葛花提取物通过激活PPARγ上调ABCA1的表达而抑制THP-1源性泡沫细胞形成

[目的]探寻葛花提取物(PFE)对巨噬细胞源性泡沫细胞脂质蓄积的影响。[方法]通过MTT法筛选PFE对THP-1源性泡沫细胞的作用浓度,采用油红O染色和胆固醇检测试剂盒检测细胞内脂质蓄积情况,采用胆固醇流出试剂盒检测细胞的胆固醇流出水平,使用RT-qPCR和Western blot检测mRNA和蛋白表达。[结果]PFE显著降低THP-1源性泡沫细胞内的脂质蓄积。PFE不影响CD36、清道夫受体AⅠ(SR-AⅠ)、固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)及3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)的mRNA表达,但能上调ATP结合盒转运体A1(ABCA1)的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),促进巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出(P<0.01)。PFE可以激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的活性(P<0.01)及上调其mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。与PFE对照组相比,加入GW9662处理后PPARγ和ABCA1的蛋白表达水平均下降(P<0.01),胆固醇流出水平降低(P<0.01)。[结论]PFE可显著改善THP-1源性泡沫细胞内的脂质蓄积,通过PPARγ上调ABCA1表达及其介导的胆固醇流出抑制泡沫细胞形成。

瑶药“野葛花”的抗病毒和抑菌活性

目的:研究瑶药“野葛花”的抗病毒和抑菌活性。方法:采用活性追踪分离的方法分离瑶药“野葛花”的活性成分,分别用细胞病变抑制法和微量稀释法测定分离所得的各部位及成分的抗病毒活性和抑菌活性。结果:从“野葛花”中分离得到3个黄酮化合物:染料木素、鸢尾甙元和鸢尾甙。其中,染料木素和鸢尾甙元对呼吸道合胞病毒(RSV)有较好的抑制作用,两者的半数抑制浓度(IC50,质量浓度)分别为12.5和30μg/mL,选择性指数(SI)分别为36和16.7。同样,染料木素和鸢尾甙元也有一定的抑菌作用。而鸢尾甙不显示抗病毒和抑菌活性。结论:染料木素、鸢尾甙元和鸢尾甙均为首次从“野葛花”中分离得到。且染料木素和鸢尾甙元有较好的抗病毒活性和一定的抑菌活性。

野葛花醇提物中异黄酮含量及其抗氧化活性测定

以葛花苷为标准品,对野葛花醇提物的氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物及水溶物4部分中的异黄酮含量进行测定,并采用DPPH·法对各萃取物进行自由基清除实验.结果显示,(1)氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物及水溶物4部分的异黄酮含量分别为35.27%、53.42%、52.13%和2.34%.(2)抗氧化实验显示,4部分清除DPPH·的IC50值分别为252、49、197和344μg/mL.(3)相关性分析表明,野葛花醇提物各萃取部分的抗氧化活性主要来自于其中含有的异黄酮类化合物.研究表明野葛花醇提物的乙酸乙酯和正丁醇萃取部分异黄酮含量较高;氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物及水溶物4部分对DPPH自由基均有一定的清除作用,其中以乙酸乙酯萃取物的效果最佳;表明异黄酮是一种天然的抗氧化剂,具有较强的抗氧化作用.

RP-HPLC测定野葛花中3种异黄酮

采用反相高效液相色谱法测定野葛花中3种异黄酮化合物葛花苷、次葛花苷及尼泊尔鸢尾异黄酮.色谱柱为ODS柱,以甲醇-1.0g/L柠檬酸水溶液为流动相,紫外检测波长为265 nm.3种异黄酮化合物线性范围均在0.02～0.2mg/mL,它们的平均回收率分别为99.90%,100.57%和99.80%（n=5）,RSD分别为0.79%,0.60%和0.70%（n=5）.

不同产地葛花主要营养成分的比较

为探索湖北、广东、广西和浙江4种不同来源葛花的营养成分,采用常规方法测定葛花中蛋白质、脂肪、可溶性多糖、灰分、水分和Vc含量,ICP-OES法测定了葛花中矿物元素的含量,紫外分光光度法测定了葛花中总黄酮的含量。结果表明,葛花中富含Ca,Mg,其平均含量分别为1.0368×1043、817.32μg/g。湖北葛花中Mg、Mn含量最高,分别为4503.571、11.76μg/g;浙江葛花Ge含量最高,为335.18μg/g,广西葛花总黄酮含量最高,为6.60%。不同产地葛花蛋白质、粗脂肪、水分含量存在差别。

野葛花异黄酮化学成分研究

从野葛花中分离得到7个异黄酮类化合物,经理化和光谱鉴定分析为:尼泊尔鸢尾异黄酮(1)、尼泊尔鸢尾异黄酮7-O--βD-葡萄糖苷(2)、葛花苷(3)、染料木素(4)、刺芒柄花素(5)、大豆甙元(6)和8-C-芹菜糖(1→6)-葡萄糖大豆甙(7)。

一种含有富里酸及腺苷的葛花解酒产品的研制

富里酸腺苷、葛花提取液与富里酸复配解酒产品,具有解酒和保健的双重功效。采用微波和超声波协同提取葛花水溶物;并将从富里酸提取液中筛选出的有益菌-富里酸拟青霉菌进行培养,采用微波和超声波协同提取富里酸拟青霉菌中的腺苷,利用高效液相色谱法进行鉴定,得出腺苷含量;将葛花提取液、富里酸及拟青霉菌腺苷提取液进行复配,制备解酒产品。通过醉酒小鼠"翻正反射"实验,证明产品的解酒防醉功效,获得最佳的复配条件为葛花提取液∶拟青霉菌腺苷提取液∶富里酸=1∶2∶4(体积比),其中葛花提取液浓度为5.872 g/L,腺苷的浓度为0.4 g/L;富里酸的浓度3 g/L。

野葛花解酒作用机理研究

目的:探讨野葛花提取物解酒作用机理,为中药解酒保肝药物的开发提供依据。方法:观察比较野葛花提取物与解酒护肝胶囊对小鼠肝脏匀浆中ADH、ALDH、SOD、GSH-PX的酶活力的影响[1]。结果:野葛花提取物能够明显提高ADH、ALDH、SOD、GSH-PX活力。结论:野葛花提取物通过提高ADH、ALDH、SOD、GSH-PX活力以达到其解酒的作用,进而对抗酒精性肝损伤。

搅拌型葛花汁无糖酸乳的研制

以葛花水提取液、木糖醇、纯牛乳为主要原料,采用正交试验优化搅拌型葛花汁酸乳的最佳发酵工艺条件和配方。结果表明,搅拌型葛花汁无糖酸乳的最佳生产工艺及配方为:葛花水提取液5%,木糖醇6%,发酵剂接种量4%,发酵时间3h,产品风味独特,具有葛花汁、乳香特有复合香味、组织均匀、营养丰富。

瑶药野葛花中6种无机元素的测定

用原子吸收光谱法测定野葛花原生药、野葛花汤剂中的 Ca、Mg、Cu、Zn、Fe、Mn等 6种无机元素含量。结果表明 ,原药和水煎液中 Ca、Mg含量比较丰富 ;各种元素的煎出率存在着较大的差异 ,其中 Cu、Zn、Fe的煎出率较高 ,Zn最高 ,达到了 82 .5 6 % ;Ca最低 ,为 5 .5 8%。并且将其结果与葛根的无机元素做了比较。为探讨无机元素与中药药效之间的关系提供了基础数据。

葛花解酲汤的现代相关研究与运用

酒在社会生活中扮演了极其重要的角色,其中酗酒和酒精中毒者也随之增多,成为危害身体健康的一大因素。葛花解酲汤作为千古解酒名方之一,受到众多相关人士的重视,被加以广泛研究运用。本文探讨了葛花解酲汤目前的研究与应用现状,为今后的相关实验研究提供依据。

野葛花葛根素的提取及稳定性研究

以野葛花为研究对象,采用超声辅助醇提法提取其葛根素,在单因素试验基础上,以葛根素得率为指标,通过响应面设计,对野葛花葛根素的提取条件进行优化,并研究酸碱度、温度、金属离子和光照对野葛花葛根素稳定性的影响。结果表明,野葛花葛根素最佳提取工艺条件为:提取温度为69℃,p H为7.1,料液比为1∶20;葛根素的得率为126.153mg/kg。葛根素的稳定性实验结果表明:酸碱度为中性时葛根素较稳定;Na^+、Mg^(2+)、Fe^(3+)离子不影响葛根素的稳定性,Cu^(2+)对葛根素稳定性的影响较大;常温下自然光照利于葛根素的保存,避光会对葛根素的稳定性造成一定的影响。因此,葛根素的贮存及使用可在常温自然光下进行,但是应注意避免和Cu^(2+)离子存在的环境接触。

微波助溶提取云台山野葛花总黄酮的研究

用微波方法提取野葛花中有效成分,通过紫外分光光度法和HPLC法测定总黄酮和葛根素含量,研究了微波条件对野葛花有效成分提取的影响。结果表明:温度体系低于60℃,微波功率500 W,辐射时间8 min,野葛花总黄酮的提取率达95%以上。与传统加热回流提取法相比,微波萃取法不仅速度快,而且产量高。

芊玖舒胶囊体外抗癌活性初筛

(目的)比较芊玖舒胶囊组方中的单方药材由水和70%乙醇提取的粗提物体外抗癌活性,以确定其抗癌的有效单方粗提物。(方法)采用MTT显色法观察芊玖舒胶囊单方药材水和70%乙醇提取的粗提物对PC3、HEL、K562、wm9的生长抑制作用并用显微镜观察其形态改变。(结果)芊玖舒胶囊复方中的甘草、葛根及乌梅的粗提物对人红白血病细胞HEL的增殖具有抑制作用并能影响其形态,且有剂量依赖的关系。

畲药葛花治疗非酒精性脂肪性肝病的临床观察

目的:观察葛花对非酒精性脂肪性肝病患者的疗效。方法:随机抽取门诊非酒精性脂肪性肝病患者59例,随机分为对照组和实验组,实验组给予辛伐他汀片+葛花颗粒治疗(30 g,2次/d),对照组给予辛伐他汀片+维生素C片+维生素E片治疗,8周为1个疗程。结果:(1)治疗组本组与治疗后相比较,GGT、ALT、AST、TG、TC均有明显统计学差异(P<0.01);(2)与对照组治疗后相比,治疗组GGT、ALT、AST、TG、TC、SOD、MDA及B超变化均有统计学差异(P<0.05)。(3)与对照组相比,治疗组的总有效率及B超有效率均有统计学差异(P<0.05)。结论:葛花对非酒精性脂肪性肝病患者有明显的治疗作用。

野葛花中葛花苷紫外分光光度法检测

采用紫外-分光光度法测定野葛花中异黄酮化合物葛花苷的含量,紫外检测波长为265mm。葛花苷在 0．010-0．040mg／mL范围内呈良好线性关系,平均加样回收率为101．1％(n=4),平均RSD为0．69％(n=4)。

葛根、葛花、枳椇子混合物对小鼠急性酒精中毒醒酒作用的研究

目的探讨中药葛根、葛花、枳椇子混合物对小鼠急性酒精中毒的醒酒效果。方法采用酒精灌胃法建立小鼠急性酒精中毒模型,观察混合物不同配比对小鼠的醒酒效果,选择最佳配比;按最佳配比将小鼠分为低剂量组和高剂量组,通过测定小鼠的耐受时间、醉酒时间、血液中的乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶的活性观察葛根、葛花、枳椇子混合物的醒酒效果。结果葛根、葛花、枳椇子混合物能够增加小鼠对酒精的耐受时间,同时缩短小鼠的醉酒时间,降低血液中的乙醇浓度,提高肝中乙醇脱氢酶的活性。结论葛根、葛花、枳椇子混合物对小鼠急性酒精中毒具有醒酒作用。

葛根汤颗粒与葛提取物对小鼠急性酒精性肝损伤的影响

目的研究葛根汤颗粒与葛提取物对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用,并探讨其可能机制,从而为临床应用提供依据。方法将60只雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯滴丸组(阳性药组)、葛根汤颗粒组、葛根水提物组、葛花水提物组。除正常组外,其余各组每天灌胃52度二锅头酒,建立急性酒精性肝损伤模型;造模同时,灌胃给予受试药,每日1次,连续14d。末次给药后各组禁食不禁水,12h后摘眼球取血,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量、碱性磷脂酶活性(ALP)。测定肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果葛根汤颗粒能明显降低肝组织中MDA含量,降低血清中ALT、AST、TC、TG、ALP水平及肝脏系数,提高肝组织中SOD活性。葛根水提物能降低肝组织中MDA含量,降低血清中ALP水平及肝脏系数,提高肝组织中SOD活性。葛花水提物能降低肝组织中MDA含量和肝脏系数,提高肝组织中SOD活性。结论葛根汤颗粒对急性酒精性肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抗氧化有关;葛提取物对急性酒精肝有不同程度的保护作用。

葛花急性毒性及遗传毒性试验研究

目的研究葛花的急性毒性和遗传毒性。方法开展葛花对小鼠的急性毒性和遗传毒性实验(Ames、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核和小鼠精子畸变试验),观察葛花的毒理学反应。结果葛花急性毒性的最大耐受剂量>30 g/kg BW,属于无毒级别;Ames试验结果显示为阴性;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验结果显示为阴性;小鼠精子畸变实验结果为阴性。结论葛花基本无毒性。

葛花异黄酮提取工艺及其防醉功效的研究

以单因素实验考察了浸提时间、浸提温度、固液比、乙醇浓度四因素对葛花异黄酮提取率的影响。通过正交实验确定了最佳工艺参数为:70%乙醇溶液,固液比1∶15,75℃水浴中浸提2h。以小鼠为实验对象,通过毒理学实验和防醉功效的研究,证明葛花异黄酮无毒性且可以显著提高酒后小鼠血清中乙醇脱氢酶(ADH)活力,从而加速酒精在体内的分解代谢。