人参皂苷Rd酸水解产物的RRLC-Q-TOFMS研究

利用高分离快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)联用技术对人参皂苷Rd酸水解产物进行了分析研究。通过化合物的保留时间、精确分子质量信息、串联质谱碎片信息,分析鉴定了7种Rd酸水解产物,分别为C-Y1、C-Y2、F2、20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rk1和Rg5。串联质谱分析水解产物获得了原人参二醇苷元特征离子m/z459(20(S)-Rg3,20(R)-Rg3,F2),Δ20(21)或Δ20(22)位脱水原人参二醇型苷元特征离子m/z441(Rk1,Rg5),C-24、C-25位水合原人参二醇苷元特征离子m/z 477(C-Y1和C-Y2)。研究表明,人参皂苷Rd在酸性条件下发生化学转化,包括取代糖基的水解反应,Δ20(21)或Δ20(22)位脱水反应和C-24,C-25位水合加成反应。本实验可为研究人参在配位方面的化学物质基础提供方法参考。

RRLC法同时测定橘红痰咳颗粒中苦杏仁苷和柚皮苷

目的建立用快速高分离度液相色谱(RRLC)同时测定橘红痰咳颗粒(化橘红、苦杏仁、百部、水半夏、茯苓、白前、五味子、甘草)中苦杏仁苷和柚皮苷的方法。方法采用BDS HYPERSIL C18(4.6 mm×100 mm,2.4μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量为2.0 mL/min;检测波长为207 nm;柱温为30℃;进样体积为2.5μL。结果样品中苦杏仁苷、柚皮苷在6 min内完全分离并对其进行了定量测定,苦杏仁苷、柚皮苷进样量分别在0.041 68～0.416 8μg、0.063 06～0.630 6μg范围内有良好的线性关系(r=0.999 9)。平均回收率(n=6)分别为99.8%,101.0%;RSD分别为0.5%,1.0%。结论 RRLC法可大幅提高苦杏仁苷和柚皮苷的分析速度,同时减少了溶剂消耗,在多组分复杂体系的快速分析中仍然可以保持出色的分离重现性,可作为传统HPLC方法的一种更新、替代方法。

RRLC测定肚痛健胃整肠丸中甘草苷、橙皮苷和甘草酸的含量

目的建立快速高分离度液相色谱(RRLC)同时测定肚痛健胃整肠丸中甘草苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法。方法采用BDS HYPERSIL C1(84.6 mm×100 mm,2.4μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.2%磷酸,梯度洗脱;流速为1.0 mL.min-1;检测波长为0～9 min,276 nm;9～14 min,250 nm;柱温为25℃;进样体积为4.0μL,检测器响应时间1 s。结果样品中甘草苷、橙皮苷和甘草酸在进样量分别为0.0112～0.2800μg、0.0435～1.0875μg、0.0630～1.5750μg范围内有良好的线性关系(r=0.9999)。平均回收率分别为99.1%,99.66%,99.26%(n=6);RSD分别为0.79%,1.61%,0.99%。结论本方法可在较短的时间内快速得到准确的结果,有效控制肚痛健胃整肠丸的产品质量。

RRLC-Q-TOF-MS法研究人参皂苷Rh1对映异构体在大鼠体内的药代动力学行为

建立了高分离快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF-MS）法同时分离人参皂苷Rh1对映异构体,并研究其在大鼠体内的药代动力学行为.实验采用Agilent SB C18色谱柱,流动相A为水-乙腈（90∶10,V∶V）溶液,流动相B为水-乙腈（10∶90,V∶V）溶液,两种流动相内均含15 mmol/L甲酸铵,流速0.3 mL/min,进样量5μL,二元线性梯度洗脱分离,在电喷雾负离子模式下进行质谱检测.结果表明,20-（S）和20-（R）人参皂苷Rh1的定量线性范围分别为0.24～39.00 mg/L和0.035～7.80 mg/L,定量限分别为0.20和0.03 mg/L,方法的检测限（S/N=3）分别为0.10和0.02 mg/L.精确度与精密度结果显示：两者的日内精确度分别为89.54％～95.79％和88.76％～94.33％,相对偏差小于5％;日间精确度分别为88.16％～92.41％和88.49％～94.35％,相对偏差小于5％.低、中、高3个浓度的提取回收率均大于90％.该方法可用于分离测定20-（S）和20-（R）人参皂苷Rh1,从而进行人参皂苷Rh1对映异构体在大鼠体内的药代动力学研究.

葛花中异黄酮类化学成分的RRLC-Q-TOF MS/MS研究

采用快速分离液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用(RRLC-Q-TOF MS/MS)技术对葛花中的异黄酮类成分进行了研究,得到了相应化合物的保留时间、分子量及结构信息.研究结果表明,葛花水提取液的主要成分为异黄酮类及其苷类化合物,并含有皂苷类和酚类化合物.在葛花中首次发现同属植物狐尾葛特有化合物Alopecuroides A和葛根中的化合物3'-甲氧基大豆苷元-7-O-甲醚.讨论了异黄酮类化合物的质谱碎裂途径及规律.

RRLC-Q-TOF-MS研究人参二醇型皂苷Rb1,Rb2和Rc的化学转化

将高分离快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF-MS)联用技术用于人参二醇型(PPD)皂苷Rb_1,Rb_2和Rc在酸性条件下的化学转化研究,并对人参炮制过程中人参二醇型皂苷Rb_1,Rb_2和Rc及其转化产物的相对含量进行了分析.利用RRLC-Q-TOF-MS联用和串联质谱(MS/MS)技术对化合物的保留时间、精确分子量及串联质谱碎片信息进行分析,以鉴定化合物的结构.研究结果表明,人参二醇型皂苷在酸性条件下的化学转化包括:取代糖基的水解反应、Δ20(21)或Δ20(22)位的脱水反应和C24,C25位的水合加成反应.在MS/MS分析中,质谱峰m/z 459,477和441分别为人参二醇苷元、C24,C25位水合人参二醇苷元和Δ20(21)或Δ20(22)位脱水人参二醇型苷元的特征离子,这为人参二醇型皂苷及其转化产物的结构鉴定提供了依据,并以此总结了人参二醇型皂苷的化学转化途径.还利用所建立的方法研究了生晒参和红参(100和120℃)中PPD人参皂苷在炮制过程中的变化.

RRLC-MS/MS同时测定食品接触材料中9种双酚类化合物迁移量

建立了高分离度快速液相色谱-串联质谱(RRLC-MS/MS)法同时测定食品接触材料中9种双酚类化合物的迁移量。样品经不同类型食品模拟物浸泡后,用Oasis HLB固相萃取柱净化,Agilent poroshell 120 SB-C18柱(2.1 mm×100 mm×2.7μm)分离,以甲醇和0.1 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾负离子模式(ESI^-)和多反应监测(MRM)模式下进行分析。结果表明,在优化的实验条件下,9种双酚类化合物的线性关系良好,相关系数(R^2)均大于0.99,检出限为0.01～0.2μg/kg,定量限为0.05～1.0μg/kg,在低、中、高3个加标水平下的回收率为76.9%～113.1%,相对标准偏差为1.9%～6.7%。本方法灵敏、准确、可靠、快速,能满足食品接触材料中9种双酚类化合物迁移量的检测需求。

RRLC-Q-TOF MS法分析鲜人参与仙人掌果配伍发酵前后人参皂苷成分的变化

采用高分离度快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)法对鲜人参与仙人掌果配伍发酵过程中的人参皂苷进行定性和定量分析。采用Agilent Zorbax SB-C18柱(2.1m×150mm×3.5μm),以0.1%甲酸和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源负离子模式下进行质谱检测。结果表明,在发酵液中共鉴别了27种人参皂苷,通过其总离子流图比较了发酵前后人参皂苷成分的差异,对发酵后含量明显增加的人参皂苷Rh1、Rg2、F2、Rg3、Rh2、CK进行了定量分析,确定其含量分别为6.345 2、20.452 2、6.255 9、27.452 8、55.384 6、30.472 9mg/L。利用该方法能够快速发现人参配伍后产生的新化合物,并依据人参皂苷类化合物的质谱裂解规律对其进行鉴定。

通过RRLC-Q-TOF MS和UPLC-QQQ MS分析原人参三醇型皂苷在人肠道菌群中的代谢产物

通过高分离度快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)和超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-QQQ MS)法对原人参三醇型皂苷Re、Rg 1、Rg 2、Rh 1、Rf、F 1、R 1在人肠道菌群中的转化产物进行定性、定量分析,确定原人参三醇型皂苷的代谢产物、转化途径和60 h时的转化率。结果表明,人参皂苷Re的转化产物为人参皂苷Rg 1、Rg 2、Rh 1、F 1和PPT,转化率为91%;人参皂苷Rg 1的转化产物为人参皂苷Rh 1、F 1和PPT,转化率为80%;人参皂苷Rg 2的转化产物为人参皂苷Rh 1和PPT,转化率为73%;人参皂苷Rh 1和F 1主要通过PPT代谢,转化率分别为82%和81%;人参皂苷Rf的转化产物为人参皂苷Rh 1和PPT,转化率为89%;三七皂苷R 1的转化产物为人参皂苷Rg 1、R 2、Rh 1和PPT,转化率为79%。原人参三醇型皂苷类成分可被人肠道菌群代谢,主要通过丢失糖残基形成转化产物,而次级皂苷和苷元是人参在体内发挥药理作用的物质基础。

RRLC-MS-MS对海水养殖水体中磺胺类残留量的检测

建立了快速高分离液相色谱-色谱串联质谱法同时测定海水养殖水体中16种磺胺类抗菌素的方法。水样经固相萃取小柱富集、洗脱、浓缩后用液相色谱串联质谱仪测定,采用多反应监测模式进行测定,内标法定量。方法的检出限在0.467-1.88 ng/L之间,加标回收率在80.1%114%之间,相对标准偏差（RSD）0.731%-8.79%;适用于海水养殖水体中磺胺类残留的定量检测。

格列美脲治疗的2型糖尿病大鼠的尿液代谢组学研究

采用快速高分离度液相色谱-质谱技术(RRLC-MS)检测经格列美脲治疗的2型糖尿病大鼠尿液中代谢物的变化,对糖尿病组、给药组和健康对照组大鼠的尿液代谢物谱进行了分析.采用主成分分析(PCA)对3组大鼠进行分类并寻找潜在生物标记物.结果表明,3组大鼠的尿液代谢物谱得到了很好的区分,发现并鉴定了2个潜在生物标记物,分别为4-脱氧三羟基丁酸和4-胍基丁酸.格列美脲对2型糖尿病大鼠的药物作用可能体现为对氨基酸代谢的调节作用。

快速高分辨率液相色谱-串联质谱法测定牛肉中24种镇静剂类兽药残留量

建立了牛肉中24种镇静剂类药物残留量的检测方法。样品经氨水-乙腈溶液（体积比10∶90）和30μLβ-葡糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶提取后,用HLB固相萃取小柱净化,采用快速高分辨率液相色谱-串联质谱（RRLC-MS/MS）检测,以信噪比（S/N）分别为3和10时测定药物的检出限（LODs）和定量限（LOQs）。各药物在添加浓度水平范围均有良好的线性关系,相关系数（r^2）在0.963 9～0.999 8之间,LODs为0.2～2.5μg/kg,LOQs为0.5～5μg/kg,平均添加回收率为74.1%～123.9%,日内相对标准偏差（RSD）为2.6～9.9%,日间相对标准偏差（RSD）为2.9～9.9%。该方法灵敏度高、回收率高,为镇静剂类药物残留量检测提供了基础方法,可满足同类实验室的检测需求。

基于液相色谱-质谱联用系统的系统性红斑狼疮患者血浆代谢组学分析

应用快速分离液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF/MS)系统对系统性红斑狼疮(SLE)患者血浆样本进行代谢指纹图谱的分析。分别应用监督模式识别方法正交信号校正结合偏最小二乘法-判别分析(OSC-PLS-DA)对代谢组数据进行处理,结果显示SLE患者与健康人群对照组的代谢指纹存在明显差异;进一步从SLE患者血清代谢图谱中筛选出10个对分类有显著贡献的离子,定性鉴定出7种代谢标志物,发现SLE患者存在异常的氨基酸、磷脂和卟啉的代谢状态。本研究可为SLE的监测和诊断以及SLE发病的分子基础研究提供科学依据。

超高效/高分离度快速/超快速液相色谱在中药及其制剂研究中的应用

超高效液相色谱(UPLC)、高分离度快速液相色谱(RRLC)和超快速液相色谱(UFLC)是近几年来推出的一种新的液相色谱技术,峰容量、分析效率、灵敏度和分辨率较常规HPLC有了很大的提高。其主要用于中药成分分析、中药指纹图谱、中药及其复方定量测定。此外,与TOF-MS、MS/MS联用还可用于中药代谢产物、中药复方血清化学成分和药动学等复杂体系的生物分析,以及药物的研究与开发,是复杂体系中药分离分析的重要手段。着重就其在中药及其复方研究中的应用进行介绍。

快速溶剂萃取-固相萃取-液相色谱-串联质谱法同时检测小型家用电器中溴代阻燃剂

建立了快速溶剂萃取-固相萃取-超快速液相色谱-串联质谱(ASE-SPE-RRLC-MS/MS)测定小型家用电器中溴代阻燃剂残留(六溴环十二烷(HBCDs)、四溴双酚A(TBBP-A))的方法。试样经冷冻粉碎后,以V(丙酮)∶V(正己烷)=1∶1的溶液为萃取液,采用快速溶剂萃取法,萃取液经C18固相萃取柱富集净化,以水-甲醇为流动相,经C18柱分离后,以快速液相色谱-串联质谱法多反应监测扫描模式进行定性和定量分析。方法的线性相关系数r大于0.998,检出限为0.05～0.2mg/kg,在0.05～800mg/kg等浓度添加水平下,平均回收率为87.72%～95.71%;相对标准偏差(RSD)为4.42%～8.38%。该方法灵敏度高、重现性好、定性定量准确,适用小型家用电器的复杂基质样品检测,可为相关国家标准制定提供参考依据。

活血止痛制剂中三七的专属性鉴别方法研究

目的:建立活血止痛散和活血止痛胶囊中三七的专属性鉴别方法,并采用高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱(RRLC-QQQ/MS)对结果加以验证。方法:采用高效薄层色谱法研究三七与其混伪品人参、红参、三七茎叶的特征条带。以高效硅胶G薄层板为固定相,二氯甲烷-无水乙醇-水(70∶45∶6.5)展开,10%硫酸乙醇溶液显色,105℃加热至条带清晰。分别置紫外光灯(365 nm)和日光下检视。RRLC-QQQ/MS分析采用Agilent Rapid Resolution HT SB-C18 (2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以5 mmol·L-1醋酸铵溶液-乙腈为流动相梯度洗脱。离子化模式为ESI-,碎裂电压100 V。结果:三七可检出三七皂苷R1,未检出人参皂苷Rb3、人参皂苷Rf。人参和红参可检出人参皂苷Rb3和人参皂苷Rf,未检出三七皂苷R1。三七茎叶可检出人参皂苷Rb3,未检出三七皂苷R1或人参皂苷Rg1。以三七对照药材、三七皂苷R1(应检出)和人参皂苷Rb3(不得检出)为对照,可实现活血止痛制剂中三七的专属性鉴别和人参(红参)或三七茎叶的非法掺杂投料检查。6个厂家的93批样品均未发现人参、红参或三七茎叶冒充三七非法投料。RRLC-QQQ/MS与高效薄层分析结果一致。结论:该方法简便、快速、灵敏、准确,可为含三七中成药的质量控制提供参考。

快速高分离液相色谱-串联质谱法检测化妆品中马来酸二乙酯含量

建立了化妆品中马来酸二乙酯的快速高分离液相色谱-串联质谱（RRLC-MS/MS）的定性定量检测方法.试样经乙腈60℃超声提取,RRLC-MS/MS多反应监测模式（MRM）定性、定量分析.马来酸二乙酯在2.1 min快速出峰,0.06～20.0 mg/L上机溶液浓度范围内呈线性（相关系数R＞0.996）;方法检出限为0.1mg/kg,最低定量浓度为0.3 mg/kg;在0.5 mg/kg和5.0 mg/kg添加水平时,加标回收率86.2％～96.4％;日内精密度3.19％～8.18％,日间精密度3.72％～7.64％（n=6）.该方法适用于防晒乳（霜）、香水、指甲油中马来酸二乙酯的标准化检测.

基于QuEChERS提取的快速液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿谷基辅助食品中的9种真菌毒素

建立了婴幼儿谷基辅助食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、伏马毒素B1共9种真菌毒素的快速测定方法.试样用改良的QuEChERS方法进行提取,无需进一步净化,直接用液相色谱-串联质谱仪进行测定,基质外标法定量.在较宽的线性范围内,9种毒素的线性相关系数（r2）均不小于0.98,检出限为0.1～ 15.8 μg/kg,在3个不同添加水平下的加标回收率为77.6％ ～ 105.7％,RSD为2.5％～13.7％.采用建立的方法对市面上销售的41批次婴幼儿谷基辅助食品中的9种真菌毒素进行了筛查,数批产品检出不同含量的毒素.该方法准确、灵敏,可适用于婴幼儿谷基辅助食品中多种真菌毒素的快速分析.

RRLC-DAD-ESI-MS^2分析天平山淫羊藿中的11个化学成分

目的:分析鉴定天平山淫羊藿叶片部位的化学成分。方法:采用高分离度快速液相色谱-离子阱质谱联用法。选用Agilent Proshell 120 C18色谱柱(2.1 mm!100 mm,2.7μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱(0~10 min,10%B→22%B;10~30 min,22%B→27%B;30~35 min,27%B→42%B;35~40 min,42%B→45%B;40~55 min,45%B→75%B),流速0.4 mL·min-1,柱温25℃,270 nm、正离子模式检测。结果:从天平山淫羊藿叶片部位鉴定出11个化合物,木兰花碱(magnoflorine)、朝藿定A1(hexandraside F)、朝藿定B(epimedin B)、朝藿定C(epimedin C)、宝藿苷Ⅵ(baohuosideⅥ)、淫羊藿苷(icariin)、淫羊藿素-3-O-α-鼠李糖苷(icaritin-3-O-α-rhamnoside)、箭藿苷A(sagittatoside A)、箭藿苷B(sagittatoside B)、鼠李糖淫羊藿次苷(2"-O-rhamnosylicarisideⅡ)、宝藿苷Ⅰ(baohuosideⅠ),其中10个黄酮苷类成分和1个生物碱类成分。结论:RRLC-MS2能快速地鉴定出天平山淫羊藿中的化学成分,为进一步阐明该品种物质基础,提高其质量控制水平,提供了实验基础。

SPE-RRLC-MS/MS法测定制药废水中青霉素G

建立了利用固相萃取-高分离度快速液相色谱-串联质谱(SPE-RRLC-MS/MS)测定制药废水中青霉素G残留的方法。水样以30%硫酸锌+20%亚铁氰化钾作为沉淀剂沉淀蛋白质后,上清液采用Oasis HLB固相萃取柱富集和净化,以0.01 mol/L乙酸铵溶液(加0.1%甲酸)+乙腈作为流动相进行等度洗脱,经Agilent Plus C18柱分离后,在串联质谱ESI(+)源下进行MRM检测。该方法的青霉素G检出限(S/N=3)为0.02μg/L,目标物在0.0020～1.0 mg/L范围内线性关系良好,线性相关系数为0.9997。在0.20,1.0,2.0μg/L添加水平平均回收率为74.6%～101.4%,相对标准偏差为4.49%～8.17%。该方法灵敏度高、重现性好、定性定量准确,可满足制药废水中青霉素G残留检测的要求。