青香蕉果肉多酚成分鉴定及其对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用

以青香蕉为原料提取多酚,利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱联用技术对多酚提取物进行成分鉴定,并通过体外实验评价香蕉果肉多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用,探究青香蕉降血糖的部分机制。结果表明:青香蕉果肉多酚提取物中共鉴定出28种化合物,包括21种多酚类化合物、2种有机酸、3种鞣花单宁代谢产物、以及香兰素和香豆素,检测到香蕉果肉中含有秦皮乙素、金丝桃苷、紫云英苷3种多酚类化合物,此外,二甲基鞣花酸和尿石素A为主要色谱峰;体外实验结果显示,香蕉果肉多酚对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶均存在抑制作用,质量浓度为1.0 mg/mL时,对α-淀粉酶抑制率为(76.25±3.79)%,半抑制质量浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)为0.53 mg/mL;质量浓度为160μg/mL时,对α-葡萄糖苷酶抑制率为(92.54±0.69)%,IC50为35.76μg/mL。因此,多酚可能是青香蕉能够降血糖的活性成分之一。

宽叶金粟兰的化学成分及其抗肿瘤活性研究

为探寻宽叶金粟兰(Chloranthus henryi)的化学成分及抗肿瘤活性,该研究采用硅胶柱层析、反相柱色谱、Sephadex LH-20凝胶和半制备高效液相等色谱技术对宽叶金粟兰95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位进行分离纯化,根据理化性质与波谱数据并结合参考文献鉴定所得化合物的结构,并采用MTT法评价化合物细胞毒活性。结果表明:(1)从该植物的95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位分离并鉴定了12个化合物,分别为pipercyclobutanamide C(1)、chololactone A(2)、sarcanolide B(3)、环银线草醇A(4)、chloramultiol D(5)、chlorasessilifol B(6)、chlorajaponol(7)、tianmushanol(8)、spicachlorantins B(9)、spicachlorantins A(10)、及已灵素A(11)、chloramultiols A(12)。化合物1为新化合物,除化合物8外,其余化合物均为首次从宽叶金粟兰中分离得到。(2)细胞毒活性测试结果显示,仅化合物2和化合物7对人宫颈癌细胞HeLa有抑制作用,IC_(50)值分别为(4.50±0.27)μmol·L^(-1)和(4.25±0.08)μmol·L^(-1),其他化合物对其均无抑制作用。该研究结果为进一步深度研究与开发利用金粟兰属草本植物提供了一定的科学依据。

泡滇橄榄中一株酵母菌的分离鉴定及其耐受性研究

以泡滇橄榄为原料,对分离出的一株产气酵母菌进行鉴定并对其耐受性进行分析。从胀袋泡滇橄榄产品中分离获得一株产气酵母菌株,利用26S rDNA进行分子生物学鉴定,并开展耐受性及消毒剂抑制效果试验。结果表明:泡滇橄榄中产气菌株为葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum);该酵母菌具有耐酸性,在pH 2.5条件下依旧能够生长,而其耐热性能较差,75℃处理5 min便可将其杀死;pH值较低时,两种防腐剂(山梨酸钾、苯甲酸钠)对该酵母菌的抑制效果差异不明显,但pH值较高时,山梨酸钾的抑制效果较佳;4种消毒剂中对酵母菌抑制效果最好的为过氧乙酸,其次为次氯酸钠,而二氧化氯和二溴海因几乎无抑制作用。综上,泡滇橄中产气酵母为葡萄汁有孢汉逊酵母,具有较强耐酸性,过氧乙酸对其抑制效果较好。本研究为泡滇橄榄的工业化生产及滇橄榄系列产品开发提供一定的理论指导。

酸马奶酒中微生物的分离鉴定及抗菌特性的研究

从内蒙古锡盟不同地区采集 15份酸马奶酒样品 ,经分离纯化、归属种鉴定 ,并单菌发酵液经调 p H值、蒸发酒精、浓缩后 ,对李斯特杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌进行抑菌研究。结果表明 ,酸马奶酒是由多种乳酸菌和酵母菌共同发酵的乳饮料。其中乳酸菌中有球菌 5个属 ,杆菌 6个属 ,酵母菌 6个属。乳酸菌中有 9株乳球菌和 12株乳杆菌对李斯特杆菌有抑制作用 ,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌无抑制作用。酵母菌中有 4株对大肠杆菌有抑菌作用 ,其中有 2株同时对金黄色葡萄球菌有抑制作用 。

贮藏苹果中酵母菌的分离、初步鉴定及其抑制研究

对苹果中的酵母菌进行分离、纯化与初步鉴定,并用不同的抑制剂对其进行抑制试验研究。结果表明:从苹果中初步分离出酵母菌4株,通过对其形态、培养特征及生物学特性的研究,初步鉴定为酿酒酵母属、出芽短梗霉属、产朊假丝酵母属、皮状丝孢酵母属;山梨酸和苯甲酸钠对此4株菌都有很好的抑制效果,当山梨酸和苯甲酸钠浓度均为0.08%时,对酵母菌的平均抑菌率分别为99.98%和99.78%。

大蒜秸秆水浸液的抑菌作用和抑菌成分初步分析

以不同浓度的大蒜秸秆水浸液对西瓜枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、辣椒疫霉病菌进行抑菌圈试验,并对3种不同的大蒜秸秆萃取液中的可挥发抑菌物质进行鉴定,以了解大蒜秸秆水浸液的抑菌作用。结果表明,大蒜秸秆水浸液对3种靶标菌均有抑菌活性,其最有效的抑菌浓度为100 g.L-1,对辣椒疫霉病菌的抑菌活性最强。大蒜秸秆水浸液的石油醚、三氯甲烷和乙酸乙酯3种有机溶剂萃取相对3种靶标菌均有抑菌活性,以乙酸乙酯相抑菌活性最强,在50 g.L-1浓度下对辣椒疫霉菌抑菌率达100%,在100 g.L-1浓度下对西瓜枯萎病菌和黄瓜枯萎病菌的抑菌率也达100%;三氯甲烷相的抑菌活性稍高于石油醚相;抑菌活性基本随浓度增加而增大。经GC-MS分析,初步确定大蒜秸秆水浸液中的可挥发抑菌物质主要有2-甲氧基-1,6-己二酸甲酯、邻苯二甲酸二丁酯等有机酯类,3-甲氧基-4-羟基-苯甲酸、对羟基苯甲酸等有机酸,以及对甲氧基苯酚等酚类化合物。

油菜菌核病菌拮抗海洋细菌GM-1菌株的种类鉴定及抑菌作用研究

从连云港海域分离到1株对油菜菌核病菌有显著抑制作用的海洋细菌菌株GM-1,对其进行种类鉴定、抗菌作用测定及盆栽防病效果测定。通过形态特征观察、生理生化试验及16SrDNA序列、gyrB基因序列分析,将该菌株鉴定为芽胞杆菌属(Bacillus)的解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。抑菌作用测定结果表明:GM-1菌株和无菌发酵液对油菜菌核病菌菌丝的生长具有明显的抑制作用,培养7d的抑菌带宽度分别达到30mm和16mm,GM-1菌株和无菌发酵液对菌丝细胞结构有明显的破坏作用,导致菌丝细胞壁变厚、膨大;同时对菌核的萌发有明显的抑制作用,菌液较无菌发酵液的抑制作用更显著。盆栽防病效果测定表明:该菌株菌液对油菜菌核病具有明显的防治作用,防治效果达68%,同时能够促进油菜种子萌发,显示出良好的开发应用前景。

芽孢杆菌抗菌肽对对虾养殖环境中镰孢菌的抑菌效应

采用镰孢菌选择性培养基(FS)、PDA分离培养基和SNA鉴定培养基,针对对虾养殖环境中水域、沉泥及饲料等样本进行镰孢菌的分离,再用芽孢杆菌抗菌肽作用于分离株,观察其抑菌效应。结果共分离到镰孢菌255株,鉴定出14株梨孢镰孢菌和16株串珠镰孢菌。定量计算出水样镰孢菌平均浓度16 CFU/mL,沉泥样镰孢菌平均浓度161 CFU/mL,饲料样镰孢菌平均浓度为69 CFU/g。抑菌试验表明芽孢杆菌抗菌肽对受试菌株的气生菌丝均有抑制效应,最佳稀释度为2.5μg/mL。对虾养殖环境中存在一定浓度的镰孢菌,对对虾养殖存在潜在威胁;芽孢杆菌抗菌肽对对虾养殖环境中镰孢菌的抑菌效应显著。

1株桑根腐病拮抗细菌的分离鉴定及田间防治效果

【目的】筛选出对桑根腐病菌可可毛色二孢Lasiodiplodia theobromae有显著拮抗作用的细菌,并测定其田间防治效果。【方法】采用平板稀释法从健康桑树根际土壤中分离细菌;采用平板对峙法和孢子萌发法筛选出对靶标菌株有显著拮抗作用的菌株。通过形态观察、生理生化特征测定、gyr A和gyr B基因序列鉴定拮抗细菌菌株。设置田间小区试验,测定拮抗菌株在自然条件下的生防效果。【结果】从桑树根际土壤中分离出8株对L.theobromae有抑制作用的细菌,其中菌株YZ14-3的抑制效果最好。该菌株及其培养液对L.theobromae菌丝生长的抑制率分别为73.3%和55.6%,挑取抑菌圈上的L.theobromae菌丝镜检发现,菌丝畸形膨大;L.theobromae分生孢子在YZ14-3的培养液中不能萌发,且分生孢子因细胞壁降解而解体;经形态观察、生理生化特征测定和基于gyr A和gyr B基因序列BLAST分析结果构建的系统发育树,YZ14-3被鉴定为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens;大田防治试验结果表明,YZ14-3的生防效果达67.94%。【结论】B.amyloliquefaciens菌株YZ14-3对L.theobromae的抑制效果较显著,可应用于L.theobromae所致病害的生物防治。

猪源性大肠杆菌分离鉴定及体外抑菌试验

试验从延边地区养猪场临诊上疑似大肠杆菌病的仔猪中无菌采集粪便和血样52份,进行大肠杆菌分离鉴定及致病性研究;通过纸片扩散法测定四环素、磺胺嘧啶钠及链霉素对分离株及标准菌株的抑菌效果,通过试管二倍稀释法及牛津杯法测定中药蒲公英、连翘及柴胡粗提物对分离株及标准菌株的最小抑菌浓度(MIC)及抑菌效果。结果表明:共分离鉴定28株大肠杆菌,分离率54%;79%分离株可致死小鼠;大肠杆菌对四环素及磺胺嘧啶钠敏感度较低,耐药率分别为89%和64%,对链霉素敏感度较高,耐药率为6%;蒲公英粗提物的MIC值为0.05g/mL,连翘与柴胡粗提物的MIC值均为0.1g/mL,3种中药粗提物均可抑制大肠杆菌生长,且蒲公英粗提物的抑菌效果最强。该试验结果表明:分离株对抗菌药的耐药性明显,中药体外抑菌效果明显,为延边地区仔猪腹泻性大肠杆菌病的防治及新药的开发提供依据。

藜麦内生细菌LS3发酵条件优化及其抑菌机制初探

藜麦黑茎病是危害藜麦的主要病害之一,可引起藜麦倒伏、籽粒空瘪和不育,严重影响藜麦籽粒的产量和品质。前期从藜麦穗中分离获得1株对藜麦黑茎病菌(Ascochyta caulina)具有良好抑菌活性的内生细菌,命名为LS3,为进一步开发应用该菌株,采用单因素试验法对LS3菌株的最佳培养基、碳源、氮源、温度进行筛选,对其发酵条件进行优化,采用鉴定培养基法对LS3菌株的抑菌活性物质进行检测,对其抑菌机制进行初探。结果表明,LS3菌株发酵所需最佳培养基为YSP培养基,最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为牛肉膏+酵母粉,发酵最佳温度为28℃。对转速、装液量、接种量、pH以及发酵时间5个因素进行正交发酵优化,结合方差分析,并考虑成本因素,最终确定LS3菌株最佳发酵条件为:转速130 r/min,装液量150 mL/300 mL,接种量1%,pH值7.0,发酵时间96 h。对LS3菌株细胞壁降解酶活性检测发现,LS3菌株可分泌β-1,4-葡聚糖酶和胞外蛋白酶,但不能产生几丁质酶和β-l,3-葡聚糖酶。

暹罗芽孢杆菌ZHX-10的分离鉴定及其对花生白绢病的生防效果

为筛选可用于防治花生白绢病的生防菌株,采用稀释涂布平板法,从土传病害发生严重的花生田中分离获得了1株拮抗细菌ZHX-10,结合形态学观察、生理生化鉴定及16S rDNA、gyrB序列分析对其进行了种类鉴定,并初步测定了ZHX-10的菌悬液、挥发性气体、发酵液对白绢病菌的抑制效果。结果表明:ZHX-10菌株为暹罗芽孢杆菌Bacillus siamensis,其菌悬液、挥发性气体和发酵液均能有效抑制白绢病菌菌丝的生长;同时离体叶片接菌实验发现ZHX-10菌悬液产生的挥发性气体能够有效降低白绢病的发病情况。研究结果表明,ZHX-10在白绢病菌生物防治中具有较好的应用潜力和较高的研究价值。

1株生防菌的鉴定及其发酵条件优化

对草莓灰霉病菌具有较强拮抗活性的生防菌株F11进行分类学鉴定和抑菌效果评价,并采用正交试验和单因素试验对该菌株发酵配方和发酵条件进行优化,以期提高该菌株的发酵效率。结果表明,F11菌株对水稻稻瘟病菌、核盘菌等12种常见病原菌抑制率均达79.88%以上,表现出高效、广谱的抑菌特性,可作为植物病害生物防治的潜在资源。经菌落形态观察、生理生化测定、16S rRNA及gyrB基因测序分析,确定菌株F11为解淀粉芽孢杆菌(Bacillues amyloliqufaciens)。通过L16(4^3×2°)正交试验优化,确定该菌株适宜的发酵培养基配方为:3.00g/L牛肉膏、10.00 g/L蛋白胨、5.00 g/L NaCl、3.00 g/L葡萄糖、2.00 g/L MgCl2。单因素试验结果进一步表明,基于优化配方,菌株F11培养的适宜初始pH为7.0、温度为30℃、振荡速率为150 r/min;平板计数显示,上述培养条件下活菌数为4.67×10^9 CFU/mL。

川芎化学成分及其抑制子宫平滑肌收缩作用(Ⅱ)

目的研究川芎Ligusticum striatum DC.的化学成分及其抑制子宫平滑肌收缩作用。方法川芎水提物正丁醇萃取部位采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20和半制备液相进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用缩宫素致大鼠离体子宫平滑肌痉挛模型考察其对子宫平滑肌收缩活动的影响。结果从中分离得到10个化合物,分别鉴定为环(L-苯丙氨酸-L-丝氨酸)(1)、环(D-苯丙氨酸-L-丝氨酸)(2)、环(L-苯丙氨酸-L-谷氨酰胺)(3)、2-isopropyl-5-phenylmethyl-imidazolidinone-4-one(4)、环(L-苯丙氨酸-L-丙氨酸)(5)、环(L-酪氨酸-L-亮氨酸)(6)、环(L-苯丙氨酸-L-酪氨酸)(7)、4(3H)-喹唑酮(8)、3-羟基喹啉(9)、marinoquinoline K(10)。与空白组比较,化合物2和5在高剂量时对子宫收缩张力、收缩活力表现出抑制作用,中、低剂量组无明显作用。结论所有化合物均为首次从该植物和藁本属中分离得到,化合物2、5在50μmol/L时对离体子宫平滑肌收缩活动有抑制作用。

血散薯内生真菌的分离鉴定及其抗菌活性研究

从血散薯(Stephania dielsiana Y.C.Wu)中寻找活性内生真菌,为血散薯植物资源的保护及活性天然产物的开发提供依据,对其茎、叶中内生真菌进行分离鉴定,并研究其抗菌活性。结果表明,从血散薯茎、叶中共分离得到38株内生真菌,其中31株经形态学结合分子生物学的方法鉴定表明,其归为14个不同的属,包括链格孢属(Alternaria)、炭团菌属(Hypoxylon)、枝孢属(Cladosporium)、茎点霉属(Phoma)、镰刀属(Fusarium)、Stagonosporopsis、Ascomycete、毛壳菌属(Chaetomium)、拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)、弯孢霉属(Curvularia)、短梗霉属(Aureobasidium)、Annulohypoxylon、小光壳属(Leptosphaerulina)、刺盘孢属(Colletotrichum)。其中,优势属为链格孢属和茎点霉属。基于前期对峙拮抗预试验结果,选取14株内生真菌进行发酵培养,并测定其对9种植物病原真菌和10种动物病原细菌的抗菌活性。结果表明,内生真菌发酵产物粗提物对供试病原菌具有不同程度的抑制作用。其中,7株内生真菌(叶-8、Y-66、YB-12、J-12、J-34、J-36、J-55)的粗提物对5株或5株以上供试植物病原真菌具有明显抗菌活性。叶-8、J-12分别对玉米大斑病菌、金橘砂皮病菌表现出最佳的抗菌活性,EC 50值分别为0.063 1、0.006 2 mg/mL;J-34对甘蓝黑斑病菌、甘蔗凤梨病菌表现出最佳的抗菌活性,EC 50值分别为0.018 1、0.004 2 mg/mL。10株内生真菌的粗提物对金黄色葡萄球菌均具有抑制作用,MIC值介于0.500~10.000 mg/mL,4株内生真菌的粗提物对大肠杆菌具有抗菌活性,MIC值介于0.156~4.000 mg/mL。上述结果表明,血散薯茎叶中存在丰富的内生真菌资源,且其次生代谢产物具有广谱抗菌活性。

安徽池州市茶轮斑病病原鉴定及4种杀菌剂对其抑制性

茶轮斑病是安徽产茶区近年来发生的重要病害,可导致叶片脱落甚至植株死亡,严重影响其经济价值。为明确茶树轮斑病病原菌种类和对杀菌剂敏感性,采用组织分离法获得病原菌,并通过柯赫氏法则验证,之后采用形态特征结合分子生物学方法鉴定病原菌的分类地位;应用生长速率法测定了4种常见杀菌剂对该病原菌生长的抑制效果。结果表明,茶树轮斑病的病原菌为茶拟盘多毛孢Pestalotiopsis theae;50%多菌灵可湿性粉剂对病原菌菌丝生长的抑制效果最好,其致死中浓度(EC50)最小,为0.03μg·mL^-1。

高速短初级直线感应电动机等效电路模型及时变参数辨识

由于受到动态纵向边端效应和铁心饱和的影响,直线感应电机传统等效电路模型电磁参数时变。针对此,本文提出了多因素耦合影响下高速短初级直线感应电机等效电路模型及其时变参数辨识方法。首先,分析不同工况下电机推力变化规律;其次,分析电机电磁参数与运行工况之间的规律,提出激磁电感和次级电阻修正系数,构建直线感应电机改进等效电路模型,并通过响应面分析法计算两个修正系数;最后,开展样机静态堵驻实验和动态实验。计算和实测结果表明:推力计算值与实测值误差不超过4.1%,端口基波正序阻抗的实部、虚部计算值与实测值误差不超过4.7%,验证了时变参数辨识的准确性。

黄精根腐病分离菌及其拮抗内生细菌的鉴定

黄精是重要的药食同源植物。采集湖南洪江市发生的黄精根腐病株,从其分离菌株HF2的培养性状和形态学特征、真菌r DNA内转录区(ITS)、EF-1a区序列分析和系统发育关系比较等方面对该菌株进行了鉴定;通过平板对峙试验筛选对黄精根腐病菌具有抑制作用的内生细菌,并进行形态观察、生理生化指标测定和16S rRNA序列分析。结果表明:从根腐病株中分离得到的菌株为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum);从黄精中分离获得40株内生细菌,对尖孢镰刀菌有抑制作用的菌株10株,其中A8的抑菌效果最好,对病原菌的抑菌圈半径可达13 mm,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

高寒草地牧草内生细菌262AG6拮抗功能测定及鉴定

为明确高寒草地牧草矮生嵩草(Kobresia humilis)内生细菌262AG6的生防潜力,采用平皿对峙法测定其抑菌功能,并综合形态学特征和16SrDNA序列分析对其进行鉴定。结果表明,262AG6对马铃薯炭疽病菌(Colletotrichum coccodes)的抑制效果达到81.33%,对其他多种病原真菌也具有良好抑制能力,且抑菌能力稳定;在含100mg·L^(-1)色氨酸和不含色氨酸的King培养液中分泌IAA的量分别为8.04mg·L^(-1)和7.98mg·L^(-1);具有溶解无机磷和固氮的能力;262AG6革兰氏染色呈阳性,杆状,菌体大小为(1.63~3.65)μm×(0.38~0.95)μm,综合形态特性、16SrDNA和gyrB DNA序列分析将菌株262AG6鉴定为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。

黄粉虫致病菌的分离鉴定、发酵条件优化及其对植物病原菌的抑制作用

【目的】研究黄粉虫病死幼虫体内的致病菌、致病菌抑制植物病原菌的效果及其最佳发酵条件,为有效防控黄粉虫病害及利用致病菌进行农业病虫害生物防治提供科学依据。【方法】以罹病死亡的黄粉虫幼虫为材料,利用平板涂布法及划线法分离致病菌;依据柯赫氏法则测定致病菌的致病性;通过形态学观察、生理生化测定和16S rDNA序列分析确定致病菌株的分类地位;采用平板对峙法测定致病菌对12种供试植物病原真菌的抑制效果;利用单因素试验对致病菌的发酵条件进行优化。【结果】从罹病黄粉虫虫体中分离获得3株致病菌,从中筛选出致病效果最好的菌株并命名为WU-1,其对黄粉虫幼虫的致死率为58.00%;WU-1菌株对供试12种植物病原真菌具有广谱抑菌性,抑菌率为60.54%~78.33%。结合WU-1菌株菌落形态特征、生理生化测定和16S rDNA序列分析结果,将WU-1菌株鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。WU-1菌株发酵条件优化结果表明,其最适培养基为YSP培养基;最适发酵条件为250 mL三角瓶装液量30 mL、初始pH 8、接菌量50μL、培养温度40℃、转速240 r/min、发酵时间24 h。【结论】优化的发酵方案可用于快速、大批量培养WU-1菌悬液。WU-1菌株对黄粉虫幼虫具有较好的致病效果,可为鞘翅目害虫防治提供参考。该菌株对12种植物病原真菌具有良好的抑制作用,可作为研制植物病害生物防治菌剂的备选菌株。