多重耐药革兰阴性杆菌耐消毒剂基因qacE△1-sul1监测

目的了解某院临床常见革兰阴性(G^-)杆菌多重耐药株耐消毒剂基因qacE△1-sul1的产生情况。方法收集临床分离的G^-杆菌235株,包括155株多重耐药株和80株敏感株,采用聚合酶链反应(PCR)法检测qacE△1-sul1基因,并进行DNA测序。结果在50株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、27株产ESBLs肺炎克雷伯菌、50株多重耐药的铜绿假单胞菌和28株多重耐药的鲍曼不动杆菌中,检出qacE△1-sul1株分别为37、24、46、28株,检出率分别为74.00%、88.89%、92.00%和100.00%,总的检出率为87.10%;在非产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌以及铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的敏感株(各20株)中,分别检出qacE△1-sul1株16、7、5、13株,检出率分别为80.00%、35.00%、25.00%和65.00%,总的检出率为51.25%。结论该院G^-杆菌多重耐药株耐消毒剂基因qacE△1-sul1的携带率较高,加强多重耐药菌对消毒剂耐药性的监测,对临床合理使用消毒剂具有重要意义。

医院感染革兰阴性杆菌耐消毒剂基因研究

目的了解浙江湖州解放军第98医院临床分离的医院感染革兰阴性杆菌中,耐消毒剂基因qacE△1存在状况。方法采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法,分析147株革兰阴性杆菌(分别为鲍氏不动杆菌63株、铜绿假单胞菌30株、阴沟肠杆菌20株、嗜麦芽寡养单胞菌19株、黄杆菌属细菌15株)中qacE△1基因。结果147株革兰阴性杆菌qacE△1基因阳性96株,总阳性率为65.3%;阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、嗜麦芽寡养单胞菌和黄杆菌属细菌qacE△1基因阳性株数分别为17(85.0%)、25(83.3%)、52(82.5%)、2(10.5%)、0。结论临床分离的医院感染革兰阴性杆菌中,耐消毒剂基因qacE△1携带率比较高,应引起我国医院消毒界的重视。

鲍氏不动杆菌儿童分离株qacE△1-sul1及IntⅠ1基因与抗菌药物多药耐药性关系研究

目的鲍氏不动杆菌(ABA)在儿科临床分离株的耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sul1)、整合酶基因(IntⅠ1)以及与该基因阳性细菌多药耐药的关系。方法28株ABA收集自2006年分离的儿科住院肺炎患儿的深部痰培养标本,均采用VITEK-32全自动微生物鉴定仪GNI和GNS卡进行细菌鉴定和药敏试验;qacE△1-sul1与IntⅠ1基因检测用聚合酶链反应(PCR)方法。结果检测的28株ABA中3株呈多药耐药性,阳性率10.71%,复方新诺明(SXT)检出4株耐药菌株,耐药率14.29%,qacE△1-sul1基因检出11株,阳性率为39.29%,IntⅠ1基因检出4株,阳性率14.29%;4株复方新诺明耐药菌株(包括3株多药耐药株)均检出qacE△1-sul1和IntⅠ1基因,其余7株qacE△1-sul1基因阳性菌株对复方新诺明表型敏感。结论ABA儿童分离株对SXT耐药的主要原因是获得了qacE△1-sul1基因;对于复方新诺明表型敏感,但qacE△1-sul1基因阳性菌株也应引起重视,防止在抗菌药物的压力下,出现耐药;因qacE△1-sul1、IntⅠ1基因两者之一为阳性即可表明该菌株携带Ⅰ类整合子,即可能含有多药耐药基因,其对抗菌药物表现多药耐药性,应引起儿科医生的高度重视。

耐亚胺培南铜绿假胞菌耐药性分析及耐消毒剂基因检测

目的了解临床分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IMPRPa)的分布和耐药性,以及携带耐消毒剂基因qacE△1-sull的情况。方法临床标本应用VITEK-2 compact全自动微生物鉴定仪进行鉴定及药敏试验,并对23株IMPRPa的耐消毒剂基因qacE△1-sull进行PCR扩增。结果本院IMPRPa主要来自新生儿科病房,其检出率为36.96%,高于儿科门诊及儿科病房(P<0.05);IMPRPa对氨基糖苷类、喹诺酮类药物敏感,对广谱青霉素类、头孢类以及磺胺类的复方新诺明等几乎全部耐药;23株IMPRPa有19株qacE△1-sull基因阳性,携带率为82.6%。结论 IMPRPa早产儿易感,对常用抗生素耐药率高,耐消毒剂基因qacE△1-sull携带率较高,存在抗消毒剂的可能性。

鲍氏不动杆菌耐消毒剂磺胺基因、Ⅰ类整合酶基因及氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的了解鲍氏不动杆菌耐消毒剂磺胺基因(qacE△1-sulⅠ)、Ⅰ类整合酶基因(intI1)及氨基糖苷类修饰酶(aminoglycoside-modifyingenzymes,AMEs)基因存在情况。方法自临床分离20株鲍氏不动杆菌,采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析qacE△1-sulⅠ、intI1及9种AMEs基因。结果qacE△1-sulⅠ、intⅠ1、aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)Ⅰ、ant(3″)-Ⅰ和aac(6′)-Ⅱ基因的阳性率分别为90.0%、20.0%、55.0%、15.0%、35.0%、60.0%和5.0%,而aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、ant(2″)-Ⅰ和aph(3′)-Ⅵ基因均阴性。结论浙江省立同德医院临床分离的鲍氏不动杆菌多重耐药严重,耐消毒剂磺胺基因及AMEs基因携带率较高。

铜绿假单胞菌耐消毒剂-磺胺基因及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sulⅠ)及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况。方法自临床分离40株Pa,采用聚合酶链反应(PCR)检测qacE△1-sulⅠ基因及12种β-内酰胺类抗生素耐药相关基因(TEM、SHV、OXA-10群、CTX-M-1群、PER、VEB、GES、CARB、IMP、VIM、DHA和oprD2)。结果40株中qacE△1-sulⅠ基因阳性19株(47.5%),CARB基因阳性18株(45.0%),oprD2基因缺失35株(87.5%),其余基因均阴性。结论临床分离的铜绿假单胞菌多重耐药严重,qacE△1-sulⅠ基因及CARB基因携带率高,oprD2基因缺失严重。

不同来源大肠埃希菌中Ⅰ类整合子和耐消毒剂基因qacE△1-sul1的研究

目的研究健康大学生及住院患者肠道内大肠埃希菌Ⅰ类整合子及qacE△1-sull基因的携带情况,并与临床分离株比较,初步探讨其影响因素。方法常规方法分离并鉴定健康大学生粪便分离大肠埃希菌79株,住院患者粪便分离出40株及住院患者其他类型标本分离出29株,PCR方法检测Ⅰ类整合酶及qacE△1-sul1基因,K-B法检测药物敏感性,标准纸片扩散确证法检测ESBLs。结果Ⅰ类整合酶基因总检出率为26.35%,qacE△1-sul1基因总检出率为68.92%;临床分离株组Ⅰ类整合酶及qacE△1-sull基因携带率均高于两组粪便,差异有统计学意义(P<0.01),但两组粪便组携带率差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ类整合酶阳性组菌株对阿莫西林、左氧氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、阿米卡星与头孢噻肟的耐药率均明显高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);ESBLs阳性组Ⅰ类整合酶的阳性率为43.24%,明显高于阴性组20.72%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肠道内大肠埃希菌Ⅰ类整合子的携带率与多种药物耐药有关,与ESBLs及qacE△1-sul1基因的携带有关,肠道内大肠埃希菌中耐消毒剂基因qacE△1-sul1的携带高,医疗部门应及时监测并在选用消毒剂种类上做出调整。

多耐药铜绿假单胞菌抗药基因检测及对常用消毒剂的抗性分析

目的：了解临床分离的多耐药铜绿假单胞菌携带抗药基因qacE△1-sul 1（消毒剂-磺胺复合基因）情况及对常用消毒剂抗性水平。方法采用聚合酶链反应（PCR）法和悬液定量杀菌试验分别检测临床分离的多耐药铜绿假单胞菌qacE△1-sul 1基因和对三氯异氰尿酸、聚维酮碘、戊二醛的抗性（杀灭率）。结果临床分离的10株多耐药铜绿假单胞菌中6株qacE△1-sul 1基因阳性，4株阴性。浓度为125 mg/L的三氯异氰尿酸溶液作用1 min的杀灭率为99．63％～100．00％；浓度为250 mg/L 的三氯异氰尿酸溶液作用1 min 的杀灭率为99．81％～100．00％；浓度为125、250 mg/L的三氯异氰尿酸溶液作用3、5 min的杀灭率及浓度为500 mg/L时作用1、3、5 min的杀灭率均为100．00％。有效碘浓度为125 mg/L的聚维酮碘溶液作用0．5 min的杀灭率为99．91％～100．00％，该浓度作用1、3 min的杀灭率和浓度分别为250、500 mg/L时作用0．5、1、3 min的杀灭率均达100．00％。浓度为250 mg/L的戊二醛溶液作用1 min的杀灭率为65．46％～99．75％；浓度为500 mg/L的戊二醛溶液作用1 min的杀灭率为99．84％～100．00％，这两种浓度的戊二醛溶液作用3、5 min的杀灭率均达100．00％。结论多耐药铜绿假单胞菌抗药基因qacE△1-sul 1携带率较高，本研究显示消毒剂正确运用对多耐药铜绿假单胞菌能起到较好的杀灭效果。

铜绿假单胞菌消毒剂-磺胺耐药基因检测及对消毒剂的抗性研究

目的了解铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子消毒剂-磺胺耐药基因(qacE△1-sull)的携带情况以及阳性菌株对碘伏、戊二醛、氯己定、"84"消毒液的抗性。方法对某院2007年12月-2008年1月连续分离的20株铜绿假单胞菌以聚合酶链反应(PCR)法检测qacE△l-sull基因,测定其阳性菌株对上述4种消毒剂的最低抑菌浓度(MIC)。结果 20株铜绿假单胞菌中检出qacE△1-sull阳性株10株(50.00%)。碘伏、戊二醛、氯己定、"84"消毒液对qacE△1-sull阳性菌株的MIC范围分别为:8.0～128.0μg/mL、16.0～256.0μg/mL、1.0～16.0μg/mL、4.0～64.0μg/mL。结论 qacE△1-sul1基因普遍存在于临床分离的铜绿假单胞菌中,阳性菌株对碘伏、戊二醛、氯己定、"84"消毒液存在抗性差异,应合理使用消毒剂并增加作用时间,以有效控制铜绿假单胞菌的播散。

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌消毒剂及β内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的 了解临床分离的对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌消毒剂及β内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况。方法 自临床分离2 8株对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法检测耐药基因。结果 2 8株中,qac E△1、TEM、OXA基因阳性株数(% )分别为2 4株(85 .7% )、2 0株(71.4 % )、1株(3.6 % ) ,此株OXA基因经序列分析确认为OXA-10型超广谱β内酰胺酶(Gen Bank注册号:AY84 185 9)。2 5株(89.3% ) opr D基因缺失,IMP、VIM、SHV、PER、VEB、GES、MIR、DHA基因均阴性。结论 临床分离的对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌耐消毒剂基因qac E△1及TEM基因携带率均很高,至少存在TEM、OXA- 10两种β内酰胺酶基因,opr D基因缺失突变是对亚胺培南耐药的重要原因。

国内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因特征Meta分析

目的：采用 Meta 分析，综合评价中国耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐消毒剂基因特征。方法计算机检索中国知网（CNKI）、万方医学网、PubMed、EMbase 等数据库，查找中国 MRSA 耐消毒剂基因特征的相关文献，按照统一的纳入与排除标准筛选文献后，采用 R 3．1．1软件、RevMan 5．3软件进行 Meta 分析。结果共纳入42篇文献，我国16个省（直辖市）的2671株 MRSA 耐消毒剂基因情况。Meta 分析结果显示：qacA／B、qacC、qacJ 和norA 基因的合并检出率分别为28．03％（95％CI ：20．03％～36．48％）、8．94％（95％CI ：1．27％～ 22．49％）、17．74％（95％CI ：2．25％～43．39％）和17．90％（95％CI ：0．00％～76．38％）。qacEΔ1、qacG、qacH 的检出率均为0。中国淮河以南、以北地区 qacA／B 基因的合并检出率分别为27．12％（95％ CI ：19．03％～36．06％）和30．14％（95％CI ：13．11％～50．63％），南北地区差异无统计学意义（Z ＝0．59，P ＞0．05）。东部、中部、西部经济区域的qacA／B基因的合并检出率分别为29．95％（95％CI ：21．85％～38．73％）、22．65％（95％ CI ：10．08％～38．47％）和26．94％（95％CI ：3．78％～60．95％），组间差异均无统计学意义（P ＞0．05）。医院获得性 MRSA 与社区获得性 MRSA qacA／B 基因检出率比较，差异无统计学意义[OR 及95％CI 为0．69（0．14～3．31），P ＝0．64]。MRSA qacA／B 基因检出率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）[OR 及95％CI 为4．99（3．53～7．06），P ＜0．01]。结论中国MRSA 耐消毒剂基因检出率高，MRSA 耐消毒剂基因是一个常见且严重的问题，应加强耐消毒剂基因的监测，合理使用消毒剂。

铜绿假单胞菌亚胺培南及消毒剂耐药相关基因研究

目的了解临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中金属β内酰胺酶基因(blaIMP和blaVIM)、外膜孔蛋白D2(OprD2)基因(oprD)、消毒剂-磺胺耐药相关基因(qacE△1-sulⅠ)存在状况。方法采用ATBPSE5药敏试验条板微量肉汤法测定28株铜绿假单胞菌对14种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)技术及序列分析的方法检测耐药基因。结果该28株铜绿假单胞菌对亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、妥布霉素和复方新诺明均完全耐药,对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率最高为64.3%,其余的耐药率在57.1%～92.9%之间。28株Pa中blaIMP和blaVIM基因均阴性,25株(89.3%)oprD基因缺失,24株(85.7%)qacE△1-sulI基因阳性。结论浙江湖州解放军第98医院临床分离的对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌多重耐药严重,oprD基因缺失是其对亚胺培南耐药的重要原因,qacE△1-sulⅠ基因携带率很高。

常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子标志物检测

目的了解浙江省湖州解放军第98医院从临床分离的常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子存在状况。方法从临床分离鲍曼不动杆菌60株、铜绿假单胞菌30株、阴沟肠杆菌20株、嗜麦芽窄食单胞菌19株和黄杆菌属15株(脑膜败血性黄杆菌12株、产吲哚金黄杆菌3株),采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测Ⅰ类整合子标志物 int Ⅰ 1及qacE△1 基因。结果鲍曼不动杆菌、铜绿似单胞菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和黄杆菌属中 int Ⅰ 1基因阳性率分别为58.3%、0、95.0%、0和0,qacE△1基因阳性率分别为83.3%、83.3%、85.0%、10.5%和0。合计144株中 int Ⅰ 1和 qacE△1阳性株数(%)分别为54株(37.5%)、94株(65.3%),Ⅰ类整合子标志物总阳性率为68.1%(98/144)。结论解放军第98医院从临床分离的常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子携带率相当高。

常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子标志物检测

目的了解临床分离的常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌I类整合子存在状况。方法临床分离鲍曼不动杆菌60 株、铜绿假单胞菌30株、阴沟肠杆菌20株、嗜麦芽窄食单胞菌19株和黄杆茼属15株(脑膜败血性黄杆菌12株、产吲哚金黄杆菌3株),采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测I类整合子标志物int I 1及qacE△1基因。结果鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和黄杆菌属中intI 1基因阳性率分别为58.3%、0、95.0%、0和0,qacE△1基因阳性率分别为83.3%、83.3%、85.0%、10.5%和0。合计144株中intI 1和qacE△1阳性株数(%)分别为54株(37.5%)、94株 (65.3%),I类整合子标志物总阳性率为68.1%(98/144)。结论临床分离的常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌I类整合子携带率较高。

qacE△1-sul1阳性多药耐药革兰阴性杆菌的临床分布特征

目的了解携带耐消毒剂磺胺复合物基因qacE△1-sul1的多药耐药革兰阴性杆菌临床分布状况,为多药耐药革兰阴性杆菌医院感染预防控制提供依据。方法采用聚合酶链反应(PCR)检测多药耐药革兰阴性杆菌qacE△1-sul1基因,分析其阳性菌株的分布特点。结果182株qacE△1-sul1基因阳性多药耐药革兰阴性杆菌临床分布以重症监护病房(ICU)最多(55株,30.22%),其次为普外科(38株,20.88%);标本分布以痰标本检出率最高(52.20%)。结论耐消毒剂基因qacE△1-sul1多药耐药革兰阴性杆菌分布以ICU、普外科较高,应作为防范重点,加强医院环境微生物监测,防止感染携带耐消毒剂基因多药耐药菌感染的局部流行和暴发。

肺炎克雷伯菌中Ⅰ类整合子与qacE△1-sul1基因的研究

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子和qacE△1-sul1耐消毒剂基因的携带情况。方法收集临床住院患者分离出的产ESBLs肺炎克雷伯菌108株;采用K-B法测定抗菌药物的敏感性;聚合酶链反应(PCR)检测Ⅰ类整合子和qacE△1-sul1基因。结果Ⅰ类整合子基因总检出率为53.70%,qacE△1-sul1基因总检出率为63.89%;产ESBLs肺炎克雷伯株Ⅰ类整合子阳性株除对氨苄西林和哌拉西林的耐药率与Ⅰ类整合子阴性株差异无统计学意义以外,对其他抗菌药物的耐药率均明显高于整合子阴性株,差异有统计学意义(P<0.05)。结论医院产ESBLs肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子和qacE△1-sulⅠ耐消毒剂基因携带率均较高,应进一步加强Ⅰ类整合子和耐消毒剂基因菌株的流行病学监测,并根据耐消毒剂状况,在消毒剂的使用上作出相应的调整。

铜绿假单胞菌烧伤患者分离株qacE△1-sul1基因检测及临床意义

目的了解分离自烧伤病房患者的铜绿假单胞菌中消毒剂-磺胺耐药qacE△1-sul1基因的存在状况。方法采用GNS-448药敏卡及K-B法测定抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)测定qacE△1-sul1基因并进行序列分析。结果32株铜绿假单胞菌对氨苄西林、头孢呋辛、头孢西丁、复方新诺明完全耐药,对阿米卡星的敏感率最高为68.0%,对庆大霉素的敏感率为46.9%,而对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别达到68.8%、59.4%;16株(50.0%)qacE△1-sul1基因阳性。结论分离自烧伤患者的铜绿假单胞菌耐药严重,qacE△1-sul1基因携带率较高。

新疆地区鲍氏不动杆菌qacE△1-sul1基因检测及临床意义

目的研究乌鲁木齐地区住院患者中分离的鲍氏不动杆菌qacE△1-sul1耐药基因,以了解此基因在新疆地区的分布及差异性。方法采用API系统鉴定分离菌株,根据CLSI的标准采用K-B法和微量稀释法测定抗菌药物的敏感性;最后采用聚合酶链反应检测qacE△1-sul1基因并在基因库上比对。结果耐药表型显示鲍氏不动杆菌对三代的头孢噻肟和四环素耐药率最高,均达到100.0%,头孢派酮/舒巴坦等加酶抑制剂耐药率最低;鲍氏不动杆菌携带qacE△1-sul1耐药基因高达52.5%。结论新疆地区鲍氏不动杆菌耐药产生率较高;qacE△1-sul1耐药基因携带率高;应进一步加强由整合子携带耐药基因进行耐药传播的菌株的流行病学监测。

186株革兰阴性菌耐消毒剂基因携带情况及抗药性观察

目的研究临床分离的革兰阴性杆菌耐消毒剂基因及抗药性。方法用基因扩增技术和药敏试验方法,对临床分离的革兰阴性菌携带qacEΔ1-sull基因与耐药性进行了检测。结果分离自浙江省部分医院环境和病人感染标本的186株革兰阴性杆菌中,有81株携带qacEΔ1-sull基因,携带率为45.5%;其中鲍曼不动杆菌的携带率为70.0%。这些菌株对氨苄西林等19种临床常用抗菌药物耐药率均达60%以上,对美罗培南和阿米卡星耐药率分别为48.39%和30.65%。结论临床分离的革兰阴性菌耐消毒剂基因携带率较高,对临床常用抗菌药物普遍耐药。

rmtB基因在铜绿假单胞菌烧伤分离株中流行

目的了解分离自烧伤科患者的铜绿假单胞菌中16S rRNA甲基化酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、耐消毒剂-磺胺基因(qacE△1-sul1)、转座子基因(merA)存在状况。方法以K-B法测量铜绿假单胞菌对20种抗菌药物的耐药性;以PCR法检测20株铜绿假单胞菌16SrRNA甲基化酶及氨基糖苷类修饰酶基因;以PCR直接全自动荧光法进行阳性基因测序。结果20株铜绿假单胞菌检出3种氨基糖苷类修饰酶基因,分别为aac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(2″)-Ⅰ,检出1种16S rRNA甲基化酶基因(rmtB);所测20株菌均携带qacEΔ1-sul1(阳性率100.0%),19株携带merA基因(阳性率95.0%)。结论分离自烧伤科患者的铜绿假单胞菌耐药情况严重,对氨基糖苷类抗菌药物耐药与5种氨基糖苷类修饰基因及16S rRNA甲基化酶基因rmtB有关,qacE△1-sul1及merA携带率高,说明转座子及整合子是细菌间基因传播的重要机制,必须寻求新的途径来解决此类细菌对氨基糖苷类抗菌药物的耐药问题。