Influence of Therapy on Some Important Final Products of Oxidation of Lipids, Proteins and Nucleic Acids in Patients with Parkinson’s Diseases

The major clinical disturbances in Parkinson’s disease (PD) are consequence of dopamine depletion in the neostriatum, due to degeneration of dopaminergic neurons. The aim of the present study was to determine whether oxidative stress (OS) occurs during the clinical course of Parkinson’s disease and to evaluate the influence of therapy on the levels of some important final products of oxidation of lipids, proteins and nucleic acids in PD patients with drug therapy. For this purpose, we investigated the levels of malondialdehid (MDA), protein carbonyl content (PCC) and 8-hydroxy-2’-deoxyguanosine quantity (8-OHdG) in PD patients with and without drug therapy. The observed changes in MDA levels, PCC and 8-OHdG quantity in blood of untreated PD patients, suggested impaired antioxidant status and presence of oxidative stress in Parkinson disease. After treatment with Madopar, the elevation in by-products significantly progresses. Our results demonstrate that administration of Madopar causes in greater degree oxidative stress than that induced by Parkinson disease, by itself.

蛋白质羰基含量与蛋白质氧化损伤

本文讨论了蛋白质羰基含量与蛋白质氧化损伤的关系及其在抗氧化领域中的应用,以便为进一步完善抗氧化保健食品功能检测方法提供理论依据。

重组人谷氧还蛋白1对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨重组人谷氧还蛋白1(rhGrx1)对小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法线栓法制备小鼠脑缺血/再灌注模型,病理形态学方法证实模型建立成功。小鼠尾静脉注射rhGrx1(5mg·kg-1和10mg·kg-1)后,观察脑组织中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)及蛋白质羰基含量的变化,Western blot检测小鼠脑组织中p38MAPK表达水平的变化。结果HE染色证实模型建立成功且提示rhGrx1可改善缺血/再灌注损伤所致的小鼠脑组织病理形态学变化;rhGrx1能增加小鼠脑组织LDH、SOD活性、降低蛋白质羰基的含量。与假手术组小鼠相比,缺血和再灌注时脑组织p38MAPK蛋白表达量明显增加,注射rhGrx1后p38MAPK蛋白表达被抑制。结论rh-Grx1对局灶性脑缺血/再灌注损伤小鼠有一定保护作用,其机制可能与抑制p38MAPK蛋白表达相关。

甲醛吸入致小鼠蛋白质氧化损伤作用的研究

为了探讨在气态甲醛中暴露后小鼠的脑、心和肝组织蛋白质的氧化损伤程度及其发生机制,用不同剂量的气态甲醛对小鼠进行连续动态染毒处理72h ,用2 ,4-二硝基苯肼比色法测定小鼠脑、心和肝组织蛋白质的羰基含量,用以判断蛋白质的氧化损伤程度.结果显示:吸入0. 68mg·m- 3甲醛后,小鼠的脑、心和肝蛋白质的羰基含量下降(P <0 0 1,P <0 . 0 1,P <0. 0 5 ) ;吸入3 0mg·m- 3甲醛后,小鼠的心和肝的蛋白质羰基含量均显著升高(P <0 . 0 1) ,而脑的蛋白质羰基含量与对照组相比无显著差异(P >0 . 0 5 ) .以上结果表明,小鼠蛋白质的氧化损伤与气态甲醛的浓度有关,气态甲醛在较低浓度时,不引起小鼠蛋白质的氧化损伤,而在中等浓度时对小鼠心和肝的蛋白质氧化损伤作用显著,而对脑的蛋白质没有明显损伤作用.

中式香肠中脂肪氧化对蛋白质氧化的影响

以中式香肠为研究对象,通过对加工、储藏过程中包装、温度、光照以及抗氧化剂的不同处理,建立中式香肠的脂肪氧化模型,结合对其蛋白质氧化的跟踪检测,分析了中式香肠中脂肪氧化与蛋白质氧化之间的相关性。结果表明:对于脂肪氧化的抑制作用,有效抑制了蛋白质氧化形成羰基类物质,且与脂肪氧化初级和次级产物均表现较好的相关性;脂肪氧化对于蛋白质游离硫醇基流失的促进作用是由脂肪氧化次级产物挥发性醛类物质引起的。

游离脂肪酸对肝脏氧化应激及胰岛素抵抗的影响

目的:研究游离脂肪酸(FFA)慢性升高对肝脏胰岛素抵抗的影响,探讨氧化应激在其中的作用.方法:给Wistar大鼠分别静脉输注脂肪乳加肝素(IH组)和单纯输注生理盐水(SAL组)48h,在输注的最后2h,清醒状态下行高胰岛素-正血糖钳夹试验,观察延时输注脂肪乳导致的高FFA对葡萄糖利用率(葡萄糖输注率,GIR)的影响,并取肝组织测定羰基蛋白、肝细胞膜和细胞质PKC-δ的含量.结果:在高胰岛素-正血糖钳夹状态,IH输注组与SAL组比较,血清FFA增加4.3倍(P<0.001),羰基蛋白增加3.2倍,GIR下降58.6%(均P<0.001);48h的IH输注使肝细胞膜的PKC-δ/胞质PKC-δ比值增加4.0倍(P<0.001).结论:FFA慢性升高导致了肝脏GIR下降,葡萄糖的利用障碍,肝脏的PKC-δ向细胞膜转位增加,说明在慢性高FFA导致的肝脏胰岛素抵抗中,氧化应激反应起了重要的作用.

二氧化硫衍生物对小鼠心、肝、肺蛋白质的氧化损伤作用

研究了二氧化硫(SO2)衍生物——亚硫酸钠和亚硫酸氢钠混合物(分子比为3∶1),对小鼠心、肝、肺中蛋白质的氧化损伤作用,探讨其分子作用机制.连续5d对动物腹腔注射SO2衍生物,每天注射剂量为0、0.025、0.100、0.400g·kg-1.用2,4-二硝基苯肼比色法测定不同器官组织中蛋白质羰基含量.结果表明,SO2衍生物染毒剂量为0.025、0.100和0.400g·kg-1时,小鼠心、肝、肺蛋白质羰基含量染毒组与对照组相比均呈现不同程度的增加,不同器官羰基含量增量大小的次序为:肝>肺>心;其染毒剂量与心、肝、肺蛋白质羰基含量之间存在明显的剂量效应关系(p<0.05),线性拟合确定系数分别为0.894、0.893和0.903.由此认为,SO2衍生物可引起小鼠心、肝、肺组织蛋白质的氧化损伤,以及不同组织器官的蛋白质氧化损伤程度不同.

硝基苯灌胃致小鼠蛋白质氧化损伤作用的研究

为了探讨硝基苯对小鼠多器官的蛋白质氧化损伤程度,采用不同剂量的硝基苯对小鼠进行灌胃染毒(每天1次,共30 d),用2,4二-硝基苯肼比色法测定小鼠组织蛋白质羰基含量,用以判断蛋白质的损伤程度.结果显示,各组织空白对照和油对照组间差异均不显著(p>0.05),随着染毒剂量的增加,肝脏、肾脏、脾脏和心脏的蛋白质羰基含量呈上升趋势,脑组织只在高剂量组表现明显升高趋势;低剂量组与油对照组相比,只有肝脏蛋白质羰基含量显著性升高(p<0.05);中、高剂量组与油对照组相比,各组织蛋白质羰基含量显著性升高(p<0.05).以上结果表明,低剂量硝基苯可以对细胞蛋白质产生氧化损伤作用,并且随着染毒剂量的增加,小鼠各组织蛋白质羰基含量呈上升趋势,蛋白质氧化损伤程度加重.

多壁碳纳米管对小鼠肝和肺细胞蛋白质氧化损伤作用研究

目的探索多壁碳纳米管对机体蛋白质的氧化损伤作用。方法将20只老鼠随机分成4组,3个染尘组,1个对照组,用腹腔注射法进行1次性染尘,3个染尘组分别注入0.1、0.2、0.4mg/ml的多壁碳纳米管(粒径20～40nm)颗粒悬浮液1ml。对照组注入等体积的生理盐水,染毒5天后测定肝脏和肺组织中的蛋白质羰基含量,比较不同浓度的多壁碳纳米管对肝和肺部蛋白质的氧化损伤作用。结果不同浓度的碳纳米管染尘组小鼠与对照组相比较,肝脏组织蛋白质羰基含量在0.2mg/ml和0.4mg/ml染毒条件下都有显著性差异(P<0.05)。肺组织羰基含量在0.4mg/ml染毒条件下有极显著差异(P<0.01)。在其他浓度条件下都没有统计学意义(P>0.05)。结论多壁碳纳米管对小鼠肝脏和肺部组织有一定的氧化损伤毒性作用。

关于几种蛋白氧化后羰基含量的对比研究

羰基含量的测定一直是反应蛋白质氧化程度的重要理化指标,近年来,蛋白中的羰基含量往往采用较简便的DNPH比色法进行检测,但在实际测定过程中存在着蛋白含量不好精确定量、不同种类蛋白紫外吸收波长不统一等问题。且以往研究均是针对单一蛋白的氧化程度进行,鲜有系统性的针对不同种类的蛋白质进行氧化程度与羰基含量相关性研究的报道。针对此问题分别对牛肌原纤维蛋白、牛血清白蛋白以及豌豆蛋白进行了一系列氧化实验及其羰基含量测定,并且在蛋白羰基含量测定方面优化了DNPH比色法,使其可操作性更强,数据稳定性更高。

SO_2致小鼠肝蛋白质氧化损伤和DNA-蛋白质交联作用

探讨了SO2对小鼠肝组织蛋白质的氧化损伤作用及其分子机制.结果表明,SO2可致雌、雄小鼠肝蛋白质羰基(PCO)含量升高,且呈浓度-效应关系.雌性小鼠肝PCO含量升高较雄性小鼠明显.SO2可致雌、雄小鼠肝细胞DNA-蛋白质交联(DPC)升高,且呈现浓度-效应关系,但这种升高仅在SO2浓度为28,56mg/m3时才具有显著意义.雌性小鼠肝细胞DPC升高较雄性小鼠明显.其分子机制可能是SO2吸入后,导致机体产生·OH和O2-·或直接抑制机体抗氧化系统酶的活性,使机体中过量的自由基堆积,继而对蛋白质和DNA产生损伤.

干旱及复水对小麦幼苗蛋白质损伤的影响

研究间断干旱和持续干旱及干旱后复水对小麦幼苗根长、叶长,含水量、水势和羰基含量的影响。结果表明:2种干旱方式均使小麦幼苗生长受到抑制,使小麦根、叶含水量、水势下降,羰基含量上升。复水后小麦幼苗根、叶含水量、水势、羰基含量均有不同程度的恢复,水势可以恢复到处理前和对照的水平,含水量和羰基含量不能恢复到处理前和对照的水平。持续干旱处理对小麦生长(根、叶含水量,水势)的影响比间断干旱处理大,且持续时间更长;间断干旱处理对小麦蛋白质损伤的影响比持续干旱处理更严重。2种干旱方式对小麦幼苗根的影响均比叶大。

锰致鸡肾脏蛋白质氧化损伤作用的研究

为探讨锰致鸡肾脏组织蛋白质的氧化损伤作用及其分子机制,分别在日粮中添加500、800、1700 mg/kg MnCl2染毒处理30、60、90 d,建立鸡亚慢性锰中毒模型。采用2,4-二硝基苯肼比色法测定鸡肾脏组织蛋白质的羰基含量,用以判断蛋白质的氧化损伤程度。结果表明,与对照组相比,各染毒组肾脏组织中的蛋白质羰基含量增大,且呈一定的时间-剂量效应。因此,锰能使鸡肾脏组织蛋白质羰基含量增加,从而诱导机体氧化损伤。

用改良的2,4-二硝基苯肼比色法评价抗氧化保健食品

对测定蛋白质羰基含量的方法2,4-二硝基苯肼比色法进行改良,使这一方法更适用于保健食品的功能检测。用液氮低温法代替经典的蛋白酶抑制剂,用两种方法分别测定同龄小鼠与不同龄小鼠脑组织蛋白质羰基含量进行对比,并用两种抗氧化保健食品功能材料对改良方法的实用性进行检验。结果显示改良方法与经典方法测定的结果之间无显著性差异(p>0.05),改良方法同样能够将抗氧化保健食品对蛋白质羰基含量的影响显示出来。

SO_2衍生物对小鼠脾、胃组织蛋白质的氧化损伤

用腹腔注射的方法对实验小鼠进行SO2衍生物(亚硫酸钠和亚硫酸氢钠,分子比为3:1)染毒,染毒剂量分别为0,0.025,0.100,0.400g/(kg·d),共染毒5d.研究了SO2衍生物对小鼠脾、胃蛋白质的氧化损伤作用并探讨其分子作用机制.结果表明,经SO2衍生物处理,可以使小鼠脾、胃蛋白质的羰基含量增大,且染毒剂量与蛋白质的羰基含量之间呈现直线相关关系,相关系数分别为0.899和0.855(P=0.05).蛋白质羰基含量增大表现为脾>胃.说明SO2衍生物可使小鼠脾、胃组织蛋白质产生氧化损伤,氧化损伤的程度大小因组织而异.

镉对瓯江彩鲤脏器组织蛋白质的氧化损伤作用

瓯江彩鲤(Cyprinus carpio var color)是浙江省大力推广的主要稻田养鱼鱼种,重金属污染对其生态毒理效应研究具有重要意义。针对镉胁迫瓯江彩鲤蛋白质氧化损伤效应,采用静态置换法,研究了0.412～2.059mg·L-1浓度范围内的镉对瓯江彩鲤鳃、脑和肝脏组织蛋白质的氧化损伤作用。结果表明,瓯江彩鲤鳃、脑和肝组织蛋白质羰基(PCO)含量随着镉暴露浓度的增加而升高,且均表现出明显的浓度-效应关系,线性拟和确定系数分别为0.9660,0.9630和0.9723;在0.686～2.059mg·L-1浓度组,各脏器组织PCO含量均明显高于对照组(p<0.05或p<0.01)。在胁迫剂量为0.686mg·L-1不同暴露时间条件下,鳃、脑和肝组织蛋白质羰基含量随暴露时间的延长而升高,3种组织中PCO含量在暴露7d后均显著高于对照组(p<0.05)。3种组织蛋白质羰基含量变化对镉暴露敏感性大小的次序为:肝>鳃>脑。结果显示,镉可引起细胞蛋白质产生氧化损伤,镉对不同组织器官的蛋白质氧化损伤程度不同;PCO可以做为评价重金属污染对鱼体生态毒效应的有效生物标志物。

甲醛吸入致小鼠脑和肾组织的氧化损伤作用研究

目的研究小鼠吸入气态甲醛后,甲醛对小鼠的脑、肾组织蛋白造成氧化损伤和脂质的过氧化及其发生机制。方法用不同剂量的气态甲醛对小鼠进行连续动态染毒处理72 h,用2,4-二硝基苯肼比色法测定小鼠脑、肾组织蛋白质的羰基含量,以判断蛋白质的氧化损伤程度;用M DA(丙二醛)试剂盒测定组织中M DA含量,来判断脂质的过氧化程度。结果只有吸入3.0 m g/m3的气态甲醛时,才会对脑、肾组织中的蛋白质造成明显的氧化损伤;而在0.5 m g/m3时,脑组织中脂质的过氧化比肾组织中显著。结论0.5 m g/m3的气态甲醛不造成蛋白质氧化损伤,而对脑组织中脂质的过氧化作用却很显著,可见0.5 m g/m3甲醛对生物体存在着直接的神经毒性;3.0 m g/m3的气态甲醛对脑、肾组织中的蛋白质和脂质会造成明显的氧化损伤,且肾组织比脑组织敏感。

微囊藻毒素-LR致小鼠蛋白质氧化损伤的作用

目的:探讨微囊藻毒素-LR对小鼠肝、肾和睾丸组织蛋白质的氧化损伤程度。方法:用3.0、6.0和12.0μg/kg3种不同浓度的微囊藻毒素-LR对小鼠进行腹腔注射染毒(n=5),染毒时间为7d,每天1次,并设阴性对照组。用2,4-二硝基苯肼比色法测定3种组织的蛋白质羰基含量。结果:随着微囊藻毒素-LR剂量的升高,小鼠肝、肾和睾丸的蛋白质羰基含量升高(F分别为44.631、21.975和23.962,P均<0.001)。3.0μg/kg染毒组肝、肾蛋白质羰基含量[(3.72±0.23)和(3.99±0.48)mmol/kg]高于阴性对照组[(2.90±0.22)和(3.27±0.23)mmol/kg](P均<0.05)。3.0μg/kg染毒组睾丸蛋白质羰基含量[(1.91±0.25)mmol/kg]与阴性对照组[(1.69±0.27)mmol/kg]相比,差异无统计学意义(P>0.05)。6.0μg/kg染毒组肝、肾和睾丸蛋白质羰基含量[(4.55±0.45)、(4.44±0.53)和(2.53±0.24)mmol/kg]和12.0μg/kg染毒组肝、肾和睾丸蛋白质羰基含量[(5.62±0.55)、(5.67±0.60)和(3.15±0.41)mmol/kg]均高于阴性对照组(P均<0.01)。结论:微囊藻毒素-LR对小鼠肝、肾和睾丸组织的蛋白质有氧化损伤作用。

小鼠不同组织蛋白质羰基含量随龄变化的比较研究

为寻找适宜观察蛋白质遭受自由基损伤的组织,用2,4-二硝基苯肼比色法测定不同性别幼龄和老龄小鼠不同组织蛋白质羰基含量,结果发现随着年龄增加小鼠各组织中蛋白质羰基增量为脑>肝>心>血清。由此可知小鼠脑蛋白质容易遭受自由基攻击,损伤程度大且不宜自身修复,在功能食品抗氧化的研究中是一种适用于观察蛋白质受自由基损伤的理想材料。

单壁碳纳米管致小鼠肝脏组织蛋白质氧化损伤的研究

目的研究单壁碳纳米材料对小鼠肝组织蛋白质的氧化损伤作用。方法用不同剂量的单壁碳纳米管悬浮液(0.1,0.2,0.4 mg/ml)对小鼠进行腹腔注射一次性染毒,7 d后用2,4-二硝基苯肼比色法测定小鼠肝组织蛋白质的羰基含量,以判断蛋白质的氧化损伤程度。结果注入0.4 mg/ml单壁碳纳米管悬浮液后,小鼠肝的蛋白质羰基较对照组含量呈显著升高(P<0.05),而在低浓度(0.1 mg/ml)和中浓度(0.2 mg/ml)无显著差异(P>0.05)。结论单壁碳纳米管在高浓度(0.4 mg/ml)时,能引起小白鼠肝的蛋白质氧化损伤。