白花前胡乙素通过SREBP1c/FASN信号通路抑制卵巢癌SK-OV-3细胞增殖的作用

目的研究白花前胡乙素抑制卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的作用及机制。方法通过CCK-8细胞活力检测法对不同浓度的白花前胡乙素作用24、48 h对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的影响;划痕实验考察20、40、60μmol/L白花前胡乙素对卵巢癌细胞SK-OV-3迁移的影响;20、40、60μmol/L白花前胡乙素给药作用24 h后,RT-qPCR检测c-Myc、细胞周期蛋白(Cyclin)D1等增殖基因mRNA的表达水平及胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)1c、脂肪酸合成酶(FASN)等肿瘤细胞能量代谢关键基因mRNA的表达水平;Western印迹检测SREBP1c、FASN等蛋白的表达水平。结果不同浓度的白花前胡乙素对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖均具有抑制作用,且随着白花前胡乙素浓度升高,作用时间增长,对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖的抑制作用增强;20、40、60μmol/L白花前胡乙素给药作用后能够抑制卵巢癌细胞SK-OV-3迁移,降低c-Myc、CyclinD1 mRNA基因表达效果,同时使其蛋白表达水平在一定程度上被降低。结论白花前胡乙素对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖具有抑制作用,其作用机制可能是通过SREBP1c/FASN信号通路调节卵巢癌细胞SK-OV-3能量代谢从而抑制其增殖。

基于投料规范值评价中药制剂质量风险

通过建立投料规范值数学公式,构建中药制剂质量风险分类管理模式。采用高效液相色谱法测定3种含前胡制剂(4厂家8批次)中白花前胡甲素、白花前胡乙素的质量分数,计算投料规范值,评价制剂质量风险。根据投料规范值将制剂质量风险分为4类,可有效评估制剂质量风险。该方法可评估中药投料规范性,及时发现制剂质量风险,为风险分类管理提供决策依据。

中药前胡质量现状、问题与对策

查阅分析前胡质量现状相关文献,指出前胡质量问题突出,影响因素复杂,质控方法简单.亟待完善前胡全产业链质量体系,创新全生命周期监管模式,提升产业发展质量.提出了前胡产业发展策略,为前胡全生命周期科学监管提供参考.

HPLC-ELSD-UV法同时测定氨酚那敏三味浸膏胶囊中长梗冬青苷、白花前胡甲素、白花前胡乙素

目的建立氨酚那敏三味浸膏胶囊中长梗冬青苷、白花前胡甲素和白花前胡乙素的定量分析方法。方法采用HPLC-ELSD-UV法测定长梗冬青苷、白花前胡甲素和白花前胡乙素,色谱柱为Venusil XBP-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,紫外检测波长为320 nm;ELSD参数:漂移管温度为80℃,氮气体积流量为2.5 mL/min,雾化温度为36℃,柱温30℃。结果长梗冬青苷在1.0716～5.358μg范围内的线性关系良好(r=0.999 1),平均回收率100.3%,RSD为2.05%(n=9);白花前胡甲素和白花前胡乙素分别在0.892 4～4.462μg(r=0.999 9)和0.486 8～2.434μg(r=0.999 7)范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.03%、99.02%,RSD为2.01%、1.98%(n=9)。结论本方法测定结果准确可靠,重复性好,可为氨酚那敏三味浸膏胶囊的质量控制提供定量评价方法。

产地海拔等对前胡中白花前胡甲、乙含量的影响

目的针对目前前胡含量较难合格的问题,对不同产地前胡的质量进行比较分析。方法采用HPLC-DAD法测定前胡中白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇-水(75∶25)为流动相,等度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长321 nm,洗脱时间为30 min。并针对实验结果进行了聚类分析、主成分分析。结果 24批不同产地的前胡,白花前胡甲素含量范围在0.83%-1.52%;白花前胡乙素含量范围在0.10%-0.44%,两者均符合规定的占比为45.45%。24批不同产地的前胡聚类分析结果显示,根据海拔可将其分为3类;主成分分析结果显示,综合评分较高的是四川、安徽、重庆、湖北、贵州等高海拔地区。结论由于各地栽培前胡海拔、气候等差异,不同产地高海拔地区前胡的白花前胡甲素和白花前胡乙素含量普遍高于低海拔地区,高海拔地区前胡合格率更高。

不同产地加工方法对前胡药材品质的影响

目的:明确不同产地加工处理对前胡药材品质的影响。方法:以选育品系为材料,统一栽培,同时采收。将形状和质量相近的新鲜白花前胡根进行水洗、干燥、切片处理,记录干燥时间、折干率和霉腐特征。高效液相色谱法(HPLC)测定干燥药材中白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡丙素含量。参考《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)2020年版方法,对不同材料的灰分、酸不溶灰分进行测定。结果:水洗处理可以很好地控制酸不溶灰分含量,非水洗药材酸不溶灰分高达3%,比《中国药典》2020年版规定指标高50%左右;40、50、60℃烘干的药材中白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡丙素含量无显著差异。40、50、60℃烘干药材时间分别为18、22、56 h,切6 mm厚片再进行60℃烘干的药材中白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡丙素含量差异无统计学意义,烘干时间为16 h。结论:前胡产地加工需水洗后马上进行低温烘干,烘干温度应控制在60℃以下;产地趁鲜切片加工,切片厚度宜控制在6 mm以上。

白花前胡质量对海拔梯度的响应研究

目的:探讨白花前胡有效成分含量对海拔因子的响应规律,为前胡的规范化栽培提供依据。方法:设置650 m、900 m、1 200 m三个不同海拔梯度,统一种源与大田管理,于采收期每个海拔梯度采挖具有代表性的10株单株,测定白花前胡甲素、白花前胡乙素,并对实验结果进行特征分析和相关性分析。结果:不同海拔梯度上白花前胡甲素的达标率为50.00%~70.00%,总达标率为56.67%,900 m时达标率最高;白花前胡乙素达标率为10.00%~40.00%,总达标率为26.67%,随海拔升高而降低。白花前胡甲素含量的变异系数为32.66%~42.92%,白花前胡乙素含量的变异系数为79.30%~123.12%,均随海拔升高而降低。白花前胡甲素含量与乙素含量呈负相关性,且相关程度在900 m时达极显著水平。白花前胡甲素含量与海拔呈正相关,白花前胡乙素含量与海拔呈显著负相关。结论:海拔高度对白花前胡甲素与白花前胡乙素的含量高低、含量的变异系数,以及二者含量之间的关系均具有一定影响,相对高海拔(900 m)环境的白花前胡甲素含量高,相对低海拔(650 m)白花前胡乙素含量高,且海拔高度对白花前胡乙素含量的影响大于白花前胡甲素。基于不同产区白花前胡质量千差万别的现状,该研究对探寻前胡质量的主要影响因素具有重要科学价值,对前胡的高效栽培和质量提升与控制具有实际指导意义。

用GC/MS、GC分析中药前胡中白花前胡丙素、丁素和紫花前胡苷元

为快速鉴别中药白花前胡 (Peucedanum praeruptorum Dunn.)和紫花前胡 (Peucedanum decursivumMaxim .) ,用气相色谱 /质谱 (GC/ MS)、气相色谱法 (GC)分别定性、定量分析白花前胡丙素 (Pd- a)、丁素 (Pd- ) )和紫花前胡苷元 (Nodakenetin)。在白花前胡中检出白花前胡丙素 (M/ Z386 )和丁素 (M/ Z4 2 6 ) ,但未检出紫花前胡苷元 ;在紫花前胡中检出紫花前胡苷元 (M/ Z 2 4 6 ) ,但未检出白花前胡丙素和丁素。线性关系 :YPd- a=1.111XPd- a+0 .0 2 1(n =6 r=0 .9995 ) ,线性范围 :0 .175～ 1.919μg。 YPd- =1.189XPd- - 0 .0 13(n =6 r=0 .9996 ) ,线性范围 :0 .0 86～ 0 .95 0 μg。YNodakenetin =0 .90 1XNodakenetin- 0 .0 2 4 (n =6 r=0 .9999) ,线性范围 :0 .0 89～ 1.0 6 2μg。回收率 :白花前胡丙素 97.2 9% ,白花前胡丁素 98.81% ,紫花前胡苷元 96 .34%。分析结果表明 ,不同产地药材样品中各自特征成分含量不同 ,分析中未能找到白花前胡和紫花前胡苷元共有的相同的有效成分或指标性成分。表明可用 GC/ MS区分白花前胡和紫花前胡苷元 。

不同提取方法对白花前胡指标成分含量的影响

目的:考察不同提取方式对前胡药材中白花前胡甲素和白花前胡乙素的影响,探寻白花前胡指标成分提取方法。方法:采用超声法和回流法提取,以HPLC法测定指标成分含量。结果:4种不同土壤类型的白花前胡样品的甲素和乙素含量存在差异;回流法制样处理白花前胡甲素含量均高于超声法制样,而乙素含量则相反。结论:回流法有利于白花前胡甲素的提取,较超声法提高了8.7%~21.9%;超声法有利于白花前胡乙素的提取,较回流法提高了10.4%~21.95%。选择合适的提取体系和方式可提高白花前胡有效成分的可检测性。

超高液相色谱法同时测定通宣理肺丸中白花前胡甲素和白花前胡乙素

目的建立通宣理肺丸中白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量测定方法。方法采用超高液相色谱法,色谱柱为ACE UItra Core Super C18(75 mm×2.1 mm,2.5μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,检测波长为321 nm,柱温为40℃。结果白花前胡甲素、白花前胡乙素分别在20.48~204.8 ng(r=0.999 7)、5.158~51.58 ng(r=1.000 0)范围内呈良好线性关系,加样回收率分别为98.2%、100.3%。结论该方法简便、快速、准确、重复性好,可用于通宣理肺丸中白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量测定。

HPLC-CAD法同时测定小儿清肺化痰颗粒中6种成分的含量

目的建立高效液相色谱法联合电雾式检测器(HPLC-CAD)法同时测定小儿清肺化痰颗粒中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、黄芩苷、白花前胡甲素及白花前胡乙素的含量,为小儿清肺化痰颗粒的质量控制提供参考。方法采用HPLC-CAD法,色谱柱为Phenomenex Luna C18(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈(A)-10 mmol·L^-1甲酸铵(甲酸调p H=4.0)(B),梯度洗脱(0~10min,5%A;10~15 min,5%~20%A;15~30 min,20%~30%A;30~40 min,30%~55%A),流速0.8 mL·min^-1,进样量20μL,CAD雾化器温度为35℃,柱温40℃,测定小儿清肺化痰颗粒中6种活性成分的含量。结果盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、黄芩苷、白花前胡甲素及白花前胡乙素的质量浓度分别在0.019~0.480 mg·m L^-1(r=0.9998),0.008~0.210 mg·m L^-1(r=0.9998),0.029~0.720 mg·m L^-1(r=0.9993),0.012~0.300 mg·m L^-1(r=0.9998),0.004~0.100mg·mL^-1(r=0.9994),0.004~0.110 mg·m L^-1(r=0.9997)内与峰面积呈良好的线性关系。盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、黄芩苷、白花前胡甲素及白花前胡乙素的平均加样回收率分别为99.0%、99.2%、99.4%、99.1%、98.8%及98.8%,RSD分别为1.1%、1.3%、1.4%、0.90%、1.2%及0.70%(n=6)。结论该方法准确、重复性好、灵敏度高,可用于小儿清肺化痰颗粒多成分的质量控制研究。

基于UPLC法快速测定前胡配方颗粒中指标性成分

目的建立超高效液相法(UPLC)对前胡配方颗粒中白花前胡甲素、白花前胡乙素和白花前胡素E同时快速定量分析的方法。方法采用Acquity UPLC BEH C 18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,体积流量0.4 mL·min^(-1),在321 nm波长处进行检测,柱温25℃,进样量2.0μL。结果前胡配方颗粒中3种有效成分在考察线性范围内线性关系良好,白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡素E的线性范围分别为1.870~18.70μg·mL^(-1)(r=0.9998)、0.2075~2.075μg·mL^(-1)(r=0.9998)、0.2220~2.220μg·mL^(-1)(r=0.9997),加样回收率均在98.85%~99.76%,RSD均小于2.0%。结论该方法简便,准确,快速,重复性好,可用于前胡配方颗粒的快速质量控制,并为将来该配方颗粒的质量标准提升提供参考。

替代对照品法同时测定前胡炮制品中主要香豆素成分

以白花前胡甲素为标准对照品,计算出白花前胡乙素和白花前胡E素的相对校正因子(f),建立HPLC替代对照品法含量测定方法同时测定前胡药材中白花前胡甲素、乙素和E素含量,并在此基础上考察不同前胡炮制品中主要香豆素类成分的含量变化,为前胡药材及炮制品质量标准的制定及其临床应用提供科学依据。采用Welch Materials Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,柱温30℃,检测波长322 nm。该条件下测得前胡中白花前胡乙素和白花前胡E素相对于白花前胡甲素的相对校正因子分别为0.787 2和0.969 0,通过对15批药材进行含量测定,结果证明,替代对照品法与外标法测定的结果无明显差异,说明本研究建立的替代对照品法测定含量,方法准确可靠,可用于前胡及其不同炮制品中主要香豆素的含量测定。用该法测定各炮制品中香豆素总含量均低于生前胡。

高效液相色谱法测定前胡中白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量

目的对前胡中白花前胡甲素和白花前胡乙素常用的高效液相色谱法含量测定方法进行改进,用于市售前胡的分析。方法改用甲醇作为提取溶剂,超声处理时间为30 min,提取液直接测定分析。采用Thermo ODS HYPERSIL色谱柱(4.6×250mm,5μm),以甲醇-水(68∶32)为流动相。结果白花前胡甲素和白花前胡乙素分别在5.00~400.00mg/L和0.50~40.00 mg/L范围内线性关系良好,回归方程分别为Y=28.478 222 4X+6.484 094(r=0.999 99)和Y=25.589 318 7X-0.328 822(r=0.999 99),精密度为0.6%~2.0%,加样回收率为90.7%~104.8%。采用建立的方法对9批市售前胡进行了测定。结论该方法更简便、快速、重复性好,可准确测定前胡中白花前胡甲素和白花前胡乙素。

基于UPLC-Q-TOF/MS法分析不同产地前胡药材质量

目的基于超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)法分析不同产地前胡药材的质量。方法前胡药材甲醇提取物的分析采用ZORBAX Eclipse plus C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-水,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1 mL/min;检测波长270 nm。电喷雾离子源(ESI),正离子模式;扫描范围m/z 100～1 500;毛细管电压3 500 V;碎裂电压170 V;干燥气(N_2)体积流量10 L/min;干燥气温度350℃;雾化气压力344.75 kPa;碰撞诱导解离(CID)能量35 eV;碰撞气N_2。结果白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡E素分别在0.131 2～2.100μg(r=0.999 7)、0.062 5～1.030 0μg(r=0.999 6)、0.087 5～1.430 0μg(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均回收率分别为101.2%、99.7%、96.8%,RSD分别为1.3%、1.4%、1.7%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于前胡药材的质量控制。

HPLC法同时测定杏苏止咳糖浆中5种成分

目的建立HPLC法同时测定杏苏止咳糖浆(苦杏仁、紫苏叶、前胡等)中5种成分的含量。方法该药物80%甲醇提取液的分析采用CAPCELL PAK C_(18) MG色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相水(含0.05%磷酸)⁃乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长210、237、321 nm。结果苦杏仁苷、甘草苷、甘草酸、白花前胡甲素、白花前胡乙素在各自范围内线性关系良好(r>0.9900),平均加样回收率95.3%~101.2%,RSD 0.66%~2.57%。结论该方法稳定、准确、可靠,可用于杏苏止咳糖浆的质量控制。

高效液相色谱法同时测定前胡药材中白花前胡甲素和白花前胡乙素含量

目的建立同时测定前胡药材中指标性成分白花前胡甲素和白花前胡乙素含量的高效液相色谱法。方法共收集安徽、浙江、四川、湖南等地产的31批前胡药材样品,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-甲醇(25∶75,V/V),流速为1 mL/min,柱温为25℃,检测波长为321 nm,进样量为10μL。结果白花前胡甲素和白花前胡乙素的质量浓度分别在3.8802~248.3333μg/mL(r=0.9998,n=5)和1.8880~120.8333μg/mL(r=0.9999,n=5)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%;平均加样回收率分别为98.93%和99.66%,RSD分别为1.64%和1.79%(n=6)。白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量分别为0.62%~1.63%和0.06%~0.59%;按2020年版《中国药典(一部)》规定,白花前胡甲素含量合格的样品有24批(77.42%),白花前胡乙素含量合格的样品有10批(32.26%),2种成分含量均合格的样品仅9批(29.03%)。结论该方法操作简便、结果准确、重复性好,可用于同时测定前胡药材中白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量。市售前胡药材质量参差不齐,合格率低,需要一个切合实际的质量控制方法来评价、控制其质量。

多因素影响白花前胡甲素和乙素含量分析

目的:研究在不同采收期、栽培环境、抽薹前后和组织部位的白花前胡甲素和乙素含量的变化规律。方法:采用高效液相色谱法测定不同采收时期栽培白花前胡甲素及乙素含量。结果:前胡甲素及乙素含量累积规律是根>茎>叶;二年生前胡甲素含量显著高于一年生,南坡前胡甲素显著高于其他坡向;抽薹前后的前胡甲素和乙素含量无显著差异。结论:高效液相法可用于初步评估前胡适宜采收时期,以期为进一步明确白花前胡中药材的最佳采收时期奠定基础。

HPLC法测定含化上清片中白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量

目的建立含化上清片中白花前胡甲素和白花前胡乙素含量测定的高效液相色谱方法。方法色谱柱为Agilent C18（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为甲醇-水（75∶25）;流速为1.0mL·min^-1;检测波长为321nm;柱温为30℃。结果白花前胡甲素质量浓度在10.13-200.26μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系（r=0.9992）,加样回收率为98.9%,RSD为0.46%（n=6）;白花前胡乙素质量浓度在10.36-200.72μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系（r=0.9991）,加样回收率为98.6%,RSD为0.55%（n=6）。结论该方法简单、准确、重复性好,可用于含化上清片中白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量测定。

高效液相一测多评法同时测定参苏片中葛根素、迷迭香酸、白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡E素的含量

目的:建立高效液相一测多评法同时测定参苏片中葛根素、迷迭香酸、白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡E素的含量。方法:采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速:0.9 ml·min^-1;检测波长:250 nm(葛根素)、321 nm(迷迭香酸、白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡E素);柱温:30℃;以迷迭香酸为内标物,计算葛根素、白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡E素的相对校正因子,测定其含有量,同时采用外标法测定这5个组分的含量。结果:5种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率97.46%~99.83%,RSD为0.71%~1.67%,一测多评法计算值与外标法实测值间无明显差异。结论:利用相对校正因子对参苏片中5种成分的含量测定是可行的,所建立的高效液相一测多评法可以用于参苏片的质量评价研究。