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转录因子NbERF RAP2-1在黄瓜绿斑驳花叶病毒侵染中的功能
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作者 于连伟 姜兴林 +7 位作者 杨灵玲 王贺 张玉阳 谢莉娜 夏子豪 李洪连 杨雪 施艳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第15期2919-2928,共10页
【背景】黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是我国重要的检疫性植物病毒,对蔬菜和瓜类产业造成严重的经济损失。ERF转录因子可以调控植物生物和非生物胁迫,参与植物对多种病害的防御作用。前期研究显示CGMM... 【背景】黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是我国重要的检疫性植物病毒,对蔬菜和瓜类产业造成严重的经济损失。ERF转录因子可以调控植物生物和非生物胁迫,参与植物对多种病害的防御作用。前期研究显示CGMMV侵染后可以显著下调寄主转录因子Nb ERF RAP2-1的表达。【目的】明确ERF转录因子家族成员在CGMMV侵染过程中的作用,为CGMMV病害防治提供理论依据。【方法】运用MEGA7.0构建系统进化树,对基于Nb ERF RAP2-1蛋白的氨基酸序列进行系统进化分析;构建Nb ERF RAP2-1的荧光表达载体,并观察其亚细胞定位;利用q RT-PCR技术分析Nb ERF RAP2-1在CGMMV侵染不同时期的表达量;通过烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默(VIGS)和瞬时过表达Nb ERF RAP2-1分析其在CGMMV侵染过程中的作用。【结果】系统进化树分析表明,Nb ERF RAP2-1与多种烟草的ERF转录因子同源性极高,与拟南芥的ERF转录因子亲缘关系较远;亚细胞定位结果显示Nb ERF RAP2-1定位于细胞核,作为转录因子行驶功能;CGMMV侵染对本氏烟内源基因Nb ERF RAP2-1的转录水平影响结果显示,在CGMMV侵染6、9、12 d时Nb ERF RAP2-1的表达量无明显变化,在CGMMV侵染15和18 d时Nb ERF RAP2-1表达量显著下调;TRV介导的VIGS可以将植物内源基因Nb ERF RAP2-1有效沉默,在沉默的植株系统叶上接种CGMMV,8 d对照植株系统叶出现斑驳、卷曲症状而Nb ERF RAP2-1沉默植株无症状,同时CGMMV RNA水平和蛋白水平检测结果也表明TRV:Nb ERF RAP2-1可以有效抑制CGMMV的积累;同样,分别在本氏烟叶片瞬时过表达Nb ERF RAP2-124、48和72 h时检测CGMMV RNA水平和蛋白水平表达量,结果显示在病毒侵染早期,即复制阶段就抑制CGMMV的表达。【结论】Nb ERF RAP2-1可以有效抑制CGMMV侵染初期病毒复制,即病毒RNA复制阶段;随着CGMMV不断侵染,在CGMMV细胞间运动和系统运动时期,CGMMV识别防御相关基因Nb ERF RAP2-1并抑制该基因的转录;当Nb ERF RAP2-1缺失后可能抑制了下游蛋白的转录或表达,从而抑制病毒侵染后期的积累。由此可见,Nb ERF RAP2-1在CGMMV侵染过程中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 NbERF rap2-1 致病机制
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miR-488-3p靶向调控RAP1A在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬的作用研究 被引量:3
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作者 高源 揭育祯 +6 位作者 马天龙 汪乐新 杨慧霞 周瑜瑾 焦运 卢冠军 马胜超 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第9期1-9,共9页
目的探讨微小RNA(miR-488-3p)通过靶向调控RAS癌基因家族成员RAP1A在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬中的作用。方法体外常规培养人正常肝细胞(HL-7702),并给予100μmol/L Hcy干预24 h,采用Western blot检测肝细胞自噬相关蛋白LC3、p62和RA... 目的探讨微小RNA(miR-488-3p)通过靶向调控RAS癌基因家族成员RAP1A在同型半胱氨酸介导肝细胞自噬中的作用。方法体外常规培养人正常肝细胞(HL-7702),并给予100μmol/L Hcy干预24 h,采用Western blot检测肝细胞自噬相关蛋白LC3、p62和RAP1A的表达水平,qRT-PCR检测肝细胞中miR-488-3p和RAP1A的表达;转染miR-488-3p inhibitor和mimics后,qRT-PCR和Western blot分别检测miR-488-3p的转染效率及其对LC3和p62蛋白表达的影响;TargetScan预测miR-488-3p与RAP1A基因相关性,Western blot检测miR-488-3p下游潜在靶蛋白(RAP1A)的表达改变;Pearson相关系数对肝细胞中miR-488-3p表达水平与自噬相关蛋白水平进行相关性分析。结果与Control组相比,Hcy组肝细胞自噬相关蛋白LC3、RAP1A和miR-488-3p的表达水平升高(P<0.01),而p62表达明显降低(P<0.01);同时,转染miR-488-3p inhibitor和mimics后,与NC-inhibitor组比较,miR-488-3p inhibitor组中LC3和RAP1A蛋白的表达水平显著降低(P<0.01),p62表达明显升高(P<0.01);而与NC-mimics组相比,miR-488-3p mimics组中LC3和RAP1A蛋白表达水平明显增加(P<0.01),p62表达降低(P<0.01);进一步机制研究表明RAP1A是miR-488-3p的下游靶基因并受其正向调控。Pearson相关性分析发现,miR-488-3p的表达水平与LC3(r=0.9329,P=0.0002)蛋白表达呈正相关,而与p62(r=-0.8086,P=0.0083)表达则呈负相关。结论miR-488-3p在Hcy介导的肝细胞中高表达,可通过靶向调控RAP1A的表达促进肝细胞自噬。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 miR-488-3p 肝细胞 rap1A 自噬
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miR-509-3p靶向RAP2B基因通过PI3K/AKT信号通路调控喉癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量:4
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作者 王继国 王虹园 李婷 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第22期5093-5098,共6页
目的探讨miR-509-3p对喉癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法将miR-con、miR-509-3p、anti-miR-con、anti-miR-509-3p、si-con、si-RAP2B分别转染至M4E细胞中,分别记为miR-con组、miR-509-3p组、anti-miR-con组、anti-miR-5... 目的探讨miR-509-3p对喉癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法将miR-con、miR-509-3p、anti-miR-con、anti-miR-509-3p、si-con、si-RAP2B分别转染至M4E细胞中,分别记为miR-con组、miR-509-3p组、anti-miR-con组、anti-miR-509-3p组、si-con组、si-RAP2B组;将miR-509-3p质粒分别与pcDNA-con、pcDNA-RAP2B共转染至M4E细胞中,分别记为miR-509-3p+pcDNA-con组、miR-509-3p+pcDNA-RAP2B组,以正常培养的细胞作为空白对照(NC)组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-509-3p和Ras相关蛋白(RAP)2B mRNA表达水平;Western印迹检测RAP2B、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测miR-509-3p和RAP2B的靶向关系。结果与喉上皮细胞NP69相比,人喉癌细胞系M4E、SCC-2、SCC-40中miR-509-3p低表达,RAP2B高表达(均P<0.05)。过表达miR-509-3p和敲减RAP2B,CyclinD1、MMP-2和MMP-9表达水平显著降低,细胞存活率显著降低,细胞迁移和侵袭数目显著降低(均P<0.05)。miR-509-3p靶向RAP2B,高表达RAP2B部分逆转了miR-509-3p对M4E增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05)。过表达miR-509-3p,p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05),高表达RAP2B部分逆转了miR-509-3p对p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平的抑制作用。结论过表达miR-509-3p可抑制喉癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与RAP2B及PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 miR-509-3p rap2B PI3K/AKT信号通路 喉癌 增殖 迁移 侵袭
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基于星点设计-响应面法的掺RAP和铁尾矿砂水泥稳定碎石配比优化 被引量:5
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作者 张立群 周辉 +2 位作者 张学峰 崔宏环 王晟华 《三峡大学学报(自然科学版)》 CAS 2022年第1期67-73,共7页
为了促进废旧沥青混合料(RAP)和铁尾矿砂的高值化利用,采用星点设计-响应面法对掺有RAP和铁尾矿砂水稳碎石进行配合比设计.其中以水泥、RAP和铁尾矿砂(掺量)为影响因子,抗压强度、劈裂强度和抗压回弹模量为响应值,分析各因素(掺量)及其... 为了促进废旧沥青混合料(RAP)和铁尾矿砂的高值化利用,采用星点设计-响应面法对掺有RAP和铁尾矿砂水稳碎石进行配合比设计.其中以水泥、RAP和铁尾矿砂(掺量)为影响因子,抗压强度、劈裂强度和抗压回弹模量为响应值,分析各因素(掺量)及其交互作用对响应值的影响规律,并得到最优配比.结果表明:各因素(掺量)对抗压强度、劈裂强度和抗压回弹模量的影响强弱顺序依次均为水泥>RAP>铁尾矿砂,各因素交互作用对抗压强度、劈裂强度和抗压回弹模量的影响均不显著;最优配比为水泥掺量4.48%,RAP掺量55.08%,铁尾矿砂掺量14.87%,通过换算得到天然集料占比为25.57%,该配比下混合料的7d无侧限抗压强度满足高速公路、一级公路基层的强度要求.通过试验可知,最优配比下试件的抗压强度、劈裂强度和抗压回弹模量的理论值与实测值相接近,说明采用星点设计-响应面法对水稳碎石基层材料进行配比优化是可靠的.抗冻性能试验结果表明最优配比下的水稳碎石基层材料具有较好的抗冻性能. 展开更多
关键词 星点设计-响应面法 rap和铁尾矿砂 水稳碎石基层材料 配比优化
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Adsorption properties of CFBC ash-cement pastes as compared with PCC fly ash-cement pastes 被引量:4
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作者 Zhijuan Wang Yuanming Song 《International Journal of Coal Science & Technology》 EI 2016年第1期62-67,共6页
Circulating fluidized bed combustion (CFBC) ash can be potentially used as supplementary cementitious materials for concrete production due to its desirable pozzolanic activity. The adsorption properties of CFBC ash... Circulating fluidized bed combustion (CFBC) ash can be potentially used as supplementary cementitious materials for concrete production due to its desirable pozzolanic activity. The adsorption properties of CFBC ash-cement pastes were studied, and ordinary pulverized coal combustion (PCC) fly ash-cement pastes were used as control. The water-adsorption and superplasticizer (SP)-adsorption properties of the pastes were evaluated by water demand and UV-visible absorption spectroscopy respectively. The results show that CFBC ash-cement system has greater compressive strength as compared with PCC fly ash-cement system at a given curing age, although the water demand of the former is significantly higher than that of the latter. CFBC ash-cement pastes possess higher adsorption ability of aliphatic SP than PCC fly ash-cement pastes and the adsorption amount increases with an increase in ash replacement ratio. CFBC ash- cement pastes exhibit lower workability with higher slump loss. It is concluded that CFBC ash can be potentially used as supplementary cementitious material in concrete production, but the mix design of CFBC ash concrete needs to be appropriately adjusted. It is suggested that CFBC ash is used for the production of the concrete needing low flowability. 展开更多
关键词 CFBC ash - Coal ash CONCRETE ADSORPTION SUPERPLASTICIZER FLOWABILITY
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EYA4通过抑制NF-κB依赖的RAP1反式激活抑制肝细胞癌的生长和侵袭 被引量:2
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作者 Shi-Jing Mo Xun Hou +5 位作者 Xiao-Yi Hao Jian-Peng Cai Xin Liu Wei Chen Dong Chen Xiao-Yu Yin胆胰外科 《癌症》 SCIE CAS CSCD 2019年第2期76-90,共15页
背景与目的我们之前研究表明,眼缺失蛋白同源物4(eyes absent homolog 4,EYA4)是果蝇眼部发育相关的眼缺乏蛋白家族成员之一,在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)标本中常发生甲基化和沉默,并与患者生存期短密切相关。本研究旨在... 背景与目的我们之前研究表明,眼缺失蛋白同源物4(eyes absent homolog 4,EYA4)是果蝇眼部发育相关的眼缺乏蛋白家族成员之一,在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)标本中常发生甲基化和沉默,并与患者生存期短密切相关。本研究旨在探讨EYA4在HCC中作为肿瘤抑制因子的作用机制。方法转染EYA4表达质粒(pEYA4)构建稳定表达EYA4的人HCC细胞系Huh-7和PLC/PRF/5(PLC)。通过BALB/c裸鼠皮下注射稳定转染细胞建立异种移植肿瘤。组织标本来自75例病理诊断为HCC的患者。采用实时定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)、蛋白质免疫印迹和免疫组织化学的方法检测EYA4在细胞系、异种移植物和临床标本中的表达;研究了稳定转染细胞系的细胞增殖、克隆形成、侵袭性和肿瘤形成。利用基因表达芯片筛选EYA4调节的基因。通过共转染EYA4和带Flag标签的RAS相关蛋白1A(RAS-related protein 1A,RAP1A)基因的表达质粒(pEYA4和Flag-RAP1A)、功能研究、染色质免疫共沉淀、免疫荧光染色和细胞泛素化分析等方法,研究了EYA4对核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/RAS相关蛋白1(RAS-related protein 1,RAP1)信号通路的影响。结果恢复HCC细胞系中EYA4的表达可抑制细胞的增殖、抑制克隆形成、降低细胞的侵袭性和抑制异种移植肿瘤生长,在体外实验中Flag-RAP1A可逆转pEYA4的抑制作用。用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)激活NF-κB通路可增加p65与RAP1A基因启动子的结合并上调RAP1蛋白的表达。用BAY 11-7085和p65 siRNA抑制NF-κB通路,成功阻断了TNF-α诱导的RAP1上调。EYA4拮抗了TNF-α诱导的NF-κB抑制因子α(inhibitor of NF-κBα,IκBα)的磷酸化和泛素化以及p65的核易位和反式激活,进而抑制了NF-κB的活性和RAP1的表达。用calyculin A阻断EYA4的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶活性可显著消除其对NF-κB活性的抑制作用。此外,EYA4的表达与HCC临床标本中IκBα/RAP1活性呈负相关。结论我们的研究结果为明确EYA4是真正的肿瘤抑制因子提供了功能和机制的理论基础,该肿瘤抑制因子可抑制NF-κB/RAP1信号通路的异常激活,从而抑制HCC生长和侵袭。 展开更多
关键词 眼缺失蛋白同源物4(eyes ABSENT HOMOLOG 4 EYA4) RAS相关蛋白1(RAS-related protein 1 rap1) 核因子-κB(nuclear factor-κB NF-κB) 反式激活 肝细胞癌
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Preparation of Single Phase Na-X Zeolite from Oil Shale Ash by Melting Hydrothermal Method
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作者 TONG Lingxin LUO Huaming +1 位作者 ZHANG Lin ZHAN Huasheng 《China's Refractories》 CAS 2014年第2期12-17,共6页
A single phrase Na - X zeolite was synthesized from pretreated oil shale ash by alkaline fusion and hydrotherreal treatment. Eff3cts of the NaOH concentration, crystallization time ant temperature on the formation of ... A single phrase Na - X zeolite was synthesized from pretreated oil shale ash by alkaline fusion and hydrotherreal treatment. Eff3cts of the NaOH concentration, crystallization time ant temperature on the formation of Na-X zeolite were studied in detail. The single phase Na- X zeolite powders can. be prepared by alkaline fusion o.f pretreated oil shale ash at 600 ℃ .for 1 h, and crystalli-zation at 80 - 100 ℃ .for 8 - 10 h with NaOH concentration of 3 -3. 5 tool · L-1. Na - A zeolite appears when decreasing NaOH concentration, crystallization time or temperature, ant an unnamed zeolite emerges when prolonging crystallization time or raising crystalli-zation, temperature. SEM micrographs suggest that the aggregates of Na-X zeolite particles have perfect dispersity and uniform granular with about 1.5 μm in size, and most of the Na-X zeolite crystals display a regular octahedral structure with the size of about 500 nm. The specific surface area of the powders with single Na-X zeolite phase reaches the maximum value of 488. 163 2 m2· g -1, larger than that of multiple zeolite powders. 展开更多
关键词 sodium - X zeolite oil shale ash alka-line fusion hydrothermal synthesis
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miR-205-5p抑制体外胃癌细胞系增殖、迁移和侵袭 被引量:5
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作者 杨屹立 何学元 +1 位作者 潘新民 马建勋 《基础医学与临床》 CSCD 2020年第8期1068-1075,共8页
目的探讨miR-205-5p靶向RAS致癌家族基因2B(RAP2B)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法RT-qPCR和Western blot检测胃癌细胞AGS、MGC803、MKN-28、SGC-7901和正常胃黏膜细胞GES-1中miR-205-5p和RAS致癌家族基因2B的表达。分别构建过... 目的探讨miR-205-5p靶向RAS致癌家族基因2B(RAP2B)对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法RT-qPCR和Western blot检测胃癌细胞AGS、MGC803、MKN-28、SGC-7901和正常胃黏膜细胞GES-1中miR-205-5p和RAS致癌家族基因2B的表达。分别构建过表达miR-205-5p和抑制RAP2B表达的AGS细胞株,采用MTT法检测细胞活力;Transwell小室法检测细胞的迁移及侵袭能力;Western blot检测RAP2B、cyclin D1、MMP-2、MMP-9、GSK-3β和β-catenin蛋白的表达。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-205-5p对RAP2B的靶向作用。结果与正常胃黏膜细胞相比,4种胃癌细胞中miR-205-5p的表达显著降低,RAP2B的表达显著升高(P<0.05)。过表达miR-205-5p或抑制RAP2B表达均可显著抑制AGS细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白的表达(P<0.05)。miR-205-5p可负性调控RAP2B的表达。结论miR-205-5p通过靶向RAP2B抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 miR-205-5p rap2B 胃癌 增殖 迁移
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HRGC-LRMS测定垃圾焚烧炉布袋飞灰中的二噁英类物质
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作者 谷月玲 陈彤 施正展 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期159-160,165,共3页
  利用高分辨气相色谱-低分辨质谱(HRGC-LRMS)测定了某垃圾焚烧厂布袋飞灰中的二噁英类物质,结果表明对于测定二噁英类浓度相对较高的垃圾飞灰而言,采用HRGC-LRMS是一种可行的方法,回收率在74%~114%之间.……
关键词 HRGC - LRMS PCDD/FS Fly ash
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lnc171靶向调控miR-149-5p促进肝癌细胞的迁移 被引量:2
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作者 黄诗萍 廖舟翔 +2 位作者 杨丽超 何晓 黄雪静 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第2期287-293,共7页
目的:探讨长链非编码RNA RP1-171K16.5(lnc171)对肝癌细胞的作用和机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测正常人和肝癌患者血浆外泌体、正常肝细胞和肝癌细胞中lnc171的表达水平;设计siRNA转染肝细胞,分为空白对照组(Blank组)、... 目的:探讨长链非编码RNA RP1-171K16.5(lnc171)对肝癌细胞的作用和机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测正常人和肝癌患者血浆外泌体、正常肝细胞和肝癌细胞中lnc171的表达水平;设计siRNA转染肝细胞,分为空白对照组(Blank组)、阴性对照组(siNC组)和干扰组(si171组);采用Transwell实验检测lnc171对细胞迁移的影响;RegRNA、miRDB和LncBase在线靶基因预测网站预测lnc171的靶基因,并采用Venny 2.1对3个数据库预测结果取交集;双荧光素酶报告基因实验验证lnc171和miR-149-5p之间的靶向关系;生物信息学分析miR-149-5p的靶蛋白RAP1并用qPCR验证。结果:肝癌患者血浆外泌体中lnc171的表达水平高于正常对照者(P<0.01),肝癌细胞中lnc171的表达水平高于正常肝细胞(P<0.05);与siNC组比较,转染si171-3后,HL-7702和Hep3B细胞迁移数量明显下降(P<0.05);生物信息学预测lnc171的靶基因为miR-149-5p;与siNC组比较,Hep3B细胞转染si171-3后miR-149-5p的表达量升高(P<0.001);lnc171WT中miR-149-5p mimics组荧光素酶活性较miR-NC组下降(P<0.05);利用TargetScan和MicroT-CDS在线网站预测miR-149-5p的靶基因取得256个交集靶基因,将其放入DAVID数据库中进行KEGG通路富集得到与迁移相关的RAP1信号通路。生存分析发现,Ras-associated protein 1A(RAP1A)高表达的肝癌患者预后差。结论:lnc171在肝癌中高表达,可能通过靶向作用miR-149-5p调控RAP1A表达水平从而促进肝癌细胞迁移。 展开更多
关键词 肝癌 lnc171 miR-149-5p rap1A 迁移
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益气化瘀解毒方对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺损伤及中性粒细胞粘附分子的作用研究
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作者 邹乔 李雁 +5 位作者 陈瑜 孔煜荣 陈一凡 刘通 曾燕鹏 沈冠彤 《环球中医药》 CAS 2024年第3期414-419,共6页
目的 观察益气化瘀解毒方及拆方对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)模型大鼠的保护作用及中性粒细胞粘附分子的影响。方法 将36只SD大鼠随机分为对照组、模型组、... 目的 观察益气化瘀解毒方及拆方对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)模型大鼠的保护作用及中性粒细胞粘附分子的影响。方法 将36只SD大鼠随机分为对照组、模型组、益气清热组、益气化瘀组、益气逐饮组及中药全方组,每组6只。益气清热组、益气化瘀组、益气逐饮组、中药全方组给予对应中药浸膏12.2 g/(kg·d)连续灌胃7天,其余组均以等量蒸馏水灌胃。尾静脉注射LPS建立ARDS大鼠模型,造模后16小时麻醉处死各组动物进行取材。苏木精—伊红染色观察肺组织病理变化,采用酶联免疫吸附法法检测肺匀浆及肺泡灌洗液中Rap1b、淋巴细胞功能相关抗原1(leukocyte function-associated antigen-1,LFA-1)、巨噬细胞表面抗原-1(macrophage surface antigen-1,MAC-1)的表达水平,蛋白免疫印迹法检测肺组织Rap1b的表达水平。结果 与对照组相比,模型组大鼠Rap1b、LFA-1及MAC-1蛋白表达均有所上调。与模型组相比,益气化瘀解毒方及拆方可明显减轻ARDS模型大鼠肺损伤,显著下调肺泡灌洗液中Rap1b、MAC-1及肺匀浆中LFA-1蛋白表达。结论 益气化瘀解毒方对LPS诱导的ARDS模型大鼠具有保护作用,可能与其减少Rap1b、LFA-1和MAC-1蛋白表达水平,降低中性粒细胞粘附活性有关。 展开更多
关键词 益气化瘀解毒方 急性呼吸窘迫综合征 rap1b 中性粒细胞粘附 淋巴细胞功能相关抗原1 巨噬细胞表面抗原-1
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帕金森病模型小鼠皮质神经元树突棘变化观察
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作者 贾苗 吕一霖 +3 位作者 关晶心 刘萱 时子乔 张玉梅 《中国当代医药》 CAS 2024年第22期13-17,共5页
目的观察帕金森病(PD)小鼠模型初级运动皮质锥体神经元树突棘变化情况并探索其可能机制。方法采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)建立PD小鼠模型,行为学实验和免疫组化检测黑质多巴胺神经元损伤情况进行模型鉴定,高尔基染色法观... 目的观察帕金森病(PD)小鼠模型初级运动皮质锥体神经元树突棘变化情况并探索其可能机制。方法采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)建立PD小鼠模型,行为学实验和免疫组化检测黑质多巴胺神经元损伤情况进行模型鉴定,高尔基染色法观察锥体神经元树突和树突棘变化,免疫组化分析血清诱导激酶(SNK)和树突棘相关的Rap特异性GTPase活化蛋白(SPAR)的变化情况。结果MPTP组小鼠行为学得分、多巴胺阳性神经元平均光密度和树突棘密度低于正常对照组,MPTP组小鼠锥体神经元树突棘长度高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组的神经元树突复杂度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论MPTP模型小鼠皮质神经元树突棘受损,树突棘的改变可能与SNK和SPAR表达变化有关。 展开更多
关键词 帕金森病 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶 树突棘 皮质 血清诱导激酶 树突棘相关的rap特异性GTPase活化蛋白
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Bioleaching of trace elements and rare earth elements from coal fly ash 被引量:4
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作者 Stephen Park Yanna Liang 《International Journal of Coal Science & Technology》 EI 2019年第1期74-83,共10页
Coal fly ash originated from coal combustion has high concentrations of metals. If suitable leaching techniques are identified, then coal fly ash could serve as a useful source of valuable minerals including rare eart... Coal fly ash originated from coal combustion has high concentrations of metals. If suitable leaching techniques are identified, then coal fly ash could serve as a useful source of valuable minerals including rare earth elements (REEs). In this study, three microbial strains, Candida bombicola, Phanerochaete chrysosporium and Cryptococcus curvatus were tested on their performance of leaching trace elements and REEs from fly ash. Through comparing mineral loss and leaching efficiencies resulting from indirect leaching or use of the culture supernatant, C. bombicola was identified to be the best leading to the highest mineral loss and extracting efficiencies of trace elements and REEs among the three strains. The highest mineral loss observed from using the supernatant of this yeast strain was 59.7%. Among all trace elements, As and Mo had the highest leaching efficiency of 80.9% and 79.5%. respectively. The same leaching test led to 67.7% of Yb and 64.6% of Er dissolved from the ash. This study, thus, demonstrated that bioleaching is feasible for leaching metals out of fly ash. The C. bombicola strain deserves further investigation due to its robust actions on metal leaching. 展开更多
关键词 CRYPTOCOCCUS curvatus CANDIDA bombicola PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM - Coal fly ash BIOLEACHING Rare earth elements Trace metals
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掺RAP和铁尾矿砂的水泥稳定碎石受力特性试验研究 被引量:1
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作者 张立群 周辉 +2 位作者 崔宏环 张学峰 王晟华 《辽宁工程技术大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第6期518-525,共8页
为研究掺RAP和铁尾矿砂的水泥稳定碎石基层材料受力特性,对17组不同配合比的水泥稳定碎石基层材料进行单轴抗压强度试验,揭示单轴受压下水泥稳定碎石基层材料应力-应变全曲线和变形模量-应变全曲线的变化规律,分析各因素掺量对水泥稳定... 为研究掺RAP和铁尾矿砂的水泥稳定碎石基层材料受力特性,对17组不同配合比的水泥稳定碎石基层材料进行单轴抗压强度试验,揭示单轴受压下水泥稳定碎石基层材料应力-应变全曲线和变形模量-应变全曲线的变化规律,分析各因素掺量对水泥稳定碎石基层材料的峰值应力、峰值应变、模量、应变能密度和脆性指数的影响规律.结果表明:不同水泥、RAP、铁尾矿砂掺量的水泥稳定碎石基层材料应力-应变全曲线均由上升段和下降段组成,模量-应变全曲线呈先下降后上升再下降的趋势,不同配比下试件的破坏过程也相似;水泥掺量增加,水泥稳定碎石基层材料的峰值应变减小,峰值应力、模量、应变能密度和脆性指数均增大;RAP和铁尾矿砂掺量增加,水泥稳定碎石基层材料的峰值应变增大,峰值应力、模量、应变能密度和脆性指数均减小. 展开更多
关键词 受力特性 rap和铁尾矿砂 应力-应变全曲线 变形模量-应变全曲线 抗压强度
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Nutrient uptake by mulberry and Chinese prickly ash associated with arbuscular mycorrhizal fungi
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作者 Hechun Piao Siliang Li Shijie Wang 《Acta Geochimica》 EI CAS CSCD 2016年第2期120-129,共10页
Understanding how nutrient absorption processes in plants are related to arbuscular mycorrhizal(AM)association is critical for predicting the effects of AM symbiosis on elemental cycling for plants. Both mulberry(Moru... Understanding how nutrient absorption processes in plants are related to arbuscular mycorrhizal(AM)association is critical for predicting the effects of AM symbiosis on elemental cycling for plants. Both mulberry(Morus alba) and Chinese prickly ash(Zanthoxylum bungeanum) are AM-associated plants, widely distributed in southwest China. It was hypothesized that if the nutrient absorption processes were efficiently associated with AM symbiosis in both mulberry and Chinese prickly ash, foliar nutrient concentrations—especially calcium(Ca)—would be primarily determined by the soil conditions in different regions. To investigate this, AM colonization levels of soils, nutrient levels in soils and leaves, and δ^(13)C values of leaves were analyzed for mulberry and Chinese prickly ash.In this study, spore density in soils with low p H was higher than that in soils with high p H. The average concentrations of sugar delivered to roots in both mulberry and Chinese prickly ash in soil with relatively low p H and soil extractable cations were higher than those in other areas.The values of foliar δ^(13)C in both mulberry and Chinese prickly ash in low soil-pH and soil extractable cations were lower than those in contrast areas, indicating that water availability was impacted by soil characteristics. The efficiency in AM-mediated processes might play an important role in translocation between soil nutrients and plant tissue.The results suggest uptake and translocation of nutrients,especially Ca, in AM-associated plants may be affected by an efficiency of AM-mediated processes. Since Sr does not appear to be similarly affected, expressing Ca and other nutrient concentrations relative to Sr could be used to evaluate whether the uptake and translocation of Ca and other nutrients are affected by AM-mediated processes. 展开更多
关键词 Arbuscular mycorrhizal fungi - Elementalratio Carbon isotopes MULBERRY Chinese prickly ash
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口腔扁平苔藓患者外周血中ASH1L及其相关调控因子表达与免疫功能相关性 被引量:1
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作者 王方方 汪鹰 蔡扬 《中国医药导报》 2021年第24期8-10,16,共4页
目的分析口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中ASH1L及其相关调控因子表达与免疫功能的相关性,探讨其在OLP发病机制中的作用及意义。方法收集2018年8月至2019年8月贵州医科大学附属口腔医院40例OLP患者(OLP组)和20名同期体检健康者(对照组)的... 目的分析口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中ASH1L及其相关调控因子表达与免疫功能的相关性,探讨其在OLP发病机制中的作用及意义。方法收集2018年8月至2019年8月贵州医科大学附属口腔医院40例OLP患者(OLP组)和20名同期体检健康者(对照组)的外周血。采用流式细胞术及散射比浊法检测两组细胞免疫及体液免疫相关指标水平,实时荧光定量PCR检测两组外周血单个核细胞中ASH1L、泛素编辑酶A20、白细胞介素-6(IL-6)mRNA相对表达量及其与OLP免疫指标的相关性。结果OLP组中CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、总T^(+)B^(+)NK细胞、IgM水平均低于对照组,CD19^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、补体C3及C4水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。OLP组ASH1L及A20 mRNA相对表达量低于对照组,IL-6 mRNA高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。OLP组ASH1L mRNA相对表达量与IgG水平呈正相关(r>0,P<0.05)。A20 mRNA相对表达量与CD8^(+)、IgA水平呈正相关(r>0,P<0.05),与CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关(r<0,P<0.05)。结论ASH1L及其相关调控因子在OLP患者外周血中表达异常且与免疫指标水平相关,在OLP免疫相关发病机制中发挥了一定作用。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓 ash1L 泛素编辑酶A20 白细胞介素-6
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白花蛇舌草通过抑制RAP1-JNK信号通路选择性促进人肾癌ACHN细胞间质-上皮转化 被引量:7
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作者 邹寒冰 周雁 +3 位作者 张元亮 何小珍 刘培峰 刘永忠 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期235-248,共14页
目的 :研究白花蛇舌草(Hedyotis di usa Willd,HDW)对人肾癌细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :人肾细胞腺癌ACHN和人肾近曲小管HK-2细胞经HDW处理24 h后,采用CCK-8法检测HDW对ACHN和HK-2细胞... 目的 :研究白花蛇舌草(Hedyotis di usa Willd,HDW)对人肾癌细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :人肾细胞腺癌ACHN和人肾近曲小管HK-2细胞经HDW处理24 h后,采用CCK-8法检测HDW对ACHN和HK-2细胞增殖的影响,FCM法检测HDW对细胞周期和凋亡的影响。光学显微镜下及罗丹明染色法观察HDW处理对ACHN和HK-2细胞形态的影响;采用免疫荧光染色法和蛋白质印迹法检测间质-上皮转化(mesenchymal-epithelial transition,MET)相关蛋白表达的变化。划痕愈合实验和Transwell小室法检测ACHN和HK-2细胞的迁移和侵袭能力,RNA测序法检测HDW对ACHN细胞转录组的影响;实时荧光定量PCR法检测RAP1信号通路相关基因RAP1GAP、RASGRP2、RAPGEF3、MAGI1及GNAI1 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activate protein kinase,MAPK)通路相关蛋白c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、磷酸化JNK(phospho-JNK,p-JNK)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)、磷酸化Akt(phospho-Akt,p-Akt)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)和磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)表达水平的改变。结果:HDW可选择性抑制ACHN细胞增殖(P <0.01),将细胞周期阻滞于S期(P <0.01),诱导细胞凋亡(P <0.01)。HDW处理后ACHN细胞的形态发生了明显变化,HDW可促进ACHN细胞中E-钙黏蛋白1(E-cadherin 1)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达,并抑制波形蛋白(Vimentin)和Snail1的表达(P值均<0.01)。HDW能显著抑制细胞的迁移和侵袭能力(P值均<0.01),且ACHN和HK-2细胞之间没有明显差异。RNA测序结果分析显示,HDW可影响细胞周期相关基因以及控制细胞生长的转录因子E2F和Myc靶基因的表达,并激活p53信号通路;HDW可显著下调ACHN细胞中RAP1GAP、RASGRP2、RAPGEF3、MAGI1及GNAI1 mRNA(P值均<0.000 1)和p-JNK蛋白的表达水平。结论 :HDW可能通过抑制RAP1-JNK信号通路来选择性抑制肾癌细胞ACHN的增殖,促进ACHN细胞MET、周期阻滞和凋亡。 展开更多
关键词 肾肿瘤 白花蛇舌草 上皮-间质转化 细胞运动 rap1-JNK信号通路
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miR-3677-3p在胃癌组织和癌细胞中表达及靶向抑制RAP1GAP对癌细胞增殖和侵袭影响 被引量:3
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作者 普彦淞 李真真 +3 位作者 段宝军 马钰 王建华 高增战 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2021年第15期1144-1150,共7页
目的旨在揭示miR-3677-3p在胃癌组织中的表达情况,及其是否通过靶向RAP1 GTPase激活蛋白(RAP1GAP)影响胃癌细胞的增殖、凋亡和侵袭功能。方法收集2016-10-10-2018-06-08陕西省人民医院手术治疗的40例胃癌患者癌和癌旁组织(距离癌组织边... 目的旨在揭示miR-3677-3p在胃癌组织中的表达情况,及其是否通过靶向RAP1 GTPase激活蛋白(RAP1GAP)影响胃癌细胞的增殖、凋亡和侵袭功能。方法收集2016-10-10-2018-06-08陕西省人民医院手术治疗的40例胃癌患者癌和癌旁组织(距离癌组织边缘>5 cm),qRT-PCR检测miR-3677-3p在临床组织标本及正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(SNU-1、AGS、HGC-27、SGC-7901)的表达情况。选取AGS细胞进行转染,分为NC inhibitor组、miR-3677-3p inhibitor组、NC mimics组、miR-3677-3p mimics组、si-NC组、si-RAP1GAP组和si-RAP1GAP+miR-3677-3p inhibitor组。采用qRT-PCR检测转染效率,CCK-8法、流式细胞仪和Transwell分别检测转染NC inhibitor、miR-3677-3p inhibitor、si-RAP1GAP+miR-3677-3p inhibitor对AGS细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。各组数据经Shapiro-Wilk检验符合正态分布,2组比较采用t检验,多组比较采用单因素方差分析,组间的多重比较采用LSD-t检验。结果 miR-3677-3p在胃癌组织的相对表达量(2.443±1.006)显著高于癌旁对照组织(1.000±0.265),差异有统计学意义,t=8.941,P<0.001。miR-3677-3p在胃癌细胞株SNU-1(1.975±0.310)、AGS(2.439±0.635)、HGC-27(2.223±0.462)和SGC-7901(1.604±0.405)相对表达水平显著高于GES-1细胞(1.000±0.173),差异有统计学意义,F=8.846,P<0.001。miR-3677-3p inhibitor组细胞增殖水平(0.873±0.132)与NC inhibitor组(1.323±0.122)相比显著下降,差异有统计学意义,t=5.598,P<0.001。miR-3677-3p inhibitor组细胞凋亡比例(33.11±5.36)与NC inhibitor组(9.17±2.12)相比显著增高,差异有统计学意义,t=9.287,P<0.001。穿过Transwell小室的细胞数量miR-3677-3p inhibitor组(78.52±21.25)与NC inhibitor组(232.30±33.65)相比显著下降,差异有统计学意义,t=8.642,P<0.001。双荧光素酶报告基因结果显示miR-3677-3p能够结合RAP1GAP的3′UTR。RAP1GAP的mRNA相对表达水平miR-3677-3p inhibitor组(3.210±0.540)显著高于NC inhibitor组(1.000±0.242),差异有统计学意义,t=8.351,P<0.001,蛋白质印迹法也得出了类似结果。功能回复实验显示,si-RAP1GAP部分逆转了miR-3677-3p inhibitor对AGS细胞的增殖、凋亡和侵袭的影响。结论 miR-3677-3p在胃癌组织和细胞中高表达,其可能通过靶向抑制RAP1GAP的表达,进而调控了胃癌细胞的增殖、凋亡和侵袭。 展开更多
关键词 胃癌 miR-3677-3p rap1GAP 增殖 侵袭
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Mex3a promotes oncogenesis through the RAP1/MAPK signaling pathway in colorectal cancer and is inhibited by hsa-miR-6887-3p 被引量:8
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作者 Haixia Li Jinghui Liang +4 位作者 Jiang Wang Jingyi Han Shuang Li Kai Huang Chuanyong Liu 《Cancer Communications》 SCIE 2021年第6期472-491,共20页
Background:Although Mex3 RNA-binding family member A(Mex3a)has demonstrated an important role in multiple cancers,its role and regulatory mechanism in CRC is unclear.In this study,we aimed to investigate the role and ... Background:Although Mex3 RNA-binding family member A(Mex3a)has demonstrated an important role in multiple cancers,its role and regulatory mechanism in CRC is unclear.In this study,we aimed to investigate the role and clinical significance of Mex3a in CRC and to explore its underlying mechanism.Methods:Western blotting and quantitative real-time polymerase chain reaction(qRT-PCR)were performed to detect the expression levels of genes.5-Ethynyl-2’-deoxyuridine(EDU)and transwell assays were utilized to examine CRC cell proliferation and metastatic ability.The R software was used to do hierarchical clustering analysis and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)pathway analysis.Overexpression and rescue experiments which included U0126,a specific mitogen activated protein kinase kinase/extracellular regulated protein kinase(MEK/ERK)inhibitor,and PX-478,a hypoxia-inducible factor 1 subunit alpha(HIF-1α)inhibitor,were used to study the molecularmechanisms of Mex3a in CRC cells.Co-immunoprecipitation(Co-IP)assay was performed to detect the interaction between two proteins.Bioinformatics analysis including available public database and Starbase software(starbase.sysu.edu.cn)were used to evaluate the expression and prognostic significance of genes.TargetScan(www.targetscan.org)and the miRDB(mirdb.org)website were used to predict the combination site between microRNA and target mRNA.BALB/c nude micewere used to study the function of Mex3a and hsa-miR-6887-3p in vivo.Results:Clinicopathological and immunohistochemical(IHC)studies of 101 CRC tissues and 79 normal tissues demonstrated that Mex3a was a significant prognostic factor for overall survival(OS)in CRC patients.Mex3a knockdown substantially inhibited the migration,invasion,and proliferation of CRC cells.Transcriptome analysis and mechanism verification showed that Mex3a regulated the RAP1 GTPase activating protein(RAP1GAP)/MEK/ERK/HIF-1αpathway.Furthermore,RAP1GAP was identified to interact with Mex3a in Co-IP experiments.Bioinformatics and dual-luciferase reporter experiments revealed that hsa-miR-6887-3p could bind to the 3’-untranslated regions(3’-UTR)of the Mex3amRNA.hsa-miR-6887-3p downregulated Mex3a expression and inhibited the tumorigenesis of CRC both in vitro and in vivo.Conclusions:Our study demonstrated that the hsa-miR-6887-3p/Mex3a/RAP1GAP signaling axis was a key regulator of CRC and Mex3a has the potential to be a new diagnostic marker and treatment target for CRC. 展开更多
关键词 Mex3a rap1GAP microRNA hsa-miR-6887-3p MEK/ERK/HIF-1αsignaling colorectal cancer proliferation INVASION migration prognosis
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lncRNA CDK5RAP3通过miR-223-3p调节胃癌细胞的增殖和侵袭
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作者 陈洪焱 肖萍 +3 位作者 李昀晖 柯春霞 高勇 占桂香 《国际外科学杂志》 2022年第9期618-622,F0004,共6页
目的探究长链非编码RNA(lncRNA)CDK5RAP3在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖和侵袭的调节作用。方法通过TCGA数据库分析CDK5RAP3在胃癌组织和癌旁组织中的表达差异。通过转染pcDNA3.1-CDK5RAP3质粒至Hs-746T细胞,构建过表达CDK5RAP3胃... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)CDK5RAP3在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖和侵袭的调节作用。方法通过TCGA数据库分析CDK5RAP3在胃癌组织和癌旁组织中的表达差异。通过转染pcDNA3.1-CDK5RAP3质粒至Hs-746T细胞,构建过表达CDK5RAP3胃癌细胞株(CDK5RAP3组),转染pcDNA3.1质粒至Hs-746T细胞(对照组)。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组细胞中CDK5RAP3表达量的变化。CCK-8法和Transwell实验分别检测过表达CDK5RAP3对Hs-746T细胞增殖、侵袭的影响。通过starBase v2.0数据库预测CDK5RAP3和miR-223-3p的结合位点。双荧光素酶报告基因实验验证CDK5RAP3和miR-223-3p的直接结合。qRT-PCR检测各组Hs-746T细胞中miR-223-3p表达水平。Western blotting检测各组Hs-746T细胞中增殖蛋白和侵袭蛋白的表达水平。实验数据采用SPSS 17.0软件进行分析,符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示,两组间比较采用t检验,多组均数间比较采用单因素方差分析。结果与癌旁组织相比,胃癌组织中CDK5RAP3表达水平明显降低(P<0.01)。对照组和CDK5RAP3组Hs-746T细胞中CDK5RAP3表达分别为(1.08±0.77)和(10.63±2.14),差异有统计学意义(P<0.01)。上调CDK5RAP3显著降低Hs-746T细胞的增殖活性(P<0.05)。对照组和CDK5RAP3组侵袭细胞数分别为(137.80±28.72)个和(57.76±24.95)个,差异有统计学意义(P<0.01)。CDK5RAP3能够直接结合miR-223-3p(P<0.01)。对照组和CDK5RAP3组Hs-746T细胞中miR-223-3p表达分别为(6.22±1.20)和(1.01±0.98),差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,上调CDK5RAP3显著减少增殖蛋白和侵袭蛋白的表达水平。结论胃癌组织中CDK5RAP3呈现低表达,CDK5RAP3通过靶向miR-223-3p抑制胃癌Hs-746T细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 胃肿瘤 细胞增殖 转染 CDK5rap3 miR-223-3p 细胞侵袭
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