rHPLC定量分析血浆Hcy方法的比较研究

目的 :建立一种高效简单的血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度的定量分析法。方法 :以N -乙酰半胱氨酸为内标 ,SBD -F为衍生剂 ,分别使用硼氢化钠和3 -丁基膦为还原剂及磷酸盐和乙酸盐为流动相 ,应用反相高效液相色谱 -荧光检测器(rHPLC -FD) ,在测定Hcy 标准品的基础上 ,测定63例健康人血浆Hcy 浓度。结果 :所有色谱图均有较好分离效果。应用硼氢化钠为还原剂和磷酸盐为流动相的方法检测Hcy 浓度 ,其最小检测限为1.0μmol/L ,批间差异为4.48 % ,批内差异为4.20 % ,回收率为(98.62±5.05) %。测得健康成人血浆平均Hcy 浓度为(10.11±1.91)μmol/L。同份样品用硼氢化钠还原比用3 -丁基膦还原反应快 ,但色谱图杂峰多 ,用磷酸盐为流动相洗脱时间略长 ,但对色谱柱损害小。结论 :本方法适用于临床实验室对Hcy 的常规定量测定。3 -丁基膦更适合为Hcy 的还原剂 ,使用磷酸盐为流动相可延长色谱柱的使用寿命。

MAE-RHPLC法测定肉制品、动植物油脂中B(α)P含量

建立测定肉制品、动植物油脂中苯并(α)芘[B(α)P]含量的MAE-RHPLC法。样品经微波辅助萃取技术(MAE)富集、提取、净化,Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,流速1.0 mL/min的流动相(V(乙腈)︰V(水)=88︰12)洗脱,荧光检测器(λ发射:410 nm,λ激发:365 nm,狭缝:10 nm)检测,最后以峰面积外标法定量。B(α)P的检出限为0.01μg/kg,标准曲线线性范围为0μg/mL^42μg/mL,相关系数为0.999 9,方法回收率为97%~105%,精密度良好:日内RSD<1%、日间RSD<2%,准确度良好:测定值在甲醇中苯并(α)芘成分分析国家标准物质(GBW 08702)的标准值范围内。该法前处理简捷、高效、重现性好、回收率高,检出限、线性范围、准确度、精密度均满足要求,可用于大批量处理并测定肉制品、动植物油脂中B(α)P含量,也可参照用于处理、测定其它食品中B(α)P含量。

反相高效液相色谱法测定人血中血小板活化因子方法学的研究及其临床意义

目的：探讨用反相高效液相色谱法（ＲＨＰＬＣ）测定人血中血小板活化因子（ＰＡＦ）方法学的实用性。方法：分析实验影响因素，并与生物法对比观察，对不同年龄段正常人与冠心病患者血中ＰＡＦ含量进行测定与分析。结果：证实ＲＨＰＬＣ法测定ＰＡＦ操作简便，与经典生物法有良好的相关性（ｒ＝０．９０７９）。结论：用ＲＨＰＬＣ法测定人血中ＰＡＦ的干扰因素少，重复性好，测定的血ＰＡＦ值具有可靠性，能较准确地反映血中ＰＡＦ的水平。

反相高效液相色谱法测定油脂中抗氧化剂特丁基对苯二酚

采用反相高效液相色谱法分离并测定了加入于油脂中的抗氧化剂t-丁基对苯二酚 (t-BHQ)。适量的油脂试样溶于n-已烷中,其中的t-BHQ用甲醇萃取。含有t-BHQ的甲醇溶液进样至仪器中进行分离和测定。采用Symmetry Shield RP-C18作固定相;流动相系由甲醇及 0．001 mol·L-1磷酸按60比40的体积比混合配成,并用0．001 mol·L-1乙酸及0．001 mol·L-1 磷酸组成的缓冲控制流动相的酸度至pH 5．0。t-BHQ浓度在0．010 07-0．402 8 g·L-1范围内与所测主峰面积之间呈线性关系。方法的检出限(S／N=2)为0．020 14 μg。无论日间或日内测定的保留时间值或峰面积值,计算所得的RSD值均小于3．4％,说明仪器的重复性和稳定性良好。回收试验的结果表明测定的回收率在91．8％-94．0％之间,一次分析仅需6 min。

复方丹参口腔崩解片中人参皂苷Rg_1的含量测定

目的:建立复方丹参口腔崩解片中人参皂苷Rg1的含量测定方法。方法:应用HPLC测定人参皂苷Rg1含量,并考察其方法的可行性。结果与结论:研究建立了测定人参皂苷Rg1含量的反相HPLC,在0.420～3.780μg线性关系良好,精密度0.38%,加样回收率1.31%。

测定人红细胞内核苷酸反相高效液相色谱法的改进

对测定人红细胞内核苷酸的反相高效液相色谱法进行改进,将双液梯度洗脱条件改为单液等度洗脱,使其操作简单,分析时间缩短,效果同样满意。

反相高效液相色谱法同时测定茶叶中六种儿茶素组分的研究

采用反相高效液相色谱法同时测定茶叶中L (+) 表儿茶素(L EC),L (-) 表儿茶素没食子酸酯(L ECG),L (-) 表没食子儿茶素没食子酸酯(L EGCG),L (-) 表没食子儿茶素(L EGC),(+) 没食子儿茶素没食子酸酯(GCG),DL 儿茶素(DL C)六种儿茶素组分,以乙醇∶乙酸∶水=14.5∶1.0∶84.5(体积比)为流动相(1.0ml·min-1),C18柱,UV检测器(278nm)。六种儿茶素组分的相对标准偏差分别为0.67%,0.45%,0.24%,0.56%,3.11%,4 41%,回收率分别为95.2%,98.2%,101.3%,97.0%,98.3%,97.5%。该法采用乙醇、乙酸等无毒溶剂作流动相,回收率高,用于实际样品测定,结果满意。

草甘膦与共存有机膦酸的对甲基苯磺酰氯衍生物反相高效液相色谱分离

建立了一种草甘膦生产母液中的草甘膦和共存有机膦酸的反相高效液相色谱分离方法。化合物与对甲基苯磺酰氯在pH 11.2的磷酸盐缓冲溶液中反应 ,取反应混合物溶液 10 μl进样 ,在C18柱中分离 ,用二极管阵列检测器在 2 4 0nm检测。流动相组成为 0 .0 5mol·L- 1磷酸盐缓冲液(pH 5 .5 ) 甲醇 (80 +2 0 )。草甘膦与其主要代谢物氨甲基膦酸的出峰顺序在pH 4 .2和 5 .5时是相反的。样品中草甘膦浓度在 2～ 4 0 μg·ml-

血小板活化因子反相高效液相色谱法测定及其在老年性疾病中的应用

目的 建立血小板活化因子 (PAF)的反相高效液相色谱 (rHPLC)检测法 ,与生物学检测法比较 ,探讨其在老年脑梗死、高血压、冠心病等疾病中的意义。方法 采用rHPLC对 10 0例健康对照者、2 3例脑梗死、2 8例高血压病、6 5例冠心病患者血PAF进行分析。结果 rHPLC法与生物学法相关性较好 ,操作简便 ,重复性好 ,灵敏度高 ,干扰因素少。脑梗死、冠心病患者血PAF值显著高于参考值 (P <0 0 1) ;高血压病组与对照组比较 ,无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 rHPLC法测定PAF更具可靠性 ,更能正确地反映血中PAF水平 ;有助于进一步推动PAF的临床与基础研究。

钩藤碱对大鼠脑内去甲肾上腺素、5-羟吲哚乙酸的影响

目的测定钩藤碱对大鼠脑内去甲肾上腺素 (norepinephrine ,NE)、5 羟吲哚乙酸 (5 hydroxyindoleaceticacid ,5 HIAA)影响 ,进一步探讨钩藤碱的镇静作用机制。 方法利用脑微透析方法收集药前及药后纹状体、海马及大脑皮质的细胞外液 (透析液 )。经反相高效液相电化学法 (HPLC -ECD)检测其NE、5 HIAA的变化。结果Rhy增高正常鼠脑纹状体及海马细胞外液中 5 HIAA的含量 ,降低海马和皮层中NE的含量。结论钩藤碱的镇静作用 ,可能与其改变脑内单胺类递质及其代谢产物的含量有关。

固相萃取-反相HPLC分析色酒中有机酸

以高效液相色谱法对三种有色酒中的七种有机酸进行了分析。采用 C18预处理柱进行样品前处理 ,固定相为 μBondapak C18柱 ,流动相为 p H2 .9的 5g· L-1磷酸氢二铵溶液 ,流速为1 ml· min-1,检测波长为 2 1 4nm,方法回收率为 96%～ 1 1 3% ,检出限为 2 0～ 1 2

恩丹西酮注射液与异环磷酰胺在生理盐水中配伍的稳定性

目的：考察０℃～４℃，２５℃和３５℃下，恩丹西酮注射液与注射用异环磷酰胺在生理盐水中的配伍稳定性。方法：采用反相高效液相色谱法测定配伍后不同时间恩丹西酮与异环磷酰胺的含量，同时观察外观并测定ｐＨ值。结果：０℃～４℃，２５℃和３５℃下，两种药物在生理盐水中配伍后，２４ｈ内配伍液的外观澄明，未见气泡及颜色变化，ｐＨ值及含量均无明显变化。结论：两种药物在生理盐水中２４ｈ可以配伍使用。

高效液相色谱法测定新除草剂丙草醚

介绍了高效液相色谱外标法测定新型除草剂丙草醚含量的方法。用C_8反相柱,甲醇-水(80:20)为流动相,紫外检测波长310nm;线性范围1～300μg·ml^(-1);相关系数为0.9999,RSD为0.36%。回收率为98.5%～101.8%,检出限为8.33ng·ml^(-1)。

反相高效液相色谱法测定茶多酚中表没食子儿茶素没食子酸酯的含量

目的采用反相高效液相色谱法测定茶多酚中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的含量。方法以甲醇∶水∶乙酸=26∶73.5∶0.5(体积比)为流动相(1.0mL/min),C18柱(250.0mm×4.6mm,5μm),UV检测器(278nm)。结果EGCG在0.1303￣0.6517mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9995),平均回收率为100.26%,RSD为0.86%。结论该法简便、快速,可作为测定茶多酚中EGCG含量的方法。

邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法测定氨基酸类神经递质

以邻苯二甲醛柱前衍生,ODS(C_(18))柱分离,pH 6.0乙酸盐缓冲溶液与甲醇二元梯度洗脱,荧光检测,仅9min内分离测定了大鼠脑中5种氨基酸递质的含量。在1～10μmol·L^(-1)浓度范围内,氨基酸的峰面积与其浓度呈现良好的线性关系,相关系数在0.9978～0.9999之间。

反相HPLC分析发酵液中麦白霉素A_1的含量

麦白霉素(Meleumycin,MLM)是放线菌发酵的次级代谢物,属于大环内酯类抗生素。在发酵工艺和菌种不同时都会产生一系列结构相似、性质相仿的同系物,其中的主要有效成分为A_1。本文建立了用反相HPLC法分析测定A_1的含量,及时反馈发酵液、吸附废液、解吸液、固体粗品中麦白霉素效价情况,为中间体各环节的质量控制提供了简便快速、重现性好的方法。使用Waters液相色谱仪,C_(18)柱(15 cm×7.5 mm),流动相为甲醇-NH_4Ac-水。

基于反相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术快速测定饲料中砷形态的研究

建立了反相高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术(RHPLC-ICP-MS)测定饲料中砷酸盐砷[As(Ⅴ)]、一甲基砷酸(MMA)、亚砷酸盐[As(Ⅲ)]、二甲基砷酸(DMA)、甜菜碱(AsB)的分析方法。饲料样品经硝酸溶液(10+990)提取,结合Agilent ZORBAX SB-Aq反相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),在5 min内完成5种砷形态物质的分离和检测。结果表明:各形态砷在1～50 ng/mL范围内线性良好(R>0.999),检出限为0.258～1.150 ng/mL,加标回收率在83.6%～113.1%之间,相对标准偏差(RSD)均小于5%。通过实际样品检测,该方法适用于饲料中主要砷形态物质的快速定量分析。

反相高效液相层析技术用于新生儿^(A)γ^(T)基因频率分析

为检测贵州省苗族新生儿血红蛋白中的A T 变异体 ,以便进一步分析变异个体的基因型 ,首先必须用适当的方法检测出新生儿脐带血HbF中的A T 链。介绍用反相高效液相层析技术 (RHPLC)检测人类HbF中的A T 链 ,所用主要试剂乙腈为国内产品。该检测方法具有程序化、自动化、灵敏度高、快速、准确的特点。该方法的建立为A T的检测及基因表达产物的鉴定 ,提供了新的。

反相高效液相色谱法测定注射用氢化可的松琥珀酸钠的含量

目的：采用反相高效液相色谱法测定注射用氢化可的松琥珀酸钠中21-氢化可的松半琥珀酸钠、17-氢化可的松半琥珀酸钠与游离氢化可的松的量。方法：ODS柱(4．0×250mm，10μm)，流动相为甲醇：磷酸盐缓冲液，用0．008mol／LK2HP04溶液调节0．008mol／LKH2P04溶液至pH=5．0)(43：57)，检测波长242nm，流速1．0ml／min，柱温40℃。结果：氢化可的松琥珀酸钠的平均回收率99．68％。RSD为0．26％，氢化可的松琥珀酸钠在0．16～1．44μg浓度范围内呈良好线性，r=0.9999。游离氢化可的松在0．240～0．560μg浓度范围内呈良好线性，r=0．9999。结论：该方法快速、准确、灵敏，并能更好地控制药品质量。该方法已被中国药典2000年版2002增补本收载。

生理条件下对苯二酚的电化学行为及电极产物的色谱鉴定

用循环伏安法研究了对苯二酚在玻碳电极上的电化学行为，从循环伏安图上看出当在0至1．6V电位间连续扫描20次，在0．63V左右可见到一氧化峰电位，其峰电流随扫描次数的增加而减小。说明电极反应为不可逆过程。然而，如改变在-1．4～1.6V电位间扫描，仅数次扫描后即可在Epa=0．25V和Epc=-0．08V处见到一对氧化还原峰电位，说明了此过程为一可逆过程。同时，对电极反应的产物用RHPLC进行研究和鉴定，从色谱图所示结果与电化学法所得结果一致。根据此工作的研究结果对苯二酚在呼吸链中所产生的作用进行了探讨。