制备液相色谱分离纯化埃博霉素B

基于制备液相色谱法开发与优化埃博霉素B的分离纯化工艺,制备得高纯度埃博霉素B样品。实验首先对埃博霉素B粗品进行了液相色谱(HPLC)分析,定位目标峰和杂质情况。其次,对两款正相色谱填料进行筛选和模拟制备,考查不同填料对埃博霉素B相关杂质的去除效果和回收率。结果表明,上样量为0.2%时,埃博霉素B在NPLC-2分析柱(250 mm×4.6 mm,10μm)上保留得较好,可与杂质有效分离。最后,将优化好的纯化方法在制备水平上进行放大,以正庚烷和乙酸丁酯为洗脱剂,使用NPLC-2制备柱(260 mm×50 mm,10μm)对埃博霉素B粗品进行分离纯化,样品的色谱纯度可达99.63%,回收率为90%,各项有关杂质均符合限量规定。该方法对埃博霉素B的相关杂质去除效果好,纯化效率和回收率均很高,为埃博霉素B分离纯化生产工艺的开发提供了新方法。

制备色谱法分离纯化高良姜黄酮中高良姜素和山柰素

建立了制备型高效液相色谱(Prep-HPLC)分离高良姜黄酮中高良姜素和山柰素的方法。高良姜黄酮经HPD-600树脂吸附洗脱纯化后,采用Prep-HPLC分离高良姜黄酮中高良姜素和山柰素。制备色谱条件:流动相为甲醇-0.6%(v/v)乙酸水溶液(58∶42,v/v),柱温为常温,流速为7.0 mL/min,检测波长为360 nm,进样量为700μL,上样质量浓度为10.0 g/L。分离的单体由质谱和核磁共振氢谱、碳谱鉴定确证为高良姜素和山柰素,HPLC外标法定量,纯度分别为99.5%和99.7%。该方法分离效果好、高效、低毒,可用于高良姜中高良姜素和山柰素的分离制备。

制备型液相色谱法及其在制药和天然产物分离中的应用

介绍了制备型高效液相色谱法的工作原理和特点,探讨了影响制备型高效液相色谱分离纯化的因素,研究了其在制药和天然产物分离中的应用,并阐述了制备型高效液相色谱与大孔吸附树脂、超临界CO2萃取方法联合使用的情况。

高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱法鉴定碱性嫩黄中的杂质及高效液相色谱法制备碱性嫩黄标准物质（英文）

该文建立了一种高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱(HPLC-IT-TOF-MS)分析非法食品添加剂碱性嫩黄样品中杂质成分的方法。对碱性嫩黄样品中的杂质进行多级质谱分析,根据各碎片离子的精确质量数推测出该杂质的具体组成,确定这个杂质为4-(亚氨基(4-(甲基氨基)苯基)甲基)-N,N-二甲基苯胺盐酸盐,从而推断出碱性嫩黄的合成方法及杂质的可能来源。同时建立了制备碱性嫩黄标准物质的方法,分别选用了粒径为10μm和5μm的制备液相色谱柱进行两次制备高效液相色谱分离纯化,进样量分别为1 mL和500μL,最终采用分析型高效液相色谱峰面积归一化法得到纯度为99.52%的碱性嫩黄标准物质。扣除0.34%水分含量,0.13%灰分含量,采用质量平衡法确定制备的物质最终纯度为99.05%,并通过UV、IR、LC-MS和NMR四大谱图进行化学结构的确认。该方法简单、高效,可拓展应用于其他非法食品添加剂标准物质的制备。

环孢素A在反相液相色谱中的吸附行为及分离纯化

环孢素A(cyclosporine A,CsA)是由11个氨基酸组成的中性环状多肽,是临床拮抗器官和组织移植后排异反应的首选药物。高效液相色谱法广泛应用于CsA的分离分析,开展CsA色谱行为的研究是使用制备高效液相色谱纯化CsA的关键。该文首先在C18固定相上比较了CsA在甲醇-水和乙腈-水两种流动相体系中的保留行为,结果表明其保留时间对有机相比例变化比较敏感。控制甲醇比例在84%~88%,或者乙腈比例在75%~85%,CsA的保留因子(k)在3~7范围内。考察了上样量对CsA峰形的影响。随着上样量增加,在两种流动相体系中,CsA的峰形都由对称开始变得拖尾,保留时间前移。因此在进行CsA纯化时,需要特别注意前杂的去除情况。然后采用吸附等温线描述CsA的保留行为,当流动相中CsA的质量浓度较低时,有机相比例对溶质在固定相上的吸附量影响并不明显。随着溶质的质量浓度增加至0.5 g/L以上,有机相比例降低有助于提高CsA在固定相上的吸附量。和甲醇-水体系相比,在乙腈-水体系中固定相对溶质有更大的吸附容量。用模型对CsA的等温吸附曲线拟合,在甲醇-水体系中符合Langmuir模型,在乙腈-水体系中为Moreau模型。由模型参数可知在两种体系下,CsA在C18固定相上均为单层吸附,区别在于乙腈-水体系中CsA会产生较大的分子间作用力。最后,实验采用0~60 min 65%~75%乙腈、60~80 min 75%乙腈的条件开展了环孢素A纯化的探索实验,可将CsA的杂质控制在0.2%以下。本研究结果对采用制备高效液相色谱纯化CsA具有指导意义。

制备液相色谱法分离纯化碘帕醇

基于制备液相色谱法,开发与优化了碘帕醇的分离纯化工艺,制备得到高纯度碘帕醇样品。实验首先在分析水平发展碘帕醇的反相分离方法,考察了两种不同键合量的反相C18固定相、柱温和上样量对碘帕醇的保留、分离度和峰形等的影响。结果表明,碘帕醇在键合量为13. 7%的反相C18-1分析柱(250 mm×4. 6 mm,10μm)上保留较好,且可与杂质有效分离;柱温升高,碘帕醇保留变弱,和杂质之间的分离度降低,最终选用20~25℃作为分离纯化的温度;上样量增加,碘帕醇出峰时间提前,不利于前杂的去除。在制备水平上,以水和甲醇为洗脱剂,在20℃条件下使用装填C18-1固定相的制备柱(270 mm×50 mm,10μm)对碘帕醇进行分离纯化,制备的碘帕醇样品的色谱纯度可达98. 97%,回收率为93. 44%,各项有关物质均符合限量规定。该方法可以在保证高回收率的条件下有效降低杂质水平,为碘帕醇分离纯化生产工艺的开发提供新方法。

奥硝唑氯化钠注射液主要杂质的结构鉴定

目的:对奥硝唑氯化钠注射液的主要杂质进行结构分析。方法:采用HPLC-QTOF-MS联用技术对该杂质进行鉴定;利用制备高效液相色谱从奥硝唑氯化钠注射液中分离制备该杂质,并进一步采用核磁技术进行结构确证。结果:确证了奥硝唑氯化钠注射液的1个主要杂质的结构。结论:本研究对奥硝唑氯化钠注射液的杂质分析、质量控制具有重要作用。

生物标志物单体放射性碳同位素分析技术的发展

自Eglinton等(1996)首次将单体放射性碳同位素分析技术(CSRA)应用于海洋沉积物中生物标志物14C研究以来,该技术发展迅速,广泛应用于海洋科学、生物地球化学和古气候学等领域。但是,自然环境样品中生物标志物大多含量低、干扰基质复杂而且难以分离。因此,如何从基质组成复杂的样品中分离富集高纯度的目标化合物已经成为限制CSRA技术发展和应用的瓶颈。近些年来,不断改进的色谱分离富集技术不仅提高了目标化合物分离的纯度和回收效率,同时也扩展了生物标志物的碳同位素示踪应用。综合介绍了自然环境研究中单体化合物放射性碳同位素分析技术中常见生物标志物单体分离纯化的技术方法以及发展现状。

地塞米松磷酸钠注射液中杂质Ⅰ研究

目的:研究地塞米松磷酸钠注射液中的杂质Ⅰ。方法:采用液相色谱法测定地塞米松磷酸钠原料药和注射液中的有关物质;采用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱技术(HPLC-QTOF-MS)考察杂质Ⅰ的产生机理;合成、制备、纯化杂质Ⅰ,并进一步采用紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振技术确证杂质Ⅰ的化学结构。结果:杂质Ⅰ为地塞米松磷酸钠与抗氧剂亚硫酸氢钠在高温下的加成产物。结论:本研究结果对地塞米松磷酸钠注射液的工艺改进以及质量控制具有指导作用。

格列美脲中间体BHXA中杂质的研究

目的:对格列美脲中间体4-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧代-3-吡咯啉-1-甲酰胺基)乙基]-苯磺酰胺(BHXA)在相对保留时间(RRT)1.08和1.46处的2个较大杂质进行分离、鉴别。方法:采用高效制备型高效液相色谱(Prep-HPLC)对BHXA的杂质进行分离,通过核磁(^(1)H-NMR、^(13)C-NMR)和质谱(MS)进行结构分析和鉴定,并进一步使用3-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧代-3-吡咯啉-1-甲酰胺基)乙基]-苯磺酰胺和2-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧代-3-吡咯啉-1-甲酰胺基)乙基]-苯磺酰胺对照品进行了定性。结果:这2个杂质为BHXA合成过程中的异构副产物,其化学名为3-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧代-3-吡咯啉-1-甲酰胺基)乙基]-苯磺酰胺(杂质Ⅰ)和2-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧代-3-吡咯啉-1-甲酰胺基)乙基]-苯磺酰胺(杂质Ⅱ)。结论:这2个杂质与BHXA结构极其相似,根据其反应机理,它们可以和BHXA一起参与下一步反应,得到格列美脲欧洲药典(EP)中的杂质D和杂质I,对格列美脲的药效和安全性会产生一定的影响。通过本研究,可以在BHXA合成过程中优化合成条件,减少这2个杂质的生成,达到提前控制格列美脲成品中EP杂质D和杂质I含量的目的,以提高用药的安全性和有效性。

密生雪灵芝的化学成分研究

目的研究密生雪灵芝的化学成分。方法利用硅胶柱层析、大孔吸附树脂、中压柱层析、Sephadex LH-20和反相C18半制备液相色谱等手段进行分离纯化,并通过1HNMR、13CNMR等波谱技术来鉴定结构。结果从密生雪灵芝全草的正丁醇萃取物中分离得到了10个化合物,分别鉴定为:小麦黄素(Ⅰ)、小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅲ)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)、邻苯二甲酸二异丁酯(Ⅴ)、没食子酸(Ⅵ)、山奈酚(Ⅶ)、槲皮素(Ⅷ)、芹菜素(Ⅸ)、杨梅素(Ⅹ)。结论所有化合物均为首次从密生雪灵芝中分离得到。

柏木枝叶的化学成分研究

目的研究柏木Cupressus funebris Endl.枝叶的化学成分。方法利用柱色谱和制备HPLC等方法进行分离纯化,采用核磁共振波谱鉴定化合物的结构。结果从柏木枝叶95%乙醇提取物中分离得到了12个化合物,分别鉴定为柏木双黄酮(Ⅰ)、4',4二甲醚柏木双黄酮(Ⅱ)、槲皮素3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(Ⅲ)、山柰酚3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(Ⅳ)、山柰酚3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(Ⅴ)、海波拉亭7-O-β-吡喃木糖苷(Ⅵ)、芦丁(Ⅶ)、(6R,9S)3-氧代-α-紫罗兰醇β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅷ)、桃拓酚(Ⅸ)、反式璎柏酸(Ⅹ)、顺式璎柏酸(Ⅺ)和3-(4'-甲氧基苯基)丙酸2'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅻ)。结论所有化合物均为首次从柏木中分离得到,化合物Ⅱ、Ⅳ~Ⅸ、Ⅻ为首次从柏木属植物中发现。

石杉碱甲注射液金属离子诱导降解杂质结构分析

目的对石杉碱甲注射液的杂质Ⅰ进行结构分析。方法采用高效液相-飞行时间质谱联用(HPLC-Q-TOF)技术对杂质进行解析推断,利用制备型高效液相从石杉碱甲注射液中分离制备杂质Ⅰ,结合NMR技术进行结构确证。结果利用质谱和核磁方法鉴定了石杉碱甲注射液中杂质Ⅰ:(11E)-7,8-二氯-5-氨基-11-亚乙基-5,8,9,10-四氢-7-甲基-5,9-亚甲基环辛三烯并[b]吡啶-2(1H)-酮。结论杂质Ⅰ为金属离子诱导降解产生,为石杉碱甲注射液质量控制和工艺优化提供参考依据。