HPLC法同时测定杠板归不同部位中5种成分的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定杠板归不同部位(茎、叶、根)中5种成分的含量。方法采用Luna?-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为320 nm,柱温为30℃,测定杠板归不同部位中绿原酸、咖啡酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素的含量。结果绿原酸、咖啡酸、芦丁、阿魏酸、槲皮素分别在0.046~4.6μg/mL,0.212~21.2μg/mL,0.055~5.5μg/mL,0.084~8.4μg/mL,0.114~11.4μg/mL范围内质量浓度与峰面积呈线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率为97.65%~102.09%,RSD为1.76%~2.44%。不同部位中5种成分含量差异较大,绿原酸和咖啡酸2个成分在叶中含量高,且远远高于根和茎中的含量;芦丁和阿魏酸主要存在于茎和根中,叶中未检测到;槲皮素在茎中含量最高,叶中次之,根中最低。结论建立的HPLC方法准确可靠、重复性好、专属性强,可用于杠板归不同部位中5个成分含量的同时测定。

兴安杜鹃3种主要成分的HPLC测定及其对大鼠气管平滑肌的舒张作用

[目的]建立同时测定兴安杜鹃中金丝桃苷、槲皮素和杜鹃素含量的高效液相色谱法(HPLC),并探讨兴安杜鹃提取物及3种主要成分对大鼠气管平滑肌舒张作用的影响及其作用机制。[方法]采用HPLC法测定兴安杜鹃中金丝桃苷、槲皮素和杜鹃素的含量并进行方法学考察。采用离体气管灌流法取大鼠气管环,将气管环固定于麦氏浴皿中,使用扑尔敏、吲哚美辛、格列苯脲、左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、硝苯地平和普萘洛尔进行预孵育,待气管环张力稳定后,加入60 mmol/L KCl溶液收缩气管环,进行兴安杜鹃对气管环的舒张试验,观察大鼠气管平滑肌张力变化。[结果]兴安杜鹃中3种主要成分HPLC测定方法考察结果显示,3种成分均在2~80μg/mL线性关系良好,平均回收率分别为金丝桃苷100.3%(RSD=2.63%)、槲皮素102.7%(RSD=2.89%)、杜鹃素102.1%(RSD=2.36%)。在吲哚美辛、格列本脲和普萘洛尔孵育组织中,兴安杜鹃提取物及3种单体成分的舒张作用与未孵育组相比没有显著差异;在扑尔敏、L-NAME和硝苯地平孵育的组织中,兴安杜鹃及金丝桃苷与未孵育的组织相比有显著差异,舒张作用有所降低。这种现象可能是通过抑制组胺H1受体、一氧化氮合酶途径和钙离子通道介导的钙离子内流实现的。[结论]该试验建立的方法简单、准确,能快速测定兴安杜鹃中金丝桃苷、槲皮素和杜鹃素的含量,为其质量评价和控制提供了有效的分析手段;并且这3种成分与兴安杜鹃舒张气管的作用有关,可作为支气管扩张剂开发的理论依据。

HPLC法同时测定金胆片中龙胆苦苷等4种主成分的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定金胆片中4种主要活性成分含量的方法。方法:采用Agilent Eclipse X DB C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相梯度洗脱,检测波长为270 nm;柱温为30℃;流速1.0 mL•min^(-1)。结果:龙胆苦苷、虎杖苷、槲皮素和大黄素质量浓度分别在7.875~78.75μg•mL^(-1)(r=0.9999)、6.75~67.50μg•mL^(-1)(r=0.9997)、7.726~77.26μg•mL^(-1)(r=0.9994)、3.809~38.09μg•mL^(-1)(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.31%、99.21%、99.04%、99.59%(n=6),RSD分别为1.86%、1.24%、1.37%、1.15%。结论:该实验方法准确性可靠、重复性和稳定性良好,专属性强,可为金胆片的质量控制和标准提升提供参考依据。

正交试验优选细叶铁线莲醇提工艺

目的 优选细叶铁线莲的醇提工艺。方法 采用高效液相色谱法测定细叶铁线莲饮片样品中槲皮素的含量;以紫外吸收光谱法测定饮片样品中总黄酮含量;以料液比、提取次数、提取时间为考察因素,以干膏得率、总黄酮含量和槲皮素含量为考察指标,采用L9(3~4)正交试验法优选最佳醇提工艺,并验证。结果 槲皮素质量浓度在1.99~198.99μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9,n=6),定量限和检测限分别为0.060μg/mL和0.018μg/mL;精密度、稳定性和重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率为101.74%,RSD为1.25%(n=6)。芦丁质量浓度在7.42~44.52μg/mL范围内与吸光度线性关系良好。最佳工艺条件为加10倍40%乙醇,提取3次,每次0.5 h。验证试验中干膏得率、总黄酮含量、槲皮素含量分别为25.10%,56.78 mg/g,1.35 mg/g,RSD分别为2.43%,4.10%,2.13%(n=3)。结论 该研究中优选的醇提工艺稳定可靠、重复性好,可为细叶铁线莲的质量评价及其制剂产品的产业化开发提供参考。

Screening of Anti-tumor Effective Extracts from Sedum bulbiferum Makino and HPLC Determination of Quercetin and Kaempferol in This Herbal Medicine

[Objectives] To investigate the anti-tumor activity of Sedum bulbiferum Makino in vitro,and establish a HPLC method for determination of quercetin and kaempferol in S. bulbiferum. [Methods] The inhibitory activities of different extracts and total flavonoids of S. bulbiferum on proliferation of three kinds of cancer cells( Hep G2,EC109,SW480) were tested by MTT assay. HPLC method for determination of quercetin and kaempferol in S. bulbiferum was established. [Results]The growth and proliferation of the three kinds of cancer cells were all significantly inhibited by ethyl acetate fraction and total flavonoids isolated from S. bulbiferum. With each extraction concentration increasing,stronger anti-tumor activity was found. The linear ranges of quercetin and kaempferol were 0. 03-0. 36 μg( R = 0. 999 9) and0. 08-0. 96 μg( R = 0. 999 9),and the average recoveries were 98. 90%( RSD = 1. 15%) and 98. 27%( RSD = 1. 70%),respectively.[Conclusions]S. bulbiferum has significant anti-tumor activity in vitro. The HPLC method established was accurate,reproducible,and could be used for quality control of this crude drug.

艾不同部位有效成分含量的比较

目的建立药材艾不同部位中4种活性成分的高效液相色谱(HPLC)含量测定方法。方法采用HPLC测定艾叶和茎中绿原酸、芦丁、槲皮素、山奈酚含量,色谱柱为Agilent Extend C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为360 nm;柱温为30℃;流速为1.0 ml/min。结果绿原酸、芦丁、槲皮素、山奈酚分别在7.826~782.6μg/ml,0.842~84.2μg/ml,1.685~168.5μg/ml,2.654~265.4μg/ml范围内与峰面积线性关系良好(R^(2)分别为0.9998,0.9995,0.9997,0.9998),精密度、稳定性和重复性良好,平均加样回收率分别为98.92%,97.58%,101.25%,98.02%,RSD分别为1.89%,2.04%,1.69%,2.27%。艾叶和茎中4个成分的含量存在显著差异,其中绿原酸在叶和茎中含量最高,芦丁在叶和茎含量最低。结论本研究所建立的方法高效简便、专属性强,可用于艾叶和茎中绿原酸、芦丁、槲皮素、山奈酚的含量测定。

HPLC法同时测定积雪草中2个黄酮类成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定积雪草中2个黄酮类成分含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇:0.1%磷酸水(60∶40);检测波长为360 nm;流速1.0 mL·min^(-1);柱温30℃;进样量10μL。结果:得到图谱与标准物质对照,确定其2个成分分别为槲皮素,山柰酚(以下简称2个成分);2个成分在测定范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.54%和99.25%,RSD均小于3.0%,4个不同批次样品中2个成分含量分别为0.029%~0.038%、0.072%~0.091%。结论:该方法简便准确、重复性好,可用于积雪草2个黄酮类成分的含量测定。

蒙药材多叶棘豆不同采收期的槲皮素含量动态变化研究

目的:检测不同采收期的人工种植的多叶棘豆中有效成分的含量,确定最佳采收期。方法:采用高效液相色谱法测定多叶棘豆质量标准物质槲皮素的含量。色谱柱为syncronis-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.4%的磷酸溶液(50∶50);流速为1.0 mL/mim;检测波长为370 nm;柱温为25℃。结果:槲皮素在30.156μg~904.684μg范围内具有良好的线性关系(R^(2)=1),含量动态变化区间3.34 mg/g~5.80 mg/g,槲皮素含量随时间变化趋势有一定规律,在6月初到6月中旬采收的含量相对较高,6月中旬至9月初槲皮素含量逐渐下降。结论:6~9月采收的多叶棘豆槲皮素含量高于标准规定的1.00 mg/g,尤其是6月中旬采收的含量达到了5.80 mg/g,质量最佳,符合蒙医药古籍文献中记载的6月中旬夏季和8月中旬秋季为采收最佳时间,为生产加工优质多叶棘豆原材料提供科学依据。

蜡梅花药材UPLC特征图谱及黄酮类成分含量测定研究

目的 建立蜡梅花药材UPLC特征图谱,并测定2种黄酮类成分的质量分数。方法 采用Waters Cortecs T3(100 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱,以甲醇-0.2%磷酸为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,检测波长355 nm,柱温35℃,建立17批次蜡梅花药材的特征图谱,并进行相似度分析,同时测定药材中2种黄酮类成分(芦丁、槲皮素)的质量分数。结果 建立的17批蜡梅花药材特征图谱共标定5个共有峰,相似度均大于0.90。芦丁在9.911~495.5μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),加样回收率为99.34%;槲皮素在6.128~306.4μg范围内线性关系良好(r=1.000 0),加样回收率为97.32%。来源于不同产地的17批蜡梅花芦丁质量分数范围为5.04~22.04 mg/g,槲皮素质量分数范围为2.55~5.21 mg/g。结论 本研究建立的方法简便快捷、稳定可靠,能全面地用于蜡梅花药材的质量评价。

HPLC法同时测定不同产地新疆鼠李枝中3种黄酮类成分的含量

[目的]建立同时测定新疆鼠李枝中槲皮素、山奈酚、芹菜素的HPLC法,同时优化新疆鼠李枝提取工艺并测定其含量。[方法]采用Agilent XDB-C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-0.4%磷酸(B)为流动相,进行梯度洗脱(0~15 min,65%~55%B;15~35 min,55%~55%B;35~60 min,55%~40%B;60~70 min,40%~20%B;70~80 min,20%~65%B);检测波长360 nm,流速1 mL/min;柱温30℃。[结果]槲皮素、山奈酚、芹菜素分别在6.89~110.20、6.81~108.90、5.40~108.10μg/mL线性关系良好(r≥0.9996)。新疆鼠李枝中上述3种成分的平均回收率分别为100.00%、99.01%和100.43%,RSD分别为1.26%、1.76%、0.97%。[结论]该方法准确、可靠、重复性好,为新疆鼠李树枝提取物的质量评价与控制标准提供了重要依据。

加工方式对传统荞麦制品芦丁含量及功能特性的影响

为了分析不同加工方式对传统荞麦制品营养成分含量及功能特性的影响。利用高效液相色谱法测定了蒸、煮、烙、油炸和发酵等加工方式所得传统荞麦制品中的芦丁、槲皮素含量,对其制品的抗氧化能力进行了比较。结果表明,荞麦面粉加水调制成面团时,芦丁结构发生了变化,生成了槲皮素;传统荞麦制品中,槲皮素含量远高于芦丁含量;不同加工方式对芦丁和槲皮素含量的影响不同,发酵对荞麦中芦丁、槲皮素的影响最大(苦荞面粉中的芦丁含量为6869.1 mg/kg,槲皮素未捡出;而苦荞醋中的芦丁含量为19.8 mg/kg,槲皮素含量为29.2 mg/kg),油炸次之,煮制对芦丁、槲皮素的影响最小;不同加工方式所得苦荞制品的甲醇提取物均具有一定的抗氧化能力,其中发酵制品的抗氧化能力最强,而油炸制品最弱。此结果提示人们在加工荞麦制品时,应尽量避免采用加热温度较高的烙制和油炸,可多采用煮制加工,以减少对荞麦制品品质的影响,同时应重视苦荞醋的研究与开发。

云南普洱茶中黄酮含量的测定及槲皮素、芦丁的提取分离

研究了部分云南普洱茶中黄酮类化合物的含量及槲皮素、芦丁的提取分离方法。实验结果表明,新工艺原料黄酮含量最高,达24.576mg/g,新工艺特级最低,仅有3.660mg/g。从中选取黄酮含量较高的三个样品进一步提取分离槲皮素、芦丁,得到了纯度在30%以上的粗制品。

UPLC-MRM-MS法测定头花蓼药材中7个指标成分

建立头花蓼药材中没食子酸、原儿茶酸、陆地棉苷、槲皮苷、儿茶素、槲皮素-3-O-（2″-没食子酰基）-鼠李糖苷及槲皮素的UPLC-MRM-MS检测方法。色谱采用Waters BEH C18（2.1 mm×50 mm,1.7μm）色谱柱,以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,质谱采用多反应离子监测（MRM）检测。没食子酸、原儿茶酸、陆地棉苷、槲皮苷、儿茶素、槲皮素-3-O-（2″-没食子酰基）-鼠李糖苷及槲皮素分别在0.136~32.965、0.031~7.481、0.022~5.300、0.076~18.433、0.085~20.737、0.017~4.147、0.128~31.029μg/m L浓度范围线性关系良好,平均回收率为91.23%~105.33%,RSD〈3%,精密度、重复性和稳定性良好。此方法操作简便,快速,灵敏度高,可用于头花蓼药材中主要活性成分的含量测定,并为头花蓼药材质量控制提供了新方法。

不同产地火炭母中槲皮素的含量测定方法研究

目的建立火炭母药材中槲皮素的的含量测定方法,测定10个产地火炭母中槲皮素的含量。方法采用RP-HPLC测定药材中槲皮素含量,色谱柱:AgilentTC-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-0.6%磷酸(52:48)等度洗脱;流速:1mL·min-1;柱温:(25±1)℃;检测波长:365nm;洗脱时间:20min;进样量:20μL。结果槲皮素标准曲线回归方程为:Y=85355X-48.16(r=0.9993),在0.004～0.012mg·mL-1浓度范围内线性关系良好,平均回收率为100.3%,RSD=1.44%,不同产地火炭母中槲皮素的含量范围为183.0～848.1μg·g-1。结论所用方法简便、准确,可用于火炭母药材的质量控制;相同季节、不同产地火炭母中槲皮素的含量差异较大。

施氮磷钾对赶黄草产量和槲皮素含量的影响

为了研究N、P、K对赶黄草生长发育、产量和槲皮素含量的影响,为赶黄草的合理施肥提供理论依据。采用N、P、K三因素二水平完全试验设计,分析不同处理药用有效成分槲皮素含量。结果表明,施N极显著提高产量,N明显增加植株分枝和根的重量,施P有增加植株高度的效应,施K对提高植株槲皮素含量有一定影响。因此,N是影响产量的主要因素,增施N肥,配施P、K肥是提高赶黄草产量、增加槲皮素含量和积累量的有效施肥措施。

HPLC-DAD法同时测定蒙药森登-4汤散中7种抗风湿活性成分的含量

目的:建立同时测定蒙药森登-4汤散中7种抗风湿活性成分儿茶素、栀子苷、二氢杨梅素、花旗松素、芦丁、杨梅素和槲皮素含量的方法。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)。色谱柱为Sil Green C_(18),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1 mL/min,检测波长为238 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:儿茶素、栀子苷、二氢杨梅素、花旗松素、芦丁、杨梅素和槲皮素检测质量浓度的线性范围分别为8.590～2 290、10.56～3 901、13.00～3 958、8.815～564.2、4.030～257.8、8.130～750.5、7.075～454.2μg/mL(r≥0.999 1);检测限分别为0.429 5、0.264 0、0.325 0、0.220 4、0.201 5、0.203 2、0.176 9μg/mL,定量限分别为1.030、1.321、1.302、1.397、1.637、0.813 0、0.707 5μg/mL;精密度、稳定性(48 h)、重复性试验的RSD均小于2.0%(n=6);平均加样回收率分别为96.24%～99.28%,RSD分别为1.03%～1.63%(n=6)。结论:该方法简便、准确、重复性良好,可用于同时测定蒙药森登-4汤散中儿茶素、栀子苷、二氢杨梅素、花旗松素、芦丁、杨梅素和槲皮素的含量。

山蜡梅叶中3种黄酮类成分含量动态变化研究

建立同时测定山蜡梅叶芦丁、槲皮素、山奈酚含量的方法以及分析含量动态变化。采用HPLC法测定不同采收时间山蜡梅叶中芦丁、槲皮素、山奈酚的含量,建立的HPLC分析方法能使3种黄酮类成分均达到基线分离。随着植株生长,山蜡梅叶中黄酮类成分从5月份开始显著累积,并首先生成槲皮素和山奈酚黄酮苷元类成分,经由黄酮苷元继续合成黄酮苷芦丁。从7月份开始,黄酮苷元类成分开始逐渐下降,转化为黄酮苷类成分芦丁。从5月到10月,黄酮类总含量呈现逐步递增趋势。该含量测定方法能简便快速的测定山蜡梅叶中多个黄酮类成分的含量,可以较全面地反映山腊梅叶药材质量;且从含量动态分析结果可知,8至9月份采收山蜡梅叶药材,容易获得较大生物产量和质量。

高效液相色谱法测定消浊通淋颗粒中槲皮素和山奈素的含量

[目的]建立消浊通淋颗粒中槲皮素和山奈素含量的测定方法。[方法]采用高效液相色谱法,色谱柱为岛津VP-ODS c(250.0mm×4.6 mm5,μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(48∶52),流速为1.1 ml/min,检测波长为360 nm。[结果]槲皮素在0.075 2～0.270 5μg范围内呈现良好线性关系,加样回收率为99.5%,RSD为0.30%(n=6);山奈素在0.113 0～0.406 8μg范围内呈现良好线性关系,加样回收率为99.7%,RSD为0.34%(n=6)。[结论]高效液相色谱法测定消浊通淋颗粒中槲皮素和山奈素的含量操作简单、准确、重复性好、精密度高,可以作为消浊通淋颗粒的质量控制方法。

鱼腥草中总黄酮和槲皮素含量的动态变化

[目的]探究鱼腥草中总黄酮和槲皮素含量的动态变化。[方法]在2006年5～10月采集鱼腥草花果期不同器官及不同季节的器官，烘干至恒重后测定总黄酮和槲皮素的含量。[结果]鱼腥草各器官的总黄酮和槲皮素含量差异较大。总黄酮的含量在各器官高低顺序为叶子〉果实〉花〉全株〉地上茎〉地下茎；槲皮素的含量在各器官高低顺序为花〉叶子〉果实〉全株〉地上茎；鱼腥草全草中总黄酮和槲皮素的含量在6～10月逐渐升高，10月含量达到最高；二者含量的分布在不同器官和不同季节中具相似性，且鲜草中槲皮素的含量比干品的含量高。[结论]该研究为提高鱼腥草药材质量、促进综合利用、规范化栽培、适时采收提供科学依据。

银杏黄酮测定时水解条件的研究

目的:寻找水解率高、耐用性好的银杏黄酮测定的水解条件。方法:在预防氧化降解反应方面,比较不同保护措施的效果;在充分的保护措施下考察不同的加热方式、盐酸浓度、甲醇浓度、加热时间等水解条件。结果:预防氧化降解的发生能有效提高水解液的稳定性,并使密封加热在优选的条件下,测得量比回流加热水解高10%以上。结论:溶剂脱气、充氮气排除接触供试液的空气中的氧、避光等可有效防止氧化降解反应的发生;水解方式采用密封加热优于回流加热。