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Tacolimus Postconditioning Alleviates Apoptotic Cell Death in Rats after Spinal Cord Ischemia-reperfusion Injury via Up-regulating Protein-Serine-Threonine Kinases Phosphorylation 被引量:2
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作者 潘峰 程艳香 +7 位作者 祝成亮 陶凤华 李章华 陶海鹰 贺斌 余铃 戢鹏 唐欢 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2013年第6期852-856,共5页
The effects of tacrolimus postconditioning on protein-serine-threonine kinases (Akt) phos- phorylation and apoptotic cell death in rats after spinal cord ischemia-reperfusion injury were investi- gated. Ninety male ... The effects of tacrolimus postconditioning on protein-serine-threonine kinases (Akt) phos- phorylation and apoptotic cell death in rats after spinal cord ischemia-reperfusion injury were investi- gated. Ninety male SD rats were randomly divided into sham operation group, ischemia-reperfusion group and tacrolimus postconditioning group. The model of spinal cord ischemia was established by means of catheterization through femoral artery and balloon dilatation. The spinal cord was reperfused 20 min after ischemia via removing saline out of balloon. The corresponding spinal cord segments were excised and determined for Akt activity in spinal cord tissue by using Western blotting at 5, 15, and 60 min after reperfusion respectively. Spinal cord tissue sections were stained immunohistochemically for detection of the phosphorylated Akt expression at 15 min after reperfusion. Flow cytometry was applied to assess apoptosis of neural cells, and dry-wet weights method was employed to measure water content in spinal cord tissue at 24 h after reperfusion. The results showed that the activities of Akt in tarcolimus postconditioning group were significantly higher than those in ischemia-reperfusion group at 5, 15, and 60 min after reperfusion (P〈0.05, P〈0.01). The Akt activities reached the peak at 15 min after reperfu- sion in ischemia-reperfusion group and tacrolimus postconditioning group. The percentage of apoptotic cells and water content in spinal cord tissue were significantly reduced (P〈0.01) in tacrolimus postcon- ditioning group as compared with those in ischemia-reperfusion group at 24 h after reperfusion. It is concluded that tacrolimus postconditioning can increase Akt activity in spinal cord tissue of rats, inhibit apoptosis of neural cells as well as tissue edema, and thereby alleviate spinal cord ischemia-reperfusion injury. 展开更多
关键词 protein-serine-threonine kinases reperfusion injury spinal cord ischemia tacrolimus post- conditioning
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硒酶及硒化合物生理功能研究的新进展 被引量:29
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作者 黄峙 向军俭 郭宝江 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期293-297,共5页
硒是动物必需的微量元素 ,硒半胱氨酸是硒蛋白的组份并构成硒酶的活性中心 ,硒蛋白特别是硒酶是硒的主要功能形式。研究发现 ,硒半胱氨酸是参入到蛋白质分子中的第 2 1种氨基酸 ,硒是唯一受基因调控的微量元素。最新研究表明 ,硒及其化... 硒是动物必需的微量元素 ,硒半胱氨酸是硒蛋白的组份并构成硒酶的活性中心 ,硒蛋白特别是硒酶是硒的主要功能形式。研究发现 ,硒半胱氨酸是参入到蛋白质分子中的第 2 1种氨基酸 ,硒是唯一受基因调控的微量元素。最新研究表明 ,硒及其化合物还具有阻断某些炎症介质的生理活性、抑制蛋白激酶C、激活促分裂原活化蛋白激酶和S6核糖体蛋白激酶、免疫调节及与其它元素和维生素相互作用等多种生理功能 。 展开更多
关键词 硒酶 硒化合物 生理功能 激酶
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p38 MAPK_(α/β)和ERK_(1/2)在心肌缺氧预处理信号传递中的不同作用 被引量:9
3
作者 黄轶峰 龚开政 张振刚 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期454-458,共5页
建立培养乳鼠心肌细胞的缺氧/复氧(A/R)损伤模型和缺氧预处理(APC)模型,以细胞存活率、细胞内超氧化物趋化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性作为反映心肌细胞损伤的指标。采用细胞外信号调节蛋白激酶(ERK_(... 建立培养乳鼠心肌细胞的缺氧/复氧(A/R)损伤模型和缺氧预处理(APC)模型,以细胞存活率、细胞内超氧化物趋化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性作为反映心肌细胞损伤的指标。采用细胞外信号调节蛋白激酶(ERK_(1/2))抑制剂PD98059及丝裂素活化蛋白激酶p38_(α/β)(p38_(α/β))阻滞剂SB203580干预模型,并以胶内原位磷酸化法测定ERK_(1/2)和p38活性,借以探讨ERK_(1/2)和p38_(α/β)在缺氧预处理保护机制中的作用。结果表明:(1)在APC组,于预处理的缺氧时相给予PD98059,可以完全消除APC的延迟保护作用;在A、R组的缺氧时相加入PD98059对细胞损伤无影响;(2)在APE组的预处理缺氧时相给予p38_(α/β)抑制剂SB203580并不能消除APC的保护作用,而在A/R组的持续缺氧时相给予SB203580则可显著减轻缺氧对细胞的损伤;(3)ERK_(1/2)和p38总活性测定表明,缺氧可激活ERK_(1/2)和p38,它们的活性在缺氧后4 h时达到高峰,而经过APC处理后,两者活性高峰提前于缺氧后3 h时出现,且峰值显著降低。上述结果提示,预处理过程中ERK_(1/2)的激活可能是缺氧预处理延迟保护机制中细胞信号传递的重要环节,预处理阶段p38_(α/β)的活化不参与APC诱导的延迟保护信号传递过程。 展开更多
关键词 生理学 心肌保护 缺氧 心肌缺血预处理 丝裂素活化蛋白激酶p38 细胞外信号调节蛋白激酶 大鼠
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钙依赖型蛋白激酶(CDPKs)在植物中的生理功能 被引量:12
4
作者 倪天华 魏幼璋 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第6期241-246,共6页
 简要介绍了钙依赖型蛋白激酶(Calcium-dependentProteinKinases,CDPKs)的结构特点及家族成员,重点对CDPKs在植物环境胁迫、防御反应、生长发育、离子通道调节和激素信号等方面的生理功能研究进展进行了综述和讨论,并展望了该领域的研...  简要介绍了钙依赖型蛋白激酶(Calcium-dependentProteinKinases,CDPKs)的结构特点及家族成员,重点对CDPKs在植物环境胁迫、防御反应、生长发育、离子通道调节和激素信号等方面的生理功能研究进展进行了综述和讨论,并展望了该领域的研究前景。 展开更多
关键词 钙依赖型蛋白激酶 生理功能 植物 CDPKS 激素信号
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运动员运动生理生化指标与体育木地板运动功能的相关性 被引量:6
5
作者 王宏棣 周志芳 +1 位作者 何金存 李丽 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第1期172-179,共8页
【目的】从运动员与体育木地板的相互作用关系出发,研究运动员运动生理生化指标与体育木地板运动功能的相关性,构建一种基于运动员运动生理生化指标比较体育木地板运动功能性的方法。【方法】选用3种典型结构型式(双层龙骨结构、单层龙... 【目的】从运动员与体育木地板的相互作用关系出发,研究运动员运动生理生化指标与体育木地板运动功能的相关性,构建一种基于运动员运动生理生化指标比较体育木地板运动功能性的方法。【方法】选用3种典型结构型式(双层龙骨结构、单层龙骨结构和可拆装式结构)体育木地板,在设定的2种运动强度(心率为每分钟110~120次的低强度运动和170~180次的高强度运动)和固定运动模式下,采集运动员运动相关生理生化指标,包括即时血乳酸、主观感觉评价和血清肌酸激酶等,利用方差分析和非参数分析方法判定检测值之间是否存在显著差异。【结果】1)固定运动模式条件下,体育木地板结构型式和运动强度对运动员的即时血乳酸具有显著影响,低强度运动条件下,双层龙骨结构体育木地板上运动员的即时血乳酸明显高于其他2种结构型式体育木地板;2)采用岗奈尔·鲍格主观体力感觉等级表评定运动员完成规定运动后的主观感觉,在低强度运动条件下双层龙骨结构体育木地板上运动员的主观感觉最累,体力感觉等级高于其他2种结构型式体育木地板;3)固定运动模式条件下,体育木地板结构型式和运动强度对运动员血清肌酸激酶的影响不明显。【结论】运动员运动生理生化指标与体育木地板运动功能间具有相关性,基于运动员运动生理生化指标比较体育木地板运动功能性的方法是可行的。该方法是在低强度运动条件下,运动员在不同结构型式体育木地板上完成连续跨栏运动,检测运动员的即时血乳酸和主观感觉,采用方差分析方法或非参数Kruskal-Wallis检验分析即时血乳酸,并判定不同结构型式体育木地板上运动员即时血乳酸之间是否有明显差异,结合主观感觉数值从大到小可对不同结构型式体育木地板的功能性进行排序。 展开更多
关键词 体育木地板 运动生理生化 血乳酸 血清肌酸激酶 功能性
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小鼠视皮层发育过程中常规蛋白激酶Cγ亚型的动态表达及单眼剥夺对其表达的影响 被引量:1
6
作者 郗平 王静 +2 位作者 韩松 李俊发 傅涛 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期486-490,共5页
背景弱视的发生与中枢神经系统可塑性变化有关,我们先前的研究发现synapsin参与视皮层的突触可塑性过程,而神经元特异性蛋白——常规蛋白激酶C1亚型(cPKC-γ)可能是synapsin的上游激酶之一,其在视觉发育可塑性中是否发挥或如何发... 背景弱视的发生与中枢神经系统可塑性变化有关,我们先前的研究发现synapsin参与视皮层的突触可塑性过程,而神经元特异性蛋白——常规蛋白激酶C1亚型(cPKC-γ)可能是synapsin的上游激酶之一,其在视觉发育可塑性中是否发挥或如何发挥作用尚未明确。目的观察随着小鼠发育其视皮层中cPKC-γ表达水平的动态变化以及异常视觉经验对cPKC-γ表达水平的影响。方法选取清洁级C57BL/6小鼠36只,分别于出生后(P)7、14、21、28、35、42d各选6只小鼠,取其两侧视皮层用于研究正常小鼠随鼠龄增加视皮层中cPKC-γ表达水平的变化。另外选取清洁级C57BL/6小鼠24只以随机数字表法随机分为发育期组和成年期组,每组12只。发育期组取6只P14小鼠行右眼上下睑缝合术以制备单眼剥夺(MD)模型,其余6只小鼠不进行干预作为对照,至P28取小鼠左右两侧视皮层;成年期组取6只P60小鼠以同样方法制备MD模型,其余6只不作干预作为对照,至P74取小鼠两侧视皮层。采用Westernbolt法检测小鼠两侧视皮层内cPKC-γ蛋白的表达变化。结果正常P7小鼠可见左右侧视皮层中cPKC-γ蛋白的微弱表达,表达量的相对值分别为(39.74+11.22)%和(40.78±10.37)%,随鼠龄增加cPKC-γ蛋白的表达量逐渐增加;P21小鼠左右侧视皮层中cPKC-γ蛋白的表达量达峰值,分别为(138.68±15.73)%和(138.47±23.48)%,此后随鼠龄增加cPKC-γ蛋白的表达量逐渐减少并稳定。不同鼠龄正常小鼠视皮层中cPKC-γ表达量的总体比较差异有统计学意义(F鼠龄=57.174,P=0.000),各组小鼠左侧与右侧视皮层中cPKC-γ蛋白表达量的总体比较差异无统计学意义(F左事=0.059,P=0.809)。发育期组MD小鼠与成年期组MD小鼠间左右侧视皮层中cPKC-γ表达量的总体比较差异无统计学意义(F鼠龄=1.798,P=0.159),各组MD小鼠与正常对照小鼠间左右侧视皮层中cPKC-γ蛋白的表达量总体比较差异无统计学意义(F分组=0.104,P=0.749)。结论正常小鼠视皮层中cPKC-γ表达量的变化趋势与视觉发育可塑性关键期相一致;MD对小鼠视皮层中cPKC-γ蛋白表达量无明显影响,但是否对cPKC-γ蛋白的活性产生影响仍需进一步研究。 展开更多
关键词 视皮层/生理 神经元可塑性/生理 突触/生理 单眼剥夺 近交系C57BL小鼠 常规蛋白激酶Cγ亚型
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除草剂对空心莲子草PK活性和生理指标的影响 被引量:2
7
作者 洪鸿 吴能表 《西南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期112-116,共5页
研究了1种除草剂——百草枯(化学名称:1,1-二甲-4,4-二氯二吡聢)短时(0~20 min)处理下空心莲子草体内PK、SOD、POD、CAT活性和Ca^(2+)、Mg^(2+)、Mn^(2+)、脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)含量的动态变化以及在其叶片开始萎蔫时叶绿体超微结... 研究了1种除草剂——百草枯(化学名称:1,1-二甲-4,4-二氯二吡聢)短时(0~20 min)处理下空心莲子草体内PK、SOD、POD、CAT活性和Ca^(2+)、Mg^(2+)、Mn^(2+)、脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)含量的动态变化以及在其叶片开始萎蔫时叶绿体超微结构的变化.结果表明:随着处理时间的延长,空心莲子草体内的PK活性的变化为升—降—升,3种离子则共同调节PK活性,最显著的为Ca^(2+);SOD、POD活性却是降—升—降;Pro含量和CAT活性呈较稳定上升;MDA含量变化不明显;叶绿体结构显著被破坏. 展开更多
关键词 空心莲子草 除草剂 蛋白激酶 生理指标
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不同迁移体系对SDF-1/CXCR4介导间充质干细胞迁移的影响 被引量:2
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作者 王新均 唐俊明 +6 位作者 孔霞 郭凌郧 杨建业 郑飞 陈龙 黄永章 王家宁 《陕西医学杂志》 CAS 2009年第3期262-266,共5页
目的:利用Boyden chamber体外迁移体系以及活体状态下观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对间充质干细胞(MSC)迁移的影响。方法:利用Boyden chamber体外迁移体系,先观察不同浓度hSDF-1对MSC迁移的影响,随后利用活体迁移体系,观察MSC转染Ad-h... 目的:利用Boyden chamber体外迁移体系以及活体状态下观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对间充质干细胞(MSC)迁移的影响。方法:利用Boyden chamber体外迁移体系,先观察不同浓度hSDF-1对MSC迁移的影响,随后利用活体迁移体系,观察MSC转染Ad-hSDF-1后迁移的变化。最后利用上述体系经不同的阻断剂分别处理MSC,观察其对MSC迁移的影响。结果:MSC体外迁移能力随着hSDF-1α浓度递增而逐渐增强,并且Wortmannin、LY294002、PD98059、SB203580、PKC-ζ假底物、U70312、AMD3100、Verapamil对MSC迁移均有影响,其中PKC-ζ假底物、U73122、AMD3100对MSC迁移阻断的效应最显著。结论:SDF-1/CXCR4所介导的MSC迁移与PI3K、MAPK、PI-PLC/PKC等信号途径有关,且PKC途径可能处于中心环节。 展开更多
关键词 骨髓祖代细胞/生理学 中胚层 蛋白激酶C/分析 信号传导 细胞运动@SDF-1/CXCR4
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JAK-STAT信号通路在创伤性深静脉血栓形成中作用的实验研究 被引量:4
9
作者 莫建文 黄河 +8 位作者 张春强 王兵 何飞 殷亮 赵智 唐锡章 周兆文 赵学凌 李世和 《中国误诊学杂志》 CAS 2007年第26期6212-6214,共3页
目的:探讨Jak蛋白酪氨酸激酶-信号转导子和转录激活子信号通路在创伤性深静脉血栓形成中的作用。方法:将150只SD大鼠随机分为正常对照(A组)和模型组。模型组根据造模后的不同生物学状态再分为7组:创伤即刻(B组)、血栓形成前期(C组)、高... 目的:探讨Jak蛋白酪氨酸激酶-信号转导子和转录激活子信号通路在创伤性深静脉血栓形成中的作用。方法:将150只SD大鼠随机分为正常对照(A组)和模型组。模型组根据造模后的不同生物学状态再分为7组:创伤即刻(B组)、血栓形成前期(C组)、高峰期血栓形成(D组)、高峰期血栓不形成(H组)、血栓消退期(E组)、血栓不消退(F组)和血栓不形成(G组),在相应时相点无创切取股静脉血管组织,随后抽取各组大鼠总RNA,用Genechip Rat Genome430 2.0芯片测定股静脉RNA表达,并分析Jak蛋白酪氨酸激酶-信号转导子和转录激活子信号通路基因表达变化情况。结果:Jak蛋白酪氨酸激酶-信号转导子和转录激活子信号通路中Cytokine R、STAT、PI3K、AKT、SOCS、CycD等关键基因均呈下调,调控着细胞凋亡、细胞周期等。结论:Jak蛋白酪氨酸激酶-信号转导子和转录激活子信号通路可能是调控血栓的生物学状态的重要信号通路之一。 展开更多
关键词 静脉血栓形成/病理生理学 蛋白质酪氨酸激酶/生理学 信号传导 大鼠 Sprague-Dawley 随机分配 动物
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细胞周期中关键的调控分子——2001年诺贝尔生理学或医学奖简介 被引量:1
10
作者 尹子卉 聂金媛 李声时 《自然杂志》 北大核心 2001年第6期356-360,共5页
今年的诺贝尔生理学或医学奖授予了三位研究细胞周期的科学家 ,他们的突出贡献是发现了所有真核有机体中细胞周期的关键调控分子 .众所周知 ,所有有机体都是由通过分裂而增殖的细胞而组成的 ,而细胞周期中不同的时相又必须通过相互协调... 今年的诺贝尔生理学或医学奖授予了三位研究细胞周期的科学家 ,他们的突出贡献是发现了所有真核有机体中细胞周期的关键调控分子 .众所周知 ,所有有机体都是由通过分裂而增殖的细胞而组成的 ,而细胞周期中不同的时相又必须通过相互协调来完成 .三位科学家经过研究认为周期素依赖性蛋白激酶 (cyclindependentkinase,CDK)和细胞周期素 (cyclin)一起驱动细胞从循环的一个时相向另一个时相转换 .本文概述了细胞周期的基本概念及技术与三位杰出科学家的贡献 . 展开更多
关键词 细胞周期 细胞周期素(cyclin) 周期素依赖性蛋白激酶(CDK) 诺贝尔生理学 医学奖
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前列腺癌组织中PTEN和ILK的表达意义及其相关性 被引量:2
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作者 戚晓平 钱斌 +3 位作者 林考兴 阎利 王金泉 李峰 《肿瘤防治杂志》 2005年第19期1489-1491,共3页
目的:探讨前列腺癌组织中PTEN和整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)的表达意义,并分析PTEN可能影响ILK表达的信号传导机制。方法:应用免疫组织化学SP法检测50例前列腺癌及16例良性前列腺增生组织中PTEN和ILK的表达水平。结果:... 目的:探讨前列腺癌组织中PTEN和整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)的表达意义,并分析PTEN可能影响ILK表达的信号传导机制。方法:应用免疫组织化学SP法检测50例前列腺癌及16例良性前列腺增生组织中PTEN和ILK的表达水平。结果:前列腺癌组织中,PTEN和ILK阳性表达率分别为28·0%(14/50)和46·0%(23/50)。随肿瘤细胞病理分级和临床分期程度的增高,癌细胞PTEN阳性表达率降低或ILK增加,各组间比较差异有统计学意义,P<0·005或P<0·05。PTEN阳性标本中,ILK阳性表达率为7·7%(1/13),而PTEN阴性标本中ILK阳性率为59·5%(22/37),PTEN阳性表达与阳性ILK表达呈负相关,P<0·005。与良性前列腺增生组织中的阳性表达率93·8%(15/16)和6·2%(1/16)比较,差异均有统计学意义,P<0·005。结论:PTEN和ILK异常表达在前列腺癌的恶性进展中起重要作用。PTEN的缺失可能是ILK激活的途径之一。联合检测ILK和PTEN的表达有助于判断病期及预后。肿瘤防治杂志,2005,12(19) 展开更多
关键词 前列腺肿瘤/病理学 肿瘤抑制蛋白质类/生物合成 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶/生理学 免疫组织化学
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Wortmannin对视网膜缺血再灌注后HIF-1α表达的影响 被引量:2
12
作者 张薇 许建华 李若溪 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第5期1019-1021,共3页
目的:探讨磷酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)途径在大鼠视网膜缺血再灌注后对低氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响。方法:将磷酰肌醇-3激酶(PI3K)特异抑制剂Wortmannin(WT)注入大鼠玻璃体内,抑制PI3K活性为A组,玻璃体内... 目的:探讨磷酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)途径在大鼠视网膜缺血再灌注后对低氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响。方法:将磷酰肌醇-3激酶(PI3K)特异抑制剂Wortmannin(WT)注入大鼠玻璃体内,抑制PI3K活性为A组,玻璃体内注射等量林格液作为B组,空白对照组为C组,采用前房灌注生理盐水升高大鼠眼压到110mm Hg(1 kPa=7.5 mm Hg)持续1 h的方法制作实验性视网膜缺血再灌注损伤模型,于再灌注后0、2、6、8、12、24、48 h取材,行免疫组织化学法染色观察HIF-1α在视网膜细胞的阳性表达;并应用RT-PCR来检测HIF-1αmRNA的表达。结果:视网膜缺血再灌注6、8、12、24、48 h,视网膜神经节细胞层及内核层细胞出现HIF-1α阳性表达且表达逐渐增加,12 h达到高峰,然后逐渐降低,预先玻璃体内注射PI-3K特异抑制剂Wortmannin(WT)的大鼠视网膜HIF-1α表达明显减弱,亦在12 h达到高峰,然后逐渐降低。结论:缺血再灌注后大鼠视网膜HIF-1α的表达是经过PI3K途径来实现,阻断PI3K途径,可以明显减少HIF-1α的表达,但从实验结果来看PI3K途径被阻断后并没有完全阻断HIF-1α的表达,由此猜测HIF-1α的表达可能存在多种途径。 展开更多
关键词 雄二烯类/药理学 1-磷脂酰肌醇3-激酶/生理学 DNA结合蛋白质类/药物作用/代谢 核蛋白质类/药物作用/代谢 再灌注损伤/代谢/病理学 视网膜/代谢/病理学 疾病模型 动物 动物 大鼠
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抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路对慢性脑缺血小鼠认知功能的改善和机制 被引量:5
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作者 张斌斌 吴美玲 +3 位作者 刘露娜 竺杨彬 开洁静 曾玲晖 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期405-412,共8页
目的:探索哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂雷帕霉素在慢性脑缺血中的作用及机制。方法:6周龄的ICR小鼠通过右颈总动脉结扎诱导慢性脑缺血模型,采用蛋白质印迹法检测造模后不同时期(1、3、6、24 h,3、7 d,2、4、6周)小鼠大脑皮层和... 目的:探索哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂雷帕霉素在慢性脑缺血中的作用及机制。方法:6周龄的ICR小鼠通过右颈总动脉结扎诱导慢性脑缺血模型,采用蛋白质印迹法检测造模后不同时期(1、3、6、24 h,3、7 d,2、4、6周)小鼠大脑皮层和海马组织中mTOR信号通路mTOR、S6K和S6蛋白表达及其磷酸化水平。造模24 h后腹腔注射雷帕霉素(3.0 mg/kg),经FluoroJade B染色观察细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测mTOR信号通路的变化和对细胞自噬的影响,并采用Morris水迷宫和Y迷宫试验测定小鼠学习记忆功能。结果:模型小鼠大脑皮层和海马组织中mTOR信号通路被异常激活,从6 h开始一直持续到6周,表现为mTOR、S6K和S6蛋白磷酸化增加。雷帕霉素可逆转由慢性脑缺血所致的mTOR信号通路激活,并显著减少细胞凋亡(146.1±16.3与84.5±9.6,P<0.05)。雷帕霉素还能显著逆转慢性脑缺血所导致的Beclin1和LC3-Ⅱ蛋白的表达。Morris水迷宫和Y迷宫试验结果显示,雷帕霉素组较模型组平台潜伏期缩短[(11.1±2.3)s与(8.1±1.8)s,P<0.05]、游泳距离延长[(672.8±128.5)cm与(558.2±124.9)cm,P<0.05]、穿越平台次数减少(2.8±0.9与5.2±0.8,P<0.05)、正确反应率提高[(38.5±9.2)%与(64.9±7.9)%,P<0.05]。结论:抑制mTOR信号通路能改善由慢性脑缺血所致的学习记忆功能下降,其机制可能与抑制细胞凋亡和自噬相关。 展开更多
关键词 西罗莫司/药理学 蛋白激酶类/生理学 信号传导/生理学 自噬 细胞凋亡 脑缺血/药物疗法 记忆/药物作用 疾病模型 动物
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水稻OsRPK2基因的克隆及功能初步鉴定 被引量:2
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作者 张福臻 刘方惠 +2 位作者 陈鑫欣 孙静 葛荣朝 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期604-613,共10页
类受体蛋白激酶基因OsRPK1在水稻的抗逆信号传导中起着重要作用。本研究扩增获得与OsRPK1高度同源的OsRPK2基因,构建p1300:35S:OsRPK2过表达载体后转化拟南芥。对35S:OsRPK2纯合体拟南芥进行抗逆性分析表明,在盐、ABA、PEG胁迫下,OsRPK... 类受体蛋白激酶基因OsRPK1在水稻的抗逆信号传导中起着重要作用。本研究扩增获得与OsRPK1高度同源的OsRPK2基因,构建p1300:35S:OsRPK2过表达载体后转化拟南芥。对35S:OsRPK2纯合体拟南芥进行抗逆性分析表明,在盐、ABA、PEG胁迫下,OsRPK2过表达拟南芥萌发率都明显低于野生型拟南芥,其幼苗的根长生长和成株生长状况方面比野生型拟南芥表现出更为明显的受抑现象。生理检测表明,盐胁迫处理后,与野生型拟南芥相比,35S:OsRPK2转基因拟南芥中叶绿素含量下降更为明显,脯氨酸上升量较小,丙二醛含量上升更为明显,这些内在生理机制使得OsRPK2过表达拟南芥抗逆性明显下降。通过对35S:OsRPK2拟南芥的qRTPCR检测发现,OsRPK2的过量表达使拟南芥抗逆信号通路下游的SAD、SOS3和FRY基因表达明显受到抑制,OsRPK2基因可能通过SOS和CDPK信号通路影响拟南芥的抗逆性。 展开更多
关键词 OsRPK2 类受体蛋白激酶 抗逆性 生理检测 信号通路
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雷帕霉素在大鼠局灶性脑缺血再灌注后24 h给药对脑损伤的保护作用 被引量:5
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作者 梁刚 牛育苗 +3 位作者 李一涵 魏安怡 董静尹 曾玲晖 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期443-449,共7页
目的:探讨雷帕霉素在大鼠局灶性脑缺血再灌注后24 h给药对脑损伤的保护作用。方法:104只Sprague Dawley大鼠随机分为手术对照组、模型对照组、建模后6 h雷帕霉素给药组(6 h给药组)和建模后24 h雷帕霉素给药组(24 h给药组)。采用Longa法... 目的:探讨雷帕霉素在大鼠局灶性脑缺血再灌注后24 h给药对脑损伤的保护作用。方法:104只Sprague Dawley大鼠随机分为手术对照组、模型对照组、建模后6 h雷帕霉素给药组(6 h给药组)和建模后24 h雷帕霉素给药组(24 h给药组)。采用Longa法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。采用神经功能损伤程度评分(NSS)对大鼠进行神经功能评分;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测各组大鼠脑梗死体积; Fluoro-Jade B(FJB)染色法检测大鼠脑组织神经元凋亡;蛋白质印迹法检测各组大鼠mTOR信号通路磷酸化S6蛋白表达。结果:与手术对照组比较,模型对照组大鼠NSS升高,脑梗死体积增加,FJB阳性细胞增多,半暗带磷酸化S6蛋白表达量增加(均P<0.01);与模型对照组比较,6 h和24 h给药组大鼠NSS均降低,脑梗死体积缩小,FJB阳性细胞减少,半暗带磷酸化S6蛋白表达量减少(均P<0.05或P<0.01),且24 h给药组各项指标变化与6 h给药组差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:缺血再灌注后24 h给予雷帕霉素对大鼠局灶性脑缺血再灌注所致脑损伤仍有保护作用。 展开更多
关键词 脑缺血/药物疗法 再灌注损伤/药物疗法 神经元 细胞凋亡 蛋白激酶类/生理学 西罗莫司/药理学 信号传导
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Preliminary Investigation on Regulating Effects of Different TCM Treatments on Transcription of the Correlated Genes of Liver Cancer in Rats 被引量:6
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作者 管冬元 方肇勤 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2003年第1期62-66,共5页
The regulating effects of TCM treatments including clearing away heat and toxic materials,promoting blood circulation and removing blood stasis,and strengthening the spleen and regulating qi on the oncogene transcript... The regulating effects of TCM treatments including clearing away heat and toxic materials,promoting blood circulation and removing blood stasis,and strengthening the spleen and regulating qi on the oncogene transcription were observed in the liver cancer model rats.The preliminary results indicated that the mRNA levels of H-ras N-ras and K-ras,and signal molecules correlated with the ras/MAPK signal transduction pathway were down-regulated by the different TCM treatments in varying degrees.Also,the regulating effects of the treatments on differently-displayed genes were discrepant.It is suggested that the molecular mechanisms of the TCM treatments for liver cancer was complex with different target genes. 展开更多
关键词 Animals DIETHYLNITROSAMINE Drugs Chinese Herbal Genes ras Liver Neoplasms Experimental Male Mitogen-Activated Protein kinase kinases protein-serine-threonine kinases RNA Messenger RATS Rats Wistar Signal Transduction Transcription Genetic ras Proteins
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Efficacy of self-made Gengnian decoction on phosphatidylinositol 3-kinases/protein kinase B/mammalian target of rapamycin signaling pathway in perimenopausal rats 被引量:2
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作者 Zhang Fan Cao Junyan +2 位作者 Zhang Xin Wang Jing Yi Xu 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期861-866,共6页
OBJECTIVE:To investigate the efficacy of self-made Gengnian decoction on expressions of phosphatidylinositol 3-kinase(PI3 K),protein kinase B(Akt)and mammalian target of rapamycin(m TOR)in ovarian tissues of perimenop... OBJECTIVE:To investigate the efficacy of self-made Gengnian decoction on expressions of phosphatidylinositol 3-kinase(PI3 K),protein kinase B(Akt)and mammalian target of rapamycin(m TOR)in ovarian tissues of perimenopausal rats.They were identified with symptom pattern of kidney-Yang deficiency in terms of Traditional Chinese Medicine.METHODS:Female Sprague-Dawley rats aged10-12 months were selected.Estrous cycle was observed by vaginal smears of keratinocytes to screen the perimenopausal model rats.The chosen rats were randomly divided into five groups,including perimenopausal model of kidney-Yang deficiency group(24 rats),self-made Gengnian decoction of high-dose group(24 rats),self-made Gengnian decoction of middle-dose group(24 rats),self-made Gengnian decoction of low dose group(24 rats)and tibolone control group(24 rats).In addition,rats aged 4-6 months were selected as young control group.The perimenopausal model rats of kidney-Yang deficiency were prepared by alternative intramuscular injection of hydrocortisone 5 mg·kg^-1·d^-1The successfully prepared models in self-made Gengnian decoction of high-dose,middle-dose and low-dose groups and tibolone control group were given self-made Gengnian decoction 26.4,13.2 and 6.6 mg·kg^-1·d^-1,and tibolone tablets solvent 0.22 mg·kg^-1·d^-1,respectively,through intragastric administration.Models group and young control group were given the same dose of normal saline,1 time a day for 15 consecutive days.24 h after the last administration,blood and ovarian tissues were collected after anesthesia with 20%ethyl carbamate.The follicles of different levels in ovarian tissue were observed and counted by histopathological hematoxylin-eosin staining.Enzyme linked immunosorbent assay was applied to test insulin-like growth factor-1(IGF-1)level in the serum of experimental rats.The expression levels of PI3 K,phosphorylated-Akt(p-Akt)and phosphorylated-m TOR(p-m TOR)m RNA in ovarian tissue were detected by quantitative real-time polymerase chain reaction.RESULTS:The total follicle counts of perimenopausal model rats with kidney-Yang deficiency were significantly reduced,and the number of follicles(mainly increased in preantral follicles and antral follicles)in perimenopausal model rats with kidney-Yang deficiency was significantly increased after intervention of high and middle doses of Gengnian decoction and tibolone(P<0.05).Compared with normal rats in young control group,the levels of IGF-1 in serum of perimenopausal rats with kidney-Yang deficiency were significantly decreased(P<0.01),and those intervened by high dose of Gengnian decoction and tibolone were significantly up-regulated.The relative expression levels of PI3 K,p-Akt,p-m TOR m RNA in ovarian tissues of perimenopausal rats with kidney-Yang deficiency were significantly lower than those of young rats(P<0.01),and those intervened by high dose of Gengnian decoction and tibolone were significantly up-regulated(P<0.05).CONCLUSION:Self-made Gengnian decoction can increase the levels of IGF-1,PI3 K,Akt and m TOR m RNA expression in serum. 展开更多
关键词 PREMENOPAUSE Insulin-like growth factor-1 Phosphatidylinositol 3-kinase protein-serine-threonine kinases TOR serine-threonine kinases Gengnian decoction
原文传递
STYK1激活Akt信号通路促进肺癌细胞增殖 被引量:2
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作者 刘威 张艳 朱剑军 《实用肿瘤杂志》 CAS 2020年第2期134-139,共6页
目的探讨酪氨酸蛋白激酶1(tyrosine-protein kinase 1,STYK1)在肺癌组织中的表达水平、对肺癌细胞生存的影响及其作用机制。方法定量PCR检测STYK1在35例肺癌组织中的表达水平,分析其与患者临床病理特征间的关系。沉默肺癌细胞A549和HCC... 目的探讨酪氨酸蛋白激酶1(tyrosine-protein kinase 1,STYK1)在肺癌组织中的表达水平、对肺癌细胞生存的影响及其作用机制。方法定量PCR检测STYK1在35例肺癌组织中的表达水平,分析其与患者临床病理特征间的关系。沉默肺癌细胞A549和HCC827中STYK1基因,定量PCR检测mRNA表达水平,Western blot检测蛋白表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果STYK1在肺癌组织中表达水平升高(P<0.01)。其表达水平在肺癌病理分期方面比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。沉默STYK1后,肺癌细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。沉默STYK1抑制Akt磷酸化,下调Bcl-2和Bcl-xL表达水平(均P<0.01)。结论STYK1在肺癌组织中呈高表达。其可能通过激活Akt信号通路,促进肺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 肺肿瘤/病理学 蛋白酪氨酸激酶类 蛋白激酶类 基因表达 基因沉默 衔接蛋白质类 信号转导/生理学 细胞存活
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植物M/MLD类受体蛋白激酶及其生物学功能的研究进展
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作者 孙嘉琪 姜晶 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期892-900,共9页
植物受体蛋白激酶通过与胞外信号结合感知和接收外部信号传递,在植物各个生理过程及生物代谢中发挥着重大的作用。其中M/MLD类受体蛋白激酶是一类植物特有的具有Malectin-like结构域的受体蛋白激酶。研究表明,M/MLD-RLKs亚家族参与植物... 植物受体蛋白激酶通过与胞外信号结合感知和接收外部信号传递,在植物各个生理过程及生物代谢中发挥着重大的作用。其中M/MLD类受体蛋白激酶是一类植物特有的具有Malectin-like结构域的受体蛋白激酶。研究表明,M/MLD-RLKs亚家族参与植物发育过程及生物/非生物胁迫调控。该研究对近年来国内外有关植物M/MLD-RLKs的发现、结构特点以及生物学功能等方面的研究进展进行综述,并重点阐述其在调控植物根系、叶片、花发育及响应多种胁迫过程中的作用,为深入研究M/MLD-RLKs在植物生长发育过程中的生理功能提供参考。 展开更多
关键词 类受体蛋白激酶 M/MLD-RLKs 生理功能
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大豆GmRPK2基因的克隆及功能初步鉴定
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作者 顾哑慧 张常青 +3 位作者 张雪冰 张鑫月 张鑫杰 葛荣朝 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2022年第6期42-49,共8页
非生物胁迫如干旱、土壤盐碱化等严重影响着农作物的生长发育,农作物产量明显受限。大豆GmRPK2基因与拟南芥抗逆基因AtRPK1高度同源,为探究其抗逆功能和作用机理,构建了GmRPK2基因过表达载体并转化拟南芥筛选获得纯合体。抗逆性检测结... 非生物胁迫如干旱、土壤盐碱化等严重影响着农作物的生长发育,农作物产量明显受限。大豆GmRPK2基因与拟南芥抗逆基因AtRPK1高度同源,为探究其抗逆功能和作用机理,构建了GmRPK2基因过表达载体并转化拟南芥筛选获得纯合体。抗逆性检测结果表明,在高盐、PEG和ABA处理下,GmRPK2过表达拟南芥种子的萌发率显著低于野生型,其幼苗阶段根的生长量也明显小于野生型。成株阶段抗逆性检测表明,盐、旱胁迫下过表达拟南芥的生长受抑现象更为明显。为探究其抗逆性降低的内在机理,对GmRPK2过表达拟南芥进行了生理指标检测。结果表明,高盐胁迫后其叶绿素含量明显低于野生型,其丙二醛和电导率则明显较高,DAB染色比野生型更深;旱胁迫后过表达拟南芥的脯氨酸和可溶性糖含量明显较低,失水率明显较高。荧光定量PCR检测发现,GmRPK2基因在拟南芥中过表达后明显抑制了SAD1、P5CS1和ADH1的表达。因此,GmRPK2基因可能通过抑制CDPK抗逆信号转导通路、降低脯氨酸积累和减弱ABA信号传导通路影响拟南芥的抗逆性。 展开更多
关键词 大豆 GmRPK2 类受体激酶 抗逆功能 生理指标 信号转导通路
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