新疆马铃薯黑痣病病原菌的分离及鉴定

【目的】分离鉴定引起新疆马铃薯黑痣病病原菌,为筛选防治该病药剂奠定基础。【方法】从新疆吉木萨尔县、奇台县、乌鲁木齐市达坂城区和昭苏县等马铃薯种植区采集马铃薯块茎,通过组织分离法从带有马铃薯黑痣病的块茎分离病原菌,利用电子显微镜观察病原菌的形态特征,进行对峙培养和ITS序列分析,鉴定融合群。【结果】从新疆吉木萨尔县、奇台县、乌鲁木齐市达坂城区和昭苏县分离的4株病原菌均能使马铃薯块茎出现马铃薯黑痣病症状,分离菌株均为AG3融合群。【结论】AG3融合群是新疆马铃薯黑痣病的主要致病群。

马铃薯种质资源抗黑痣病鉴定及SSR聚类分析

马铃薯黑痣病已成为影响马铃薯产量和商品价值的重要土传病害。为丰富马铃薯抗黑痣病种质资源,提高抗黑痣病育种工作效率,研究通过54份马铃薯种质资源地下茎与匍匐茎黑痣病抗性评价,共筛选出7份中抗资源,分别为克17-33-270、龙18-124-8、龙18-7-100、ND11-7-22、克18-134-5、克17-115-1、克17-6-9。研究利用8对SSR适宜引物对7份抗性材料DNA进行PCR扩增,获得SSR多态性条带42条,多态性比率89.36%,遗传相似性系数在0.444 4~0.833 3之间,以相似性系数0.62为基准,可将7份抗性材料分为3类,其中克18-134-5和克17-115-1为一类;龙18-124-8和龙18-7-100为一类;克17-33-270、ND11-7-22和克17-6-9为一类。

马铃薯黑痣病生防菌的筛选和鉴定及其生长条件的研究

从甘肃省景泰县条山农场不同连作年限的马铃薯地块中取根际土样品,分离筛选马铃薯黑痣病病原菌-立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）的拮抗菌。采用土壤平板稀释、对峙法筛选拮抗菌;结合形态特征、生理生化及16SrDNA分子鉴定;采用单因素试验设计对G1菌株的生长条件进行初步试验。通过初筛和复筛,从108株细菌中获得1株对立枯丝核菌拮抗效果稳定、拮抗能力较强的细菌G1。采用平板对峙法测定其拮抗作用,抑菌带宽度达6mm,抑菌圈直径〉2.5 cm,抑菌率为66.7%。结合形态特征、生理生化及16SrDNA分子鉴定,G1为类芽孢杆菌（Paenibacillus sp.）;采用单因素试验设计对G1菌株的生长条件进行初步试验。结果表明,菌株G1在4℃～45℃,pH5～10,盐浓度0～50 g.L-1都能生长,碳源、氮源利用广泛,最适条件为：温度37℃,pH 7,蔗糖为碳源,蛋白胨为氮源,盐浓度为10 g.L-1。拮抗菌G1被鉴定为类芽孢杆菌,该菌株抑菌带较宽、抑菌效果稳定,生长条件与马铃薯生长的大田环境基本相符,具有作为一株优良生防菌的必要条件。

碳酸氢盐对马铃薯黑痣病菌毒力及田间防效

为明确碳酸氢盐对马铃薯黑痣病菌的毒力及田间防效,采用菌丝生长速率法,测定了碳酸氢盐对马铃薯黑痣病菌的毒力;并通过盆栽防治试验及田间防治试验,研究了碳酸氢盐对马铃薯黑痣病的防治效果。结果表明:碳酸氢铵抑制马铃薯黑痣病菌菌丝生长的有效中浓度EC50仅为0.71g/L,碳酸氢钾EC50为3.8g/L;在PSA培养基中同时加入0.79g/L碳酸氢铵、1g/L碳酸氢钾与在PSA培养基中含1.58g/L碳酸氢铵的抑菌效果一样;尿素对马铃薯黑痣病没有防治效果。碳酸氢铵与碳酸氢钾混配对该病有良好的防治作用,相对尿素最高防治效果可达到63.4%。覆膜栽培能够提高碳酸氢盐的防效和马铃薯产量。碳酸氢盐可用于田间马铃薯黑痣病的防治。

云南省马铃薯黑痣病病原菌融合群鉴定及8种药剂对其的毒力

由立枯丝核菌引起的马铃薯黑痣病是一种常见的土壤和种薯传播病害,在世界各地均有发生。本试验对分离纯化的67个丝核菌菌株进行融合群测定,结果表明:67个菌株都属于AG3融合群;对其中来自6个不同地域的11个菌株进行ITS测定,11个菌株的相似度为99%。8种药剂对马铃薯黑痣病菌的毒力测定结果表明,20%氟胺·嘧菌酯水分散粒剂50mg/L和25g/L咯菌腈悬浮种衣剂50mg/L的抑菌效果较好,室内抑菌效果可达100%。

杀菌剂对马铃薯黑痣病菌的室内毒力及田间防效

为解决生产中缺少防治马铃薯黑痣病的有效化学药剂问题,采用生长速率法测定了10种药剂对供试马铃薯黑痣病菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)菌株的室内毒力,并选择活性较好的5种药剂进行田间防效试验。结果表明,50%咪鲜胺铜盐SC、20%吡噻菌胺SC、42.8%氟菌·肟菌脂SC、25 g·L^(-1)咯菌腈FS以及50%异菌脲WP毒力较强,EC50值分别为0.0762、0.6899、0.7221、0.9003和0.9251μg·mL^(-1);这5种药剂对马铃薯黑痣病也具有一定的防效,其中50%咪鲜胺铜盐SC和25 g·L^(-1)咯菌腈FS对马铃薯黑痣病的防效较好,对马铃薯植株和薯块黑痣病的防效均在78%以上。

几种杀菌剂对马铃薯黑痣病的防效

马铃薯黑痣病(Rhizoctonia solani Kühn)在内蒙古发生普遍而又严重。2013年通过田间小区方法进行了4种杀菌剂防治试验。结果表明:24%满穗悬浮剂90 mL/667 m2、50%BAS70301F悬浮剂33.3 mL/667 m2、30%BAS7004F悬浮剂40 mL/667 m2和25%阿米西达悬浮剂60 mL/667 m2处理,防效分别为93.0%、90.4%、89.3%和86.6%,增产分别为17.5%、15.3%、13.1%和11.9%,均具有优良的防治效果。

马铃薯黑痣病生防菌的筛选鉴定及生长条件研究

采用稀释平板法,从马铃薯根际土壤中筛选到1株对马铃薯黑痣病病原菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)有良好拮抗效果的生防菌株QHZ-M1,抑菌率达到59.8%;通过生理生化和16S rDNA鉴定,QHZ-M1与芽孢杆菌属(Bacillus)同源性高达99%,且与B.axarquiensis CR-119亲缘关系最近,由此将其鉴定为芽孢杆菌Bacillus axarquiensis。对其生长条件进行了研究,结果表明,菌株QHZ-M1的生长速率较快,接种20 h后就进入稳定期,其生长最适温度为37℃,最适pH 8,最适盐度<25 g/L,最适碳源和氮源分别为蔗糖和酵母浸粉。QHZ-M1对马铃薯黑痣病具有较好的防治效果,具有作为生防制剂的潜力。

微生物菌剂在马铃薯上的田间药效试验

研究枯草芽孢杆菌等微生物菌剂在马铃薯连作栽培过程中,对马铃薯疮痂病、黑痣病、小薯率及产量的影响,以期筛选出防治马铃薯疮痂病、黑痣病效果最佳的微生物菌剂。试验选取了8种不同的微生物菌剂进行田间药效试验,结果表明:马铃薯专用微生物菌剂显著促进马铃薯产量的提高,每公顷用量达到225 kg时效果最佳且小薯率最低;马铃薯专用微生物菌剂能够显著降低马铃薯疮痂病、黑痣病的病情指数,建议防治马铃薯疮痂病、黑痣病的最佳用量为225 kg/hm^2。

拔苗和剪苗对甘薯黑痣病发生的影响

[目的]探讨拔苗和剪苗对甘薯黑痣病发生的影响。[方法]利用甘薯黑痣病带病种薯育苗,比较拔苗和剪苗对甘薯黑痣病发生的影响。[结果]拔苗栽插会将黑痣病菌携带至大田引起发病,而剪苗则可以有效地阻隔黑痣病菌,防止黑痣病的传播蔓延。[结论]试验结果为控制黑痣病传播和推广剪苗技术提供了理论依据。

不同药剂复合拌种对马铃薯黑痣病和疮痂病的田间防效

马铃薯黑痣病和疮痂病是影响马铃薯品相及产量的主要土传性病害。为有效防控该类病害,选取0.3%四霉素水剂、3%中生菌素可湿性粉剂等9种药剂进行马铃薯复合拌种试验。结果表明,4个复合拌种处理对马铃薯出苗和长势均具有一定的促进作用,对马铃薯黑痣病的防效为38.10%~69.66%,对马铃薯疮痂病的防效为32.06%~61.50%。各处理马铃薯增产14.52%~40.36%,均增产显著。其中每100 kg切块种薯用2.5%咯菌腈悬浮种衣剂10 mL+0.3%四霉素水剂15 mL+0.136%赤·吲乙·芸苔可湿性粉剂2 g复合拌种处理,对马铃薯黑痣病防效为69.66%,对疮痂病防效为61.50%,增产率为40.36%,均显著高于其他处理,适于生产上推广。

解淀粉芽胞杆菌PHODG36的解磷、促生及防治马铃薯黑痣病的功能分析

为筛选兼具高效溶磷和抑菌防病作用的多功能细菌,本试验采用溶磷圈法结合钼锑抗法对作物根围土壤中的解磷菌进行筛选和平板对峙法测定解磷菌株对马铃薯主要病原菌的抑制能力;通过盆栽试验评价解磷菌株对马铃薯的促生作用和对马铃薯黑痣病的防治效果以及形态特征、Biolog微生物鉴定系统及多基因序列(16S rDNA以及gyrA、gyrB、rpoB和rpoC)分析对解磷菌株进行分类鉴定。结果表明,PHODG36菌株表现高效解无机磷活性,其溶磷量为79.7 mg/L;该菌株对5种马铃薯病原菌均具有抑制作用,其中对马铃薯黑痣病菌的抑菌率最高,达69.6%;浇施该菌株发酵液(菌含量5×10^(8) CFU/mL)后,对马铃薯幼苗有明显的促生作用,株高、地上鲜重和干重、根鲜重和干重较对照分别增加178.3%、509.8%、396.9%、160.4%和146.4%,同时对马铃薯黑痣病有显著防效,达56.8%;经鉴定PHODG36菌株为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amylolique-faciens)。PHODG36菌株兼具解磷、促生及防病等多种重要作用,可应用于防病增产多功能微生物产品的产业化开发。

黑龙江省马铃薯黑痣病菌融合群类型分析

为明确黑龙江省马铃薯黑痣病菌融合群类型和分布情况,采用ITS序列分析法分析了2012~2021年采自黑龙江省10个马铃薯种植区的482份马铃薯黑痣病菌株的融合群类型及频率分布。试验共鉴定出5种融合群,其中344个菌株属于AG-3,出现频率为71.37%;70个菌株属于AG-5,出现频率为14.52%;32个菌株属于AG-2,出现频率为6.64%;34个菌株属于AG-4,出现频率为7.05%;2个菌株属于AG-1,出现频率为0.42%。在AG-2和AG-4融合群中分别鉴定出AG-2-1、AG-2-2ⅢB和AG-2-2Ⅳ以及AG-4-HGI和AG-4-HGII五个融合亚群,出现频率依次为50.00%、6.25%、43.75%和70.59%、29.41%。结合黑龙江省马铃薯种植区域和融合群类型分析,表明AG-3为优势致病融合群,在全省马铃薯主产区均有分布,同时也反映出黑龙江省马铃薯黑痣病菌融合群类型较为复杂。因此,加强对黑痣病菌融合群类型变化的监测,对更好地进行马铃薯黑痣病防控具有重要意义。

防治我国北方一季作区马铃薯主要病害的高效药剂筛选

2015~2016年通过田间药效试验,明确几种药剂对马铃薯晚疫病、早疫病和黑痣病的防治效果及其使用技术,为其推广应用于马铃薯主要病害的防治提供依据。结果表明:在晚疫病发生初期叶面喷施25%嘧菌酯SC 75 g a.i./hm^2、60%霜脲氰·嘧菌酯WG 405~540 g a.i./hm^2或30%氟啶胺·氰霜唑SC 76.5 g a.i./hm^2,每隔7 d喷施1次,连喷3次,对晚疫病防效可达83%以上;在早疫病发生初期叶面喷施20%嘧菌酯WG135~180 g a.i./hm^2,每隔7 d喷施1次,连喷3次,对早疫病防效高于84%;播种时沟施250 g/L嘧菌酯SC 225 g a.i./hm^2或325 g/L苯醚甲环唑·嘧菌酯SC 438.8~536.3 g a.i./hm^2,或者播种前用90 g/L氟唑环菌胺·咯菌腈FS按照63 g a.i./t的剂量拌种,对植株黑痣病的防效均高于60%;播种前用90 g/L氟唑环菌胺·咯菌腈FS按照45~63 g a.i./t的剂量拌种,对薯块黑痣病的防效高于60%。在生产中,可以使用以上筛选到的高效药剂防治马铃薯晚疫病、早疫病和黑痣病。

宁夏马铃薯黑痣病发生特点及综合防控技术

马铃薯黑痣病是宁夏马铃薯产业中危害最大的病害之一。通过研究宁夏马铃薯黑痣病发生规律,借鉴国内外有关马铃薯黑痣病的防治技术,明确了宁夏马铃薯黑痣病农业和化学等防治方法,提出了宁夏地区马铃薯黑痣病综合防控技术,实现了马铃薯黑痣病的标准化防控,为宁夏马铃薯产业提质增效和可持续发展提供强有力的科技支撑。

植物源农药丁子香酚与苦参碱对两种马铃薯主要病害的毒力测定及评价

为筛选防治马铃薯黑痣病和早疫病的高效低毒植物源杀菌剂,降低有效用药量,提高防治效果,本研究采用菌丝生长速率法测定植物源农药丁子香酚和苦参碱对马铃薯黑痣病菌和早疫病菌的毒力,分别以咯菌腈和代森锰锌为对照。结果表明:1.1%丁子香酚和1.5%苦参碱对两种病原菌均具有较好的毒力,对马铃薯黑痣病的EC50值分别为2.1014和2.4421 mg·L^(-1),对马铃薯早疫病的EC50值分别为0.7610和0.8752 mg·L^(-1),显著性分析表明1.1%丁子香酚和1.5%苦参碱之间抑菌效果差异不显著,但相对于对照药剂均表现为差异显著,说明与病原菌防治常规药剂相比这两种植物源药剂均具有较好的室内抑菌效果。

250 g/L嘧菌酯悬浮剂对2个地区马铃薯黑痣病的防治效果

杀菌剂防治马铃薯黑痣病是生产中采用的主要措施。在河北和内蒙古2个马铃薯种植区,研究了250 g/L嘧菌酯悬浮剂对马铃薯黑痣病的田间防治效果。结果表明,沟施250 g/L嘧菌酯悬浮剂对2个地区马铃薯黑痣病均具有较好的防效;在河北地区,250 g/L嘧菌酯悬浮剂有效成分用量为225 g/hm2时,对马铃薯茎部和薯块黑痣病的防效分别达到了72.0%和85.1%;在内蒙古地区的防效更好,各试验处理对薯块黑痣病的防效均达到了80.6%~87.2%。该试验结果为250 g/L嘧菌酯悬浮剂在生产上的推广使用提供理论依据。

马铃薯黑痣病菌拮抗细菌的筛选及鉴定

为分离筛选出对马铃薯黑痣病菌有较强拮抗作用的生防菌,采用平板对峙筛选拮抗细菌,盆栽试验测定其防治效果,通过形态特征、生理生化特性及16S rRNA基因序列鉴定生防细菌。结果表明,通过筛选获得1株有明显拮抗效果的细菌KSD17,菌株平板对病菌抑菌率高达78.91%。该菌株具有产纤维素酶、蛋白酶、β-1,3-葡聚糖酶能力,盆栽防效为66.17%,且对马铃薯植株株高和匍匐茎数均有提高,分别增加了9.05%和22.0%。菌落呈不透明乳白色,无皱褶,粘稠,无色素产生,边缘不规则,结合16S rRNA基因序列和生理生化分析,将其鉴定为多粘类芽孢杆菌。拮抗菌株KSD17是具有较强生防潜能的菌株,对防治马铃薯黑痣病生物菌剂的开发具有良好的前景。

解淀粉芽孢杆菌HMB33604的抑菌物质及对马铃薯黑痣病的防治效果

【目的】由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani AG-3)引起的马铃薯黑痣病是马铃薯生产中重要的土传病害,严重影响马铃薯的产量和质量。利用微生物杀菌剂防治马铃薯黑痣病是环境友好、切实可行的措施之一。本研究旨在获得有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌并明确其防病作用方式,为生防细菌发酵工艺的优化、微生物杀菌剂的合理施用提供科学依据。【方法】通过对峙培养法和温室盆栽试验筛选有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌,通过Biolog微生物鉴定系统、16S rDNA序列以及gyrA、gyrB、rpoB和rpoC多基因序列分析对生防细菌进行分类鉴定。通过盆栽试验比较生防细菌菌株发酵液、无菌体上清液和菌体悬浮液对马铃薯黑痣病的防治效果,利用高效液相色谱(HPLC)对脂肽提取物进行分离,通过抑菌活性测定结合质谱(UPLC-Triple TOF-MS/MS)技术鉴定生防细菌产生的抑菌活性物质。采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术测定马铃薯根际黑痣病菌的DNA拷贝数。【结果】通过对2106株细菌进行筛选,获得3株有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌,其中HMB33604菌株对马铃薯黑痣病的防治效果较高,达到52.9%。通过生理生化及多基因序列比对,将HMB33604菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。该菌株发酵液和上清液对马铃薯黑痣病具有显著的防治效果,分别为52.2%和66.4%,而菌体悬浮液对马铃薯黑痣病的防治效果仅为16.9%,证明该菌株主要通过产生抑菌活性物质而起到防治马铃薯黑痣病的作用。HMB33604菌株可以产生泛革素(fengycin)、伊枯草菌素A(iturin A)和表面活性素(surfactin),抑菌试验证明泛革素和伊枯草菌素是HMB33604菌株产生的主要抑菌活性物质,这两种脂肽类抗生素能够显著抑制黑痣病菌的生长,并且造成菌丝畸形。菌株发酵液和无菌体上清液均显著降低马铃薯根际黑痣病菌的DNA拷贝数,与对照相比分别降低了60.3%和64.0%;而菌体悬浮液处理后根际黑痣病菌的DNA拷贝数仅降低10.3%。【结论】获得一株有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌——解淀粉芽孢杆菌HMB33604,该菌株主要通过产生抑菌活性物质而发挥生防作用。泛革素和伊枯草菌素是HMB33604菌株产生的主要抑菌活性物质。泛革素和伊枯草菌素不仅造成黑痣病菌菌丝畸形,还可显著降低马铃薯根际黑痣病菌的数量,从而有效防治马铃薯黑痣病。

马铃薯黑痣病药剂筛选试验

选用7种药剂拌种防治马铃薯黑痣病。结果表明,所有药剂拌种处理均对马铃薯黑痣病有较好的防控作用,防治效果为68.21%~88.02%。质量分数为8%氟环·咯菌腈FS和质量分数24%噻呋酰胺SC无论在地下茎还是在薯块上都有很好的防控效果,尤其是在地下茎黑痣病的防控上显著优于其他药剂。推荐为大同地区马铃薯黑痣病防控首选药剂。