表达结核杆菌ppe27基因重组耻垢杆菌的构建及鉴定

采用PCR技术扩增出结核分枝杆菌ppe27基因,并克隆至穿梭质粒pMV261中,将重组pMV261-ppe27-flag穿梭表达载体电转化到耻垢分枝杆菌内,诱导重组耻垢分枝杆菌,通过免疫印迹分析表达产物。结果表明:成功构建表达结核分枝杆菌基因ppe27的重组耻垢分枝杆菌,Western blotting结果显示,表达的重组融合蛋白PPE27-FLAG能与抗FLAG多抗以及兔抗PPE27-HIS蛋白多抗发生特异反应,在37.9ku处有明显特异性条带。表达ppe27基因的重组耻垢分枝杆菌构建成功,为下一步研究结核分枝杆菌致病机制奠定基础。