天冬对大鼠的亚慢性和致畸毒性研究

目的:研究天冬对大鼠经口重复给药的亚慢性毒性和致畸毒性。方法:90天经口毒性试验采用SD大鼠80只,雌雄各半,体质量65.4~94.0 g,拌饲法设2 000、4 000、8 000 mg/kg共3个剂量组和1个阴性对照组,连续给予受试物90天,观察动物一般状况,记录动物体质量、摄食量,计算食物利用率,并进行血液学、血生化及病理学检测,从而评价其亚慢性毒性。传统致畸试验采用雌性SD孕鼠,剂量为1 000、2 000、4 000 mg/kg共3个剂量组,另设阴性对照组(蒸馏水),每组22只,经口灌胃给药,于孕第20天处死母体,检查受孕情况和胎仔发育,观察胎仔外观,检查骨骼及内脏,以评估致畸毒性。结果:90天经口毒性试验中大鼠未出现中毒症状及死亡,试验组大鼠组织病理学检查未见毒性损伤作用。致畸试验中低、中剂量组胎仔胸骨发育不全发生率分别为21.49%和26.32%,与对照组(6.25%)相比显著升高(P<0.01),未见其他异常。结论:在本试验条件下,90天经口毒性试验中天冬对大鼠的未观察到有害作用剂量(NOAEL)为8 000 mg/kg;在致畸试验中,未观察到与染毒剂量相关的效应,天冬对SD大鼠无致畸性。

内江天冬的产地加工、质量标准与产品开发策略

天冬始载于《神农本草经》,列为“上品”,临床上常与麦冬、地黄配伍,用于治疗肺阴虚、肾阴虚、热伤胃津等证。内江市东兴区是四川省天冬适宜种植区域之一,2023年“天冬膏熬制技艺”列入内江市第九批非物质文化遗产代表性项目名录。除了药用,在内江地区天冬还常作为食品原料。目前,天冬的采收、产地加工等环节仍需大量人工,去皮、干燥、切制、去心是产地加工的关键工序,去皮机、切药机、微波干燥机等相关中药炮制设备亟需优化升级。《中华人民共和国兽药典》2020年版二部天冬项下收载了性状、显微鉴别、水分检查、总灰分检查、二氧化硫残留量检查及浸出物测定,未收载含量测定项,质量标准有待进一步完善。液质联用、高光谱、近红外光谱、X射线等新技术可用于天冬的定性鉴别,建立内江天冬的特征图谱、指纹图谱可完善专属性分析。天冬的定量分析目前集中在皂苷、氨基酸、多糖,单一成分的含量测定并不能反映中药材的整体质量,故应对天冬药材的多组分进行含量测定,天冬产品则需结合适应症选取药效物质进行测定。另外,有关物质检查应增加5-HMF、农药残留、霉菌毒素、重金属及有害元素等测定项。目前天冬的应用形式单一,主要作为中药材原料,而其在提取物、配方颗粒、新饲料添加剂等领域也发挥着重要作用,具有广阔的市场前景。本文从天冬的产地加工、质量标准、产品开发等方面进行综述,为内江天冬进一步的研究与应用提供参考。

响应面法优化天冬多糖的提取条件

以天冬多糖提取率(Y1)和含量(Y2)为响应值,利用响应面法对天冬多糖提取工艺进行多目标同步优化。根据统计模型发现3个影响因素——提取时间、提取温度、液料比均对多糖提取率和含量有显著影响。由响应面三维及等高线叠加图推测得到天冬多糖提取率与含量均较高的最佳提取工艺参数为提取时间4.2h,提取温度78℃,液料比22:1(mL/g)。验证优化工艺参数得到多糖提取率达到5.24%,多糖含量达到26.42%,与模型预测值非常接近。采用响应面法对天冬多糖提取条件进行优化合理可行。

天冬多糖的结构、免疫调节活性及体外抗氧化活性

目的:探究天冬多糖的结构特征、免疫调节活性和体外抗氧化活性,为后续天冬多糖研究提供依据。方法:采用水提醇沉法提取天冬粗多糖,Sevage法脱蛋白和分级醇沉法对脱蛋白后的多组分多糖进行分离,苯酚-浓硫酸法测定其糖含量;采用高效凝胶渗透色谱法测定其相对分子质量,高效离子色谱法测定其单糖组成;采用红外光谱法分析其结构;对于均一分子质量的80%醇沉多糖分级产物(以下简称TD-80),采用小鼠脾淋巴细胞和巨噬细胞RAW264.7评价TD-80的免疫调节活性及其相关细胞因子的分泌情况。通过测定DPPH自由基清除能力、超氧阴离子清除能力评价其体外抗氧化活性。结果:天冬粗多糖糖含量为63.13%,天冬脱蛋白冻干粉糖含量达73.98%。不同体积分数乙醇分级醇沉后,80%醇沉产物为均一分子质量的多糖产物TD-80(Mw=7.3 ku,Mw/Mn=2.68)。TD-80主要含有7种单糖组成,其中以半乳糖和半乳糖醛酸为主,属于酸性杂多糖。TD-80能促进脾淋巴细胞的增殖,并呈质量浓度依赖关系,对相关细胞因子(TNF-α,IL-1β和IL-6)的分泌有一定的刺激作用,呈现一定的免疫调节活性和抗氧化活性。结论:本方法具有操作简便、结果准确等优点,可为天冬及其它类似药材中多糖的提取、纯化及药理活性研究提供参考。

天冬药材药理实验研究

目的:从天冬水提液、总多糖、总皂苷三种不同提取部位中初步筛选天冬药材的有效部位群。方法:以小鼠为研究对象,灌服不同剂量的以上三种提取液7d,进行低温游泳和常压缺氧实验,以对比给药小鼠免疫及抗应激能力。以D半乳糖致衰小鼠为研究对象,灌服不同剂量的以上三种提取液30d,以脑组织中超氧化物歧化酶(SOD),脑、肝组织中Na+·K+ATP酶、丙二醛(MDA)及血浆中MDA活性为评价指标,对比研究天冬不同提取部位的抗氧化能力。结果:天冬总多糖低、高剂量组能不同程度增加小鼠胸腺和脾脏重量;水提液低、高剂量组能显著增加小鼠耐缺氧时间(P<0.01);天冬水提液低、高剂量组和总多糖的高剂量组能增加小鼠在冰水中的游泳时间。与衰老模型组比较,天冬水提液高剂量组能提高衰老小鼠脑和肝组织中Na+·K+ATP酶活性;水提液低、高剂量组能不同程度降低衰老小鼠脑、肝和血浆中MDA的含量,天冬总多糖高剂量组能降低衰老小鼠肝组织中MDA含量(P<0.01)。结论:天冬水提液低剂量组和高剂量组具有提高小鼠对抗应激反应的能力,长期服用天冬水提液高剂量组能延缓小鼠由D半乳糖引起的衰老。天冬总多糖能不同程度增加小鼠胸腺和脾脏的重量,提高小鼠对抗应激反应的能力,并有一定的延缓衰老作用。天冬总皂苷在以上几项实验中作用均不明显。

新加沙参麦冬煎剂抑制肿瘤转移及其作用机制的实验研究

目的探讨新加沙参麦冬煎剂防治肿瘤转移的机制。方法结合动物模型、免疫组化、细胞分子生物学技术,观察新加沙参麦冬煎剂对荷瘤小鼠抑瘤率、转移抑制率、生命延长率的影响,检测实验小鼠皮下移植瘤血管内等细胞生长因子(VEGF)、血管内皮细胞第Ⅷ因子(CD34)、黏附因子(CD44V6)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶抑制酶(TIMP2)的表达情况。结果新加沙参麦冬煎剂治疗组的瘤重抑制率、肺转移抑制率、生命延长率分别为37.3%,58.3%和20.8%;皮下移植瘤CD44V6、VEGF表达、微血管密度(MVD)明显低于空白组(P<0.01),TIMP2表达记分明显高出其他组(P<0.01)。小鼠肺转移灶数与VEGF、CD44V6、MVD呈线性相关,相关系数分别为0.490,0.398,0.455。结论①新加沙参麦冬煎剂对小鼠LA795高转移肺腺癌模型有较好抑制转移、抑制肿瘤生长和延长荷瘤小鼠生存时间的作用。②新加沙参麦冬煎剂可通过调控肿瘤转移过程中黏附、基质降解、血管生成相关分子的表达,多途径、多靶点防治肿瘤的转移。

中药天冬的化学成分研究

从中药天冬氯仿提取物中分离得到8个化合物,通过化学和波谱方法将其结构鉴定为:β谷甾醇( 1) ,胡萝卜苷( 2 ) ,正 三十二碳酸( 3) ,棕榈酸( 4 ) ,9 二十七碳烯( 5 ) ,菝葜皂苷元( 6 ) ,薯蓣皂苷元( 7) ,菝葜皂苷元 3 O [αL 鼠李吡喃糖基( 1 4 ) ] βD 葡萄吡喃糖苷( 8) ,除β谷甾醇外均为首次从该植物中分得。

天冬类药材中洋菝契皂苷元的含量测定

天冬类药材中皂苷类成分种类较多,我们选择其共有的皂苷元洋菝契皂苷元为质量评价指标成分,利用薄层扫描法对天冬类中药材中洋菝契皂苷元的含量进行了分析测定。结果表明,来源于7种天冬属植物块根的12件商品药材样品中均含有以洋菝契皂苷元为甙元的甾体皂苷,皂苷元含量与天冬药材的植物来源无明显的相关性,且皂苷元的含量与商品等级成反比。

贵州产天冬中多糖的提取及其抗氧化活性的研究

沸水煮提贵州产天冬中的多糖成分并提纯;测定其对.O2-和.OH的清除作用。结果显示贵州产天冬中多糖的提取率为13.00%;一定剂量的天冬多糖在体外对.O2-和.OH具有显著的清除作用(P<0.05)。

天冬中呋甾皂苷含量测定方法的建立

目的：采用E试剂比色法建立了天冬总皂苷含量测定方法。方法：用对二甲氨基苯甲醛-HCl乙醇液的发色体系，以天冬皂苷AC-9作为指标，在波长510nm测定天冬总皂苷含量。结果：标准曲线在0．08～0．40mg范围内线性关系良好，平均回收率为99．79％（RSD=1．05％）。结论：此法可作为评价天冬总皂苷的质量标准。

湘产鲜天门冬加工方法初步研究

采用不同煮烫时间、干燥温度、干燥方法、处理方法加工湘产鲜天冬,并对产品质量进行综合评价。结果表明,干燥温度为25、35℃产品质量优良;60℃以上的干燥温度所得产品质量差,45、50℃干燥的产品色较深;真空干燥产品质量较烘干方法更好;冷冻干燥法的产品质量好;经CaCl2、明矾处理以35℃干燥的质量较优;原材料以煮汤15min产品质量较优。

天门冬水提液及其纳米中药对衰老模型小鼠NOS、NO、LPF的影响

目的:探讨中药天门冬及其纳米化后对D-半乳糖衰老模型小鼠血清和肝的抗氧化作用。方法:采用D-半乳糖致衰老小鼠分别ig相同剂量的天门冬水提液及其纳米中药15d,测定衰老小鼠血清中一氧化氮合酶(NOS)的活性,一氧化氮(NO)含量及肝组织中脂褐素(LPF)的含量。结果:天门冬水提液及其纳米中药均能显著增强小鼠血清中NOS的活性(P<0.01),提高NO含量(P<0.05),降低LPF含量(P<0.05),且纳米中药的药效强于天门冬水提液的药效(P<0.05)。结论:天门冬水提液及其纳米中药均有抗氧化作用,且纳米中药比水提液药效更好。

天冬中菝葜皂苷元含量测定方法的探讨

目的 研究天冬中菝葜皂苷元的含量测定法。方法 采用薄层扫描法对天冬中菝葜皂苷元进行含量测定。结果 菝葜皂苷元在 0 .5～ 4 .5 μg范围内线性关系良好 ( r=0 .9985 ) ,平均回收率为 97.4 % ,RSD=2 .7%。结论 本法简便、准确、灵敏 ,重现性良好 ,可用于天冬质量控制及 GAP研究。

天冬种子油营养成分分析及镇静催眠作用观察

目的:研究天冬种子油的理化性质和营养成分含量,观察天冬种子油对小鼠的镇静催眠作用,并评价其急性毒性。方法:采用中国油脂标准方法测定天冬种子油基本营养成分和理化性质;气相色谱-质谱联用法分析不皂化物成分;原子吸收分光光度计(atomic absorption spectrometry,AAS)法检测矿质元素含量;以KM种小鼠为受试动物,研究天冬种子的镇静催眠作用,并考察其急性毒性。结果:天冬种子油水分含量为1.87 g/100 g、灰分含量为0.15 g/100 g、粗脂肪含量为96.6 g/100 g、VE含量为405.55μg/g;不皂化物主要为烷烃类化合物(17%)和甾醇类化合物(41.8%);天冬种子油中含量较高的矿质元素有钠(297.92μg/g)、镁(216.88μg/g)、钙(145μg/g);天冬种子油4.65 g/kg和2.33 g/kg剂量组对小鼠自主活动有明显抑制作用,且能显著增加阈下剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠只数;一次性灌胃最大给药量40 mL/kg(37.24 g/kg),连续观察14 d,未见死亡或体质量、活动等异常。结论:天冬种子油含有丰富的营养成分,具有安神镇静的作用,并且安全性较高。

硫酸-蒽酮法测定天冬中多糖含量

目的:从天冬中提取多糖并测定其含量。方法:水提醇沉法提取多糖,硫酸-蒽酮法测定天冬多糖含量。结果:测得天冬中多糖含量较高,平均回收率100.26%,RSD=1.61%(n=6)。结论:该方法操作简便、准确,回收率高,可用于天冬药材的质量控制。

天冬药材的薄层层析研究

作者首次从天冬样品液制备方法、展开剂筛选、展距确定等方面研究了不同产地的天冬所含有的β-谷甾醇和氨基酸(L-天冬酰胺、精氨酸、亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸)的薄层色谱条件。β-谷甾醇的薄层鉴别条件为:用石油醚提取,展开剂为石油醚-醋酸乙酯-甲酸(5:1:0.06),10防硫酸乙醇显色;氨基酸的薄层定性鉴别:无水乙醇冷浸,展开剂为正丁醇-冰醋酸-乙醇-水(4:1:1:2),茚三酮溶液显色;所得出的方法的重现性好,薄层斑点清晰,分离度好,可作为天冬定性鉴别手段之一;有利于天冬CAP研究并为制定天冬药材质量标准提供依据。

不同产地天冬中多糖的含量比较

目的比较不同产地天冬中多糖的含量差异。方法以水提醇沉法提取多糖、硫酸-蒽酮法测定多糖含量。结果天冬中多糖含量较高,不同产地的含量差异较大。含量测定方法的平均回收率为100.04%,RSD=0.88%(n=6)。结论含量测定方法简便、准确,回收率高。

天冬药材的薄层色谱分析

目的 完成天冬GAP研究以及进一步制订天冬药材的质量标准。方法 首次采用薄层色谱法 (TLC)对不同产地的天冬药材中所含的 β -谷甾醇、氨基酸 (L -天冬酰胺、精氨酸、亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸 )和菝葜皂苷元进行定性分析。 结果 TLC分离效果好 ,斑点清晰。结论 所用方法专属性强 ,重复性好 ,可作为天冬的定性分析方法。

暖宫七味丸的质量标准研究

目的修订暖宫七味丸的质量标准。方法采用显微鉴别方法,鉴别暖宫七味丸中豆蔻、天冬、肉豆蔻、沉香、手掌参及丁香;采用GC法,鉴别暖宫七味丸中豆蔻的主成分桉油精;采用HPLC法,测定暖宫七味丸的总丁香酚含量。结果显微鉴别及气相色谱鉴别专属性强。含量测定丁香酚线性范围为0.08560～3.264μg;样品的平均加样回收率为95.87%(n=6)。结论此方法简便、准确,重复性好,可作为暖宫七味丸的质量控制方法。

天门冬纳米制剂对小鼠抗氧化系统的影响

目的:探讨中药天门冬及其纳米制剂对小鼠心肌线粒体中超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量,肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响,观察纳米制剂能否更有效地改善机体的抗氧化能力。方法:采用D-半乳糖致衰老小鼠分别ig相同剂量的天门冬水提液及其纳米中药15d,测定衰老小鼠心肌线粒体中SOD活性、MDA含量及肝组织中GSH-Px活性。结果:天门冬水提液及其纳米中药均能显著增强天门冬及其纳米中药均可提高小鼠心肌线粒体中SOD的活性(P<0.01),肝组织GSH-Px活性(P<0.01),降低心肌线粒体中MDA(P<0.05),且纳米中药的药效强于天门冬水提液的药效(P<0.01)。结论:天门冬纳米制剂抗氧化能力优于天门冬超声波水提液。