鲍曼不动杆菌中耐消毒剂基因qacEΔ1-sul1和Ⅰ类整合酶的携带情况调查

目的调查分析我院临床分离的鲍曼不动杆菌菌株中耐药基因的分布情况及部分多重耐药株的流行病学特点。方法收集2016年1~6月我院院内分离的150株鲍曼不动杆菌,MIC法测定其对抗生素的敏感性;将对三类以上抗生素耐药的菌株定义为多重耐药菌,运用PCR法检测qac EΔ1-sul1和int I 1基因在所分离菌株中的分布,并用PFGE法对其中多重耐药鲍曼不动杆菌进行分子分型。结果鲍曼不动杆菌敏感率排行前三的药物为妥布霉素(50.0%)、庆大霉素(44.2%)和亚胺培南(42.4%);84株多重耐药鲍曼不动杆菌中排行前三的药物为美罗培南(33.3%)、头孢哌酮(33.3%)和左氧氟沙星(13.1%);qac EΔ1-sul1和int I 1在鲍曼不动杆菌中的携带率为46.2%(85/150)和58.0%(88/150);在多重耐药鲍曼不动杆菌中的携带率为59.5%(49/84)和83.4%(70/84)。多重耐药鲍曼不动杆菌经PFGE分型可分为14个克隆,其中A克隆最多见,在ICU、呼吸科和急诊病房均存在集中流行,神经内科和老年科以C克隆多见,其余均为散在流行。结论 qac EΔ1-sul1和int I 1在鲍曼不动杆菌中的携带率很高,在多重耐药株中更高,说明I类整合子是鲍曼不动杆菌产生耐药的原因之一,研发新的消毒剂以消除鲍曼不动杆菌在院内的流行迫在眉睫,此外同一克隆株在同一病区的集中流行和在病区间的交叉流行提示应采取进一步的感染控制和隔离措施。

外科重症监护病房细菌耐药性与qacEΔ1-sul1基因检测

目的研究外科重症监护病房分离细菌构成、耐药性特征以及革兰阴性杆菌消毒剂-磺胺耐药相关基因qacE△1-sul1的携带情况,为合理使用抗菌药物和消毒剂提供依据。方法统计分析外科重症监护病房各种标本分离细菌及其药敏试验结果,筛选革兰阴性杆菌实验菌株检测qacE△1-sul1基因。结果外科重症监护病房分离菌株大部分对常用抗菌药物呈多重耐药,消毒剂-磺胺耐药相关基因qacE△1-sul1的携带率高达80.6%。结论外科重症监护病房是院内感染的高发科室,控制抗菌药物高耐药率和防范携带耐消毒剂基因多药耐药菌定植及感染,是医院感染控制的重中之重。

多重耐药革兰阴性杆菌耐消毒剂基因qacE△1-sul1监测

目的了解某院临床常见革兰阴性(G^-)杆菌多重耐药株耐消毒剂基因qacE△1-sul1的产生情况。方法收集临床分离的G^-杆菌235株,包括155株多重耐药株和80株敏感株,采用聚合酶链反应(PCR)法检测qacE△1-sul1基因,并进行DNA测序。结果在50株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、27株产ESBLs肺炎克雷伯菌、50株多重耐药的铜绿假单胞菌和28株多重耐药的鲍曼不动杆菌中,检出qacE△1-sul1株分别为37、24、46、28株,检出率分别为74.00%、88.89%、92.00%和100.00%,总的检出率为87.10%;在非产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌以及铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的敏感株(各20株)中,分别检出qacE△1-sul1株16、7、5、13株,检出率分别为80.00%、35.00%、25.00%和65.00%,总的检出率为51.25%。结论该院G^-杆菌多重耐药株耐消毒剂基因qacE△1-sul1的携带率较高,加强多重耐药菌对消毒剂耐药性的监测,对临床合理使用消毒剂具有重要意义。

18株泛耐药鲍曼不动杆菌的耐药性与qacE△1-sul1和Ant(3″)-I基因检测的相关性

鲍曼不动杆菌（Ab）是医院感染的重要病原菌,具有显著的快速建立耐药性的能力,几十年内就可以建立多重耐药。目前鲍曼不动杆菌的耐药性日益严重,其中的部分菌株甚至对目前所有已知的抗生素均耐药,即＂全耐药＂的鲍曼不动杆菌。鲍曼不动杆菌在医院的环境中分布很广且可长期存活,对危重患者和CCU及ICU中的患者威胁很大,常引起医院获得性感染。

革兰阴性杆菌耐季铵盐消毒剂-磺胺复合物基因qacE-sul1的检测

目的:检测革兰阴性菌中耐季铵盐消毒剂-磺胺复合物的qacE-sul1基因,为临床提供细菌对消毒剂的耐药信息。方法:使用稀释计数法测定60株革兰阴性杆菌对季胺盐复合物(QACs)的最低有效杀菌浓度,使用改良的表型筛选试验检测耐QACs的表型,使用聚合酶链反应(PCR)试验检测耐季铵盐消毒剂-磺胺复合物基因qacE-sul1。结果:部分革兰阴性杆菌临床分离株对QACs的最低有效杀菌浓度超过其推荐消毒浓度的8倍;60株革兰阴性杆菌中表型筛选试验14株阳性;11株qacE-sul1基因阳性,其中部分菌株进行全长基因测序并登陆美国核酸数据库(Genebank),注册号:AY769739;结论:在临床常见革兰阴性杆菌中已出现由遗传物质介导的高耐QACs的细菌;本研究所采用的改良表型筛选试验能有效地检测高耐QACs的细菌表型。

多重耐药鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因及qacE△1-sul1基因检测的研究

目的了解新疆地区鲍曼不动杆菌(ABA)16S rRNA甲基化酶基因及qacE△1-sul1基因存在状况。方法对临床分离的40株ABA用PCR法检测16S rRNA甲基化酶基因及qacE△1-sul1耐药基因并与基因库比对。结果 40株MDR-ABA6种16S rRNA甲基化酶基因检出结果与美国GenBank登录的相同;40株ABA菌中qacE△1-sul1耐药基因阳性21株(52.5%)。结论本组40株ABA未检出16S rRNA基因甲基化酶基因,qacE△1-sul1基因检测结果提示这些菌株52.5%携带Ⅰ类整合子,是本组细菌多重耐药表型的原因之一。

猪源大肠埃希菌消毒剂敏感性及耐药基因qacE△1-sul Ⅰ的试验

为了考察养殖场细菌消毒剂耐药性与抗菌药物耐药性的相关性,选择临床分离的104株猪源大肠埃希菌进行了消毒剂敏感性试验,并对消毒剂-磺胺耐药基因qacE△1-sul Ⅰ进行了检测。结果显示,临床分离大肠埃希菌消毒剂耐药性比质控菌明显提高,qacE△1-sul Ⅰ基因检出率高达95.19%。结果说明,受试消毒剂耐药性在养殖业中已日趋严重,进一步研究细菌消毒剂耐药及与抗菌药物交叉耐药性的机制迫在眉睫,以期对细菌消毒剂耐药的有效控制提供理论依据。

多重耐药鲍曼不动杆菌OXA-23基因与qacE△1基因检测的研究

目的对本院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌(MRAB)OXA-23和qacE△1耐药基因进行检测分析。方法收集2009年1月至2010年12月分离的85株多重耐药鲍曼不动杆菌,用聚合酶链反应(PCR)方法检测OXA-23和qacE△1耐药基因并测序,序列与基因库比对。结果 85株耐药菌中OXA-23、qacE△1基因的阳性率依次为55.3%、81.2%。其中58株耐亚胺培南MRAB OXA-23、qacE△1基因的阳性率为75.86%、84.48%;而其余27株亚胺培南敏感MRAB两个基因的阳性率分别为11.11%、74.07%。结论 OXA-23基因存在与鲍曼不动杆菌耐亚胺培南密切相关,qacE△1基因检测结果提示这些菌株81.2%携带Ⅰ类整合子,是本组细菌多重耐药表型的主要原因之一。

多重耐药鲍曼不动杆菌耐药谱及耐消毒剂qacEΔ1基因分析

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌的临床分布、耐药谱特征及耐消毒剂基因qacEΔ1的携带情况,为医院感染防控提供实验室依据。方法收集2013年10月至2014年8月临床标本中分离的鲍曼不动杆菌共56株,分别采用微量肉汤稀释法和聚合酶链反应(PCR)进行药物敏感性试验和耐消毒剂基因qacEΔ1的检测;随机抽取qacEΔ1基因阳性标本进行序列测定。结果临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌主要分离于痰液和分泌物标本,分别占70.7%和15.5%;病区主要来自重症监护病房和呼吸内科,分别占41.1%和17.9%。药敏试验除对头孢哌酮/舒巴坦(32.1%)的耐药率较低外,对其余抗菌药物普遍耐药。耐消毒剂qacEΔ1基因检测出50株阳性标本,携带率为89.3%。测序结果与GeneBank中相应基因序列相比较,同源性为98%。结论多重耐药鲍曼不动杆菌以呼吸道为主要感染途径且病区集中趋势明显。耐消毒剂qacEΔ1基因携带率高,加强监测多重耐药鲍曼不动杆菌的消毒剂抗性,对临床科学使用消毒剂具有重要意义。

qacE△1耐消毒剂基因与细菌多重耐药性的关系

qacE△1存在于Ⅰ类整合子的3’保守端,编码针对季铵化合物、双胍类等消毒剂的外排蛋白,使细菌对消毒剂产生抗性。qacE△1分布较广,多存在于革兰阴性细菌中,也存在于小部分革兰阳性细菌。由于Ⅰ类整合子是编码抗菌素耐药性基因盒的良好载体。因此,在一般情况下,qacE△1阳性菌株比qacE△1阴性菌株发生多重耐药现象的频率高。

Correlation of the antiseptic resistance in Acinetobacter baumannii and the antiseptic resistance gene qacEΔ1 located in classⅠintegron

In the past decade, uses of antiseptics and disinfectants in hospitals and other health care centers are rather common, but the chance to develop resistance to antiseptics and disinfectants is also increased. Acinetobacter baumannii is one of the opportunistic bacteria involving in the nosocomial infection. In the present study, the correlation of the antiseptic resistance in A. baumannii and the antiseptic resistance gene qacEΔ 1 was investigated by means of determination of MICs. Meanwhile, the MICs of glutaraldehyde, chlorhexidine, benzalkonium bromide, iodophor and trichloroisocyanurate to 80 clinical isolates of A. baumannii were detected by tube dilution assay and the resistance genes intll and qacE Δ 1 in these isolates were amplified by PCR and verified by DNA sequencer. It was found that the MIC50 for these 5 antiseptics tested were 32, 8, 8, 4 and 1 μg/ml respectively, and the detection rates of intll and qacEΔ1 gene were 60.0% and 77.6% respectively. In addition, 55% of the 80 isolates simultaneously possessed both intll and qacEΔ1 gene, and the percentage of antiseptic resistance of A. baumannii carring both genes to benzalkonium bromide were higher than that without these two genes, however, there was no significant difference between intll and qacEΔ1 gene. The result in bactericidal efficiency assay indicated that chlorhexidine could still produce rapid and strong bactericidal effect at concentration of 1 MIC after 10 rain exposure. These results suggest that the antiseptic resistance of A. baumannil to various antiseptics is correlated with the presence of the antiseptic resistance genes qacEΔ 1 in bacteria, thus warning that the increase of the antiseptic resistance should not be ignored and the relative high concentration or prolonged application time is required to achieve a sufficient bactericidal effect.

不同来源大肠埃希菌中Ⅰ类整合子和耐消毒剂基因qacE△1-sul1的研究

目的研究健康大学生及住院患者肠道内大肠埃希菌Ⅰ类整合子及qacE△1-sull基因的携带情况,并与临床分离株比较,初步探讨其影响因素。方法常规方法分离并鉴定健康大学生粪便分离大肠埃希菌79株,住院患者粪便分离出40株及住院患者其他类型标本分离出29株,PCR方法检测Ⅰ类整合酶及qacE△1-sul1基因,K-B法检测药物敏感性,标准纸片扩散确证法检测ESBLs。结果Ⅰ类整合酶基因总检出率为26.35%,qacE△1-sul1基因总检出率为68.92%;临床分离株组Ⅰ类整合酶及qacE△1-sull基因携带率均高于两组粪便,差异有统计学意义(P<0.01),但两组粪便组携带率差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ类整合酶阳性组菌株对阿莫西林、左氧氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、阿米卡星与头孢噻肟的耐药率均明显高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);ESBLs阳性组Ⅰ类整合酶的阳性率为43.24%,明显高于阴性组20.72%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肠道内大肠埃希菌Ⅰ类整合子的携带率与多种药物耐药有关,与ESBLs及qacE△1-sul1基因的携带有关,肠道内大肠埃希菌中耐消毒剂基因qacE△1-sul1的携带高,医疗部门应及时监测并在选用消毒剂种类上做出调整。

鲍氏不动杆菌儿童分离株qacE△1-sul1及IntⅠ1基因与抗菌药物多药耐药性关系研究

目的鲍氏不动杆菌(ABA)在儿科临床分离株的耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sul1)、整合酶基因(IntⅠ1)以及与该基因阳性细菌多药耐药的关系。方法28株ABA收集自2006年分离的儿科住院肺炎患儿的深部痰培养标本,均采用VITEK-32全自动微生物鉴定仪GNI和GNS卡进行细菌鉴定和药敏试验;qacE△1-sul1与IntⅠ1基因检测用聚合酶链反应(PCR)方法。结果检测的28株ABA中3株呈多药耐药性,阳性率10.71%,复方新诺明(SXT)检出4株耐药菌株,耐药率14.29%,qacE△1-sul1基因检出11株,阳性率为39.29%,IntⅠ1基因检出4株,阳性率14.29%;4株复方新诺明耐药菌株(包括3株多药耐药株)均检出qacE△1-sul1和IntⅠ1基因,其余7株qacE△1-sul1基因阳性菌株对复方新诺明表型敏感。结论ABA儿童分离株对SXT耐药的主要原因是获得了qacE△1-sul1基因;对于复方新诺明表型敏感,但qacE△1-sul1基因阳性菌株也应引起重视,防止在抗菌药物的压力下,出现耐药;因qacE△1-sul1、IntⅠ1基因两者之一为阳性即可表明该菌株携带Ⅰ类整合子,即可能含有多药耐药基因,其对抗菌药物表现多药耐药性,应引起儿科医生的高度重视。

肺炎克雷伯菌中Ⅰ类整合子与qacE△1-sul1基因的研究

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子和qacE△1-sul1耐消毒剂基因的携带情况。方法收集临床住院患者分离出的产ESBLs肺炎克雷伯菌108株;采用K-B法测定抗菌药物的敏感性;聚合酶链反应(PCR)检测Ⅰ类整合子和qacE△1-sul1基因。结果Ⅰ类整合子基因总检出率为53.70%,qacE△1-sul1基因总检出率为63.89%;产ESBLs肺炎克雷伯株Ⅰ类整合子阳性株除对氨苄西林和哌拉西林的耐药率与Ⅰ类整合子阴性株差异无统计学意义以外,对其他抗菌药物的耐药率均明显高于整合子阴性株,差异有统计学意义(P<0.05)。结论医院产ESBLs肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子和qacE△1-sulⅠ耐消毒剂基因携带率均较高,应进一步加强Ⅰ类整合子和耐消毒剂基因菌株的流行病学监测,并根据耐消毒剂状况,在消毒剂的使用上作出相应的调整。

qacE△1-sul1阳性多药耐药革兰阴性杆菌的临床分布特征

目的了解携带耐消毒剂磺胺复合物基因qacE△1-sul1的多药耐药革兰阴性杆菌临床分布状况,为多药耐药革兰阴性杆菌医院感染预防控制提供依据。方法采用聚合酶链反应(PCR)检测多药耐药革兰阴性杆菌qacE△1-sul1基因,分析其阳性菌株的分布特点。结果182株qacE△1-sul1基因阳性多药耐药革兰阴性杆菌临床分布以重症监护病房(ICU)最多(55株,30.22%),其次为普外科(38株,20.88%);标本分布以痰标本检出率最高(52.20%)。结论耐消毒剂基因qacE△1-sul1多药耐药革兰阴性杆菌分布以ICU、普外科较高,应作为防范重点,加强医院环境微生物监测,防止感染携带耐消毒剂基因多药耐药菌感染的局部流行和暴发。

铜绿假单胞菌烧伤患者分离株qacE△1-sul1基因检测及临床意义

目的了解分离自烧伤病房患者的铜绿假单胞菌中消毒剂-磺胺耐药qacE△1-sul1基因的存在状况。方法采用GNS-448药敏卡及K-B法测定抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)测定qacE△1-sul1基因并进行序列分析。结果32株铜绿假单胞菌对氨苄西林、头孢呋辛、头孢西丁、复方新诺明完全耐药,对阿米卡星的敏感率最高为68.0%,对庆大霉素的敏感率为46.9%,而对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别达到68.8%、59.4%;16株(50.0%)qacE△1-sul1基因阳性。结论分离自烧伤患者的铜绿假单胞菌耐药严重,qacE△1-sul1基因携带率较高。

新疆地区鲍氏不动杆菌qacE△1-sul1基因检测及临床意义

目的研究乌鲁木齐地区住院患者中分离的鲍氏不动杆菌qacE△1-sul1耐药基因,以了解此基因在新疆地区的分布及差异性。方法采用API系统鉴定分离菌株,根据CLSI的标准采用K-B法和微量稀释法测定抗菌药物的敏感性;最后采用聚合酶链反应检测qacE△1-sul1基因并在基因库上比对。结果耐药表型显示鲍氏不动杆菌对三代的头孢噻肟和四环素耐药率最高,均达到100.0%,头孢派酮/舒巴坦等加酶抑制剂耐药率最低;鲍氏不动杆菌携带qacE△1-sul1耐药基因高达52.5%。结论新疆地区鲍氏不动杆菌耐药产生率较高;qacE△1-sul1耐药基因携带率高;应进一步加强由整合子携带耐药基因进行耐药传播的菌株的流行病学监测。

多药耐药鲍氏不动杆菌耐消毒剂qacEΔ1基因检测研究

目的了解医院分离的多药耐药鲍氏不动杆菌耐消毒剂qacEΔ1基因分布,为医院规范消毒技术和减少鲍氏不动杆菌感染提供科学依据。方法收集医院2013年8月-2013年11月分离的非重复多药耐药鲍氏不动杆菌26株,采用Phoenix100微生物全自动鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验;采用PCR方法检测qacA/B、qacC、qacEΔ1、qacG、qacJ基因;药敏数据采用WHONET5.6软件进行统计分析。结果 26株鲍氏不动杆菌标本来源以痰液为主,占84.7%;科室分布内科ICU检出最多,占53.9%;检出qacEΔ1基因阳性19株,阳性率73.1%;qacA/B基因2株,阳性率7.7%;未检出qacC、qacG、qacJ基因;26株多药耐药鲍氏不动杆菌对四环素、阿米卡星、庆大霉素耐药率分别为73.1%、73.1%、96.2%,对其余11种抗菌药物耐药率均为100.0%,仅对多黏菌素无耐药株,呈现多药耐药性。结论医院鲍氏不动杆菌耐消毒剂qacEΔ1基因携带率已非常高,规范消毒技术和制定标准化操作程序,以控制或延缓细菌对耐消毒剂基因的产生和蔓延。

嗜麦芽寡养单胞菌耐消毒剂基因qacE△1的检测及分子流行病学研究

目的了解近4年嗜麦芽寡养单胞菌(SMA)医院感染特征及耐消毒剂基因的分布,进一步提高对其医院感染特征的认识,改进消毒灭菌的方法,降低医院感染率。方法对2004年1月-2007年12月医院报告的165例个案病例进行统计分析,用PCR的方法进行耐消毒剂基因的检测,脉冲场凝胶电泳(PFGE)全DNA指纹图谱技术对菌株进行分子分型,确定菌株的亲缘关系。结果SMA是一种重要的医院感染病原菌,年老、严重的基础疾病、住院时间长、侵入性操作为其易感因素;感染部位以肺部感染为主,占全部病例的87.9%,对SMA治疗临床常用抗菌药物敏感性>80.0%的有米诺环素、复方新诺明、左氧氟沙星;60株SMA耐消毒剂基因的阳性株数为8株(13.3%),对这8株菌进行PFGE同源性分析,结果表明在呼吸ICU有两型同一克隆株的传播。结论SMA是一种重要的医院感染病原菌,由于的它的多药耐药性,临床治疗困难,由于耐消毒剂基因的检出及同克隆株的传播,提示临床应加强消毒效果的监测。

部队医疗机构室内空气中细菌抗消毒剂基因qacEΔ1检测

目的研究西北地区东片部队医疗机构室空气细菌抗消毒剂基因qacEΔ1的阳性率,为部队医疗机构空气消毒及医院感染预防治疗提供指导依据。方法用PCR方法检测空气中分离的细菌的qacEΔ1基因。结果 98株细菌中有23株携带抗消毒剂基因qacEΔ1,阳性率为23.5%;大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌qacEΔ1的检出率分别为36.7%、36.4%、27.8%、20.0%、10.0%;白色假丝酵母菌、蜡样芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞、流感嗜血菌未检出qacEΔ1基因。结论西北地区东片部队医疗机构空气中的细菌抗消毒剂基因qacEΔ1阳性率不高,但应注意消毒剂的交替使用。