原花青素A2肠道菌群代谢物及其抗氧化活性

采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用仪对原花青素A2(procyanidin A2,PCA2)体外大鼠肠道菌群代谢物进行分析,比较不同培养时间点PCA2肠道菌群代谢物总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2,2’-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt,ABTS)自由基清除能力的变化。结果表明:随着菌群培养时间的延长,PCA2质量浓度逐渐降低,在6 h时PCA2的浓度降低77.28%,24 h降低了90.07%。PCA2经肠道菌群代谢主要产生8种新化合物,经鉴定为对羟苯基乙酸、表儿茶素、3-(4-羟苯基)丙酸、B型原花青素、5,7,2’-三羟基黄烷和3种未知结构化合物。PCA2肠道菌群代谢产物的抗氧化能力显著高于PCA2,其中代谢6 h时,其T-AOC、DPPH自由基和ABTS+μ清除能力分别提高了2.01、2.16、1.34倍。肠道菌群代谢物在PCA2生物活性作用过程中具有重要作用。

荔枝核化学成分的研究

利用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、制备薄层色谱等方法，从荔枝（Litchi chinensis Sonn．）核乙醇提取物中分离出9个化合物，根据理化性质和波谱分析鉴定了7个化合物，分别为胡萝卜苷（daucosterol，1）、原儿茶醛（protocatechuic aldehyde，2）、原儿茶酸（protoeatechuic acid，3）、表儿茶素（（-）-epicafichin，4）、procyanidin A2（5）、procyanidin A1（6）、芦丁（rulin，7）。化合物2,4-7为首次从荔枝核中分得，化合物2．4、5为首次从该属植物中分离得到。

锡叶藤的化学成分

目的:研究锡叶藤Tetracera asiatica地上部分的化学成分.方法:采用正、反向硅胶色谱、凝胶Sephadex LH-20以及HPLC制备等多种技术进行分离纯化,并通过化合物的波谱数据及理化性质鉴定其结构.结果:从锡叶藤的体积分数为95%乙醇提取物中进一步分离得到13个化合物,分别鉴定为原花色素A2(1)、香草酸(2)、丁香酸(3)、阿魏酸(4)、对香豆酸(5)、没食子酸(6)、没食子酸甲酯(7)、3-甲氧基没食子酸(8)、原儿茶酸甲酯(9)、根皮苯乙酮(10)、羽扇豆醇(11)、桦木酸(12)、β-胡萝卜苷(13).结论:除桦木酸(12)和β-胡萝卜苷(13)外,其他均为首次从该种植物中分离得到.

固相萃取净化HPLC法同时检测荔枝皮中的几种原花青素

本研究建立了荔枝皮中儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、没食子酸(GA)、原花青素B2(PCB2)、原花青素B4(PCB4)和原花青素A2(PCA2)含量的测定方法。样品经85%乙醇水溶液提取,Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化,高效液相色谱(HPLC)同时进行检测。色谱柱为Thermo Syncronis C18(250×4.6 mm,5μm),以甲醇和1%冰乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长280 nm。儿茶素、表儿茶素、没食子酸、原花青素B2、原花青素B4和原花青素A2在0.5~100 mg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.9998。平均添加回收率为83.00%~102.00%,相对标准偏差(RSD)在0.48%~0.83%之间。儿茶素、表儿茶素、没食子酸、原花青素B2、原花青素B4和原花青素A2在荔枝皮中检出限分别为0.52、0.55、0.35、0.45、0.95和0.65 mg/kg,定量限分别为1.26、1.64、0.95、1.35、2.80和1.45 mg/kg。该方法简便、快速、准确,重复性好,可用于荔枝皮中C、EC、GA、PCB2、PCB4、PCA2的含量同时定量测定。

蔓越莓提取物薄层鉴别研究

以原花青素A2、原花青素B2、儿茶素为对照品,以蔓越莓冻干果粉为对照提取物,采用硅胶GF254薄层板,以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸=6∶10∶1为展开剂进行展开,喷以香草醛盐酸溶液进行加热显色,建立蔓越莓提取物的薄层鉴别方法。对其进行方法学确认,并对潜在掺伪提取物和不同厂家的蔓越莓提取物进行薄层鉴别分析。结果表明该鉴别方法专属性强、重现性好、操作简便可行,可用于蔓越莓提取物的鉴别,为建立蔓越莓提取物质量标准提供参考。

指纹图谱与一测多评法相结合评价荔枝多酚提取物

目的采用指纹图谱与一测多评(QAMS)结合的方法评价荔枝多酚提取物,并测定提取物中4种多酚类成分。方法采用RP-UPLC法测定22批荔枝多酚提取物,建立指纹图谱的共有模式。以表儿茶素为内参物,建立原花青素A2、原花青素B2、表儿茶素-(4β→8,2β→O→7)-表儿茶素-(4β→8)-表儿茶素(PC-C)的相对校正因子(f),并测定各成分量,实现QAMS。同时比较QAMS和外标法测定4种多酚类成分量测得值的差异,验证QAMS的可行性及其准确性。结果 22批荔枝多酚提取物特征指纹图谱标定了19个共有峰,指认了其中9个共有峰,即4个已知主成分6号峰(原花青素B2)、8号峰(表儿茶素)、9号峰(PC-C)、15号峰(原花青素A2),3个A型原花青素三聚体(12、16、17号峰),1个A型原花青素二聚体(19号峰)和1个B型原花青素二聚体(14号峰);22批荔枝多酚提取物相似度大于0.9,其中4个主成分的QAMS计算值与外标法实测值间无显著差异(P>0.25)。结论指纹图谱与QAMS结合的质控模式准确可行,可为全面合理评价荔枝多酚提取物的质量提供参考。

基于加权基因共表达网络分析和分子对接分析荔枝核干预结肠腺癌的黄酮类成分及靶点

目的探讨荔枝核干预结肠腺癌(COAD)进展和转移的黄酮类成分和作用靶点。方法通过DRAR-CPI和SWISS数据库检索荔枝核中19个黄酮类化合物的潜在作用靶点。从TCGA数据库下载COAD基因表达数据和临床特征数据,采用加权基因共表达网络分析(WGCNA)法建立COAD的基因共表达网络和识别共表达模块,以共表达模块和潜在作用靶点中共同靶点作为化合物干预COAD的作用靶点。通过String数据库进行蛋白互作网络分析、KEGG和GO分析。通过cytoHubba插件提取Hub基因作为COAD潜在生物标志物,通过Cytoscape建立成分、靶点、通路的互作网络。HPA数据库验证潜在生物标志物的表达,通过分子对接技术虚拟筛选与潜在生物标志物作用的化合物。结果经WGCNA分析得到18个共表达模块,其中7个模块与生存时间、肿瘤分期等临床特征相关,turquoise模块与COAD进展转移相关。荔枝核中19个黄酮类化合物作用于380个潜在作用靶点,选择与turquoise模块重复的34个靶点作为作用靶点,GO分析结果显示作用靶点富在304个GO条目,其中生物过程229条、细胞组成31条、分子功能44条;KEGG分析结果显示作用靶点富集在癌症通路、细胞周期、孕酮介导的卵母癌症途径、细胞衰老、p53信号通路等40条通路。CytoHubba筛选得到CDC25A、CDC25C、CCNB2、AURKB基因作为COAD进展转移相关的潜在生物标志物。HPA数据库免疫组化结果显示,与癌旁组织相比,COAD组织中CDC25C、AURKB、CCNB2蛋白表达升高(P<0.05),与TCGA数据集中基因表达量一致。通过分子对接初步筛选得到柚皮芸香苷、原花青素A2、根皮苷、表儿茶素可通过氢键等与CDC25A、CDC25C、AURKB结合较好。结论CDC25A、CDC25C、CCNB2、AURKB可作为COAD进展和转移密切相关的潜在生物标志物。荔枝核黄酮类化合物干预COAD进展和转移的机制可能与黄酮类化合物调控细胞分裂、细胞周期G2/M期转变等生物过程进而调节癌症途径、p53信号通路等信号通路有关,其中柚皮芸香苷、原花青素A2、根皮苷、表儿茶素、芦丁可能是CDC25A、CDC25C、AURKB的潜在抑制剂。