前胡丙素对培养心肌细胞^（45）Ca^（2＋）摄入及细胞内游离钙的影响

利用培养的乳鼠心肌细胞测定细胞４５Ｃａ２＋的摄入及细胞内游离钙的浓度。结果表明，前胡丙素（Ｐｒａ－Ｃ）１０－１００μｍｏｌ·Ｌ－１依浓度抑制４５Ｃａ２＿的摄入，并抑制由３０μｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ所引起的４５Ｃｓ２＋摄入的增加，同时Ｐｒａ－Ｃ１００μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素所诱发的４５Ｃａ２＿摄入的增加也有抑制作用。Ｐｒａ－Ｃ１０μｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１能抑制细胞外高钾（３０，５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）引起的［Ｃａ２＋］ｉ的升高，同时Ｐｒａ－Ｃ３０ｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素１０μｍｏｌ·Ｌ－１在无钙及含ＣａＣｌ２１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１的溶液中所引起的［Ｃａ２＋］，的增加也有抑制作用。提示前胡丙素对心肌细胞的作用与其阻滞钙通道有关。

白花前胡根中白花前胡丙素的分离鉴定及其有效成分含量的HPLC分析

从白花前胡根中分离鉴定了主要有效成分白花前胡丙素，建立了利用ＨＰＬＣ法分析白花前胡根中白花前胡丙素及其消旋体白花前胡甲素含量的方法，并用该方法分析了不同产地白花前胡根中白花前胡丙素及其白花前胡甲素的含量，为制定中药前胡的质量标准奠定基础。

白花前胡丙素C-3′和C-4′反式结构类似物的半合成

目的 对白花前胡丙素 [(+) praeruptorinA]进行结构修饰 ,半合成C 3′和C 4′反式结构类似物 ,寻找活性化合物。方法 首先从白花前胡 (Peucedanumpraeruptorum)根中分离得到白花前胡丙素 ,从白花前胡丙素出发 ,运用碱水解及各种酰化反应 ,半合成各种结构修饰产物。结果 首次合成了 1 7个白花前胡丙素C 3′和C 4′反式结构类似物 ,通过IR ,1 HNMR ,MS等方法确定它们的结构。结论 1 7个化合物均为新化合物 ,其中一些新化合物有显著的钙离子拮抗活性 ,首次证明C 3′和C 4′反式结构的这类化合物同样具有活性。

前胡丙素对培养大鼠心肌细胞内游离Ca^(2+)的影响

用Fura-2/AM技术直接观察前胡丙素(Pra-C)对培养大鼠心室肌细胞内游离钙的影响。结果显示Pra-C浓度为0.1～1.0μmol·L^(-1)可明显抑制CaCl_2,高K^+和Bay K 8644引起[Ca^(2+)]i增加,并且有剂量—效应关系,对ouabain引起的[Ca^(2+)]i增加无明显作用。结果提示Pra-C降低心肌细胞[Ca^(2+)]i的作用与抑制电压依赖性钙通道有关。

前胡丙素对Ang II致离体血管平滑肌细胞肥厚及胞内钙、NO含量和信号转导的影响

目的 前胡丙素 (Pra C)对血管紧张素II(AngII)致离体培养大鼠血管平滑肌细胞 (SMCs)肥厚模型胞内游离钙浓度、NO含量和信号转导的影响。方法 以AngII刺激SMCs形成肥厚模型 ,用倒置显微镜测定SMCs面积 ;用Fura 2 AM测定单细胞内 [Ca2 + ]i,Griess法测定NO含量 ;在PMA和ST(PKC激动剂及抑制剂 )、PTX(Gi蛋白敏感毒素 )作用下观察Pra C对KCl和NE所致胞内 [Ca2 + ]i浓度变化的影响。结果 Pra C组SMCs细胞面积较肥厚组减小3 9 0 1% ,并接近正常细胞水平 ;NO含量明显增加 ;胞内 [Ca2 + ]i对KCl和NE激动的反应明显低于肥厚组。PMA使肥厚SMCs [Ca2 + ]i升高 ,而ST及PTX则使之降低 ,Pra C均使之恢复正常。结论 Pra C抑制AngII致体外培养细胞SMCs肥厚 ,改善肥厚细胞因PKC和Gi蛋白的信号转导改变所致的 [Ca2 + ]i改变。

前胡丙素对高血压大鼠血管肥厚、细胞内钙、胶原及NO的影响

目的 研究前胡丙素对自发性高血压大鼠SHR及肾型高血压大鼠RHR的血管肥厚、细胞内钙、胶原、NO及血管收缩的反应性影响。方法 用显微测微仪测定血管中膜层厚度 ,细胞大小 ,用Fura 2 /AM为荧光指示剂 ,测定单细胞内 [Ca2 +]i,以测定羟脯氨酸含量反映胶原含量 ,用Griess法测定NO含量 ,以血管环观察收缩反应。结果 前胡丙素抑制血管中膜层增厚 ,维持细胞内 [Ca2 +]i稳态。减少胶原形成 ,增加SMCs释放NO。抑制血管环高反应状态。结论 前胡丙素抑制高血压血管肥厚 。

前胡丙素对两肾两夹肾性高血压大鼠心脏重构及心功能的影响

目的研究前胡丙素长期灌胃给药对两肾两夹肾性高血压大鼠心脏、心功能及左室顺应性的影响。方法制作两肾两夹肾性高血压大鼠模型,前胡丙素20 mg.kg-1.d-1,连续灌胃给药9 wk,用离体大鼠工作心脏灌流法检测心功能及左室顺应性,W oessner等报道的方法测定心肌组织羟脯氨酸含量。结果与假手术对照组相比,肾性高血压左室肥厚(LVH)组大鼠CF/HWW和CO/HWW降低29.2%和38.5%,LVSP、-dp/dtm ax分别降低22.8%和43.2%;LV-EDP和T值增高172.9%和187.1%,LVEDP-V曲线左移上抬,左室肌胶原含量增加38.9%。前胡丙素组CF/HWW和CO/HWW比LVH组分别增加23.5%和37.2%,LVSP值和-dp/dtm ax负值较LVH组增加16.0%和42.7%,LVEDP和T值降低38.9%和39.0%,左室LVEDP-V曲线接近正常组水平,左室肌胶原含量降低18.9%,其作用与硝苯地平相似。结论前胡丙素可明显改善两肾两夹肾性高血压大鼠心脏舒张功能,改善心肌顺应性,同时也可改善心脏收缩功能,其作用可能是通过扩张冠状动脉,改善心肌缺血,降低心肌胶原含量而实现。

白花前胡丙素对实验性心肌缺血损伤的影响

目的:观察白花前胡丙素对小鼠耐缺氧能力的影响以及对连二亚硫酸钠(Na_2S_2O_4)和过氧化氢(H_2O_2)所致幼鼠心肌细胞损伤的保护作用。方法:采用异丙肾上腺素制备低氧模型,记录小鼠缺氧条件下的存活时间;应用原代培养的乳鼠心肌细胞,用Na_2S_2O_4和H_2O_2制备心肌缺血性损伤模型,分别测定各组心肌细胞的存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果:白花前胡丙素(10,20 mg·kg^(-1))明显延长异雨肾上腺素所致小鼠缺氧条件下存活时间(P＜0．01);白花前胡丙素(20,40,80 mg·L^(-1))降低细胞死亡率,显著抑制H_2O_2和Na_2S_2O_4损伤引起的心肌细胞LDH释放,并提高细胞中SOD浓度(P＜0．05,P＜0．01);对正常生长条件下的心肌细胞无明显影响(P＞0．05)。结论:白花前胡丙素对缺氧小鼠及缺氧心肌细胞有明显的保护作用,这可能与其抑制脂质过氧化反应有关。

前胡丙素对肾型高血压大鼠血压及尾动脉反应性的影响

目的：观察前胡丙素对肾型高血压大鼠血压及尾动脉反应性的影响。方法：两肾一夹ＳＤ大鼠，术后７ｗｋ始给予前胡丙素２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１ｉｇ，给药第９周末测离体尾动脉反应性。结果：前胡丙素明显降低肾型高血压大鼠血压，用药９ｗｋ后血压较给药前下降４３％，较溶剂对照组下降４４％。尾动脉对ＮＥ和ＫＣｌ的反应性显著降低，量效曲线向右下移位。结论：前胡丙素的降压作用与其对血管平滑肌的松弛作用有关。

前胡丙素与硝苯啶对大鼠工作心脏缺血再灌注损伤的保护作用

大鼠ip前胡丙素(Pra-C 15 mg/kg,bid×3d)和硝苯啶(Nif 60μg/kg,bid×3d),使离体缺血再灌注工作心脏的收缩(AP,LVSP,+dP/dt_(max))舒张(-dP/dt_(max) LVEDP和T值)性能在35min时得到改善,尤以舒张性能改善明显,并能促进CO,CF,SV及HR恢复,改善心脏工作效率,减少CK释放和心肌线粒体钙含量,表明Pra-C和Nif对心肌缺血都有保护作用,Pra-C的效应与Nif相近。

前胡丙素对肾性高血压左室肥厚大鼠心功能、左室顺应性及心肌胶原含量的影响

观察前胡丙素对肾性高血压左室肥厚（ＬＶＨ）大鼠心功能、左室顺应性及心肌胶原含量的影响。用两肾一夹肾性高血压动物模型，ｉｇ前胡丙素（ＰｒａＣ）９周。结果，与ＬＶＨ组相比，ＰｒａＣ组的ＣＦ／ＨＷＷ及ＣＯ／ＨＷＷ分别增加３１３％和２８９％；ＬＶＳＰ和－ｄｐ／ｄｔｍａｘ负值分别增加１６７％和２７８％；ＬＶＥＤＰ和Ｔ值分别降低３４９％和３６５％；ＰＶ曲线接近正常组水平；左室肌羟脯氨酸降低２３８％。提示ＰｒａＣ可提高ＬＶＨ大鼠心脏收缩及舒张功能。

不同产地加工方法对前胡药材品质的影响

目的:明确不同产地加工处理对前胡药材品质的影响。方法:以选育品系为材料,统一栽培,同时采收。将形状和质量相近的新鲜白花前胡根进行水洗、干燥、切片处理,记录干燥时间、折干率和霉腐特征。高效液相色谱法(HPLC)测定干燥药材中白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡丙素含量。参考《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)2020年版方法,对不同材料的灰分、酸不溶灰分进行测定。结果:水洗处理可以很好地控制酸不溶灰分含量,非水洗药材酸不溶灰分高达3%,比《中国药典》2020年版规定指标高50%左右;40、50、60℃烘干的药材中白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡丙素含量无显著差异。40、50、60℃烘干药材时间分别为18、22、56 h,切6 mm厚片再进行60℃烘干的药材中白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡丙素含量差异无统计学意义,烘干时间为16 h。结论:前胡产地加工需水洗后马上进行低温烘干,烘干温度应控制在60℃以下;产地趁鲜切片加工,切片厚度宜控制在6 mm以上。

预适应和前胡丙素对缺氧肥厚血管平滑肌胞内钙离子浓度及NO含量的影响

观察了预适应和前胡丙素对缺氧肥厚血管平滑肌胞内钙离子浓度 ([Ca2 +]i)及NO含量的影响 .①建立两肾一夹肾血管性高血压大鼠模型 ,分离培养主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC) ,以fura 2 /AM为钙指示剂。测得前胡丙素 (2 0mg·kg- 1·d- 1,术后第9周起ig 9周 )治疗和缺氧预适应 (5minN2 ,5min95%O2 + 5%CO2 混合气体 ,循环 3次 )对缺氧 (30minN2 )所致肥厚VSMC对KCl和去甲肾上腺素刺激反应性升高 ([Ca2 +]i 升高 )有明显的拮抗效应 .②用血管紧张素Ⅱ刺激致VSMC肥厚 ,前胡丙素 (10μmol·L- 1温育 2 4h)和缺氧预适应合用使缺氧肥厚VSMC的NO含量恢复至正常VSMC水平 .结果提示前胡丙素与缺氧预适应对肥厚VSMC缺氧损伤有协同性的保护作用 .

缺氧预适应和前胡丙素预处理对心肌受磷蛋白磷酸化水平的影响

目的探讨缺氧预适应和前胡丙素预处理对大鼠心肌受磷蛋白磷酸化水平的影响。方法体外培养的乳鼠心肌细胞随机分为4组:对照组,缺氧复氧损伤组(HR组)、缺氧预适应组(HP组)和前胡丙素预处理组(PP组)。用蛋白激酶A抑制剂H-89进行干预,4组再分别分为H-89阴性组和H-89阳性组。检测各组间细胞上清乳酸脱氢酶(LDH);流式细胞术检测[Ca2+]i;放射自显影法检测受磷蛋白的磷酸化水平。结果与对照组比较,HR组的LDH和[Ca2+]i显著升高(P<0.05),HP组和PP组LDH和[Ca2+]i虽高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);HP组和PP组受磷蛋白磷酸化水平与对照组比较增加15.6%和16.8%(P<0.05),而HR组较对照组降低29.3%(P<0.05)。H-89阳性组受磷蛋白的磷酸化水平较H-89阴性组显著下调(P<0.05)。结论缺氧预适应和前胡丙素预处理对缺氧复氧损伤后心肌细胞有保护作用,该作用与上调受磷蛋白磷酸化水平有关。

前胡丙素对大鼠离体缺血再灌注心脏血流动力学的影响

在大鼠离体心脏缺血再灌注损伤模型上，研究前胡丙素对缺血再灌注后血流动力学的影响。与缺血组比较，大鼠预先ｉｐ前胡丙素１５ｍｇ·ｋｇ￣（－１），每日２次，共３ｄ，可以减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤，促进冠脉流出量的恢复；防止左室收缩（ＬＶＳＰ，＋ｄｐ／ｄｔ＿（ｍａｘ））和舒张（－ｄｐ／ｄｔ＿（ｍａｘ））功能的下降；抑制肌酸激酶释放；以上结果与硝苯地平（６０μｇ·ｋｇ￣（－１）ｉｐ，每日２次，共３ｄ）类似，结果表明前胡丙素对心肌缺血再灌注的血流动力学变化有改善作用。

前胡丙素对高血压大鼠血压及犬血管阻力的影响

目的 观察前胡丙素 (pra C)的降压及对外周血管阻力的影响。方法 在肾型高血压大鼠模型与正常血压大鼠用尾容积法测血压。用RDB III型输液泵连接于麻醉杂种犬 ,以控制血流量与压力法直接测定锥动脉、冠脉左旋支、股动脉的阻力。结果 pra C 2 0mg·kg- 1 ·d- 1 ig给药 3 0d对肾性高血压大鼠 (RHR)降压峰值时间为 6h ,从( 2 13± 10 )mmHg降至 ( 14 4 0± 1 5 )mmHg,降低原水平 3 0 % ,持续至 2 0h。pra C分别以 10 0 μg·kg- 1 及 2 0 μg·kg- 1 与pra E 2 0 μg·kg- 1 iv可降低上述血管的阻力 ,减慢心率 ,降低阻力呈剂量相关。结论 pra C有降压作用 ,降低犬外周动脉阻力 ,增加小鼠耐缺氧时间。

前胡丙素对豚鼠心房和兔主动脉条的钙拮抗作用

前胡丙素(Pra—C)非竞争性抑制CaCl_2和高钾除极化所致兔主动脉条的收缩,pD’_2值分别为4.9和5.0;抑制5—HT诱导的依外钙性收缩,但不影响依内钙性收缩及NE诱导的收缩;Pra—C5～50μmol/L浓度依赖性地抑制豚鼠左房收缩力和阶梯现象;Pra—C抑制血管与心脏的IC_(50)之比为1:8。结果提示Pra—C对血管和心脏的抑制作用可能与拮抗Ca^(2+)有关,且主要影响经PDCs的外钙内流。

前胡丙素对肾血管性高血压大鼠脑肾ATP酶活力的影响

用两肾一夹模型观察肾血管性高血压大鼠血压与脑、肾细胞膜ATP酶活力的变化及前胡丙素（PraeruptorinC，Pra－C）对上述变化的影响。两肾一夹术后16周大鼠血压由（14．7±1．3）升至（27．1±1．8）kPa，脑、肾细胞膜Na+、K+－ATP酶活力分别下降至（7．3±2．5）和（14．7±1．2）μmol／（mg·h），Ca（2+）－ATP酶活力分别下降至（15．8±2．8）和（16．1±2．3）μmol／（mg·h）。与高血压组相比，Pra－c[20mg／（kg·d）]灌胃9周组在血压降至正常的同时，脑、肾细胞膜Na+、K+－ATP酶活力分别增高至（11．2±1．8）和（21．7±6．2）μmol／（mg·h），Ca+－ATP酶活力分别增高至（19．9±3．2）和（21．9±2．7）μmol／（Mg·h）。提示：肾血管性高血压时伴有脑、肾细胞膜ATP酶活力的下降，Pra－C的有效降压作用与维护脑、肾细胞膜ATP酶活力的正常有关。

前胡丙素对自发性高血压大鼠心肌受磷蛋白表达及磷酸化水平的影响

目的:探讨前胡丙素对自发性高血压大鼠(SHR)心肌重构的影响及可能机制。方法:SHR 20只,完全随机分为药物组[前胡丙素20 mg/(kg.d)灌胃,n=10],对照组(n=10),另设SD大鼠10只为正常组,干预8周,计算心脏质量指数及左室质量指数,光镜观察左心室心肌细胞形态和结构的变化,透射电镜观察心肌细胞超微结构及线粒体损伤情况,然后取左心室心肌制备匀浆,提取RNA,用半定量RT-PCR法测定受磷蛋白的基因表达水平,用液体闪烁计数法测定受磷蛋白的磷酸化水平。结果:与对照组比较,药物组用前胡丙素治疗8周后,心脏及左室质量指数明显下降(P<0.05),SHR心肌肥厚等病理改变明显改善,左心室心肌受磷蛋白mRNA表达上调(P<0.05),心肌受磷蛋白磷酸化水平增加(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:前胡丙素有改善心肌重构作用,可能是通过上调SHR心肌肌浆网受磷蛋白表达及磷酸化水平而实现的。

前胡丙素对两种高血压模型大鼠尾动脉的钙拮抗作用

目的：观察前胡丙素（Ｐｒａ－Ｃ）对两种高血压模型大鼠尾动脉的钙拮抗作用。方法：采用两种高血压模型大鼠离体血管功能实验方法。结果：Ｐｒａ－Ｃ对氯化钾除极化所致正常、ＤＯＣＡ－ｓａｌｔ型、肾血管型高血压大鼠尾动脉呈非竞争性拮抗作用，其ｐＤ′２分别为４．６４、４．７７和５．２７，ＩＣ５０分别为１６．８８、１４．３７、６．４３μｍｏｌ·Ｌ－１，Ｐｒａ－Ｃ明显抑制５－ＨＴ所致正常、ＤＯＣＡ－ｓａｌｔ型、肾血管型高血压大鼠尾动脉慢速收缩反应，其中对肾血管型高血压大鼠的抑制作用较强，而对５－ＨＴ所致３组大鼠尾动脉的快速反应均无抑制作用。结论：Ｐｒａ－Ｃ对肾血管型高血压大鼠尾动脉的钙拮抗作用强于ＤＯＣＡ－ｓａｌｔ型高血压大鼠和正常大鼠，可能与两种高血压大鼠模型高血压形成机制不同有关。