修复用粘结剂影响人中性粒细胞(polymorph nuclear neutrophils,PMNs)的存活率、早期凋亡率以及坏死率。方法采用流式细胞术检测PMNs与玻璃离子水门汀、聚羧酸锌水门汀、光固化树脂3种粘结剂直接接触4 h后其存活率、早期凋亡率以及坏死率的变化。结果流式细胞仪观察3组粘结剂的PMNs早期凋亡率、坏死率均高于空白对照组,3组粘结剂存活率均低于空白对照组,其中聚羧酸锌水门汀组早期凋亡率、坏死率最高,存活率最低;玻璃离子组早期凋亡率,坏死率最低,存活率最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 3种粘结剂促进PMNs的早期凋亡、坏死,导致存活的PMNs的数目减少,从而可能使局部炎症产生以及抗菌性下降。