Micro-CT评价铁超载影响膝骨关节炎模型小鼠软骨类组织的变化

背景:膝骨关节炎可能与铁代谢异常有关,了解铁超载对膝骨关节炎的作用非常有意义。目的:探究铁超载对膝骨关节炎发病的影响。方法:选取30只7周龄C57B/6J野生型小鼠,采用随机数表法分为正常对照组、手术对照组与手术+右旋糖酐铁组,每组10只。8周龄时,手术+右旋糖酐铁组腹腔注射右旋糖酐铁500 mg/kg,每周1次,注射至18周龄时停止;10周龄时,手术对照组与手术+右旋糖酐铁组行左后膝内侧半月板失稳手术。18周龄时处死所有小鼠,通过Micro-CT检测胫骨微结构参数,番红O-固绿染色观察关节软骨组织病理损伤程度,普鲁士蓝染色证实铁在小鼠关节中的沉积。结果与结论:①Micro-CT检测显示,与正常对照组相比,手术对照组、手术+右旋糖酐铁组骨小梁相对体积、骨小梁厚度、骨小梁数量明显减小(P<0.05),骨小梁分离度、结构模型指数增加(P<0.05);与手术+右旋糖酐铁组比较,手术对照组骨小梁相对体积、骨小梁厚度、骨小梁数量增加(P<0.05),骨小梁分离度、结构模型指数相减小(P<0.05);②番红O染色显示,与正常对照组、手术对照组相比,手术+右旋糖酐铁组小鼠软骨表面缺损、破裂严重,表层软骨细胞数量明显减少,国际骨关节炎研究学会半定量评分更高,提示其关节炎严重程度更高;③普鲁士蓝染色显示,手术+右旋糖酐铁组小鼠滑膜中可见大量被染成深蓝色的铁沉积颗粒,正常对照组与手术对照组均无明显铁沉积颗粒;④结果显示,铁超载能够加重膝骨关节炎的严重程度,并且增加软骨蛋白多糖成分的丢失和软骨下骨的骨丢失,明确了铁超载与膝骨关节炎的关系。

超顺磁性纳米铁标记大鼠骨髓基质干细胞的实验研究

目的研究超顺磁性纳米铁粒子(superparamagnetic iron nanoparticle,SPIO)标记骨髓基质干细胞(bone mar-row stem cells,BMSCs)对其存活、增殖能力的影响,确定最佳标记浓度。方法分离、纯化4周龄SD大鼠的BM-SCs,分别用15、25、50 mg/L浓度的SPIO标记1×106个BMSCs分别作为实验组1、实验组2、实验组3,未做标记的BMSCs为对照组。用普鲁士蓝染色法和透射电镜鉴定SPIO-BMSCs的效率,台蓝染色法观察SPIO-BMSCs的存活,MTT比色法检测SPIO-BMSCs增殖活性。结果普鲁士蓝染色显示,随SPIO浓度的升高,标记的细胞染色程度逐渐加深。透射电镜检查显示细胞内含致密铁颗粒。实验组1的细胞增殖性与对照组差异无统计学意义(P>0.05),实验组2和实验组3与对照组相比,死亡细胞增多,细胞增殖性受到明显抑制(P<0.05)。结论培养基SPIO浓度在15 mg/L时,SPIO对BMSCs标记效率较高,且不影响其存活、增殖。

H.E染色和普鲁氏染色在动物铁过负荷诊断的比较

本试验研究比较铁过负荷猪的淋巴结、脾脏、肝脏、肺脏、肾脏的H.E染色、革兰氏染色的变化。

葡聚糖包裹超顺磁性氧化铁纳米材料用于关节软骨磁共振T2-Map成像研究

本研究制备了粒径(18±2)nm的葡聚糖包裹的超顺磁性氧化铁纳米颗粒,作为磁共振T2造影剂,对兔关节软骨进行增强磁共振T2-Map成像,并分析注射前后24 hT2弛豫时间的变化,发现T2弛豫时间均下降。行组织病理学普鲁士兰染色,发现软骨基质及细胞内均有氧化铁纳米颗粒的存在,说明葡聚糖包裹超顺磁性氧化铁纳米材料可应用于关节软骨磁共振增强成像。

右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化合物-氟尿嘧啶转运模型在正常大鼠体内分布的磁靶向性

目的研究右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化合物-氟尿嘧啶转运模型在大鼠体内药物分布的磁靶向性。方法建立高效液相色谱内标法,测定给药后大鼠体内各组织的氟尿嘧啶分布浓度;用紫外分光光度法、原子吸收法及等离子体发射光谱法测定给药干预后大鼠各组织铁的分布浓度,通过普鲁士蓝铁染色直观评价铁的组织分布差异。结果高效液相色谱内标法回收率高、精密度好;经腹腔注射给药后,背右侧及头部设立磁场部位的药物浓度明显高于其他远离磁场的组织部位,数值分布有统计学意义,证明三级复合模型具有理想的磁靶向运转效果。结论在外加磁场的作用下,右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化合物-氟尿嘧啶转运模型能在靶向部位明显富集,表现良好的磁靶向性。