微小隐孢子虫SA35与SA40蛋白的B细胞抗原表位预测

目的预测微小隐孢子虫SA35和SA40蛋白的B细胞表位。方法以单参数(亲水性、可及性、柔韧性及抗原性)预测为基础,通过二级结构预测初步筛选,并以ABCpred方案作为最终验证,预测微小隐孢子虫SA35和SA40蛋白的B细胞表位。结果SA35蛋白N端103～115和129～146和以及SA40蛋白的N端77～89、127～136、156～174和200～209区段为预测的B细胞表位。结论所得表位为这两种蛋白以后应用于合成肽检测、制备相应的抗体、发展高特异性和敏感性的诊断系统以及研制疫苗等提供了理论基础。

构建检测隐孢子虫特异性抗体的多重微粒子免疫检测法

目的建立一种检测微小隐孢子虫特异性抗体的微粒子免疫检测法(MIA)。方法以纯化的重组蛋白CP23、SA35和SA40为检测抗原,以牛血清白蛋白(BSA)为内参,偶联微粒子,并进行蛋白偶联效率验证。比较单一MIA法和多重MIA法的一致性,以及多重MIA法检测的板内和板间差异。结果纯化蛋白和BSA成功偶联到相应的微粒子上,建立了多重MIA法检测血清隐孢子虫抗体的最佳检测条件,且证实多重检测并不降低检测的敏感性和特异性。结论多重MIA法可以快速检测隐孢子虫感染后人体产生的多种特异性抗体,敏感性、特异性均较高,可成为人群大规模血清流行病学调查的有力工具之一。