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基于四环素调控系统的叶绿体启动子在大肠杆菌中活性检测
1
作者
于晓俊
曹绍玉
+3 位作者
董玉梅
毕保良
张应华
许俊强
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期149-154,共6页
旨在研究四环素调控系统在叶绿体基因工程中调控启动子活性。以四环素基因及四环素特异性识别序列的核心操控区为基础,首先合成带有四环素核心操控区的prrn O1O2启动子,通过酶切连接的方法连接到表达载体Bio3-GFP,并在大肠杆菌中验证该...
旨在研究四环素调控系统在叶绿体基因工程中调控启动子活性。以四环素基因及四环素特异性识别序列的核心操控区为基础,首先合成带有四环素核心操控区的prrn O1O2启动子,通过酶切连接的方法连接到表达载体Bio3-GFP,并在大肠杆菌中验证该启动子的活性。结果表明,在该启动子的驱动下GFP基因表达使菌落呈明亮绿色;构建四环素诱导下GFP基因的表达载体Bio3-Tet R-prrn O1O2-GFP,筛选出适应大肠杆菌生长的最高四环素使用浓度为5μg/m L;然后构建四环素调控系统下的GFP表达载体,在未加入四环素时,prrn O1O2启动子的功能被抑制,加入四环素后,GFP基因表达出绿色荧光蛋白。说明利用四环素调控系统可以在大肠杆菌中控制叶绿体启动子prrn O1O2的活性,从而避免了核基因组对质体基因组的调控干扰,为进一步利用质体基因工程育种提供有效的方法和途径。
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关键词
四环素调控系统
叶绿体
启动子
prrn
O1O2
大肠杆菌
下载PDF
职称材料
题名
基于四环素调控系统的叶绿体启动子在大肠杆菌中活性检测
1
作者
于晓俊
曹绍玉
董玉梅
毕保良
张应华
许俊强
机构
云南农业大学云南省滇台特色农业产业化工程研究中心
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期149-154,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31560560
30972012)
云南省应用基础研究计划项目(2015FD019)
文摘
旨在研究四环素调控系统在叶绿体基因工程中调控启动子活性。以四环素基因及四环素特异性识别序列的核心操控区为基础,首先合成带有四环素核心操控区的prrn O1O2启动子,通过酶切连接的方法连接到表达载体Bio3-GFP,并在大肠杆菌中验证该启动子的活性。结果表明,在该启动子的驱动下GFP基因表达使菌落呈明亮绿色;构建四环素诱导下GFP基因的表达载体Bio3-Tet R-prrn O1O2-GFP,筛选出适应大肠杆菌生长的最高四环素使用浓度为5μg/m L;然后构建四环素调控系统下的GFP表达载体,在未加入四环素时,prrn O1O2启动子的功能被抑制,加入四环素后,GFP基因表达出绿色荧光蛋白。说明利用四环素调控系统可以在大肠杆菌中控制叶绿体启动子prrn O1O2的活性,从而避免了核基因组对质体基因组的调控干扰,为进一步利用质体基因工程育种提供有效的方法和途径。
关键词
四环素调控系统
叶绿体
启动子
prrn
O1O2
大肠杆菌
Keywords
tetracycline regulatory system
chloroplast
promoter
prrnol02
Escherichia coli
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于四环素调控系统的叶绿体启动子在大肠杆菌中活性检测
于晓俊
曹绍玉
董玉梅
毕保良
张应华
许俊强
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
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