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磁性免疫微球在人血清白蛋白纯化中的应用(英文) 被引量:4
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作者 吴明珲 姜玲黎 +2 位作者 曾凡波 王妮丹 唐斓 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期608-614,共7页
目的为了快速地从人血清中提纯人血清白蛋白,利用磁性免疫微球作为提取手段,再用间接酶联免疫法测定人血清白蛋白的回收率。方法将经过羧基修饰的聚苯乙烯微球作为载体,用EDC(碳化亚胺)活化微球表面的羧基,再将兔抗人血清白蛋白抗体包... 目的为了快速地从人血清中提纯人血清白蛋白,利用磁性免疫微球作为提取手段,再用间接酶联免疫法测定人血清白蛋白的回收率。方法将经过羧基修饰的聚苯乙烯微球作为载体,用EDC(碳化亚胺)活化微球表面的羧基,再将兔抗人血清白蛋白抗体包被于微球上,这种微球-抗体复合物能特异性地捕获人血清白蛋白,磁分离复合物后,通过将兔抗人血清白蛋白抗体作为捕获抗体,将酶联羊抗人血清白蛋白抗体作为检测抗体,建立起间接酶联免疫法,用于检测人血清中和磁性免疫微球上吸附人血清白蛋白的浓度,得到微球从人血清中提纯人血清白蛋白的回收率。结果第1次提纯的回收率为(86±4)%,重复利用微球2次,回收率分别为(69.0±0.6)%和(40.8±0.8)%,而提纯的人血清白蛋白的纯度为90%。结论以上结果表明,免疫磁性微球提纯人血清白蛋白的实验是有效的,为工业上大规模提纯人血清白蛋白提供了一条新的思路。 展开更多
关键词 磁性免疫微球 兔抗人血清白蛋白抗体 蛋白纯化 人血清白蛋白 BAS-ELISA
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Get effective polyclonal antisera in one month 被引量:45
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作者 YUAN XIN HU, Ju YUAN QUO, Lu SHEN, YAN CHEN, Zu CHUAN ZHANG, YONG LIAN ZHANGState Key Laboratory of Molecular Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, 320 Yue Yang Road, 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2002年第2期157-160,共4页
According to the traditional immunization procedure, after the first injection of the sample A (emulsion of aimed antigen and Freund's complete adjuvant) to immunize rabbit, successive injections of the sample B (... According to the traditional immunization procedure, after the first injection of the sample A (emulsion of aimed antigen and Freund's complete adjuvant) to immunize rabbit, successive injections of the sample B (emulsion of aimed antigen and Freund's incomplete adjuvant) were followed every 2-4 weeks. In general,high titer of the corresponding polyclonal antisera will be observed after 4-5 injections of sample B in 3-4months. This report presents a simply modified procedure that was able to stimulate the antisera formation in one month and achieve enough avidity to satisfy either Western blot or immunohistochemistry analysis.It just applied an additional injection of the sample A to the rabbit at the 3rd day after the primary immunization injection. You could gain the high titer of the antisera right after the first sample B injection in one month. This method has produced the desired results in three different recombinant antigens with different molecular weight (5.9 KD-55 KD) expressed from prokaryotic or eukaryotic cells. 展开更多
关键词 Antibody Formation Immunologic Techniques Animals Blotting Western Emulsions Freund's Adjuvant Immune Sera Immunohistochemistry MICE Mice Inbred BALB C rabbits Rats Research Support Non-U.S. Gov't serum albumin Bovine Specific Pathogen-Free Organisms Time Factors
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氯胺酮完全抗原的制备及免疫效果检测
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作者 段锐锐 高仕平 +1 位作者 简宗辉 陈培富 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第6期1018-1021,共4页
基于盐酸氯胺酮是一种化学反应性质活泼的小分子,利用半抗原—载体效应的免疫学原理,以三氯化磷(PCl3)为桥梁,将盐酸氯胺酮分子共价连接到兔血清白蛋白(RSA)分子,随后采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析偶联物,并用... 基于盐酸氯胺酮是一种化学反应性质活泼的小分子,利用半抗原—载体效应的免疫学原理,以三氯化磷(PCl3)为桥梁,将盐酸氯胺酮分子共价连接到兔血清白蛋白(RSA)分子,随后采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析偶联物,并用该偶联物免疫BALB/c小鼠,最后采用斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA)检测氯胺酮抗体应答水平。蛋白电泳分析显示已成功制备出分子量约为78.8 ku、氯胺酮与RSA的分子偶联比为39的完全抗原,能诱导实验小鼠产生效价为1∶1 280的抗氯胺酮抗体。本试验不仅建立了检测氯胺酮的血清学方法,还为开发氯胺酮戒毒疫苗做了有益的积累。 展开更多
关键词 盐酸氯胺酮 兔血清白蛋白 半抗原—载体效应 抗体应答
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