海藻乙醇提取物对大鼠甲状腺肿大的影响

[目的]研究海藻乙醇提取物(简称“醇提物”)对甲硫氧嘧啶(MTU)引起的大鼠甲状腺肿大的影响。[方法]将72只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组和海藻醇提物低、中、高剂量组,每组12只。除空白组外,余组采用灌喂MTU溶液14 d复制甲状腺肿大模型。造模成功后,阳性对照组灌胃给予左甲状腺素钠片溶液(每日剂量为20μg/kg);海藻醇提物低、中、高剂量组分别灌胃给予相应剂量的海藻醇提物溶液(每日剂量分别为0.54 g/kg、1.08 g/kg、2.16 g/kg);空白组和模型组每日灌胃给予等量生理盐水。各组灌胃容量均为10 ml/kg。连续给药28 d,给药期间需隔天灌胃给予MTU 1次以保证模型的稳定。28 d后采用10%水合氯醛进行腹腔注射麻醉,腹主动脉取血进行处死。取大鼠肝脏、心脏、甲状腺组织称重,计算脏器指数;用HE染色法观察甲状腺组织病理形态学变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中FT3、FT4和TSH的含量。[结果]与空白组比较,模型组大鼠甲状腺指数升高(P<0.01),甲状腺组织小叶排列紊乱,滤泡皱缩,上皮细胞增厚,间质炎性细胞浸润,血清中FT3、FT4含量显著降低,TSH含量显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,海藻醇提物低、中、高剂量组均能降低大鼠甲状腺指数(P<0.05或P<0.01),并改善MTU引起的甲状腺损伤病理形态;海藻醇提物低、高剂量组血清中的FT3含量升高(P<0.05);海藻醇提物低剂量组血清中FT4含量升高(P<0.05);海藻醇提物中、高剂量组血清中TSH含量显著降低(P<0.01)。[结论]海藻醇提物对MTU引起的大鼠甲状腺肿大及甲状腺组织病理学形态变化具有明显的改善作用,可能与海藻醇提物能够升高FT3、FT4水平,降低TSH的表达量有关。

6种介类中药对大鼠甲状腺肿大模型影响的实验研究

[目的]观察牡蛎、石决明、瓦楞子、珍珠母、紫贝齿、蛤壳6种介类中药对大鼠甲状腺肿大的影响。[方法]72只健康SD大鼠随机分为9组:正常组、模型组、阳性组及6个介类中药组。每日灌胃丙硫氧嘧啶(0.15g·kg-1),连续造模10d,称量甲状腺湿重,酶联免疫法测血清T3、T4、TSH含量,观察光镜下甲状腺的形态变化。[结果]模型组大鼠较正常组甲状腺相对重量增加,T3、T4含量降低,且均有显著性差异(P<0.01),甲状腺滤泡上皮细胞增生明显;与模型组比较,牡蛎、蛤壳组使大鼠T3、T4含量均回升,且均有显著性差异(P<0.05);牡蛎、蛤壳组甲状腺滤泡上皮细胞增生不明显,其他4种介类中药组均有不同程度的增生。[结论]牡蛎、蛤壳对甲状腺肿模型大鼠甲状腺功能均有较好的改善作用。

海藻-甘草反药组合在海藻玉壶汤抗丙硫氧嘧啶致甲状腺肿大中的作用研究

目的:探讨海藻-甘草剂量为《中华人民共和国药典》2015年版规定高限剂量2倍的条件下,海藻-甘草反药组合在海藻玉壶汤抗丙硫氧嘧啶(PTU)致大鼠甲状腺肿大中的作用。方法:Wistar雄性大鼠84只,按体质量随机分为对照组、模型组、阳性药组(优甲乐)、海藻玉壶汤全方组(简称“全方组”)、海藻玉壶汤去海藻组(简称“去海藻组”)、海藻玉壶汤去甘草组(简称“去甘草组”)、海藻玉壶汤去海藻及甘草组(简称“去藻草组”),每组12只。造模期间,除对照组外,其余各组大鼠灌胃给予PTU(10 mg·kg^(-1)),每日1次,共14 d。模型制备成功后,对照组与模型组大鼠灌胃给予去离子水,阳性药组大鼠给予优甲乐(20μg·kg^(-1)),其余各给药组给予相应中药煎液(给药剂量为全方组12.06 g·kg^(-1)、去海藻组9.9 g·kg^(-1)、去甘草组10.26 g·kg^(-1)、去藻草组8.1 g·kg^(-1)),每日给药1次,持续28 d。治疗期间,每隔1 d,除对照组外,其余各组大鼠均灌胃给予PTU以维持模型稳定,剂量依前。给药结束后计算各组大鼠的甲状腺系数;光镜下观察甲状腺组织形态;放射免疫法检测血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)水平。结果:与对照组比较,各组大鼠甲状腺系数显著升高(P<0.01);与模型组比较,各中药煎液给药组大鼠甲状腺系数显著降低(P<0.01)。光镜下观察大鼠甲状腺组织形态,结果显示,与对照组比较,模型组与阳性药组变化最为显著,甲状腺组织小叶排列紊乱,结构不清,细胞核数目增多(P<0.05),上皮细胞增生肥大,细胞直径增加(P<0.05),滤泡腔大小不一,形状各异,面积显著减小(P<0.05),其余各给药组大鼠甲状腺组织的病变均有一定减轻,其中全方组大鼠甲状腺组织形态与对照组最为接近。与对照组比较,模型组大鼠血清中T3、T4水平显著降低(P<0.05),TSH水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,阳性药组、全方组大鼠血清T3、T4水平显著升高(P<0.05),TSH水平有降低趋势,但差异无统计学意义。结论:海藻玉壶汤全方及去掉1味或2味反药组合能回调甲状腺肿大大鼠甲状腺系数,改善甲状腺组织病理形态及恢复血清中激素水平,且全方组优于全方去掉1味或2味反药组,由此说明,海藻-甘草反药组合是海藻玉壶汤中关键的药对,对于甲状腺肿大的治疗缺一不可。

贝牡莪消颗粒对PTU致大鼠甲状腺肿组织形态的影响

目的通过丙硫氧嘧啶(PTU)造成大鼠甲状腺肿的模型,观察贝牡莪消颗粒对大鼠甲状腺肿组织形态的影响,进而探究该药物对本病的治疗作用。方法选取40只雄性SD大鼠,随机选取其中10只作为空白组,其余30只给予丙硫氧嘧啶0.15 mg/g,1次/d,持续灌胃40 d。造模成功后,将30只大鼠随机分为3组,即模型对照组(2 m L/d)、贝牡莪消组(22.2 mg/g)、优甲乐组(0.08μg/g)。30 d后处死大鼠,光镜下观察大鼠甲状腺的组织形态。结果肉眼观察:PTU组大鼠甲状腺较空白组体积明显增大;镜下观察:PTU组与空白组对比,甲状腺滤泡间的差异明显,大小不一,呈圆形或椭圆形,滤泡腔变窄,呈现不规则的形状,腔内胶质数量明显降低。显微镜下观察大鼠甲状腺HE染色示:贝牡莪消组甲状腺滤泡与上皮细胞恢复较好,形态较为规则,基本恢复正常;而优甲乐组仍然可见到少许浸润的炎性细胞存在于滤泡腔和间质。结论 PTU能够导致大鼠甲状腺肿大;贝牡莪消组甲状腺细胞恢复程度明显优于优甲乐组,并能使大鼠甲状腺肿组织形态得到改善。

基于PI3K/Akt信号途径探讨理气消瘿方对结节性甲状腺肿大鼠的作用机制

目的基于PI3k/Akt信号途径探析理气消瘿方对结节性甲状腺肿大鼠的机制研究。方法60只Wist-ar雄性大白鼠,随机分为空白对照组、模型组、优甲乐组、消瘿方组,每组15只。空白对照组坚持每日进行普通胃喂养并给予生理盐水灌胃,模型组完成造模后同样给予生理盐水灌胃,优甲乐组给予优甲乐溶液灌服,消瘿方组给予活血消瘿方灌服。比较四组大鼠PI3K、Akt信号通路分子表达量以及1个月内存活情况。结果空白对照组PI3K信号通路分子表达量为(1.00±0.01)低于模型组的(1.52±0.07)、优甲乐组的(1.41±0.07)、消瘿方组的(1.31±0.08),差异均具有统计学意义(t=28.482、22.457、14.892,P<0.05)。消瘿方组PI3K信号通路分子表达量明显低于模型组及优甲乐组,差异均有统计学意义(t=7.651、3.643,P<0.05)。空白对照组Akt信号通路分子表达量为(1.00±0.01)低于模型组的(2.14±0.08)、优甲乐组的(2.01±0.03)、消瘿方组的(1.67±0.07),差异均具有统计学意义(t=54.764、123.70、36.697,P<0.05)。消瘿方组Akt信号通路分子表达量均低于模型组、优甲乐组,差异均具有统计学意义(t=17.124、12.388,P<0.05)。空白对照组小鼠存活率100.00%明显高于模型组的33.33%、优甲乐组的53.33%,差异均具有统计学意义(P<0.05);空白对照组与消瘿方组大鼠存活率比较,差异无统计学意义(P<0.05)。结论结节性甲状腺肿的发生可能与PI3K/Akt信号通路蛋白分子表达量上调有关联,临床给予消瘿方治疗可抑制PI3KAkt信号通路激活达到一定治疗目的。

贝牡莪消丸对PTU致甲状腺肿伴甲减大鼠TSH值及行为学方面的影响

目的:通过丙硫氧嘧啶(PTU)造成大鼠甲状腺肿伴甲减的模型,观察贝牡莪消丸对甲状腺肿伴甲减大鼠TSH值及行为学方面的影响,进而探究该药物对本病的作用机制。方法:选取40只SD大鼠,随机选取其中10只作为空白组,其余30只给予丙硫氧嘧啶0.15 mg/g,每日1次,持续灌胃40天。造模成功后,将30只大鼠随机分为3组,即模型对照组、贝牡莪消丸组、优甲乐组,分别喂以生理盐水、贝牡莪消丸、优甲乐。给药30天后,以10天为1个周期,分别于给药前、给药10天后、给药20天后、给药30天后,进行大鼠行为学指标检测(敞箱实验)及新奇事物认知试验检测,并于给药30天后处死大鼠,镜下观察大鼠甲状腺细胞形态,并取血清测定TSH。结果:丙基硫氧嘧啶能够导致大鼠的甲状腺肿大并发甲减;贝牡莪消丸组的血清TSH值较优甲乐组显著降低;显著改善甲减大鼠异常空间认知能力。结论:PTU能够导致大鼠甲状腺肿大并发甲减,贝牡莪消丸可以促使甲状腺肿伴甲减大鼠TSH水平降低,并且显著改善甲减大鼠异常空间认知能力。

甲亢欣合剂调节甲亢模型大鼠甲状腺激素的实验研究

甲状腺功能亢进症(简称“甲亢”)是一种常见的自身免疫性疾病,属于中医学“瘿病”的范畴。甲亢欣合剂以益气养阴、清肝散结为治法取得了较好疗效,从药理学角度探讨甲亢欣合剂对甲亢模型大鼠的治疗作用,可降低血清T3、T4、FT3、FT4含量,升高TSH含量,改善大鼠甲状腺功能,显著抑制甲状腺组织增生。

活血消瘿方调控Fas系统对结节性甲状腺肿大鼠模型甲状腺细胞凋亡的影响

目的:探究活血消瘿方调控Fas系统对结节性甲状腺肿大鼠模型甲状腺细胞凋亡的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、活血消瘿方低剂量组、活血消瘿方中剂量组、活血消瘿方高剂量组,每组10只。空白对照组大鼠灌胃生理盐水,其余各组大鼠灌胃0.1%PTU溶液复制结节性甲状腺肿模型。给予相应药物干预4周后,ELISA法检测血清中促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酶(FT_(3))、游离甲状腺素(FT_(4))水平;测定甲状腺组织质量,HE染色分析甲状腺组织的病理学变化;TUNEL分析甲状腺细胞的凋亡指数;免疫组织化学、Western blotting和RT-PCR检测FasL、Fas、Caspase-8、Caspase-3蛋白和mRNA表达水平。结果:模型组大鼠血清中TSH含量明显高于空白对照组(P<0.05),FT_(3)和FT_(4)含量、甲状腺组织质量、凋亡指数及FasL、Fas、Caspase-8、Caspase-3蛋白和mRNA表达水平均低于空白对照组(P<0.05);阳性对照组和活血消瘿方低、中、高剂量组大鼠血清中TSH含量明显低于模型组(P<0.05),FT_(3)和FT_(4)含量、甲状腺组织质量、凋亡指数及FasL、Fas、Caspase-8、Caspase-3蛋白和mRNA表达水平均明显高于模型组(P<0.05);活血消瘿方低、中剂量组大鼠血清中TSH含量高于阳性对照组(P<0.05),FT_(3)和FT_(4)含量、甲状腺组织质量、凋亡指数及FasL、Fas、Caspase-8、Caspase-3蛋白和mRNA表达水平均明显低于阳性对照组(P<0.05);活血消瘿方高剂量组大鼠以上各指标与阳性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:活血消瘿方能通过激活Fas系统促进结节性甲状腺肿大鼠模型甲状腺细胞凋亡。

平消胶囊治疗单纯性甲状腺肿药效的实验研究

目的:通过丙硫氧嘧啶诱导的大鼠甲状腺肿模型,评价平消胶囊治疗单纯性甲状腺肿的药效作用。方法:将实验大鼠随机分为对照组、模型组、平消胶囊低、中、高剂量组和阳性药左旋甲状腺素钠(10μg/kg)组。对照组大鼠每日灌胃给予双蒸水,模型组及给药组每日灌胃给予1%丙基硫氧嘧啶混悬液,共21天,于第14天起,给药组给予平消胶囊低、中、高剂量和阳性药,持续至第49天。观察监测大鼠体重、甲状腺湿重、血清甲状腺功能五项、桥本氏甲状腺炎指标等,评估平消胶囊对单纯性甲状腺肿的治疗效果。结果:平消胶囊给药期间,大鼠甲状腺在外观形态方面有一定的减小,结合各组大鼠甲状腺湿重情况,结果表明平消胶囊可抑制甲状腺肿大。给药组大鼠FT4、TSH、T3明显下降,TGAb明显回升,表明平消胶囊可显著改善单纯性甲状腺肿大鼠的FT4、TSH、T3和TGAb指标。结论:平消胶囊可通过调控FT4、TSH、T3和TGAb进而改善大鼠甲状腺肿大。

黄药子对甲状腺肿大鼠模型影响的实验研究

目的观察黄药子和黄药子(止血中药)与当归(补血中药)配伍对碘缺乏致甲状腺肿大鼠的甲状腺功能的影响。方法制备碘缺乏致甲状腺肿大鼠模型,设正常对照组、模型对照组、黄药子组、黄药子配伍当归组。观察各组大鼠甲状腺相对重量、血清T3、T4、TSH、甲状腺滤泡上皮细胞高度、滤泡腔面积以及光镜下甲状腺形态的变化。结果给药28天后,黄药子组甲状腺相对重量、血清T4、TSH、甲状腺滤泡上皮细胞高度、滤泡腔面积与模型对照组比较无显著性差异;但血清T3高于模型对照组,且有显著性差异,与正常组比较无显著性差异。黄药子组与黄药子配伍当归组比较无显著性差异。结论黄药子对碘缺乏性甲状腺肿无治疗作用;黄药子配伍当归后,对其疗效也无影响。

地方性甲状腺肿大鼠子代脑垂体-甲状腺轴的实验形态学观察

本文对地甲肿5个月仔鼠进行了脑垂体—甲状腺轴的功能测定及光镜与电镜观察。结果表明:血清 T_4下降,T_3水平升高,脑垂体嗜酸性细胞明显减少,生长激素细胞变性。嗜硷性细胞显著增加,促甲状腺激素细胞功能旺盛,增生活跃。少数细胞为退行性变。甲状腺除有增生性改变外,尚有个别胶质贮留及幼稚型结节形成。

基于均匀设计的海藻玉壶汤中海藻与甘草不同比例配伍对甲状腺肿大大鼠模型肝脏功能及病理形态的影响

目的:通过海藻与甘草不同比例配伍的海藻玉壶汤对甲状腺肿大大鼠模型肝功能相关指标的检测及病理形态学观察,考察含"十八反"中海藻、甘草这对反药组合的复方海藻玉壶汤对肝脏系统的影响。方法:将海藻与甘草按照2因素7水平的均匀设计实验原则设置不同配伍比例,灌胃14d,观察海藻与甘草不同配比的海藻玉壶汤对甲状腺肿大大鼠模型肝脏系数、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)以及肝组织病理形态的影响。结果:与模型组比较,配比2组(生甘草:海藻为9.68:12.49)、3组(生甘草:海藻为19.36:0.54)、6组(生甘草:海藻为29.04:4.16)ALT水平显著降低(P<0.05);配比3组、6组较模型组AST水平显著降低(P<0.05);配比5组(生甘草:海藻为0.14:8.32)血清中ALP的含量较模型组显著升高,配比5组AST/ALT值显著降低(P<0.05)。结论:含海藻、甘草这对反药组合的复方海藻玉壶汤应用于甲状腺肿大病理模型,在肝脏系统未发现明显的毒副作用,但需进行不同剂量、不同炮制品种的进一步研究方能得出可靠结论。

理气消瘿片治疗实验性大鼠甲状腺肿的作用机制

目的:探讨理气消瘿片对实验性大鼠甲状腺肿的作用机制。方法:白色封闭群大鼠(SD),随机分为6组:正常对照组,模型组,理气消瘿片低、中、高剂量组,优甲乐组。除正常对照组外,其余各组每日给大鼠灌服丙基硫氧嘧啶(20 mg·kg-1)连续造模,理气消瘿片低、中、高剂量组同时分别灌服2.4,4.8,9.6 g·kg-1的理气消瘿片水溶液,阳性药物组同时灌以7.8μg·kg-1的优甲乐。60 d后处死动物,留取血清和甲状腺组织。计算大鼠甲状腺指数,检测血清游离三碘甲状腺氨酸原氨酸(FT3),游离甲状腺素(FT4),促甲状腺素(TSH)含量,观察甲状腺组织病理改变,利用免疫荧光法观察甲状腺组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2),转化生长因子β(TGF-β)的表达改变。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中FT3,FT4含量升高(P<0.05),TSH含量降低(P<0.05),甲状腺明显肿大(P<0.01),bFGF,Bcl-2表达明显升高,TGF-β表达明显降低;与模型组相比,理气消瘿片能明显降低甲状腺肿大鼠的甲状腺指数(P<0.05),但对血清FT3,FT4,TSH含量影响不明显,使甲状腺组织病理改变减轻,降低bFGF,Bcl-2表达(P<0.01),升高TGF-β表达(P<0.01)。结论:理气消瘿片具有抗甲状腺肿的作用,其机制与调节bFGF,Bcl-2,TGF-β的表达有关。

海藻玉壶汤及拆方对甲状腺肿大模型大鼠mTOR-p70S6K/4E-BP1信号通路的影响

目的探讨海藻玉壶汤中海藻与甘草加减应用对甲状腺肿大模型大鼠哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-核糖体S6蛋白激酶(p70S6K)/真核起始因子4E结合蛋白(4E-BP1)信号通路的影响。方法选取Wistar大鼠84只,雄性,随机分为空白组、模型组、优甲乐组(0.02μg/g)、海藻玉壶汤组(10.08 g/kg)、海藻玉壶汤减海藻组(9.00 g/kg)、海藻玉壶汤减甘草组(9.18 g/kg)和海藻玉壶汤减海藻甘草组(8.10 g/kg),除空白组其余各组给予丙硫氧嘧啶复制甲状腺肿大病理模型,以优甲乐作为阳性对照药,其余各给药组给予相应药液。计算各组大鼠甲状腺系数,观察甲状腺病理形态变化,用RT-PCR法检测甲状腺组织中mTOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA的表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠甲状腺系数、甲状腺细胞核个数升高(P<0.01),滤泡腔面积降低(P<0.01);与模型组比较,海藻玉壶汤组及各拆方组大鼠甲状腺系数、甲状腺细胞核个数降低(P<0.01),滤泡腔面积升高(P<0.01),其中海藻玉壶汤组的恢复作用最明显。与空白组比较,模型组mTOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA表达均升高(P<0.01);与模型组比较,海藻玉壶汤组及拆方各组均可使mTOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论海藻玉壶汤及拆方对甲状腺肿大模型大鼠的甲状腺系数及甲状腺组织病理形态有纠正作用,其作用机制可能与其抑制mTOR-p70S6K/4E-BP1信号通路进而抑制细胞增殖有关。

海藻玉壶汤加减海藻甘草反药组合对甲状腺肿大大鼠p53/p21/Caspase-3通路表达的影响

目的:探究海藻和甘草反药组合在2020年版《中华人民共和国药典》高限2倍剂量条件下于海藻玉壶汤中加减配伍应用对治疗甲状腺肿大的作用和p53/p21/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)信号通路的影响。方法:Wistar大鼠128只,随机分为空白组、模型组、优甲乐组(20μg·kg^(-1))、海藻玉壶汤组(12.06 g·kg^(-1))、去海藻组(9.90 g·kg^(-1))、去甘草组(10.26 g·kg^(-1))、去海藻甘草组(8.10 g·kg^(-1))、海藻甘草组(3.96 g·kg^(-1)),每组16只。除空白组其余各组给予PTU复制甲状腺肿大病理模型,将优甲乐用作阳性药,其余各组给予相应药液,末次给药后12 h进行取材。观察各组甲状腺形态;计算各组大鼠甲状腺系数;检测各组大鼠血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)的含量;苏木素-伊红(HE)染色观察甲状腺病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测甲状腺组织p53、p21、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞周期蛋白D_(1)(Cyclin D_(1))、Caspase-3 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测甲状腺组织凋亡相关信号通路p53、p21、Caspase-3蛋白表达情况。结果:与空白组比较,模型组甲状腺系数显著增高(P<0.01),T3、T4、FT3、FT4水平均降低(P<0.01),TSH升高(P<0.01),甲状腺组织病理形态变化明显(P<0.05),p53、p21、Cyclin D_(1)、Caspase-3 mRNA表达均降低(P<0.05);与模型组比较,全方组甲状腺系数显著降低(P<0.01),T3、T4、FT3、FT4水平均上升(P<0.05),TSH下降(P<0.01),甲状腺组织病理形态明显恢复(P<0.05),p53、p21、Caspase-3 mRNA表达上升(P<0.05),p53、p21、Caspase-3蛋白表达量增加(P<0.05)。结论:在2020年版《中华人民共和国药典》高限2倍剂量条件下,含海藻和甘草反药组合于海藻玉壶汤中加减配伍应用对甲状腺肿大模型大鼠的甲状腺系数、甲状腺激素及甲状腺组织形态有显著的改善效果,其作用机制可能与升高p53、p21、Caspase-3相关表达从而促进细胞凋亡相关。