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Effects of Quercetin Extracted from Flower Buds of Sophora japonica cv.jinhuai on Proliferation and Apoptosis of Human Breast Cancer MCF-7 Cells
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作者 Jing LI Jingyue ZHU +4 位作者 Yanxi LAI Hao LIU Yizhang WANG Zongyou CHEN Kaimei ZHU 《Medicinal Plant》 2024年第4期46-50,58,共6页
[Objectives]To investigate the effects of quercetin extracted from flower buds of Sophora japonica cv.jinhuai on the proliferation,apoptosis and migration of human breast cancer MCF-7 cells.[Methods]MTT assay,inverted... [Objectives]To investigate the effects of quercetin extracted from flower buds of Sophora japonica cv.jinhuai on the proliferation,apoptosis and migration of human breast cancer MCF-7 cells.[Methods]MTT assay,inverted microscope observation,hoechst33342 staining,flow cytometry(FCM)and wound healing assay were adopted to investigate the proliferation,morphological changes,apoptosis level and cell migration ability of human breast cancer MCF-7 cells,respectively.[Results]The morphological changes of cells in the treatment groups included gradually decreased number,reduced volume,vague cell contour,loose intercellular connection,uneven cytoplasm distribution and increased cell debris.With the increase of drug concentration,quercetin significantly inhibited the proliferation of human breast cancer MCF-7 cells(P<0.05).The number of apoptotic bodies increased gradually.When the concentration reached 100μmol/L,a large number of nuclear fragments appeared,and the level of apoptosis was statistically different(P<0.05).The mobility and migration ability of cells showed a decreasing trend,and the differences were statistically significant(P<0.05).[Conclusions]This study can provide experimental basis for clinical application of quercetin against breast cancer. 展开更多
关键词 QUERCETIN Apoptosis Cell migration Cell proliferation mtt assay Anti-breast cancer
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Pharmacological Investigation on the Qi-Invigorating Action of Schisandrin B: Effects on Mitochondrial ATP Generation in Multiple Tissues and Innate/Adaptive Immunity in Mice
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作者 Hoi Yan Leung Suen Chit Sze Kam Ming Ko 《Chinese Medicine》 CAS 2024年第2期15-26,共12页
Schisandrae Fructus, containing schisandrin B (Sch B) as its main active component, is recognized in traditional Chinese medicine (TCM) for its Qi-invigorating properties in the five visceral organs. Our laboratory ha... Schisandrae Fructus, containing schisandrin B (Sch B) as its main active component, is recognized in traditional Chinese medicine (TCM) for its Qi-invigorating properties in the five visceral organs. Our laboratory has shown that the Qi-invigorating action of Chinese tonifying herbs is linked to increased mitochondrial ATP generation and an enhancement in mitochondrial glutathione redox status. To explore whether Sch B can exert Qi-invigorating actions across various tissues, we investigated the effects of Sch B treatment on mitochondrial ATP generation and glutathione redox status in multiple mouse tissues ex vivo. In line with TCM theory, which posits that Zheng Qi generation relies on the Qi function of the visceral organs, we also examined Sch B’s impact on natural killer cell activity and antigen-induced splenocyte proliferation, both serving as indirect measures of Zheng Qi. Our findings revealed that Sch B treatment consistently enhanced mitochondrial ATP generation and improved mitochondrial glutathione redox status in mouse tissues. This boost in mitochondrial function was associated with stimulated innate and adaptive immune responses, marked by increased natural killer cell activity and antigen-induced T/B cell proliferation, potentially through the increased generation of Zheng Qi. 展开更多
关键词 Zheng Qi Schisandrin B mitochondria ATP Generation Glutathione Redox Innate Immunity Adaptive Immunity Natural Killer Cell Activity Splenocyte proliferation
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CCK-8法与MTT法检测人前列腺癌PC3细胞活性的比较研究 被引量:32
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作者 万文婷 李宁 +1 位作者 刘静 金林红 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期3046-3048,共3页
目的探讨CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。方法以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,采用CCK-8和MTT法检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞增殖的影响。结果 CCK-8法的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量... 目的探讨CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。方法以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,采用CCK-8和MTT法检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞增殖的影响。结果 CCK-8法的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量范围为8×102~1×105个。结论 CCK-8法较MTT法检测的灵敏度高,准确性好,是一种优于MTT法的检测细胞增殖活性的方法。 展开更多
关键词 CCK-8法 mtt 检测时间 人前列腺癌 PC3细胞增殖 细胞增殖活性 比较研究 Cell proliferation Experiment Study 抗肿瘤药物 研究对象 数量范围 实验条件 灵敏度高 检测波长 方法 准确性 阿霉素 试剂
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Plating densities, alpha-difluoromethylornithine effects and time dependence on the proliferation of IEC-6 cells
4
作者 张子理 陈蔚文 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第4期38-40,148,共4页
To characterize the role of plating densities and alpha difluoromethylornithine (DFMO) on the proliferation of IEC 6 cells in vitro Methods IEC 6 cells were seeded in 96 well microplates at various densitie... To characterize the role of plating densities and alpha difluoromethylornithine (DFMO) on the proliferation of IEC 6 cells in vitro Methods IEC 6 cells were seeded in 96 well microplates at various densities in the pre sence or absence of DFMO Cells were counted and their proliferative capabilit y was monitored Days 1 to 7 with MTT assay at an optical density of 570?nm Results There was a positive relationship between cell number and OD value ( r =0 954 , P 【0 01) Higher plating densities (】0 5×10 4 cells/well) inhibited the growth of cells on Day 2 When the density reaches 4×10 4 cells/well, the O D value increased gradually and reached a peak on Day 5 After that, the OD va lue began to fall The growth of IEC 6 cells was limited at a low density (0 2×10 4 cells/well) on Day 4 DFMO caused a complete inhibition of proliferati on of IEC 6 cells on Days 1 to 3 Conclusion Proliferation of IEC 6 cells is related to plating density and incubation time It is inhibited by DFMO, but is reversible when the incubation time is prolon ged 展开更多
关键词 IEC 6 cell line · proliferation · mtt assay · alpha difluoromethylornithine
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Catalpa bignonioides extract improves exercise performance through regulation of growth and metabolism in skeletal muscles
5
作者 Hoibin Jeong Dong-joo Lee +11 位作者 Sung-Pil Kwon SeonJu Park Song-Rae Kim Seung Hyun Kim Jae-Il Park Deug-chan Lee Kyung-Min Choi WonWoo Lee Ji-Won Park Bohyun Yun Su-Hyeon Cho Kil-Nam Kim 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2024年第2期47-54,共8页
Objective:To evaluate the effects of Catalpa bignonioides fruit extract on the promotion of muscle growth and muscular capacity in vitro and in vivo.Methods:Cell viability was measured using the 3-(4,5-dimethylthiazol... Objective:To evaluate the effects of Catalpa bignonioides fruit extract on the promotion of muscle growth and muscular capacity in vitro and in vivo.Methods:Cell viability was measured using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay.Cell proliferation was assessed using a 5-bromo-2’-deoxyuridine(BrdU)assay kit.Western blot analysis was performed to determine the protein expressions of related factors.The effects of Catalpa bignonioides extract were investigated in mice using the treadmill exhaustion test and whole-limb grip strength assay.Chemical composition analysis was performed using high-performance liquid chromatography(HPLC).Results:Catalpa bignonioides extract increased the proliferation of C2C12 mouse myoblasts by activating the Akt/mTOR signaling pathway.It also induced metabolic changes,increasing the number of mitochondria and glucose metabolism by phosphorylating adenosine monophosphate-activated protein kinase.In an in vivo study,the extract-treated mice showed improved motor abilities,such as muscular endurance and grip strength.Additionally,HPLC analysis showed that vanillic acid may be the main component of the Catalpa bignonioides extract that enhanced muscle strength.Conclusions:Catalpa bignonioides improves exercise performance through regulation of growth and metabolism in skeletal muscles,suggesting its potential as an effective natural agent for improving muscular strength. 展开更多
关键词 Catalpa bignonioides Skeletal muscle Cell proliferation mitochondria Energy metabolism C2C12
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鸭淋巴细胞转化试验(MTT法)最佳条件的研究 被引量:21
6
作者 郭松林 谌南辉 易道生 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2001年第1期126-129,共4页
通过对培养温度、小牛血清及刀豆蛋白A(ConA)的浓度以及培养时间 4个参数的研究 ,确定了鸭淋巴细胞转化试验 (MTT法 )的最优培养条件。结果表明 ,采用 3 9.0℃、含 1 0 %小牛血清和 5μg/mLConA的RPMI1 64 0培养 66h可获得最大的OD570n... 通过对培养温度、小牛血清及刀豆蛋白A(ConA)的浓度以及培养时间 4个参数的研究 ,确定了鸭淋巴细胞转化试验 (MTT法 )的最优培养条件。结果表明 ,采用 3 9.0℃、含 1 0 %小牛血清和 5μg/mLConA的RPMI1 64 0培养 66h可获得最大的OD570nm光吸值。 展开更多
关键词 淋巴细胞转化试验 mtt CONA 培养条件 培养温度 培养时间 小牛血清浓度 细胞免疫
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MTT比色分析法在贴壁生长细胞药物敏感性测定中的应用 被引量:13
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作者 张金红 耿朝晖 +2 位作者 段江燕 陈家童 黄建英 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第4期109-112,共4页
用MTT法(噻唑蓝比色分析法)测定了几种小檗胺类化合物对三种贴壁生长细胞(HeLa、Bowes、MDBK)生长增殖的影响.结果显示:MTT分析法比传统的活细胞计数法、单细胞克隆法及3H-TdR掺入法测定样品多、省时、... 用MTT法(噻唑蓝比色分析法)测定了几种小檗胺类化合物对三种贴壁生长细胞(HeLa、Bowes、MDBK)生长增殖的影响.结果显示:MTT分析法比传统的活细胞计数法、单细胞克隆法及3H-TdR掺入法测定样品多、省时、省试剂、精确度高、重复性好及没有同位素污染等优点,是肿瘤药物研究中较理想的检测方法. 展开更多
关键词 小檗胺 抗肿瘤药物 测定 噻唑蓝比色分析
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MTT、MTS、WST-1在细胞增殖检测中最佳实验条件的研究 被引量:35
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作者 李红艳 夏启胜 +4 位作者 徐梅 房青 徐波 陈志华 向青 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期824-826,共3页
目的:探讨MTT、MTS、WST-1三种四唑盐在细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法:取对数生长期的小鼠黑色素瘤B16细胞,用10%胎牛血清DMEM培养液制成不同浓度的细胞悬液加入96孔培养板中培养24h,分别加入三种试剂后在450nm、492nm和630nm波... 目的:探讨MTT、MTS、WST-1三种四唑盐在细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法:取对数生长期的小鼠黑色素瘤B16细胞,用10%胎牛血清DMEM培养液制成不同浓度的细胞悬液加入96孔培养板中培养24h,分别加入三种试剂后在450nm、492nm和630nm波长处测定OD值,根据不同波长所测OD值的大小确定三种试剂的最佳实验波长。根据细胞浓度与OD值关系曲线确定三种试剂各自的最适细胞浓度。取最适浓度的B16细胞分别加入三种试剂在0.5h、1h、2h和4h四个不同时间点测定吸收值,根据OD值确定最佳的检测时间。结果:MTT、MTS法的最佳波长为492nm,WST-1法为450nm。MTT的最适细胞接种浓度为1.6×103—2.56×104/mL,MTS的最适细胞接种浓度为5×10—6.4×103/mL,WST-1的最适细胞接种浓度为2.5×10—1.6×103/mL。三种方法的最佳测定时间均为4h。结论:MTT、MTS、WST-1分别适用于不同条件下检测细胞的存活与增殖,可为抗病毒及抗癌药物的筛选提供实验依据。 展开更多
关键词 四甲基偶氮唑盐法 内盐法 四唑单钠盐法 细胞增殖
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测定细胞存活和增殖的MTT方法的建立 被引量:201
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作者 郑永唐 贲昆龙 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期266-269,共4页
MTT方法具有简便,灵敏,稳定可靠,不需要同位素等优点。为了摸索测定细胞存活和增殖的MTT方法的各种最适条件,我们以Raji细胞为对象,比较了十二种不同的MTT甲(月替)溶解缓冲液。实验结果表明,20%SDS-50%DMF效果最好,溶解力强,溶解甲(月... MTT方法具有简便,灵敏,稳定可靠,不需要同位素等优点。为了摸索测定细胞存活和增殖的MTT方法的各种最适条件,我们以Raji细胞为对象,比较了十二种不同的MTT甲(月替)溶解缓冲液。实验结果表明,20%SDS-50%DMF效果最好,溶解力强,溶解甲(月替)所需时间短,背景低,OD值高,不会引起培养基中小牛血清的絮状沉淀。其溶解的甲(月替)产物吸收峰在550—600nm之间。测定细胞范围为每孔500—400 000,这一范围能满足生物学和医学研究中多种测定的需要。 展开更多
关键词 mtt测定 甲Zan 细胞活性 细胞增殖
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猪外周血T淋巴细胞增殖反应MTT检测方法的建立 被引量:11
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作者 赵世云 赵新新 +2 位作者 苏华荔 刘贤勇 索勋 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第12期35-38,共4页
T细胞增殖反应是宿主T细胞识别病原的结果,也是宿主细胞免疫应答的重要指标之一。为了便于检测猪群在病原感染或者疫苗免疫过程中产生的细胞免疫应答,本研究应用MTT法建立了体外检测猪外周血T细胞增殖反应的研究方法。通过密度梯度离心... T细胞增殖反应是宿主T细胞识别病原的结果,也是宿主细胞免疫应答的重要指标之一。为了便于检测猪群在病原感染或者疫苗免疫过程中产生的细胞免疫应答,本研究应用MTT法建立了体外检测猪外周血T细胞增殖反应的研究方法。通过密度梯度离心法从外周血分离得到外周血单个核细胞(PBMC),然后利用单核细胞和淋巴细胞不同的生长特性(贴壁与否),弃掉贴壁的单核细胞,获得外周血淋巴细胞(PBL)。外周血淋巴细胞的流式分析结果显示,分离获得的PBL中T细胞所占比例达到了80%以上。应用MTT法分析了非特异性刺激物刀豆蛋白A(ConA)的浓度和细胞培养密度对T细胞增殖的影响。结果显示,ConA的工作浓度为5μg/mL、细胞培养密度为2×106/mL时T细胞的增殖反应最强烈。本研究所建立的猪外周血T细胞增殖反应检测法可以为研究猪针对病原或疫苗的细胞免疫反应提供参考。 展开更多
关键词 猪T淋巴细胞 增殖反应 流式细胞术 刀豆蛋白A mtt
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吡格列酮治疗β1肾上腺素能受体自身抗体诱导的大鼠室性心律失常的作用和电生理机制研究
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作者 喜林强 孙华鑫 +9 位作者 商鲁翔 王倩辉 宋洁 杨娜 张兴 迪拉热·太外库力 曼则热姆·热杰普 张玲 汤宝鹏 周贤惠 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2024年第7期716-724,共9页
目的:探讨吡格列酮对β1肾上腺素能受体自身抗体(β1AAb)诱导的大鼠室性心律失常治疗作用及电生理机制。方法:将48只SD大鼠按随机数字表法等分为四组:对照组(佐剂注射)、β1AAb组[β1肾上腺素能受体细胞外第二环功能表位肽段(β1AR-ECL... 目的:探讨吡格列酮对β1肾上腺素能受体自身抗体(β1AAb)诱导的大鼠室性心律失常治疗作用及电生理机制。方法:将48只SD大鼠按随机数字表法等分为四组:对照组(佐剂注射)、β1AAb组[β1肾上腺素能受体细胞外第二环功能表位肽段(β1AR-ECLⅡ)配以佐剂背部多点注射进行主动免疫,2 mg/(kg·次)]、吡格列酮组[与β1AAb组同等主动免疫8周后,吡格列酮灌胃2周,4 mg/(kg·d)]、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ特异性抑制剂GW9662组[与β1AAb组同等主动免疫8周后吡格列酮灌胃+GW9662腹腔注射2周,其中吡格列酮予以4 mg/(kg·d),GW9662予以1 mg/(kg·d)]。每2周Powerlab多通道生理仪记录心电图,取血。基线和第10周记录超声心动图,10周后进行心电生理、组织病理、免疫组化染色及电镜检查。结果:相较于对照组,β1AAb组室性心律失常诱发率较高、心室有效不应期(VERP)缩短、激动-恢复间期(ARI)延长;左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)低;葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和肉碱棕榈酰转移酶1a(CPT1a)阳性染色面积占比较低;线粒体形态异常及网络损伤明显,P均<0.05。而吡格列酮组较β1AAb组,室性心律失常诱发率降低、VERP延长、ARI缩短;LVEF和LVFS恢复;GLUT1和CPT1a阳性染色面积占比增加;线粒体形态异常及网络损伤改善,P均<0.05。GW9662组较吡格列酮组室性心律失常诱发率较高、VERP缩短、ARI延长;LVEF和LVFS较低;GLUT1和CPT1a阳性染色面积占比低;线粒体形态异常及网络损伤未恢复,P均<0.05。结论:吡格列酮可降低β1AAb诱导的室性心律失常,改善心室电传导和激动恢复时间异质性;并可在组织病理水平缓解β1AAb所致心室重塑,并伴随心室肌糖脂转运通道蛋白的上调和受损线粒体网络的修复。 展开更多
关键词 吡格列酮 过氧化物酶体增殖物激活受体 室性心律失常 β1肾上腺素能受体自身抗体 线粒体
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Bmi-1基因杂合子缺失对小鼠脑老化的影响
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作者 何晓鑫 高俊英 +1 位作者 郭吉超 肖明 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第11期1473-1482,1516,共11页
目的:Bmi-1(B-cell specific moloney leukemia virus insertion site 1)基因在干细胞增殖和分化中的作用已有大量文献报道,但其在老年小鼠脑中发挥的作用尚不清楚。本研究旨在探讨Bmi-1在脑衰老中的病理生理作用。方法:选取17月龄的Bm... 目的:Bmi-1(B-cell specific moloney leukemia virus insertion site 1)基因在干细胞增殖和分化中的作用已有大量文献报道,但其在老年小鼠脑中发挥的作用尚不清楚。本研究旨在探讨Bmi-1在脑衰老中的病理生理作用。方法:选取17月龄的Bmi-1杂合子(Bmi-1^(+/-))小鼠和野生型(wild-type,WT)小鼠,采用行为学检测、免疫组化及Masson染色等技术,比较Bmi-1^(+/-)小鼠和WT小鼠的整体健康状况及长期记忆能力;通过HE染色、电子显微镜及Western blot等方法,研究Bmi-1基因半剂量敲除对小鼠脑衰老进程的潜在影响。结果:Bmi-1^(+/-)小鼠较同窝WT小鼠出现了长期空间记忆功能的减弱(P<0.05),伴随着海马齿状回(dentate gyrus,DG)区域特异性的神经细胞发生减少(P<0.05),神经元数目降低(P<0.05)和灰质区体积缩小(P<0.05)。进一步研究发现,与WT小鼠相比,Bmi-1^(+/-)小鼠DG区神经元线粒体膨大、肿胀,线粒体嵴减少的比例增加(P<0.05),且DG区神经元细胞质中脂褐素的数量明显增加(P<0.05);此外,Bmi-1^(+/-)小鼠DG区神经元线粒体能量代谢相关蛋白泛醌氧化还原酶核心亚基V2[NADH dehydrogenase(ubiquinone)flavoprotein 2,NDUFV2]和泛醌氧化还原酶核心亚基S3[NADH dehydrogenase(ubiqui-none)ferrithionein 3,NDUFS3]的表达量均下调(P<0.05),三羧酸循环的重要催化酶二氢硫辛酰琥珀酰转移酶蛋白(dihydroli-poyl S-succinyltransferase,DLST)也显著下调(P<0.01);同时Bmi-1调控的细胞周期因子中,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27和肿瘤蛋白p53显著上调(P<0.05)。结论:Bmi-1基因的半剂量缺失抑制了老龄鼠脑内海马区新生神经元的产生,导致海马DG区体积的特异性缩小,长期记忆功能障碍,其机制可能与老化相关蛋白p27、p53表达异常和神经元线粒体变性有关。 展开更多
关键词 BMI-1 脑衰老 线粒体 细胞增殖 氧化应激
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用紫外与可见光分光分析仪测定PASMC增殖的MTT比色法 被引量:14
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作者 廖国宁 雷景迈 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第4期304-305,共2页
为使 MTT比色法得到更广泛的应用 ,对紫外与可见光分光分析仪测定细胞增殖 MTT比色法的实验条件进行了探索。结果发现 :以 5 mg/ m l MTT在 0 .1× 10 4~ 2 .4× 10 4细胞范围内进行检测 ,可获得较好的线性检测结果 (γ=0 .987... 为使 MTT比色法得到更广泛的应用 ,对紫外与可见光分光分析仪测定细胞增殖 MTT比色法的实验条件进行了探索。结果发现 :以 5 mg/ m l MTT在 0 .1× 10 4~ 2 .4× 10 4细胞范围内进行检测 ,可获得较好的线性检测结果 (γ=0 .9872 )。与酶标仪直接测定比较 ,具有灵敏度高、数据准确、检测范围广 ,值得推广应用。 展开更多
关键词 mtt比色法 细胞增殖 肝动脉平滑肌细胞
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MTT比色法测定促肝细胞生长物质对肝细胞生长的刺激活性 被引量:7
14
作者 雷殿良 马霄 +3 位作者 顾磊 赵建荣 董联珠 俞永平 《微生物学免疫学进展》 1999年第3期16-20,共5页
本实验建立了用简便的MTT比色法对促肝细胞生长物质的促肝细胞增殖作用的测定方法,确定了实验的最适条件。与传统的3HTdR掺入法进行比较的结果显示,MTT比色法与3HTdR掺入法测定结果基本相符,灵敏度相近,但消除... 本实验建立了用简便的MTT比色法对促肝细胞生长物质的促肝细胞增殖作用的测定方法,确定了实验的最适条件。与传统的3HTdR掺入法进行比较的结果显示,MTT比色法与3HTdR掺入法测定结果基本相符,灵敏度相近,但消除了同位素的污染,是一个测定促肝细胞生长物质刺激肝细胞增殖活性的简便方法。 展开更多
关键词 mtt 肝细胞生长因子 促肝细胞增殖 生物活性
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CCK-8法与MTT法检测兔成纤维细胞活性的比较研究 被引量:21
15
作者 刘爱旗 夏璐 《中国医学创新》 CAS 2013年第2期12-13,共2页
目的:探讨CCK-8法和MTT法检测兔成纤维细胞活性的最佳实验条件,并比较其优略。方法:以传至第3代的兔成纤维细胞为研究对象,分别用CCK-8法和MTT法检测兔成纤维细胞的增殖活性。结果:MTT法的最佳检测波长490nm,CCK-8法最佳检测波长为450nm... 目的:探讨CCK-8法和MTT法检测兔成纤维细胞活性的最佳实验条件,并比较其优略。方法:以传至第3代的兔成纤维细胞为研究对象,分别用CCK-8法和MTT法检测兔成纤维细胞的增殖活性。结果:MTT法的最佳检测波长490nm,CCK-8法最佳检测波长为450nm,两法的最佳检测时间均为加入试剂后4h。适宜检测的细胞数量范围为2×103/ml~1×105/ml个。结论:CCK-8法较MTT法检测的灵敏度高,准确性好,是一种优于MTT法的检测兔成纤维细胞增殖活性的方法。 展开更多
关键词 CCK-8 mtt 兔成纤维细胞 细胞增殖
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MTT法检测大鼠外周血淋巴细胞增殖反应探讨与应用 被引量:8
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作者 梁宏伟 朱雯宇 +3 位作者 冯波 王建舫 张涛 穆祥 《中国农学通报》 2016年第26期21-26,共6页
为了更精准简捷地评价机体的细胞免疫状态,采用MTT比色分析法检测大鼠外周血淋巴细胞的增殖能力,并对试验的最适条件进行了探讨,然后将该法应用到Transwell共培养体系中以评价H9N2AIV感染内皮细胞后对跨内皮淋巴细胞增殖能力的影响。结... 为了更精准简捷地评价机体的细胞免疫状态,采用MTT比色分析法检测大鼠外周血淋巴细胞的增殖能力,并对试验的最适条件进行了探讨,然后将该法应用到Transwell共培养体系中以评价H9N2AIV感染内皮细胞后对跨内皮淋巴细胞增殖能力的影响。结果表明:在96孔细胞培养板中接种密度为1.25×106个/m L的淋巴细胞于含10%FBS的RPMI 1640培养基中培养的最适时间为48 h。感染病毒后,跨内皮淋巴细胞的增殖明显受抑制;内皮完整状态下,淋巴细胞和病毒共孵育后,活病毒的量降低,而当内皮不存在或被病毒感染后,这一现象消失。结果证明作为机体细胞免疫功能评价指标之一的淋巴细胞增殖能力可采用改良后的MTT法检测。 展开更多
关键词 mtt 淋巴细胞增殖 细胞免疫
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何氏养巢方通过ERβ/PCG1α/TFAM通路提高颗粒细胞线粒体生物发生以改善早发性卵巢功能不全
17
作者 缪晨韵 赵颖 +5 位作者 陈赟 王如烨 任宁 刘青 窦晓兵 章勤 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期358-367,共10页
目的:探究何氏养巢方(简称“养巢方”)提高卵巢颗粒细胞线粒体功能的机制。方法:取36只6~8周龄C57BL/6J雌鼠随机分为空白对照组,模型对照组,养巢方小、中、大剂量组和阳性对照组。均予环磷酰胺90 mg/kg单次腹腔注射以建立原发性卵巢功... 目的:探究何氏养巢方(简称“养巢方”)提高卵巢颗粒细胞线粒体功能的机制。方法:取36只6~8周龄C57BL/6J雌鼠随机分为空白对照组,模型对照组,养巢方小、中、大剂量组和阳性对照组。均予环磷酰胺90 mg/kg单次腹腔注射以建立原发性卵巢功能不全(POI)模型后,分组灌胃21 d后处死。另取6只6~8周龄C57BL/6J雌鼠造模后获取原代颗粒细胞,分为养巢方组、PHTPP(一种雌激素受体阻滞剂)组、养巢方+PHTPP组,分别予养巢方含药血清或PHTPP或同时给予两者干预培养24 h。分别采用苏木精-伊红(HE)染色观察卵巢组织病理学变化;荧光素酶法检测颗粒细胞腺苷三磷酸(ATP)水平;定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测线粒体DNA(mtDNA)的拷贝数;透射电镜观察线粒体结构变化;蛋白质印迹法检测雌激素受体β(ERβ)、过氧化物异酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)、线粒体转录因子A(TFAM)、超氧化物歧化酶2(SOD2)蛋白表达;qRT-PCR检测Erβ、Pgc1α、Tfam、Sod2 mRNA表达。结果:模型对照组卵巢组织次级及三级卵泡较少,养巢方各剂量组及阳性对照组次级及三级卵泡较多。与空白对照组比较,模型对照组颗粒细胞ATP和mtDNA水平均下降(均P<0.01),线粒体嵴消失或空泡化结构异常比例增加,ERβ、PGC1α、TFAM、SOD2蛋白及其mRNA表达均下降(均P<0.01)。养巢方中、大剂量组及阳性对照组颗粒细胞内ATP生成增多、mtDNA拷贝数增加(P<0.05或P<0.01);颗粒细胞内结构异常线粒体减少,ERβ、PGC1α、TFAM、SOD2蛋白及其mRNA表达均增加(P<0.05或P<0.01)。体外实验中,与PHTPP组比较,养巢方+PHTPP组线粒体结构正常比例更高,线粒体ATP含量增加(P<0.05或P<0.01),mtDNA拷贝数增加(P<0.05或P<0.01);ERβ、PGC1α、TFAM、SOD2蛋白及其mRNA表达均上升(P<0.05或P<0.01)。结论:养巢方可以通过ERβ/PGC1α/TFAM通路提高线粒体生物发生从而改善POI小鼠卵巢功能。 展开更多
关键词 早发性卵巢功能不全 何氏养巢方 线粒体 雌激素受体Β 过氧化物异酶体增殖激活受体共激活因子1α 线粒体转录因子A 小鼠
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MTT染色法计数阴道毛滴虫体外增殖密度的试验 被引量:2
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作者 张静 叶彬 +1 位作者 周潜涛 武卫华 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2007年第6期448-449,F0004,F0002,I0011,共5页
目的评价四氮唑蓝(5-’diphenyl tetrazolium bromide,MTT)染色法计数阴道毛滴虫增殖密度的可行性。方法在已接种了阴道毛滴虫的肝浸汤(含小牛血清)、RPMI-1640(含小牛血清)、RPMI-1640(无血清)培养基中加入MTT,与血球计数板法进行比较... 目的评价四氮唑蓝(5-’diphenyl tetrazolium bromide,MTT)染色法计数阴道毛滴虫增殖密度的可行性。方法在已接种了阴道毛滴虫的肝浸汤(含小牛血清)、RPMI-1640(含小牛血清)、RPMI-1640(无血清)培养基中加入MTT,与血球计数板法进行比较。结果加入MTT后4、244、8 h,上述3种培养基中大部分阴道毛滴虫虫体内部未见蓝色结晶体形成,有血清的培养液镜下观察视野不清晰。结论MTT法不宜用于计数体外培养阴道毛滴虫的增殖密度。 展开更多
关键词 mtt 阴道毛滴虫 增殖
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CCK-8法和MTT法检测人前列腺癌PC3细胞活性的最佳条件比较研究 被引量:26
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作者 李宁 万文婷 金林红 《贵州大学学报(自然科学版)》 2009年第3期18-20,24,共4页
以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,探讨了CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。CCK-8的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量范围为8×102-1×105个。在检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞的增殖影... 以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,探讨了CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。CCK-8的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量范围为8×102-1×105个。在检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞的增殖影响实验中,发现CCK-8法测得数据的线性相关性优于MTT法,并且数据偏差较MTT法小。实验结果表明CCK-8法较MTT法检测的灵敏度高,准确性好,是一种优于MTT法的检测细胞增殖活性的方法。 展开更多
关键词 CCK-8 mtt 前列腺癌 细胞增殖
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MTT法检测鸡外周血淋巴细胞增殖性反应的最佳条件探讨 被引量:39
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作者 杨发龙 岳华 +1 位作者 罗薇 杨晓燕 《西南民族学院学报(自然科学版)》 2002年第2期214-215,共2页
对鸡外周血淋巴细胞增殖反应MTT比色法的四个主要因素,即培养时间、ConA浓度、细胞浓度及培养液小牛血清等应用L16(45)四因素四水平正交试验设计,对最佳反应条件进行了研究.结果表明,影响增殖反应的主次顺序为ConA、细胞浓度、培养时间... 对鸡外周血淋巴细胞增殖反应MTT比色法的四个主要因素,即培养时间、ConA浓度、细胞浓度及培养液小牛血清等应用L16(45)四因素四水平正交试验设计,对最佳反应条件进行了研究.结果表明,影响增殖反应的主次顺序为ConA、细胞浓度、培养时间及血清浓度;最佳反应条件为:15μg/ml的ConA、1×107/ml细胞、10%小牛血清及48小时的培养时间. 展开更多
关键词 最佳条件 外周血淋巴细胞 增殖反应 mtt比色法 培养时间 免疫能力 ConA浓度 细胞浓度
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