利口葡萄酒混浊物结构及其蛋白组分鉴定分析

为探究利口葡萄酒贮藏期混浊物的形成原因,以白葡萄品种为原料酿制利口葡萄酒,通过扫描电子显微镜、X射线衍射和傅里叶红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy, FT-IR)进行利口葡萄酒混浊物形貌和结构分析,并采用液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)对混浊物蛋白进行鉴定。结果表明,利口葡萄酒混浊物由无数不规则、边缘光滑的小颗粒(非晶态)堆积组成,FT-IR显示混浊物中可能含有蛋白质和酚类物质,由化学方法检测出混浊物中蛋白含量为(114.70±0.51) mg/g,显著高于总酚和总糖含量(P<0.05);经LC-MS/MS鉴定发现,混浊物中几丁质酶、类甜蛋白和非特异性脂质转移蛋白的含量分别占蛋白总量的6.10%、5.06%、0.11%,3类蛋白是利口葡萄酒中的病程相关蛋白,可能是造成利口葡萄酒混浊的主要蛋白。该研究可为探究利口葡萄酒混浊机理和解决利口酒混浊问题提供理论参考。

茶多酚——蛋白质之间的络合及沉淀回收研究

从绿茶中提取了含有5种儿茶素单体的茶多酚,对菠萝蛋白酶、大豆分离蛋白、酪蛋白、细胞色素C、胰蛋白酶、淀粉酶以及木瓜蛋白酶等蛋白质进行络合、沉淀及回收。茶多酚和这些蛋白质表现出混活性。在特定的蛋白质浓度下,茶多酚与各种蛋白质络合时的起混浓度分别是:猪胰蛋白酶为0.5%;大豆分离蛋白、木瓜蛋白酶及α-淀粉酶为0.1%,菠萝蛋白酶为0.3%;细胞色素C为0.4%。用0.7%的茶多酚对菠萝蛋白酶的蛋白质最大回收率为60%,而对木瓜蛋白酶活性的最大回收率可达78%;0.5%的茶多酚对胰蛋白酶及酪蛋白的最大回收率分别为8%和7%左右。0.8%的茶多酚对大豆分离蛋白、细胞色素C的最大回收率约20%左右。实验结果还表明,茶多酚对来自米曲霉的α-淀粉酶无抑制作用,通过0.3%的茶多酚浓度,可以获得约71%的α-淀粉酶活性最高回收率。

啤酒中蛋白质及其测定方法研究进展

啤酒中蛋白质对啤酒品质的各方面有着很大的影响,尤其是对啤酒泡沫和浑浊的形成。本文在叙述啤酒泡沫和浑浊蛋白质性质的基础上探讨了啤酒中蛋白质的测定方法,给酿造者提供选择合适的方法来测定和控制啤酒中的蛋白质,以此来提高啤酒的品质。

用浊度法预测香蕉汁中混浊活性蛋白质和多酚

本研究采用浊度仪测香蕉汁混浊活性(HA)蛋白和多酚含量。为减少内源性蛋白和多酚的影响,分别用聚乙烯吡咯烷酮(polyvinyl polypyrrolidone, PVPP)和膨润土吸附多酚和蛋白质。将单宁酸加入PVPP处理与未处理香蕉汁中,果汁浊度变化与蛋白质含量呈线性相关,在蛋白质含量相同情况下,PVPP处理果汁的浊度较未处理样品小。热处理添加适量明胶的香蕉汁可反映果汁中HA多酚的含量,膨润土处理与未处理系列样品的浊度与其HA多酚含量呈线性相关。浊度法可用于测定香蕉汁中HA蛋白和HA多酚。

多酚和蛋白质对苹果浓缩汁二次混浊的影响

采用18000r/min冷冻(-4℃)离心20min的方法处理经二次混浊处理了3个批次的果汁,测定上清液的相应指标,与未处理的果汁做空白对比,由相应的成分的变化,确定混浊物的成分。结果表明:和二次混浊有关的多酚主要是原花青定的聚合体;表儿茶素、儿茶素小分子的酚类不直接参与二次混浊,却是形成二次混浊的前体物质;和二次混浊有关的蛋白质疏水性氨基酸含量高,其中脯氨酸含量大。

不同黄酒部位的沉淀蛋白质氨基酸组成分析

为分析黄酒混浊与沉淀的原因,采用硅溶胶吸附分离法获得黄酒酒液和酒脚中易引起沉淀的蛋白,并一起分析测定这2个样品和酒脚的氨基酸组成。结果表明:酒液沉淀蛋白的主要氨基酸为谷氨酸、脯氨酸和苯丙氨酸,相对含量分别为41.33%、18.66%和9.56%;酒脚沉淀蛋白中主要氨基酸为谷氨酸、天门冬氨酸、亮氨酸,分别为12.39%、11.32%和8.02%;酒脚中主要氨基酸为谷氨酸、天门冬氨酸、亮氨酸,分别为16.57%、10.91%、7.14%。该结果显示黄酒所含醇溶蛋白质中的谷氨酸导致黄酒混浊、沉淀现象的主要氨基酸。

绍兴黄酒混浊蛋白的分离鉴定及其氨基酸组成、二级结构分析

采用双向电泳及基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱法分析了绍兴黄酒混浊蛋白的主要组成及来源,结果表明:绍兴黄酒混浊中的蛋白质主要包括来源于小麦类燕麦蛋白b1、类燕麦蛋白、二聚-α淀粉酶抑制剂、病程相关蛋白、病程相关蛋白-4、几丁质酶II,以及来源于水稻的类燕麦蛋白和β-淀粉酶。高效液相色谱与傅里叶变换红外线光谱分析法分析绍兴黄酒上清蛋白质和混浊蛋白质的氨基酸组成与二级结构发现,绍兴黄酒混浊蛋白中谷氨酸含量最高,占总氨基酸含量的20.48%,疏水性的氨基酸含量比酒体蛋白高24.2%。高α-螺旋含量、低β-折叠和无规则卷曲是黄酒混浊中蛋白质的主要结构特征。

瓶装葡萄酒蛋白破败的研究进展

瓶装葡萄酒中的蛋白质破败是由葡萄酒中的蛋白缓慢变性,形成不规则的浑浊沉淀而引起的。酒中的绝大部分蛋白来源于葡萄浆果,其中葡萄致病相关蛋白(PR蛋白)含量最高。葡萄PR蛋白等电点低,分子量小,对蛋白酶和低pH值具有高抗性。PR蛋白的形成与环境条件,以及葡萄成熟过程中的病理情况相关。葡萄酒中与蛋白破败有关的大部分蛋白,其前体属于葡萄PR蛋白。葡萄酒蛋白破败的产生不仅依赖于蛋白质,而且还要受到非蛋白因素的影响。虽然膨润土对去除酒中的问题蛋白很有效,但该方法对葡萄酒质量有不利的影响,而且在下胶处理中还损失了3%～10%体积的葡萄酒。对现有使用方法进行改进,可提高酒质、节约成本、保护环境,发展膨润土取代技术。

啤酒冷混浊蛋白的分析及硅胶、PVPP吸附效果比较

利用SDS-PAGE电泳对3种不同品牌的啤酒中的冷混浊蛋白进行分析,结果表明,引起啤酒冷混浊的蛋白分为醇溶性蛋白和水溶性蛋白。其中醇溶性冷混浊蛋白占总含量的70%左右,分子量在43～50 kDa之间,水溶性冷混浊蛋白的分子量在8～14 kDa之间。另外,比较硅胶、PVPP的吸附效果,经二者处理后的样品浊度都有明显的下降,但经硅胶处理后的样品浊度更低一些。比较硅胶吸附前后样品的泡持时间没有很大的变化,而经PVPP处理后的样品泡持时间有一定的改变。因此,在啤酒生产过程中添加硅胶,能够有效地除去啤酒冷混浊蛋白,而且不会影响啤酒的泡持性。

饮料浑浊活性蛋白研究进展

浑浊活性蛋白易与多酚发生相互作用,并引起饮料浑浊和沉淀。文章对饮料浑浊活性蛋白的性质、分离以及检测方法进行了综述,同时还对饮料浑浊活性蛋白的控制技术进行了分析,并对今后的研究重点进行了展望。

酚类物质和硅胶对啤酒中敏感蛋白的吸附选择性研究

啤酒中的混浊活性蛋白(敏感蛋白)富含脯氨酸。对0℃、37℃以及室温下分离的啤酒混浊物质进行氨基酸分析后发现,不同贮藏温度条件下产生的混浊物质中脯氨酸含量差异很大,依次为13.22%,11.30%和10.44%(均为摩尔百分含量),原因是不同贮藏温度下啤酒中的多酚物质氧化聚合情况不同,造成其对敏感蛋白的选择性差异;0℃贮藏条件下,多酚物质对敏感蛋白选择性最高,37℃次之,室温保藏最差;对硅胶吸附的蛋白质进行氨基酸分析后发现,硅胶吸附蛋白质的脯氨酸含量比啤酒总蛋白所含脯氨酸要高出许多,说明硅胶对敏感蛋白有一定的选择性吸附,且不同硅胶产品对敏感蛋白的吸附选择性也有差异,可以把硅胶吸附蛋白质的脯氨酸含量作为评价硅胶产品质量的一个参考性指标。

苹果多酚提取浓缩过程中混浊的形成及控制

对苹果多酚提取浓缩过程中的混浊现象进行研究。通过分析苹果多酚提取浓缩液中引起混浊的主要成分,采用离心法脱除混浊中的蛋白质,观测脱除蛋白质前后大孔树脂对苹果多酚吸附解析的影响。结果表明引起混浊的主要成分是蛋白质、多糖、果胶、多酚,低速离心脱除蛋白质后大孔树脂对苹果多酚的比吸附量提高了25%,比解吸量提高了23%。

啤酒中浑浊敏感蛋白的分离与鉴定

啤酒非生物稳定性是影响啤酒质量的重要指标之一,非生物浑浊主要是啤酒中的浑浊蛋白质与多酚结合体组成的,浑浊敏感蛋白质主要来自大麦醇溶蛋白,是一种富含脯氨酸的蛋白质。主要阐述了浑浊敏感蛋白质的分离,以及利用蛋白免疫印迹法(Immunobloting)鉴定啤酒中的浑浊敏感蛋白质,此外还研究了硅胶对啤酒的浑浊蛋白质的影响。

苹果汁中与混浊有关的活性蛋白质的分离纯化

采用疏水作用色谱PhenylSepharoseCL-4B和固相萃取C18柱分离纯化了浓缩苹果汁和鲜榨苹果汁中与混浊有关的活性蛋白质。经过SDS-PAGE,结果表明浓缩苹果汁和鲜榨苹果汁中的活性蛋白质为同一类蛋白,均为疏水性蛋白质,其分子量为36kDa。

啤酒中浑浊活性蛋白与泡沫蛋白及其相关性研究

以啤酒中的蛋白质为研究对象,综述了啤酒中浑浊活性蛋白、泡沫蛋白的生化性质、结构特点,并初步分析了浑浊活性蛋白与泡沫蛋白之间的相关性,为提高啤酒的品质和营养价值提供理论依据与技术参考。

苹果浓缩汁后混浊的研究进展

综述了苹果浓缩汁后混浊的反应机理、影响因素及抑制方法。

榛仁蛋白饮料工艺的研究

通过正交试验对榛仁蛋白饮料乳化稳定剂进行了优选,得出榛仁蛋白饮料的乳化稳定剂最佳配比为:黄原胶0.15%,酪蛋白酸钠0.55%,蔗糖脂肪酸脂0.35%。通过单因素试验结果表明,最佳的均质工艺条件为:压力30MPa,温度为65℃,次数为2次;采用高温瞬时杀菌(121℃,30s)效果较好。

脯氨酰内肽酶水解啤酒蛋白的研究

将脯氨酰内肽酶(PEP)添加在啤酒后酵液中,通过冷混浊实验分析脯氨酰内肽酶对啤酒非生物稳定性的影响。结果表明,添加5mg/L的脯氨酰内肽酶就能有效地提高啤酒的非生物稳定性;采用75%硫酸铵沉淀啤酒蛋白,进行SDS-PAGE电泳分析,结果显示,啤酒蛋白电泳图谱的分布主要表现为8～14.4 ku的窄带和35～45 ku的宽带,而经脯氨酰内肽酶处理的啤酒蛋白电泳图谱中8～14.4 ku的条带消失,说明此蛋白被脯氨酰内肽酶水解。

黑啤中浑浊和泡沫蛋白性质初探

泡沫是啤酒的重要特征,泡沫蛋白是构成啤酒泡沫的骨架,泡沫蛋白的含量和性质在一定程度上决定了啤酒泡沫的质量。啤酒是一种成分复杂的胶体溶液,其稳定性较弱,啤酒在贮藏中极易产生浑浊沉淀,浑浊蛋白是构成啤酒浑浊的重要成分之一。以黑啤为原料,根据SDS-PAGE原理,按浓缩胶5%,分离胶12%,浓缩电压75V,分离电压120V,分离时间3h,分析啤酒泡沫蛋白和浑浊蛋白的分子量范围。结果表明:啤酒泡沫蛋白的分子量为42.4k Da和14.1 k Da,啤酒浑浊蛋白的分子量分别为47.72k Da、42.08k Da、36.57k Da、32.44k Da、28.02k Da,两者蛋白的分子量之间有一定交集。为进一步分析啤酒中浑浊活性蛋白与泡沫蛋白的相关性提供基础数据。

酚类物质和可溶性蛋白对苹果浓缩汁后混浊的影响

测定了鲁加1号和鲁加5号苹果浓缩汁在贮藏过程中可溶性蛋白质含量、总酚含量、黄烷醇类多酚含量、缩合单宁含量和几种小分子酚类物质的含量的变化。结果表明:苹果浓缩汁中总酚含量、可溶性蛋白含量以及缩合单宁的含量随着贮藏时间的延长而降低,而黄烷醇类多酚的含量则是呈先降低然后又上升的趋势,小分子酚类物质则因苹果品种的不同和小分子酚类物质的不同存在很大的差异,但总体的变化呈下降趋势。相关性分析表明:可溶性蛋白含量、黄烷醇类多酚含量和表儿茶素的含量与浊度值呈极显著正相关,咖啡酸的含量与浊度值呈显著正相关,阿魏酸的含量与浊度值呈显著负相关;在贮藏过程中黄烷醇类多酚、咖啡酸和表儿茶素含量的变化量与浊度值的变化量呈极显著负相关,可溶性蛋白含量的变化量与浊度值的变化量呈显著负相关。