电子直线加速器照射对神经胶质瘤SHG44细胞MMP2 ppGalNAcT2表达的影响及牛磺酸的防护作用

目的 :探讨电子直线加速器照射对SHG4 4细胞MMP2、ppGalNAcT2表达的影响 ,并探讨牛磺酸对此影响的防护作用。方法 :电子直线加速器 15Gy照射细胞SHG4 4作为阳性对照组 ,不照射的作为阴性对照组 ,另设三组加药组 15Gy照射 ,加药量分别为 5 0mg/L、10 0mg/L、2 0 0mg/L ,照后 12h收集。采用RT PCR法检测MMP2、ppGalNAcT2mRNA的表达差异变化。结果 :电子直线加速器照射SHG4 4细胞后MMP2上升 ,ppGalNAcT2下降 ,两者呈负相关性。而牛磺酸可使细胞在照射后与阳性对照组比MMP2下降 ,ppGalNAcT2上升 ,且与剂量相关。结论 :15Gy电子直线加速器照射促进SHG4 4细胞MMP2的表达 ,而对ppGalNAcT2有抑制作用 ;不同剂量的牛磺酸通过下调MMP2 ,上调ppGal NAclT2 ,从而抑制电离辐射引起的肿瘤细胞潜在的浸润和转移能力 ,达到生物防御作用。

γ射线对白血病细胞K562 ppGalNAcT2 mRNA表达的影响及中药多糖的防护作用

目的 探讨γ射线对白血病细胞株K562中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mR-NA表达的影响,并探讨中药多糖对此种影响的防护作用。方法 以不同剂量的^(60)COγ射线照射K562细胞,并设加中药多糖实验组,观察不同剂量(5Gy、10Gy、15Gy)γ射线对K562细胞ppGalNAcT2 mRNA表达影响,及加入不同剂量中药(50mg/L,100mg/L,200mg/L)后对10Gy照射K562细胞组中T2 mRNA表达的防护作用。以RT-PCR法检测ppGalNAcT2 mRNA的表达差异变化。结果 γ射线照射K562细胞后ppGalNAcT2 mRNA表达明显减少,且与剂量呈负相关,而中药多糖则可对抗此种作用,使加中药多糖组细胞在照射后ppGalNAcT2 mRNA表达水平维持在正常细胞水平。结论 5～15Gyγ射线照射抑制白血病细胞ppGal-NAcT2 mPNA表达,可能与肿瘤细胞受照后分化抑制有关,而中药多糖明显对抗此种抑制作用。

γ射线和紫外线照射对白血病K_(562)细胞株中ppGalNAcT2 mRNA表达的影响

观察了γ射线、紫外线对白血病细胞株K562中多肽:N?乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mRNA表达的影响,初步探讨ppGalNAcT2与肿瘤发生、发展的相关性。以不同剂量的Coγ60射线、紫外线分别照射K562细胞,继续培养12h后将细胞收集,采用逆转录PCR(RT?PCR)法检测ppGalNAcT2mRNA的表达差异变化。结果显示,γ射线、紫外线照射均可抑制白血病细胞ppGalNAcT2在mRNA水平的表达,提示此两种辐照可能与肿瘤细胞受照射后的浸润和转移性能有关,ppGalNAcT2与此性状间有一定的相关性。

干扰素治疗病理性瘢痕的实验研究

目的 :研究体外干扰素 (INF)对瘢痕组织成纤维细胞 (FB)中转化生长因子 β1(TGF β1)、血小板衍生生长因子BB(PDGF BB)、基质金属蛋白酶 (MMP 1)以及糖基转移酶 (ppGalNAc T2 )的mRNA表达的影响 ,以求阐明干扰素对病理性瘢痕的作用机理。方法 :组织块法培养瘢痕组织FB ,传代后分成 3组①对照组 :生理盐水处理 ;②低浓度组 :10 0U/mlINF α2b处理 ;③高浓度组 :10 0 0 0U/mlINF α2b处理 ;RT PCR检测TGF β1、MMP 1、PDGF BB及ppGalNAc T2表达。结果 :体外培养瘢痕FB经 10 0U/ml及 10 0 0 0U/ml干扰素α 2b处理后 ,RT PCR检测TGF β1、PDGF BB及pp GalNAc T2表达降低 ,MMP 1表达升高 ,呈显著差异 ,且具有浓度依赖性。结论 :干扰素α2b对瘢痕FB具有抑制作用 ,其机理可能与多种细胞因子有关 ,如TGF β1、PDGF BB。

β照射对NIH3T3细胞中基质金属蛋白酶和糖基转移酶表达的影响及牛磺酸的干预作用

目的观察β射线对NIH3T3成纤维细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)和N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mRNA表达的影响,并探讨牛磺酸对β辐射损伤的防护作用。方法以不同剂量的高能电子射线模拟β射线照射NIH3T3细胞,另外在15Gy照射组中提前12h加入不同浓度的牛磺酸(Tau),照后12h收集各组细胞,采用RT-PCR法检测MMP2、ppGalNAcT2在mRNA水平的表达差异。结果β射线照射NIH3T3细胞后MMP2的mRNA表达量增加,且与照射剂量呈正相关,ppGalNAcT2的变化情况正好相反,加入牛磺酸后可以起干预作用。结论5～15Gyβ射线照射对NIH3T3细胞中ppGalNAcT2在mRNA水平的表达有抑制作用,提示ppGalNAcT2可能与细胞的癌变等过程有关,牛磺酸能抑制MMP2的表达,同时促进ppGalNAcT2的表达,因而具有辐射防护作用。

ppGalNAc-T2对胃癌细胞株SGC-7901生物学性能的影响

目的探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)对胃癌细胞株SGC-7901细胞性能的影响。方法构建ppGalNAc-T2RNA干扰真核载体(pSilenCircle-SiT2)、正义真核表达载体(pEGFP-C1-T2)及空载体(pEGFP-C1),分别转染胃癌细胞株SGC-7901细胞。MTT法检测上述各组转染后细胞对SGC-7901细胞增殖的影响;细胞黏附和穿膜实验分别检测其黏附力和迁移力的变化;同时采用RT-PCR和Westernblot检测MMP2、MMP14、TGF-β1等与肿瘤细胞浸润、转移、增殖相关基因mRNA及蛋白的表达水平。结果转染正义真核表达载体的SGC-7901细胞,随着ppGalNAc-T2表达量的增加,细胞的生长增殖受到抑制,并对纤连蛋白、基质胶和透明质酸的黏附能力降低,但其侵袭迁移能力变化不明显;而转染ppGalNAc-T2RNA干扰载体的SGC-7901细胞,细胞生长最快。ppGalNAc-T2与肿瘤细胞相关因子TGF-β1、MMP2的mRNA表达水平成负相关,但对MMP14无明显影响,Westernblot检测相关蛋白结果与mRNA表达水平基本一致。结论ppGalNAc-T2可影响胃癌细胞株SGC-7901细胞的增殖、黏附能力,并影响与肿瘤细胞浸润、转移、增殖相关基因mRNA及蛋白的表达水平。