异牛肝菌素对人胃癌细胞生物学特性的影响及机制

目的探讨异牛肝菌素对人胃癌细胞(SGC-7901)生物学特性的影响及机制。方法取对数生长期SGC-7901细胞,用2.83、5.66和11.32μmol/L异牛肝菌素分别作用于SGC-7901细胞,设为异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组和异牛肝菌11.32μmol/L组,异牛肝菌0μmol/L组仅加入等容量生理盐水。CCK-8法检测SGC-7901细胞增殖,流式细胞术检测SGC-7901细胞凋亡,Transwell检测SGC-7901细胞侵袭,细胞划痕实验检测细胞迁移,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,采用Real-time PCR法检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin mRNA表达,Western blotting法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达,流式细胞术检测活性氧(ROS)水平。结果与异牛肝菌0μmol/L组相比,异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组、异牛肝菌11.32μmol/L组细胞增殖、侵袭、迁移、克隆形成能力低(P均<0.05),并随着异牛肝菌剂量的增加,增殖、侵袭、迁移、克隆形成能力逐渐降低(P均<0.05);与异牛肝菌0μmol/L组相比,异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组、异牛肝菌11.32μmol/L组细胞凋亡率高(P均<0.05),并随着异牛肝菌剂量的增加,凋亡率逐渐升高(P均<0.05);与异牛肝菌0μmol/L组相比,异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组、异牛肝菌11.32μmol/L组E-cadherin mRNA表达高(P均<0.05),N-cadherin、Vimentin mRNA表达低(P均<0.05),并随着异牛肝菌剂量的增加,E-cadherin mRNA表达逐渐升高(P均<0.05),N-cadherin、Vimentin mRNA表达逐渐降低(P均<0.05);与异牛肝菌0μmol/L组相比,异牛肝菌2.83μmol/L组、异牛肝菌5.66μmol/L组、异牛肝菌11.32μmol/L组ROS荧光强度、p-PI3K、p-Akt蛋白表达高(P均<0.05),并随着异牛肝菌剂量的增加,ROS荧光强度、p-PI3K、p-Akt蛋白表达逐渐升高(P均<0.05)。结论异牛肝菌素可调控SGC-7901增殖、凋亡、侵袭、迁移、克隆形成能力,并呈剂量依赖性;其机制可能是通过ROS-PI3K/Akt信号通路间接发挥其抑制SGC-7901上皮-间充质转化的作用。

ALS抑制类除草剂对西瓜子叶外植体分化的研究

以西瓜自交系D66的子叶为外植体,将外植体置于含有不同浓度乙酰乳酸合成酶(Acetolactate synthase,ALS)抑制剂类除草剂(SU除草剂、IMI除草剂)的筛选培养基上,根据外植体的分化率确定最适宜的除草剂浓度。探讨不同植物生长调节剂(6-BA、NAA)浓度配比对不定芽的增殖作用。结果表明,SU除草剂中苯磺隆和噻吩磺隆的最适宜浓度均为0.25 mg/L,苄嘧磺隆的最适宜浓度为0.50 mg/L;IMI除草剂中灭草喹和灭草烟的最适宜浓度均为1.50 mg/L;在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基中不定芽的增殖率最高,为287.0%;根据西瓜自交系材料D66确定的除草剂最适宜浓度同样适用于西瓜杂交种(武农8号、黑美人、甜王1号、早佳8424)子叶外植体的筛选试验。

三七总皂苷对低氧状态下大鼠PASMCs增殖、凋亡及Notch3通路的影响

目的:探讨在低氧(hypoxia, Hypo)条件下三七总皂苷(Panax notoginseng saponins, PNS)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells, PASMCs)增殖和凋亡及其Notch3通路的影响。方法:以大鼠PASMCs为研究对象,饥饿24 h后将细胞分为6组:正常对照(control, Con)组、Hypo组、Hypo+PNS组、Hypo+DAPT{N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester;Notch3通路抑制剂}组、Hypo+过表达Notch3(Hypo+Notch3)组和Hypo+Notch3+PNS组。Con组置于常氧环境(21%O_(2)、5%CO_(2)、74%N_(2))下培养48 h,其余5组预先进行相对应的干预后置于低氧条件(5%O_(2)、6%CO_(2)、89%N_(2))下培养48 h。造模结束后用细胞计数试剂盒8(Cell Counting Kit-8, CCK-8)测各组细胞活力;EdU染色法检测细胞增殖;TUNEL染色法检测细胞凋亡;RT-qPCR法检测PASMCs中Notch3、Hes-1、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和caspase-3的mRNA表达水平;Western blot检测PASMCs中Notch3、Hes-1、PCNA和caspase-3的蛋白表达水平;通过在细胞中过表达Notch3,探讨PNS是否通过Notch3影响PASMCs的增殖。结果:EdU和TUNEL结果表明,与Con组相比,Hypo组PASMCs增殖能力增强,且细胞凋亡显著减少(P<0.01),Notch3、Hes-1和PCNA的mRNA和蛋白表达水平显著升高,而caspase-3的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);给予PNS干预后,Notch3、Hes-1和PCNA的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而caspase-3的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);给予Notch3通路抑制剂DAPT干预后,Notch3、Hes-1和PCNA的mRNA蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而caspase-3的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。进一步结果显示,在PASMCs中过表达Notch3可逆转PNS对Hypo诱导的PASMCs增殖的抑制作用(P<0.05)。结论:PNS可通过降低Notch3表达,抑制Hypo诱导的大鼠PASMCs增殖并促进PASMCs凋亡。

敲低RBX1通过下调PHF5A抑制胰腺癌细胞增殖,迁移和侵袭并促进凋亡

目的:研究环盒蛋白1(ring-finger protein 1,RBX1)对胰腺癌(pancreatic adenocarcinoma,PAAD)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用及其潜在的作用机制。方法:利用基因表达谱交互式分析网站(gene expression profile interactive analysis web⁃site,GEPIA),实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)、Western blot检测RBX1在PAAD组织、细胞中的表达和预后价值。使用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)、细胞克隆形成能力实验、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL)、细胞划痕实验、Transwell实验检测RBX1敲低对胰腺癌-1(pancreatic carcinoma-1,PANC-1)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。通过LinkedOmics网站研究PAAD中RBX1和PHD锌指结构域蛋白5A(plant homodomain finger-like domaincontaining protein 5A,PHF5A)的相关性。qRT-PCR和Western blot检测RBX1敲低后PHF5A的表达,进行功能拯救实验。结果:RBX1在PAAD组织和细胞系中高表达,与不良预后相关(P<0.05)。RBX1敲低抑制PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡(P<0.05)。RBX1和PHF5A在PAAD中具有相关性(r=0.692),且RBX1正向调控PHF5A表达(P<0.05)。功能拯救实验表明PHF5A过表达部分逆转了RBX1敲低对PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用(P<0.05)。结论:RBX1敲低通过下调PHF5A表达抑制PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡。

丹参酮防治动脉再狭窄作用的实验研究

目的 :观察丹参酮对实验性动脉再狭窄的防治作用 ,并初步探讨其作用机制。方法 :雌性KM小鼠随机分为模型组、高剂量组、低剂量组 ,每组 12只。将小鼠左颈总动脉近动脉分叉处结扎 ,造成内膜增生、颈动脉狭窄模型。将模型组结扎动脉对侧血管作为正常组。术前两天开始给药 ,高、低剂量组分别灌胃给予丹参酮 6,3g·kg- 1·d- 1,模型组给予等体积的溶媒。给药 4周后 ,取颈动脉作HE染色 ,光镜下观察动脉形态并用图像分析系统分析动脉内膜面积、中膜面积、相对管腔面积及内膜 /中膜面积 ,用免疫组化测定增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达水平并计算阳性指数。结果 :与正常组比较 ,模型组管腔相对面积明显减小 (P <0 .0 1) ,内膜面积、中膜面积及内膜 /中膜面积增大 ,差异显著 (P <0 .0 1) ;与模型组比较 ,丹参酮低剂及高剂组的管腔相对面积均显著增大 (P <0 .0 1) ,内膜面积、中膜面积及内膜 /中膜面积均有减小 (P <0 .0 5) ,PCNA的表达明显减少 ,阳性指数显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :丹参酮可抑制由于血流动力学改变而引起的以平滑肌细胞增殖迁移为主要病理特征的内膜增生 ,提示对经皮腔内冠状动脉血管成形术 (PTCA)

白藜芦醇抑制HCT116结肠癌细胞增殖与Wnt/β-catenin的关系研究

目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对人结肠癌细胞增殖的抑制作用及可能的分子机制。方法采用结晶紫染色和Western blot分析Res对HCT116细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞术和Western blot分析Res对HCT116细胞凋亡的促进作用;利用TCF4/LEF萤光素酶报告质粒检测Res对Wnt/β-catenin信号转导的影响。采用Western blot和PCR分析Res对HCT116细胞内β-catenin表达水平的影响。结果与对照组相比,Res能抑制HCT116细胞增殖,下调PCNA蛋白水平;流式细胞术和Western blot检测结果均显示,Res能明显促进HCT116细胞凋亡;报告质粒分析结果显示,Res呈浓度依赖性降低TCF4/LEF报告质粒萤光素酶活性(Res为20μmol·L-1时,P<0.05;Res为40或80μmol·L-1时,P<0.01);Western blot和PCR分析结果显示,Res不仅明显降低HCT116细胞中β-catenin的蛋白水平,同时也下调β-catenin mRNA的表达水平。结论Res能抑制HCT116细胞增殖并促进凋亡,其机制可能至少与Res下调β-catenin mRNA表达,抑制Wnt/β-catenin信号转导有关。

参与肺动脉平滑肌细胞增殖信号转导机制及信号转导抑制剂的研究进展

肺动脉高压是一种以肺血管阻力升高为特征,最终导致右心功能严重受限、衰竭甚至死亡的慢性进展性疾病。其组织病理学改变主要以肺血管重构为特点,而肺动脉平滑肌细胞在外周血管的异常增殖是肺血管重构的主要病理基础。该文主要对参与肺动脉平滑肌细胞增殖信号转导机制及信号转导抑制剂的研究进展作一综述。

粉防己甲素抑制人结肠癌细胞增殖与Wnt/β-catenin信号的关系研究

目的研究粉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人结肠癌细胞增殖的抑制作用及可能的机制。方法采用结晶紫染色和流式细胞分析检测Tet对HCT116细胞增殖的抑制作用;利用流式细胞术分析和Annexin-V EGFP染色检测Tet对HCT116细胞凋亡的影响;利用萤光素酶报告质粒法检测Tet对Wnt/β-catenin信号转导的影响;采用Western blot检测Tet对HCT116细胞内β-catenin蛋白水平的影响。结果与对照组相比,Tet能抑制HCT116细胞增殖,在5μmol·L-1时已明显抑制细胞增殖(P<0.05);流式分析和Annexin-V EGFP免疫荧光染色检测结果均显示,Tet能明显诱导HCT116细胞凋亡;与对照组相比,Tet处理组LEF/TCF4和Myc/Max报告质粒萤光素酶活性降低,并且Tet处理组细胞内β-catenin蛋白水平也明显下降。结论 Tet能抑制HCT116细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与Tet通过降低细胞内β-catenin蛋白水平,抑制Wnt/β-catenin信号转导有关。

番石榴酸对INS-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌的促进作用及其机制分析

目的考察番石榴酸（guavenoic acid，GA）对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响，并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞，给予GA（0.3、1、3、10、30 n·L^－1），并设空白对照组、溶媒对照组（0.1％ DMSO）、分泌模型组及阳性药组（150 nmol·L^－1格列苯脲含1‰DMSO），药物作用48 h。应用 MTT 法检测药物对 INS-1的影响。使用酸醇提取液提取细胞中胰岛素，用放射免疫法检测药物对 I 细胞增殖 NS-1细胞内胰岛素含量的影响。分别用5.6、16.7 mmol·L^－1葡萄糖干预细胞1 h建立基础胰岛素分泌模型（BIS）、高糖刺激胰岛素分泌模型（GSIS），用放射免疫法测定药物对 INS-1细胞胰岛素分泌的影响，结果以总蛋白量校正。荧光定量 PCR 法检测药物对INS-1细胞内胰岛素基因、PDX-1、MafA mRNA 表达的影响。结果与溶媒对照组比较，GA 能明显地促进 INS-1胰岛细胞的增殖（P ＜0.01）并能明显增加 INS-1细胞内胰岛素含量（P ＜0.01），0.3～30 nmol·L －1 GA 对 BIS 及 GSIS 均有明显促进作用（P ＜0.05或 P ＜0.01），0.3～30 nmol·L^－1 GA 明显地上调 Insulin mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。3、30 nmol·L^－1 GA 明显地上调 PDX-1 mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。3、30 nmol·L^－1 GA 能明显地上调 MafA mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。结论GA 能促进 INS-1胰岛β细胞增殖；增加细胞内胰岛素含量与分泌量，可能与其上调 Insulin、PDX-1、MafA 基因表达有关。

以红芪替换黄芪的益气养血复方含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞增殖和抗氧化的影响比较

目的:比较红芪替换益气养血复方中黄芪后,含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞增殖和抗氧化衰老的影响。方法:以相同剂量红芪替换益气养血复方中的黄芪,用MTT法确定含药血清最佳浓度和时间及对ConA诱导的老龄鼠脾淋巴细胞增殖的影响;用含药血清与老龄小鼠脾淋巴细胞共培养后,测定细胞SOD的活性,MDA、ROS的含量及培养上清中IL-2的含量。结果:含药血清浓度40%培养72 h益气养血含药血清对老龄小鼠脾淋巴细胞增殖的刺激效果最佳,两种药物均可降低细胞内ROS水平,提高IL-2含量,且益红优于益黄。两种药物均能提高在ConA诱导下淋巴细胞的增殖能力,增强老龄鼠脾淋巴细胞内SOD活性,降低MDA含量,但两者之间无差异。结论:含黄芪及含红芪的益气养血复方含药血清均能起到一定的体外抗细胞衰老作用,且两者作用强度相似。

刺梨提取物CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖和人脐血CD34^+造血干/祖细胞增殖分化能力的影响

目的:观察刺梨提取物CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖和人脐血CD34+造血干/祖细胞(HSPC)增殖分化能力的影响。方法:采用MTT法测定活细胞OD值,计算CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率。免疫磁珠分选人脐血CD34+造血干/祖细胞,细胞记数、双色直接免疫荧光标记法和流式细胞仪分析细胞增殖分化能力变化。结果:MTT检测法显示,0.01~10μmol.L-1的CL1处理,剂量依赖性和时间依赖性地抑制胃癌SGC-7901细胞生长。经14 d的培养,与细胞对照组相比,10、1μmol.L-1的CL1细胞数有下降趋势,但差异无显著性;表达粒系/单核巨噬系细胞表型CD15和CD11b的细胞百分数无显著差异。经14 d的培养,与培养0 d比较,CD15显著增高(P<0.05),CD11b有增高趋势,但无显著性差异。结论:CL1对胃癌SGC-7901细胞的体外生长具有抑制作用,但对人脐带血CD34+HSPC的增殖、和向粒细胞、单核巨噬细胞分化无明显影响,表明CL1在抗肿瘤作用剂量下,不会明显抑制造血干/祖细胞向粒-单细胞的增殖分化,提示CL1可能不会引起明显的造血抑制。

转化生长因子-β(TGF-β)影响豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的研究

目的本研究探讨转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)体外刺激豚鼠巩膜成纤维细胞,观察豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。方法原代培养豚鼠巩膜成纤维细胞并鉴定,MTT法检测豚鼠巩膜成纤维细胞的增殖,培养液分别加入20 ng·m L-1TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3,分别于12 h、24 h、48 h、72 h,Real-time PCR检测α-SMA mRNA,Western-blotting和免疫荧光化学法检测其蛋白表达。结果与对照组相比,TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖,呈剂量依赖性(P<0.05),其中TGF-β1促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖作用最强(P<0.05);TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3均增加α-SMA的表达(均为P<0.001),TGF-β3促进α-SMA表达作用最强(P<0.001)。结论 TGF-β通过调控细胞外基质合成参与调控巩膜组织重塑。

桂皮醛对激素诱导的破骨细胞分化过程的保护作用及分子机制

目的研究桂皮醛对激素诱导的体外破骨细胞增殖分化及骨吸收功能增强的保护作用及分子机制。方法RANKL联合M-CSF体外诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞,分为对照组、地塞米松处理组和不同浓度(11.6、23.2、46.4μg·L-1)桂皮醛(cinnamic alde byde,CA)干预组;TRAP染色试剂盒鉴定成熟破骨细胞;MTT法观察地塞米松和桂皮醛在不同时间点对破骨细胞增殖的抑制作用;ELISA法检测细胞培养液上清中TRACP5b的表达水平;RT-PCR分析破骨细胞相关转录因子(RANK、NFATc1)mRNA的表达状态。结果地塞米松处理后,破骨细胞的增殖分化及骨吸收功能明显增强(P<0.05);而经不同浓度桂皮醛干预后,与地塞米松组相比,细胞增殖活性、上清液中TRACP-5b的含量以及RANK、NFATc1mRNA的表达水平随药物浓度的增加呈剂量依赖性降低(P<0.05)。结论桂皮醛可有效抑制激素诱导的破骨细胞的增殖及骨吸收功能,其作用机制可能是通过下调RANK以及下游NFATc1基因的表达。

白藜芦醇对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响

目的:探讨白藜芦醇(Res)对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响．方法:MTT法检测不同浓度(0,10,20,50,100．200μmol/L)Res处理24,48,72 h对SGC7901细胞的抑制率．流式细胞仪采用AnnexinV和PI双染检测细胞的早期凋亡率．电镜扫描观察SGC7901细胞形态学改变,分光光度法检测caspase-3活性．结果:Res在20-300μmol/L浓度范围内．以浓度和剂量依赖的方式抑制胃癌细胞的增殖(P＜0．01)．经0,10,20,50,100,200μmol/L Res处理24 h后,细胞凋亡率分别为1．17%,3．73%, 8．75%,23．35%,63．97%和70．10%,晚期凋亡和坏死的细胞比例分别为5．66%,7．22%,9．86%, 6．91%,12．51%及11．98%,各组之间差异不大．电镜下见到典型的细胞凋亡的形态学改变．100μmol/L Res处理后6 h caspase-3活性增加,18 h达高峰,24 h后下降,48 h仍高于正常(0．135±0．036 vs 0．069±0．008,P＜0．05)．经20,50,100μmol/L Res处理18 h后的细胞的caspase-3活性分别为0．169±0．017．0．247±0．028,0．353±0．044(P＜0．01),较对照组(0．063±0．006)分别增加2．68倍、3．92倍和5．61倍．结论:Res通过诱导caspase-3活性增加以时间依赖和浓度依赖的方式抑制SGC7901细胞增殖,诱导细胞凋亡．

TGF-β3与熊果酸抑制人结肠癌细胞增殖作用的研究

目的研究TGF-β3与熊果酸(ursolic acid,UA)抑制结肠癌细胞增殖作用的关系及可能的分子机制。方法采用结晶紫染色法和流式细胞术分析不同浓度UA对HCT116细胞增殖的作用。利用Western blot和流式细胞术等方法分析UA对HCT116细胞凋亡的影响。通过RT-PCR和(或)Western blot实验分析UA在HCT116细胞中对TGF-β3、Smad2/3和β-catenin表达及磷酸化水平的影响。采用TGF-β3重组腺病毒和特异性抑制剂以及萤光素酶报告质粒分析TGF-β3介导UA抑制结肠癌细胞增殖的可能分子机制。结果UA能明显抑制HCT116细胞增殖,诱导G1期阻滞,并促进其凋亡。UA能明显降低TGF-β3的mRNA和蛋白表达水平;UA对Smad2/3的总蛋白水平无明显影响,但能明显降低Smad2/3的磷酸化水平;外源性过表达TGF-β3可部分逆转UA对HCT116细胞增殖的抑制作用,TGF-β3特异性抑制剂则增强UA对HCT116细胞增殖的抑制作用;UA降低β-catenin蛋白水平,并明显抑制Wnt/β-catenin信号转导;外源性过表达TGF-β3促进β-catenin蛋白表达,并部分逆转UA对β-catenin蛋白表达的抑制效应;TGF-β3特异性抑制剂增强UA对β-catenin蛋白表达的抑制作用。结论 UA能抑制结肠癌细胞HCT116增殖并诱导凋亡,其作用可能是通过下调TGF-β3表达,进而抑制Wnt/β-catenin信号转导。

体外RNA干扰抑制RegⅣ基因表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:拟探讨RegⅣ基因在胃癌细胞中的表达及干扰该基因对胃癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:应用实时定量PCR方法检测九株胃癌细胞株中RegⅣ基因的mRNA表达.针对RegⅣ基因设计三条小干扰RNA片段(siRNA1、siRNA2、siRNA3),瞬时转染高表达胃癌细胞株,实时定量PCR方法检测转染后RegⅣ基因的mRNA的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:以永生化正常胃黏膜细胞株GES-1作为参照,除MKN-45和SNU-1胃癌细胞株外,其余胃癌细胞株中RegⅣ表达水平均升高5倍以上,尤以SNU-16细胞株明显,其RegⅣ的表达水平高出GES-1细胞数千倍,遂选用SNU-16细胞进行RNA干扰.合成的三对siRNA对RegⅣ基因表达均有明显抑制作用,抑制率分别为79.3%、77.4%和60.4%.选用siRNA1干扰SNU-16细胞株后96h和120h,其细胞增殖率受到明显抑制(P=0.0057,0.0173).流式细胞仪检测显示72h细胞凋亡率明显增加(P=0.0231).结论:干扰RegⅣ基因具有抑制胃癌细胞增殖,促进凋亡的作用,RegⅣ基因可能成为胃癌基因靶向治疗的分子靶点.

类圆环病毒因子P1感染对猪外周血T淋巴细胞含量和增殖活性的影响

探讨类猪圆环病毒因子P1感染对猪细胞免疫功能的影响。将12头30日龄广西巴马小型猪随机分成试验组和对照组,每组6头。在猪感染P1后第3,8,17,24,31和40天,采用血常规和单色流式细胞术分析猪外周血T淋巴细胞的含量,通过WST法对其增殖活性进行检测。P1感染组的T淋巴细胞数量(绝对数和相对数)整体趋势低于对照组,而两组的T淋巴细胞增殖活性没有显著差别。P1感染对机体的细胞免疫功能有一定程度的影响。

神经细胞粘附分子对人恶性脑胶质瘤细胞株体内外增殖能力的影响

目的 :探讨神经细胞粘附分子 ( neural cell adhesion molecule,NCAM)对人脑胶质瘤细胞株 U2 51 MG增殖行为的影响。 方法 :将外源性 NCAM-1 40质粒转入 U2 51 MG细胞株 ,采用流式细胞仪及培养细胞增殖动力学方法比较转染前后细胞的细胞周期、增殖细胞核抗原 ( proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达及群体增殖速度 ;在裸鼠颅内原位接种上述细胞 ,观察成瘤率及肿瘤大小。 结果 :NCAM转染后细胞的体外增殖速度减慢 ( P<0 .0 5) ,S期细胞减少 ,PCNA表达率下降 ;裸鼠颅内接种的成瘤率显著降低 ( P<0 .0 1 ) ,肿瘤体积明显较小。 结论 :转染外源性 NCAM在体外、体内均可抑制人脑胶质瘤细胞株 U2 51 MG的增殖。

小剂量顺铂联合5-氟尿嘧啶对胃癌细胞增殖抑制及其机制的研究

目的:探讨小剂量顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)在体外联合用药对SGC-7901胃癌细胞及胃癌耐药细胞株SGC-7901/5-FU细胞增殖及其相关基因表达的影响。方法:采用MTT法观察在小剂量DDP、5-FU联合用药前后SGC-7901与SGC-7901/5-FU存活率的差异,同时应用免疫组化方法检测SGC-7901与SGC-7901/5-FU中p53、Fas/FasL基因的表达情况。结果:DDP与5-FU均有抑制肿瘤细胞增殖作用,且有浓度相关性;尤以DDP联合5-FU后对细胞存活率的影响明显高于两种药物的单独使用(P<0.01),小剂量DDP联合应用5-FU时效果最明显,但对SGC-7901/5-FU细胞增殖抑制作用明显小于SHC-7901;小剂量联合DDP+5-FU,p53、FasL基因表达的阳性率显著高于单纯的5-FU组或DDP组(P<0.01),而Fas基因表达则相反。结论:小剂量DDP联合5-FU对胃癌细胞具有明显抑制作用,对耐药株也有一定抑制作用,但效果弱于非耐药株。p53、Fas/FasL基因对胃癌细胞的增殖活性有重要作用,在小剂量DDP联合5-FU比各单药应用组基因的改变更明显(P<0.01)。

富血小板血浆和浓缩生长因子对人牙周膜细胞增殖和成骨分化影响的研究

目的研究富血小板血浆(PRP)和浓缩生长因子(CGF)对人牙周膜细胞(hPDLCs)增殖及成骨分化的影响。方法分离、培养并鉴定hPDLCs;制备人全血、PRP和CGF,分别进行血小板计数;分别将全血(对照组)、PRP(PRP组)和CGF(CGF组)与hPDLCs共培养,CCK-8法检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力;使用1%、5%、10%的PRP和CGF分别对hPDLCs处理24、48、72 h,进行成骨诱导,Western blot法检测成骨相关转录因子Runx2、Osx、Dlx5和Msx2的相对表达量。结果PRP、CGF可促进hPDLCs的增殖和迁移(P<0.05),提高促进成骨相关因子Runx2、Osx、Dlx5的表达并降低抑制成骨因子Msx2的表达(P<0.05)。结论PRP、CGF能促进hPDLCs的增殖和迁移,并促进成骨分化相关转录因子的表达。