多重耐药鲍曼不动杆菌耐药谱及耐消毒剂qacEΔ1基因分析

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌的临床分布、耐药谱特征及耐消毒剂基因qacEΔ1的携带情况,为医院感染防控提供实验室依据。方法收集2013年10月至2014年8月临床标本中分离的鲍曼不动杆菌共56株,分别采用微量肉汤稀释法和聚合酶链反应(PCR)进行药物敏感性试验和耐消毒剂基因qacEΔ1的检测;随机抽取qacEΔ1基因阳性标本进行序列测定。结果临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌主要分离于痰液和分泌物标本,分别占70.7%和15.5%;病区主要来自重症监护病房和呼吸内科,分别占41.1%和17.9%。药敏试验除对头孢哌酮/舒巴坦(32.1%)的耐药率较低外,对其余抗菌药物普遍耐药。耐消毒剂qacEΔ1基因检测出50株阳性标本,携带率为89.3%。测序结果与GeneBank中相应基因序列相比较,同源性为98%。结论多重耐药鲍曼不动杆菌以呼吸道为主要感染途径且病区集中趋势明显。耐消毒剂qacEΔ1基因携带率高,加强监测多重耐药鲍曼不动杆菌的消毒剂抗性,对临床科学使用消毒剂具有重要意义。

鲍曼不动杆菌中耐消毒剂基因qacEΔ1-sul1和Ⅰ类整合酶的携带情况调查

目的调查分析我院临床分离的鲍曼不动杆菌菌株中耐药基因的分布情况及部分多重耐药株的流行病学特点。方法收集2016年1~6月我院院内分离的150株鲍曼不动杆菌,MIC法测定其对抗生素的敏感性;将对三类以上抗生素耐药的菌株定义为多重耐药菌,运用PCR法检测qac EΔ1-sul1和int I 1基因在所分离菌株中的分布,并用PFGE法对其中多重耐药鲍曼不动杆菌进行分子分型。结果鲍曼不动杆菌敏感率排行前三的药物为妥布霉素(50.0%)、庆大霉素(44.2%)和亚胺培南(42.4%);84株多重耐药鲍曼不动杆菌中排行前三的药物为美罗培南(33.3%)、头孢哌酮(33.3%)和左氧氟沙星(13.1%);qac EΔ1-sul1和int I 1在鲍曼不动杆菌中的携带率为46.2%(85/150)和58.0%(88/150);在多重耐药鲍曼不动杆菌中的携带率为59.5%(49/84)和83.4%(70/84)。多重耐药鲍曼不动杆菌经PFGE分型可分为14个克隆,其中A克隆最多见,在ICU、呼吸科和急诊病房均存在集中流行,神经内科和老年科以C克隆多见,其余均为散在流行。结论 qac EΔ1-sul1和int I 1在鲍曼不动杆菌中的携带率很高,在多重耐药株中更高,说明I类整合子是鲍曼不动杆菌产生耐药的原因之一,研发新的消毒剂以消除鲍曼不动杆菌在院内的流行迫在眉睫,此外同一克隆株在同一病区的集中流行和在病区间的交叉流行提示应采取进一步的感染控制和隔离措施。

多重耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因及qacEΔ1基因检测研究

目的探讨多重耐药铜绿假单胞菌(Pa)的耐药机制,为临床使用氨基糖苷类药物治疗Pa感染和消毒灭菌工作提供参考。方法采用琼脂稀释法从临床分离的Pa中筛选出35株多重耐药菌株,用PCR方法检测这些菌株中氨基糖苷类修饰酶编码基因及qacEΔ1基因存在状况。结果35株Pa中aac(3)Ⅱ、aa(6′)Ⅱ、ant(3″)Ⅰ和ant(2″)Ⅰ等5种氨基糖苷类修饰酶基因检出率分别为48.6%、40.0%、54.3%、45.7%和60.0%,绝大多数菌株携带2种或2种以上的氨基糖苷类修饰酶基因,而qacEΔ1基因检出率也达到94.3%。结论铜绿假单胞菌产生氨基糖苷修饰酶与该菌的多重耐药有密切关系,临床治疗Pa感染应参考药敏试验结果,慎选氨基糖苷类药物;同时在消毒灭菌工作中,不宜继续使用季铵盐类、双胍类等作为常用消毒剂。

外科重症监护病房细菌耐药性与qacEΔ1-sul1基因检测

目的研究外科重症监护病房分离细菌构成、耐药性特征以及革兰阴性杆菌消毒剂-磺胺耐药相关基因qacE△1-sul1的携带情况,为合理使用抗菌药物和消毒剂提供依据。方法统计分析外科重症监护病房各种标本分离细菌及其药敏试验结果,筛选革兰阴性杆菌实验菌株检测qacE△1-sul1基因。结果外科重症监护病房分离菌株大部分对常用抗菌药物呈多重耐药,消毒剂-磺胺耐药相关基因qacE△1-sul1的携带率高达80.6%。结论外科重症监护病房是院内感染的高发科室,控制抗菌药物高耐药率和防范携带耐消毒剂基因多药耐药菌定植及感染,是医院感染控制的重中之重。

Correlation of the antiseptic resistance in Acinetobacter baumannii and the antiseptic resistance gene qacEΔ1 located in classⅠintegron

In the past decade, uses of antiseptics and disinfectants in hospitals and other health care centers are rather common, but the chance to develop resistance to antiseptics and disinfectants is also increased. Acinetobacter baumannii is one of the opportunistic bacteria involving in the nosocomial infection. In the present study, the correlation of the antiseptic resistance in A. baumannii and the antiseptic resistance gene qacEΔ 1 was investigated by means of determination of MICs. Meanwhile, the MICs of glutaraldehyde, chlorhexidine, benzalkonium bromide, iodophor and trichloroisocyanurate to 80 clinical isolates of A. baumannii were detected by tube dilution assay and the resistance genes intll and qacE Δ 1 in these isolates were amplified by PCR and verified by DNA sequencer. It was found that the MIC50 for these 5 antiseptics tested were 32, 8, 8, 4 and 1 μg/ml respectively, and the detection rates of intll and qacEΔ1 gene were 60.0% and 77.6% respectively. In addition, 55% of the 80 isolates simultaneously possessed both intll and qacEΔ1 gene, and the percentage of antiseptic resistance of A. baumannii carring both genes to benzalkonium bromide were higher than that without these two genes, however, there was no significant difference between intll and qacEΔ1 gene. The result in bactericidal efficiency assay indicated that chlorhexidine could still produce rapid and strong bactericidal effect at concentration of 1 MIC after 10 rain exposure. These results suggest that the antiseptic resistance of A. baumannil to various antiseptics is correlated with the presence of the antiseptic resistance genes qacEΔ 1 in bacteria, thus warning that the increase of the antiseptic resistance should not be ignored and the relative high concentration or prolonged application time is required to achieve a sufficient bactericidal effect.

多药耐药鲍氏不动杆菌耐消毒剂qacEΔ1基因检测研究

目的了解医院分离的多药耐药鲍氏不动杆菌耐消毒剂qacEΔ1基因分布,为医院规范消毒技术和减少鲍氏不动杆菌感染提供科学依据。方法收集医院2013年8月-2013年11月分离的非重复多药耐药鲍氏不动杆菌26株,采用Phoenix100微生物全自动鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验;采用PCR方法检测qacA/B、qacC、qacEΔ1、qacG、qacJ基因;药敏数据采用WHONET5.6软件进行统计分析。结果 26株鲍氏不动杆菌标本来源以痰液为主,占84.7%;科室分布内科ICU检出最多,占53.9%;检出qacEΔ1基因阳性19株,阳性率73.1%;qacA/B基因2株,阳性率7.7%;未检出qacC、qacG、qacJ基因;26株多药耐药鲍氏不动杆菌对四环素、阿米卡星、庆大霉素耐药率分别为73.1%、73.1%、96.2%,对其余11种抗菌药物耐药率均为100.0%,仅对多黏菌素无耐药株,呈现多药耐药性。结论医院鲍氏不动杆菌耐消毒剂qacEΔ1基因携带率已非常高,规范消毒技术和制定标准化操作程序,以控制或延缓细菌对耐消毒剂基因的产生和蔓延。

部队医疗机构室内空气中细菌抗消毒剂基因qacEΔ1检测

目的研究西北地区东片部队医疗机构室空气细菌抗消毒剂基因qacEΔ1的阳性率,为部队医疗机构空气消毒及医院感染预防治疗提供指导依据。方法用PCR方法检测空气中分离的细菌的qacEΔ1基因。结果 98株细菌中有23株携带抗消毒剂基因qacEΔ1,阳性率为23.5%;大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌qacEΔ1的检出率分别为36.7%、36.4%、27.8%、20.0%、10.0%;白色假丝酵母菌、蜡样芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞、流感嗜血菌未检出qacEΔ1基因。结论西北地区东片部队医疗机构空气中的细菌抗消毒剂基因qacEΔ1阳性率不高,但应注意消毒剂的交替使用。

西北地区东片部队医疗机构物表细菌抗消毒剂基因qacEΔ1检测研究

目的研究西北地区东片部队医疗机构物体表面细菌抗消毒剂基因qacEΔ1的阳性率。方法用PCR方法检测物体表面分离的细菌的qacEΔ1基因。结果 167株细菌中有69株细菌检出了抗消毒剂基因,总阳性率为41.3%。蜡样芽孢杆菌、白色念珠菌、鲍曼不动杆菌中未检出qacEΔ1基因。在阳性菌株中,大肠杆菌的阳性率最高,为60.4%。结论西北地区东片部队医疗机构物体表面细菌抗消毒剂基因qacEΔ1阳性率较高,在消毒中不应广泛使用季铵盐类消毒剂。

医院感染革兰阴性杆菌耐消毒剂基因研究

目的了解浙江湖州解放军第98医院临床分离的医院感染革兰阴性杆菌中,耐消毒剂基因qacE△1存在状况。方法采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法,分析147株革兰阴性杆菌(分别为鲍氏不动杆菌63株、铜绿假单胞菌30株、阴沟肠杆菌20株、嗜麦芽寡养单胞菌19株、黄杆菌属细菌15株)中qacE△1基因。结果147株革兰阴性杆菌qacE△1基因阳性96株,总阳性率为65.3%;阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、嗜麦芽寡养单胞菌和黄杆菌属细菌qacE△1基因阳性株数分别为17(85.0%)、25(83.3%)、52(82.5%)、2(10.5%)、0。结论临床分离的医院感染革兰阴性杆菌中,耐消毒剂基因qacE△1携带率比较高,应引起我国医院消毒界的重视。

国内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因特征Meta分析

目的：采用 Meta 分析，综合评价中国耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐消毒剂基因特征。方法计算机检索中国知网（CNKI）、万方医学网、PubMed、EMbase 等数据库，查找中国 MRSA 耐消毒剂基因特征的相关文献，按照统一的纳入与排除标准筛选文献后，采用 R 3．1．1软件、RevMan 5．3软件进行 Meta 分析。结果共纳入42篇文献，我国16个省（直辖市）的2671株 MRSA 耐消毒剂基因情况。Meta 分析结果显示：qacA／B、qacC、qacJ 和norA 基因的合并检出率分别为28．03％（95％CI ：20．03％～36．48％）、8．94％（95％CI ：1．27％～ 22．49％）、17．74％（95％CI ：2．25％～43．39％）和17．90％（95％CI ：0．00％～76．38％）。qacEΔ1、qacG、qacH 的检出率均为0。中国淮河以南、以北地区 qacA／B 基因的合并检出率分别为27．12％（95％ CI ：19．03％～36．06％）和30．14％（95％CI ：13．11％～50．63％），南北地区差异无统计学意义（Z ＝0．59，P ＞0．05）。东部、中部、西部经济区域的qacA／B基因的合并检出率分别为29．95％（95％CI ：21．85％～38．73％）、22．65％（95％ CI ：10．08％～38．47％）和26．94％（95％CI ：3．78％～60．95％），组间差异均无统计学意义（P ＞0．05）。医院获得性 MRSA 与社区获得性 MRSA qacA／B 基因检出率比较，差异无统计学意义[OR 及95％CI 为0．69（0．14～3．31），P ＝0．64]。MRSA qacA／B 基因检出率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）[OR 及95％CI 为4．99（3．53～7．06），P ＜0．01]。结论中国MRSA 耐消毒剂基因检出率高，MRSA 耐消毒剂基因是一个常见且严重的问题，应加强耐消毒剂基因的监测，合理使用消毒剂。

嗜麦芽寡养单胞菌耐消毒剂基因qacE△1的检测及分子流行病学研究

目的了解近4年嗜麦芽寡养单胞菌(SMA)医院感染特征及耐消毒剂基因的分布,进一步提高对其医院感染特征的认识,改进消毒灭菌的方法,降低医院感染率。方法对2004年1月-2007年12月医院报告的165例个案病例进行统计分析,用PCR的方法进行耐消毒剂基因的检测,脉冲场凝胶电泳(PFGE)全DNA指纹图谱技术对菌株进行分子分型,确定菌株的亲缘关系。结果SMA是一种重要的医院感染病原菌,年老、严重的基础疾病、住院时间长、侵入性操作为其易感因素;感染部位以肺部感染为主,占全部病例的87.9%,对SMA治疗临床常用抗菌药物敏感性>80.0%的有米诺环素、复方新诺明、左氧氟沙星;60株SMA耐消毒剂基因的阳性株数为8株(13.3%),对这8株菌进行PFGE同源性分析,结果表明在呼吸ICU有两型同一克隆株的传播。结论SMA是一种重要的医院感染病原菌,由于的它的多药耐药性,临床治疗困难,由于耐消毒剂基因的检出及同克隆株的传播,提示临床应加强消毒效果的监测。

多重耐药铜绿假单胞菌耐消毒剂基因存在状况

目的了解铜绿假单胞菌(Pa)耐消毒剂基因qacEΔ1-sul1的存在状况。方法从临床分离的Pa中筛选出多重耐药Pa,采用聚合酶链反应(PCR)检测qacEΔ1-sul1基因。结果20株多重耐药Pa中17株为阳性。结论大部分多重耐药Pa携带qacEΔ1-sul1基因,携带率高。

耐药铜绿假单胞菌携带的整合子及其耐药基因盒检测分析

整合子系统是铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）产生耐药的重要因素，其包括5’保守序列（CS，包括整合酶基因int、重组位点attⅠ和1个启动子）和3’CS（由qacEΔ1和sull组成）；整合子携带的耐药基因盒包括1个单独的基因和1个下游的重组位点attC；

生活饮用水中总大肠菌群分离株消毒剂耐药基因检测

目的了解生活饮用水中总大肠菌群分离株耐消毒剂基因qacEΔ1的存在情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测102株总大肠菌群分离株(来自2012年1—10月石家庄市城乡生活饮用水总大肠菌群阳性水样)的qacEΔ1基因,并进行DNA测序。结果 22株大肠埃希菌、27株阴沟肠杆菌、20株柠檬酸杆菌的qacEΔ1基因的阳性率分别为45.5%,7.4%和10.0%,27株克雷伯菌属细菌、6株产气肠杆菌及1株大肠杆菌标准株均未检出qacEΔ1基因。结论生活饮用水中总大肠菌群分离株已携带消毒剂耐药基因,其中,大肠埃希菌携带率较高。

耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶基因及耐消毒剂基因研究

目的分析金属β-内酰胺酶基因及耐消毒剂基因与耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药的相关性。方法采用琼脂二倍稀释法测定246株铜绿假单胞菌对14种抗菌药物的敏感性,Etest法进行金属酶表型的筛选,PCR检测金属β-内酰胺酶基因及耐消毒剂基因。结果检出102株多重耐药株,21株广泛耐药株,分别占41.5%和8.5%;亚胺培南耐药组筛选出金属酶表型阳性24株,阳性率为37.5%,敏感组未检出;亚胺培南耐药组经PCR扩增金属酶阳性21株,阳性率为32.8%,其中8株为IPM-1,9株为IPM-2,4株为NDM-1,未检出VIM-1、VIM-2;敏感组株未检出金属酶基因,两组的检出率差异具有统计学意义(P<0.05);21株金属酶阳性和表型结果一致;耐药组耐消毒剂基因qacEΔ1阳性率为81.25%,敏感组阳性率为75%,两组间的阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌表现为多重耐药;金属β-内酰胺酶基因的存在和其产生的金属酶是本地区铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的机制之一,其基因型主要为IPM-1、IPM-2和NDM-1,铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药还存在其他的主要机制;NDM-1阳性铜绿假单胞菌对头孢类抗生素、呋喃妥因、碳青霉烯类等多种抗菌药物耐药;合理使用有效的消毒剂将有利于控制NDM-1阳性菌的传播。