高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定黑参中4种稀有皂苷的含量

目的利用高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)测定14批次黑参中4种稀有皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rk1、Rg5的含量。方法采用HPLC-ELSD对黑参中4种稀有皂苷进行测定。色谱条件:采用COSMOSIL C18-PAQ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以80%乙腈水溶液(A)-10%乙腈水溶液(C)为流动相进行梯度洗脱,流速1.2 m L·min-1,柱温30℃,漂移管温度为60℃,进样体积20μL。结果稀有皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rk1、Rg5得到良好的分离,分别在21~620、19~570、20~610和19~560μg·m L-1与色谱峰面积呈良好的线性关系。14个黑参样品中稀有皂苷20(S)-Rg3的含量范围为0.107%~0.233%,20(R)-Rg3的含量范围为0.075%~0.220%,Rk1的含量范围为0.161%~0.330%,Rg5的含量范围为0.442%~0.822%。结论 HPLC-ELSD法可用于同时测定黑参中4种稀有皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rk1、Rg5成分,且方法简单、可靠、易行。同时,其结果为以后建立和完善黑参的炮制工艺及质量标准提供一定的参考依据。

不同炮制方法对人参皂苷含量及肝癌细胞凋亡的影响

为了探讨不同炮制方法对人参皂苷含量及肝癌细胞凋亡的影响,采用HPLC法测定人参液中单体皂苷Rg1、Re、Rb1(三者合为总皂苷)和稀有皂苷Rg3的含量;MTT法检测不同人参提取液对人肝癌细胞HepG2的抑制率,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果表明,在人参炮制过程中,人参总皂苷含量由0.56%下降到0.13%,稀有皂苷Rg3含量由0.17%增加到0.30%;抑制率检测结果表明,浓度为28.8 g/L时3种提取液对细胞的抑制作用最强,黑参组对肝癌细胞的抑制作用高于人参组和红参组;凋亡实验发现,黑参提取液对细胞的促进凋亡作用明显,人参提取液的促凋亡作用不明显。表明红参和黑参提取液可以抑制人肝癌细胞HepG2增殖并促进其凋亡,可能与参液中的稀有皂苷Rg3含量有关。

高效液相色谱法同时测定黑参中4种稀有人参皂苷的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定黑参中稀有人参皂苷20(S)-Rg_3、20(R)-Rg_3、Rk1、Rg_54种有效成分的含量。方法采用COSMOSIL C_(18)-PAQ(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为水-乙腈梯度洗脱,检测波长203 nm,柱温30℃,流速1.0 m L·min^(-1),进样体积10μL。结果稀有皂苷20(S)-Rg_3、20(R)-Rg_3、Rk1、Rg_5得到良好的分离效果,分别在0.051~0.256 mg·m L^(-1)(r=0.999 9)、0.009~0.280 mg·mL^(-1)(r=0.999 7)、0.051~0.303 mg·m L^(-1)(r=0.999 9)和0.093~0.279 mg·m L^(-1)(r=0.999 9)内与色谱峰面积呈良好的线性关系。平均加样回收率分别为103.9%、99.2%、97.0%和100.6%,RSD分别为0.71%、0.73%、1.97%和0.57%。结论本实验所建立的黑参中皂苷含量测定方法准确、简单、可靠、重复性好,可用于黑参药材中4种主要化学成分含量的测定,其结果可为其质量控制、合理用药及进一步研究开发提供参考。