离子迁移谱法快速检测保健食品中添加的5型磷酸二酯酶抑制剂

目的:建立快速检测保健食品中非法添加的西地那非、那红地那非、他达拉非、氨基他达拉非、伪伐地那非、那莫西地那非、二乙胺他达拉非7种5型磷酸二酯酶抑制剂的离子迁移谱方法。方法:采用离子迁移谱正离子模式检测西地那非、那红地那非、他达拉非、氨基他达拉非、伪伐地那非、那莫西地那非、二乙胺他达拉非7种5型磷酸二酯酶抑制剂,离子源电压为2.5 k V,迁移管电压为7.5 k V,进气口温度和迁移管温度均为180℃。利用所建立方法对20批市售缓解体力疲劳类保健食品进行非法添加筛查,并通过LC-MS进行确认。结果:7种5型磷酸二酯酶抑制剂迁移时间在13.8~16.2 ms之间,检出限为0.05~2μg·m L^(-1)。20批市售样品中13批检出西地那非,2批检出他达拉非,2批同时检出西地那非与他达拉非,与LC-MS检测结果一致。结论:离子迁移谱检测方法快速、灵敏,可以作为缓解体力疲劳类保健食品中非法添加的西地那非、那红地那非、他达拉非、氨基他达拉非、伪伐地那非、那莫西地那非、二乙胺他达拉非7种5型磷酸二酯酶抑制剂的快速初筛方法。

中药及保健食品中PDE_5抑制剂检测的再研究

目的：尝试优化和建立可同时快速检测多种PDE5抑制剂类非法添加化学成分的方法。方法：分别采用TLC法、HPLC-PDA-MS联用及UPLC技术。TLC法：使用硅胶GF254薄层板，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（40：40：15：12）下层溶液为展开剂，254 nm和366 nm下观察。HPLC-PDA-MS法：采用Inertsil ODS-3（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以0.01 mol·L^-1乙酸铵（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱（0～17 min，36%B；17～18 min，36%B→42%B；18～27 min，42%B；27～28 min，42%B→52%B；28～43 min，52%B；43～44 min，52%B→80%B），流速1 mL·min^-1，检测波长229 nm，UV光谱扫描（200～400 nm）;正离子模式，氮气为雾化和干燥气体，毛细管电压3 kV，锥孔电压60 V，气体流量80 L·h-1，离子源温度120℃，去溶剂温度200℃，去溶剂气体流量350 L·h-1。UPLC法：采用Waters BEH柱（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）色谱柱，以甲醇（A）-水（B）为流动相，梯度洗脱（0～3 min，90%B→65%B；3～10 min，65%B→50%B；10～13 min，50%B→25%B；13～16 min，25%B；16～20 min，25%B→90%B），流速0.4 mL·min^-1，检测波长229 nm，UV光谱扫描（200～400 nm）。结果：在TLC检测中添加了366 nm作为检测波长，提高了检测的灵敏度与准确度;优化HPLC-PDA-MS法，获得了更好的8个PDE5抑制剂色谱峰的分离度;建立了快速准确的UPLC法，可在13 min内实现6个PDE5抑制剂的快速分离与检测。结论：该法可用于中药及保健食品中非法添加PDE5抑制剂类化合物的检测，具有高效、简便、专属性强等特点。

定量核磁共振法测定4种磷酸二酯酶-5抑制剂的含量

目的:建立定量核磁共振法(qNMR)测定那莫西地那非、豪莫西地那非、硫代艾地那非和伪伐地那非4种磷酸二酯酶-5(PDE-5)抑制剂的含量。方法:采用Bruker Ascend 500 MHz核磁共振仪采集一维定量氢谱,90°脉冲,延迟时间为20 s,采样次数为64次,测定温度25℃,以对苯二甲酸二甲酯为内标,氘代氯仿(CDCl3)为溶剂,对4种PDE-5抑制剂进行定量研究。结果:样品与内标物定量峰分离良好,4种成分在各自线性范围内线性关系良好(R2>0.999 2),进样精密度和重复性好。那莫西地那非、豪莫西地那非、硫代艾地那非和伪伐地那非的含量(n=6)分别99.2%(RSD=0.27%)、99.4%(RSD=0.28%)、99.1%(RSD=0.18%)和99.3%(RSD=0.24%),与质量平衡法测定结果比较,两者基本一致。结论:本文建立的q NMR法测定4种PDE-5抑制剂的含量准确可靠,简便快速,为该类成分的含量测定和对照品的标定提供了新的测定方法。

实心核颗粒色谱分离-HPLC-MS/MS法同时测定性保健品中非法添加15种壮阳类化学成分

目的建立了性保健品中非法添加15种壮阳类化学成分的实心核颗粒色谱分离-HPLC-MS/MS检测方法。方法以高色谱性能的实心核颗粒色谱柱CORTECS-C18(150 mm×4.6 mm,2.7μm)分离,串联四级杆质谱仪检测,MRM模式进行定性定量分析,样品以甲醇为溶剂超声提取,检测添加在性保健品中的甲磺酸酚妥拉明、那红地那非、红地那非、伐地那非、西地那非、羟基豪莫西地那非、豪莫西地那非、氨基他达拉非、他达拉非、硫代艾地那非、伪伐地那非、那莫西地那非、甲睾酮、司坦唑醇和达那唑共15种化学成分。结果 15种壮阳类化学成分质谱检测的分离度较好,线性范围宽,相关性好,r2≥0.995 4;方法精密度以6次测定值的RSD表示,为0.9%~3.3%;方法回收率用3个质量浓度进行添加实验,回收率为88.3%~109.5%,RSD为0.9~5.2%;定量限范围为0.015~0.30μg/m L;日内精密度和日间精密度的RSD分别为0.9%~4.2%和1.0%~4.5%;25批次性保健品中检出阳性样品20批次,检出成分均为西地那非,不合格率达80%。结论本方法通用性强,操作简单,可作为性保健品中非法添加15种壮阳类化学成分的有效检测方法。

UPLC-Q-TOF-MS法快速检测补肾壮阳类中成药中11个PDE5型抑制剂类药物

目的：建立补肾壮阳类中药中11个磷酸二酯酶5型（PDE5型）抑制剂类药物的超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）快速检测方法。方法：样品经乙腈超声提取后,应用Agilent Extend-C18（1.8μm,2.1 mm×50 mm）色谱柱,以乙腈（A）-含0.1%醋酸的5 mmol·L-1醋酸铵水溶液（B）为流动相,梯度洗脱（0～3.5 min,27%A;3.5～12 min,27%A→69%A;12～14 min,69%A;14～20 min,27%A）,流速0.20 mL·min-1,采用四极杆飞行时间质谱（Q-TOF-MS）检测器,电喷雾离子源（ESI）,毛细管电压（capillary voltage）为4.0 kV,碎裂电压（Fragmentor）为180 V,正离子全扫描检测,扫描范围为m/z 100～1500。结果：那红地那非、红地那非、伐地那非、羟基豪莫西地那非、西地那非、豪莫西地那非、氨基他达拉非、他达拉非、硫代艾地那非、伪伐地那非、那莫西地那非11个化合物14 min内即可完成检测,在50～10000μg·L-1范围内线性相关系数均大于0.999;10倍定量限（LOQ）添加水平的加样回收率在93.8%～102.1%之间,RSD在2.6%～4.8%之间。结论：该方法操作简便、快速,经方法学验证可用于中成药中非法添加PDE5型抑制剂的快速检测。