β-榄香烯抑制胶质瘤兔角膜移植模型血管生成的实验研究

目的复制兔角膜移植瘤血管生成模型,检测β-榄香烯体内抗血管生成效应。方法裸鼠皮下种植人脑胶质瘤细胞系SHG44细胞,形成实体胶质瘤。将所得胶质瘤实体小块移植于兔角膜,复制角膜移植瘤血管生成模型。经兔耳缘静脉注射β-榄香烯,干预两周后应用Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学染色及图像分析技术,检测移植胶质瘤组织内微血管密度变化。结果兔角膜移植瘤血管生成模型成功复制;β-榄香烯处理组移植胶质瘤微血管密度明显低于对照组。结论兔角膜血管生成模型是定量研究肿瘤血管生成的良好工具;β-榄香烯具有体内抗肿瘤血管生成作用。

冷冻伤致家兔角膜内皮损伤动物模型的建立

用冷冻法建立家兔角膜内皮损伤的动物模型。将直径为 8mm的铜探头置于液氮中数秒后取出 ,待探头温度显示在 - 12 0℃时将其垂直放于兔角膜中央表面分别接触 5s和 15s。结果显示冷冻区的角膜内皮细胞完全被破坏 ,内皮细胞损伤区与未损伤区之间界限清晰。冷冻 5s和 15s能造成面积相近的角膜内皮缺损 (P >0 .0 5) ,而冷冻 5s者角膜水肿较轻 (P <0 .0 5)。伤后 2 d,内皮缺损面积为(4 .13± 1.97) mm2 ,伤后 3d,一部分的角膜内皮已愈合 ,伤后 4 d所有角膜内皮缺损已被大小不一、形态不规则的再生内皮细胞所覆盖。伤后 12 d,再生的内皮细胞大小趋于均匀一致 ,为多边形。本试验通过对冷冻探头温度的统一监测 ,建立了兔角膜内皮损伤的动物模型 ,并且本模型具有可重复性及简单易行的特点。

家兔角膜缘干细胞缺失病理模型的制作

根据角膜缘干细胞定位于角膜缘上皮基底层,为角膜上皮增殖分化的源泉并保持角膜上皮完整性的理论。将20只家兔随机分为4组,每组5只,分别将角膜缘上皮全周或半周板层手术切除,或用1mol/LNaOH直接擦除等方法破坏角膜缘干细胞,探索制作角膜缘干细胞完全缺失病理模型的有效途径。结果表明,处理后4周,全周角膜缘上皮板层手术切除,中央角膜上皮层用1mol/LNaOH擦除的5只试验家兔角膜表面全部血管化、结膜化,未发生睑球粘连,角膜基质胶原纤维完整未见溃疡、穿孔等病变,细胞印迹学检查为结膜表型,可作为实验性角膜缘干细胞移植的病理模型;全周角膜缘上皮板层手术切除,中央角膜上皮用生理盐水擦除的5只试验家兔,有2只为结膜表型,另3只为角膜表型,观察期内结果不稳定;半周角膜缘上皮板层手术切除,中央角膜上皮层用生理盐水擦除的5只试验家兔,角膜表面透明,全部为角膜表型;直接用1mol/LNaOH擦除角膜缘和中央角膜上皮的试验家兔,有4只角膜基质胶原纤维断裂、溶解,并伴有严重的溃疡、穿孔、睑球粘连等病变,不能用于移植试验,另1只角膜表面透明,未见结膜和新生血管长入,细胞印迹学检查为角膜表型。

可控恒温烧灼制作兔角膜热烧伤模型的研究

目的探讨可控恒温烧灼制作不同程度兔角膜热烧伤模型的最佳参数。方法成年新西兰大白兔36只,随机分为A、B、C 3组,每组12只(12眼),应用温度可控的电烙铁烧灼角膜制作兔角膜热烧伤模型。烧灼温度:300℃。A、B、C组设定不同的烧灼时间:3 s,7 s,10 s,观察各组制模后角膜烧伤程度及角膜形态学变化,并记录制模后3 d各组角膜溶解情况和制模后14 d角膜烧伤区混浊程度,评估应用可控恒温烧灼不同时间制作的角膜热烧伤模型在角膜烧伤程度、角膜溶解程度、角膜混浊程度等方面是否存在差异。结果制模后各组角膜烧伤程度差异明显(P<0.01),制模后3 d各组角膜溶解情况差异明显(P<0.01),制模后14 d各组角膜混浊程度差异明显(P<0.01)。结论可控恒温烧灼制作兔角膜热烧伤模型效果良好,通过控制烧灼时间可制作不同烧伤程度的模型,所制作的模型具有良好的一致性。

区域性角膜内皮损伤动物模型的建立

目的建立重复性好的区域性角膜内皮细胞（CECs）损伤兔眼动物模型。方法依据电脑绘制的CECs损伤区域模拟图，对应兔眼角膜上皮面标记，于透明角膜缘做穿刺口，导入自制刮除器刮除局部CECs，刮除的同时以含低分子肝素的乳酸林格氏液持续灌注前房，以保持前房稳定、清洗刮除的CECs及避免纤维素性渗出所引发的虹膜粘连。结果共7只兔眼，所设计的十字交叉区域性CECs损伤动物模型都顺利完成制作。从制作透明角膜缘穿刺口开始至制模结束，耗时平均（11．82±1．07）min。台盼蓝染色证实CECs刮除范围与制模前角膜上皮面标记平均吻合指数为（94．71±2．17）％。所有模型眼刮除区域的后弹力层组织均保持完好，无因纤维素性渗出而导致模型制作终止或晶状体虹膜损伤的现象发生。结论本研究提出了一种建立区域性CECs损伤动物模型的有效、可控、便捷的方法，且具有较好的可重复性。