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Study of the immunoisolating effects of barium-alginate microencapsu lation on rat islets allograft survival
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作者 MeiZhang ChaoLiu CuipingLiu YouwenQin ZhaosunZhen 《Journal of Nanjing Medical University》 2005年第2期81-85,共5页
Objective: To evaluate the immunoisola ti ng effects of barium-alginate microencapsulation on islets allograft survival. Methods: The nonmicroencapsulated and microencapsulated islets w ere transplanted under the kid... Objective: To evaluate the immunoisola ti ng effects of barium-alginate microencapsulation on islets allograft survival. Methods: The nonmicroencapsulated and microencapsulated islets w ere transplanted under the kidney capsule or intraperitoneally into Wistar rat w ith STZ-induced diabetes. The blood glucose and insulin secretion of grafts wer e observed. Graft function was tested by oral glucose tolerance test (OGTT). Results: ①Five diabetic rats became normoglycemic for 48 to 72 h after microencapsulated islets transplantation. The survival of transplanted i slets was on an average of 6 W. ②The normalization of the glycemia and insulin in the transplanted rats was associated with normal glucose and insulin profiles in response to OGTT. Conclusion: Microencapsulation with barium -alginate membrane can prolong islet survival and protect islets against allore jection. 展开更多
关键词 allogeneic transplantation immunoiso lation MICROENCAPSULATION isletS rat
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Protective effect of glucocorticoid-free immunosuppressive regimen in allogenic islet transplantation 被引量:1
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作者 Cheng-You Du and Er-Kan Xu Department of Hepatobiliary Surgery & Liver Transplantation, First Affiliated Hospital, Chongqing University of Medical Sciences, Chongqing 400016, China 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2006年第1期43-47,共5页
BACKGROUND: The most common complication after allogenic islet transplantation is rejection. This study was to evaluate the effect of anti-rejection of glucocorticoid-free immunosuppressive regimen on allogenic islet ... BACKGROUND: The most common complication after allogenic islet transplantation is rejection. This study was to evaluate the effect of anti-rejection of glucocorticoid-free immunosuppressive regimen on allogenic islet transplantation. METHODS: Tacrolimus(FK506)+mycophenolate mofetil (MMF) and FK506+MMF+prednisone (Pred) were administered respectively for 2 weeks to inhibit rejection after allogenic islet transplantation in rats, which were compared with the control group. The concentrations of blood glucose, insulin and C-peptide were determined dynamically in recipients and the sites of transplantation were observed morphologically. RESULTS: As compared with the control group without immunosuppressive agents, FK506+MMF and FK506+MMF+Pred could prolong the survival time of grafts significantly. There were many morphologically intact islets in the liver of recipients 2 months after transplantation. Group FK506+MMF kept normal levels of blood glucose, insulin and C-peptide beyond 60 days after transplantation. In contrast, group FK506+MMF+Pred secreted less C-peptide(P<0.05) and maintained a higher level of blood glucose concentration (P<0.01) after the operation. There was no significant difference in insulin concentrations between the two groups. The level of blood glucose beyond the first 2 weeks after drug withdrawal in group FK506+MMF+Pred decreased obviously (P<0.05), and the secretion of insulin and C-peptide increased. These results were compared with those the first 2 weeks after transplantation and the first 2 weeks after drug withdrawal. CONCLUSIONS: Both regimens of FK506+MMF and FK506+MMF+Pred could provide effective immunosup-pression. Moreover the combined glucocorticoid-free immunosuppressive strategy of low-dose FK506 and MMF could protect islet grafts in islet transplantation without diabetogenic side-effects. 展开更多
关键词 immunosuppressive agent islets of langerhans transplantation GLUCOCORTICOID rat
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邓老御膅膏对2型糖尿病大鼠的影响
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作者 郭雪莹 朱梓宁 +5 位作者 郑绍琴 王兆佳 陈颖谊 袁诗佳 杜岵骏 徐志勇 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期473-479,共7页
目的观察邓老御膅膏(玉米须、黄精、茯苓、山药等)对2型糖尿病大鼠的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、消渴丸组(阳性对照药,0.78 g·kg^(-1))及邓老御膅膏低、中、高剂量组(5.63、11.25、22.50 g·kg^(-1)),每组12... 目的观察邓老御膅膏(玉米须、黄精、茯苓、山药等)对2型糖尿病大鼠的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、消渴丸组(阳性对照药,0.78 g·kg^(-1))及邓老御膅膏低、中、高剂量组(5.63、11.25、22.50 g·kg^(-1)),每组12只。采用高脂饮食联合一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30 mg·kg^(-1))制备2型糖尿病大鼠模型。造模成功后灌胃给药,每天1次,连续8周。每周记录各组大鼠24 h平均饮水量;给药第2、4、6、8周检测大鼠空腹血糖(FBG);进行糖耐量(OGTT)试验,测定灌服葡萄糖后0、0.5、1、2 h的血糖值,计算时间-血糖曲线下面积(AUC);采用ELISA法测定血清胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)与胰岛素敏感性指数(IAI);采用ELISA法测定全血糖化血红蛋白(HbA1c)及血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)、C肽(C-P)水平;采用全自动生化分析仪测定血清总胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠胰腺组织病理变化,进行胰腺组织病理学半定量评分。结果与正常组比较,模型组大鼠出现多饮、多食、多尿现象,反应迟钝,第1~8周的饮水量均显著升高(P<0.01);给药第2~8周期间的FBG水平显著升高(P<0.01);口服葡萄糖后不同时间点的血糖水平及AUC值显著升高(P<0.01);血液中的HbA1c含量显著升高(P<0.01);各组大鼠的血清FINS含量无明显差异(P>0.05),模型组大鼠的HOMA-IR显著升高(P<0.01),IAI显著降低(P<0.01);血清IGF-1水平明显降低(P<0.05),C-P、TCHO、TG水平显著升高(P<0.05,P<0.01);胰岛腺泡形态不规则,体积缩小,腺泡细胞核增多,胰岛数量减少,部分胰岛见少量空泡变和胰腺淋巴细胞局灶性浸润,胰腺组织病理评分显著升高(P<0.01)。与模型组大鼠比较,邓老御膅膏给药组大鼠“三多一少”症状及精神状态得到一定改善,第1~7的周饮水量有不同程度降低(P<0.05,P<0.01);给药第2~8周期间的FBG水平有不同程度降低(P<0.05,P<0.01);口服葡萄糖后不同时间点的血糖水平及AUC值有一定程度降低,但差异无统计学意义(P>0.05);血液中的HbA1c含量显著降低(P<0.01);HOMA-IR有一定程度降低,但差异无统计学意义(P>0.05);血清C-P、TG水平明显降低(P<0.05,P<0.01),IGF-1水平有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);TCHO水平有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);胰岛腺泡形态不规则情况有所改善,胰岛数量有所增加,胰岛空泡变和淋巴细胞浸润减少,胰腺组织病理评分显著降低(P<0.01)。结论邓老御膅膏对2型糖尿病大鼠具有一定降糖作用,可能与其调节脂质代谢、修复胰岛损伤有关。 展开更多
关键词 邓老御膅膏 2型糖尿病 降糖作用 脂质代谢 胰岛损伤 糖化血红蛋白 C肽 大鼠
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罗格列酮对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞增殖与再生的影响 被引量:12
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作者 陈晓铭 吴美芬 +4 位作者 郑坤杰 方烁 胡卓清 刘阳 武革 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第8期1193-1195,共3页
目的:观察罗格列酮(RSG)对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞增殖与再生的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组(DM组)和RSG组,每组各12只。DM组和RSG组给予高脂饲料喂养,于第8周末以链脲佐菌素30 mg/kg腹腔注射,成模后RSG组给予RSG 4 ... 目的:观察罗格列酮(RSG)对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞增殖与再生的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组(DM组)和RSG组,每组各12只。DM组和RSG组给予高脂饲料喂养,于第8周末以链脲佐菌素30 mg/kg腹腔注射,成模后RSG组给予RSG 4 mg/(kg·d)灌胃持续4周。处死大鼠,取出胰腺组织,以免疫组织化学染色观察胰腺胰岛细胞的胰岛素(INS)、胰岛增殖细胞核抗原(PCNA)的表达变化,以原位末端标记法(TUNEL)检测胰腺胰岛细胞凋亡。结果:RSG组INS阳性表达率为75.0%,明显高于DM组(P<0.001);PCNA在RSG组胰腺组织的阳性表达率为66.7%,高于DM组(P<0.05);RSG组胰岛β细胞凋亡率明显降低(P<0.001)。结论:RSG可减少胰岛β细胞凋亡,促进其增殖。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 大鼠 胰岛Β细胞 凋亡 增殖 罗格列酮
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牛磺酸对链脲佐菌素所致大鼠Ⅰ型糖尿病的治疗作用 被引量:5
5
作者 杨作丰 董娜 +6 位作者 李洋 付丽 焦阳 牟丹阳 徐艳龙 李冰 刘志祥 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期66-70,共5页
为研究牛磺酸(Tau)对链脲佐菌素(STZ)所致糖尿病大鼠糖脂代谢及β细胞功能等方面的影响,给试验大鼠每日灌服牛磺酸,连续治疗70d,期间动态观测体重及空腹血糖。治疗第8周时处死大鼠,测定血清中C肽(C-P)、胰高血糖素(Glu)、超氧化物歧化酶... 为研究牛磺酸(Tau)对链脲佐菌素(STZ)所致糖尿病大鼠糖脂代谢及β细胞功能等方面的影响,给试验大鼠每日灌服牛磺酸,连续治疗70d,期间动态观测体重及空腹血糖。治疗第8周时处死大鼠,测定血清中C肽(C-P)、胰高血糖素(Glu)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)的含量。用HE染色观察胰岛组织形态,TUNEL原位末端标记法检测胰岛细胞的凋亡百分率,用免疫组化法染色观察胰岛细胞中Fas、Bax、Bcl-2的蛋白表达水平。结果表明,各牛磺酸给药组血糖、胰高血糖素、TG、TC、MDA含量降低,体重、C肽、SOD、GSH-Px、T-AOC、HDL值升高;胰岛结构较完整,凋亡率、Bcl-2表达降低,Bax、Fas表达增高,与模型组相比,差异显著(P<0.05)。研究结果说明,牛磺酸对于糖尿病动物模型的糖脂代谢以及胰岛细胞具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 牛磺酸 糖尿病 大鼠 胰岛细胞 细胞凋亡
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大鼠胰岛内γ-干扰素样免疫反应阳性物质的表达 被引量:5
6
作者 胡格 穆祥 +2 位作者 陈树林 欧阳五庆 李育良 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第4期540-542,共3页
In order to study the correlation between the neuroendocrine and immune systems, we observed the distribution and expression of interferon γ(IFN-γ) in cells of SD rat pancreas islets using the streptavidin-perosidas... In order to study the correlation between the neuroendocrine and immune systems, we observed the distribution and expression of interferon γ(IFN-γ) in cells of SD rat pancreas islets using the streptavidin-perosidase immunohistochemical method. A number of IFN-γ-like positive substances were found in the in the cytoplasm of pancreas islet A cells, but the nucleus could not be stained. Most of the IFN-γ-like positive cells were distributed around the periphery of the pancreas islet, the cells were round or oval in shape and the cell body was relatively large. Results suggest IFN-γ may play a role in the regulation of the function of pancreas islet cells and act as a neuro-immune medium . 展开更多
关键词 大鼠 胰岛 Γ-干扰素 免疫反应阳性物质 表达 神经免疫调节
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大鼠胰岛的分离和纯化 被引量:3
7
作者 侯凌 尹注增 +4 位作者 向莹 李俊华 陈实 陈刚 罗小平 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期413-416,共4页
目的探讨获得足够数量和较高纯度大鼠胰岛的分离和纯化方法。方法采用Ⅴ型胶原酶灌注消化法分离成年大鼠胰岛,Ficoll400非连续密度梯度法纯化胰岛。双硫腙(DTZ)染色鉴定培养的胰岛细胞,锥虫蓝染色检测细胞活性。葡萄糖刺激胰岛素释放试... 目的探讨获得足够数量和较高纯度大鼠胰岛的分离和纯化方法。方法采用Ⅴ型胶原酶灌注消化法分离成年大鼠胰岛,Ficoll400非连续密度梯度法纯化胰岛。双硫腙(DTZ)染色鉴定培养的胰岛细胞,锥虫蓝染色检测细胞活性。葡萄糖刺激胰岛素释放试验评价胰岛细胞的功能。结果分离纯化后大鼠胰岛平均收获量为(480±30)IEQ,纯度大于90%,活性大于90%。在低糖和高糖刺激下,胰岛素分泌量分别为(12.28±0.89)mIU/L、(19.01±1.49)mIU/L,二者相比较,差异有统计学意义(P<0.05),刺激指数为(1.55±0.01)。结论胶原酶Ⅴ逆行灌注消化胰腺和Ficoll400非连续密度梯度纯化法,可获得高纯度高活率的大鼠胰岛。 展开更多
关键词 大鼠胰岛 分离 纯化
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微囊化大鼠胰岛异种移植于糖尿病小鼠的实验观察 被引量:12
8
作者 何立敏 薛毅珑 +4 位作者 张莉 李新建 崔忻 刘成贵 潘长玉 《军医进修学院学报》 CAS 1999年第2期98-100,共3页
目的:观察海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微胶囊对异种胰岛组织移植的免疫隔离作用。方法:采用SUN氏APA微胶囊技术包裹大鼠胰岛细胞团,移植于链脲霉素(STZ)诱发的糖尿病模型小鼠腹腔。结果:糖尿病组小鼠及植入... 目的:观察海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微胶囊对异种胰岛组织移植的免疫隔离作用。方法:采用SUN氏APA微胶囊技术包裹大鼠胰岛细胞团,移植于链脲霉素(STZ)诱发的糖尿病模型小鼠腹腔。结果:糖尿病组小鼠及植入空囊或注射生理盐水的对照组小鼠血糖无明显变化;用微胶囊包裹及未包裹的大鼠胰岛异种移植于糖尿病小鼠腹腔内,移植后血糖明显下降9~12mmol/L,未包囊胰岛移植组受试鼠血糖降低仅维持2~3d,微囊化胰岛移植组血糖下降可持续110d。移植后1个月从腹腔回收的微囊胰岛呈圆型,表面光滑,无明显的纤维组织包绕,囊内胰岛DTZ染色呈桔黄色。结论:采用SUN氏静电APA微胶囊制作技术制作的胶囊,可明显延长大鼠胰岛作为异种移植物在小鼠体内的存活时间,表明这种微囊具有较好的免疫隔离作用和生物相容性。 展开更多
关键词 微囊 异种移植 糖尿病 异种移植
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一种经济高效的SD大鼠胰岛细胞分离技术 被引量:3
9
作者 张剑波 杨谦 +4 位作者 陈杰 母得志 张林 毛萌 屈艺 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期610-613,共4页
目的建立一种经济高效的大鼠胰岛细胞分离纯化方法,为胰腺的修复重建奠定实验基础。方法成年雄性SD大鼠25只,体重230~380g,共进行5次实验,每5只大鼠一组进行消化和分离。采用医用复方氯化钠注射液(compound sodium chloride injection,... 目的建立一种经济高效的大鼠胰岛细胞分离纯化方法,为胰腺的修复重建奠定实验基础。方法成年雄性SD大鼠25只,体重230~380g,共进行5次实验,每5只大鼠一组进行消化和分离。采用医用复方氯化钠注射液(compound sodium chloride injection,CSCI)经胰总管灌注大鼠胰腺,0.5mg/mLⅤ型胶原酶消化后,分别采用浓度为27.0%、23.0%、20.5%和11.0%的Ficoll 400形成不连续密度梯度介质,离心纯化胰岛细胞。双硫腙(dithizon,DTZ)染色行纯化前后胰岛细胞计数和纯度检测;荧光染料碘化丙啶(propidium iodide,PI)和二乙酸荧光素(fluorescein diacetate,FDA)储存液双染色鉴定胰岛细胞活性;RPMI1640培养基培养3d后,分别用浓度为2.8mmol/L的低糖和25.0mmol/L的高糖行葡萄糖刺激胰岛素释放实验检测胰岛细胞功能。结果5次实验胰岛细胞消化时间为(13.8±1.6)min。DTZ染色鉴定纯化前胰岛细胞数为(5626±422)个,纯化后为(2914±485)个,纯化后的胰岛细胞数较纯化前明显减少(P<0.01),回收率51.6%±6.0%,每个胰腺收获胰岛细胞数为(583±97)个/只。5次分离获得的胰岛细胞纯度为90.2%±3.4%,活性为81.6%±7.0%。培养3d后,葡萄糖刺激胰岛素释放实验显示:低糖环境下胰岛素水平为(39.7±7.5)EU/L,高糖环境为(116.1±17.4)EU/L,比较差异有统计学意义(P<0.01);刺激指数为3.0±0.4。结论采用CSCI作为大鼠胰岛细胞分离纯化的主要液体试剂,并采用低浓度Ⅴ型胶原酶消化,不仅可降低实验成本,同时可获得高质量的胰岛细胞。 展开更多
关键词 大鼠胰岛细胞 分离纯化 细胞培养
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推进式离心管结合单密度梯度法快速纯化大鼠胰岛 被引量:3
10
作者 张桦 陈宏 +5 位作者 孙嘉 杨力 鲁辛 张振 刘宏 蔡德鸿 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期349-351,共3页
目的探索用简化的单一密度梯度法建立快速纯化大鼠胰岛细胞的方法。方法用胶原酶P消化分离SD大鼠胰腺,采用自制的推进式离心管以及单一密度(1.090g/cm3)的HCA-Ficoll-400密度梯度液来纯化大鼠胰岛细胞。通过DTZ染色,在倒置显微镜下计数... 目的探索用简化的单一密度梯度法建立快速纯化大鼠胰岛细胞的方法。方法用胶原酶P消化分离SD大鼠胰腺,采用自制的推进式离心管以及单一密度(1.090g/cm3)的HCA-Ficoll-400密度梯度液来纯化大鼠胰岛细胞。通过DTZ染色,在倒置显微镜下计数胰岛细胞的数量和纯度,用胰岛素释放试验检测胰岛细胞的功能。结果纯化后平均每条SD大鼠胰腺可获得(731±89)个胰岛细胞当量(IEQ),平均纯度为(73.2±9.4)%,平均活率为(92.8±2.4)%。纯化后的胰岛细胞对胰岛素释放刺激反应良好,高糖时胰岛素的释放量为低糖时的3.54±0.79倍(P<0.001)。结论为各种胰岛细胞的实验研究建立了快速分离纯化胰岛细胞的方法,纯化的胰岛细胞功能良好。 展开更多
关键词 大鼠 胰岛细胞 纯化
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铁超负荷对胰岛β细胞分泌胰岛素功能的影响 被引量:7
11
作者 冯婷 杨波 +1 位作者 张祥迅 田浩明 《四川医学》 CAS 2007年第12期1341-1343,共3页
目的建立胰岛细胞表面灌注系统,并检测次氮基三醋酸铁(FeNTA)溶液对正常大鼠离体胰岛细胞一相分泌的影响。方法分离正常大鼠的胰岛细胞,将其分为3组:A组、B组和C组,每组含50个胰岛,分别用不同的刺激液进行灌注,检测40min内胰岛素的分泌... 目的建立胰岛细胞表面灌注系统,并检测次氮基三醋酸铁(FeNTA)溶液对正常大鼠离体胰岛细胞一相分泌的影响。方法分离正常大鼠的胰岛细胞,将其分为3组:A组、B组和C组,每组含50个胰岛,分别用不同的刺激液进行灌注,检测40min内胰岛素的分泌量。其中,A组为对照组,灌注液为16.7mmol/L葡萄糖液;B组为含铁的高糖液灌注,包括B1组(高糖液含有0.05mmol/L FeNTA)和B2组(高糖液含有0.1mmol/L FeNTA);C组为经过FeNTA孵育5h后用高糖液灌注,包括C1组(孵育液中含FeNTA 0.05mmol/L)和C2组(孵育液中含FeNTA 0.1mmol/L);实验过程重复3次。结果①正常大鼠的胰岛细胞在16.7mmol/L葡萄糖刺激下胰岛素分泌具有典型的早相分泌;②无论是在含一定浓度的(0.05mmol/L或0.1mmol/L)FeNTA的葡萄糖的刺激液灌注,还是经过含FeNTA(0.05mmol/L或0.1mmol/L)孵育液孵育5h后再用高糖刺激液灌注,大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌均完全缺乏一相分泌,仅有不断出现的微小波动,分泌峰值仅仅较基础状态略有增加。结论铁含量增加会损害胰岛细胞分泌胰岛素,这对阐明铁与糖尿病的关系具有一定的意义。 展开更多
关键词 胰岛细胞 胰岛素 一相分泌
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山药多糖对体外培养大鼠胰岛细胞活性及胰岛素分泌的影响 被引量:21
12
作者 杨宏莉 张宏馨 +6 位作者 李兰会 王燕 李军 廉海晨 卢淑兰 张伟伟 蒋雪 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2010年第4期408-412,共5页
为评价山药多糖对胰岛细胞功能的影响,以不同质量浓度葡萄糖刺激胰岛素释放,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胰岛β细胞活性,同时以反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测胰岛细胞的抗凋亡基因bcl-2的表达,研究山药多糖与大鼠胰岛细胞共培... 为评价山药多糖对胰岛细胞功能的影响,以不同质量浓度葡萄糖刺激胰岛素释放,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胰岛β细胞活性,同时以反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测胰岛细胞的抗凋亡基因bcl-2的表达,研究山药多糖与大鼠胰岛细胞共培养对胰岛细胞活性与胰岛素分泌水平的影响,并对其影响机制进行探讨.结果发现,1600 mg/L组胰岛细胞活性稍有下降,但是与对照组没有显著差异(p>0.05);其余各组随培养液中山药多糖质量浓度的增加,胰岛细胞活性增加.低糖或高糖质量浓度环境中实验组与对照组的胰岛素分泌没有显著差异(p>0.05),RT-PCR发现实验组的bcl-2表达显著高于对照组(p<0.05).800 mg/L山药多糖明显提高胰岛细胞的存活率,改善胰岛功能. 展开更多
关键词 山药多糖 胰岛细胞 大鼠 胰岛素 BCL-2
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大鼠胰岛分离条件的优化 被引量:3
13
作者 陈晓波 秦杰 +4 位作者 焦洋 董维平 李永翔 钟翠平 谭建明 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第2期166-168,共3页
目的:优化大鼠胰岛分离纯化的条件,为胰岛移植实验奠定基础。方法:通过胆总管灌注胶原酶P来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重对胰岛分离结果的影响。双硫腙染色鉴... 目的:优化大鼠胰岛分离纯化的条件,为胰岛移植实验奠定基础。方法:通过胆总管灌注胶原酶P来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重对胰岛分离结果的影响。双硫腙染色鉴定胰岛,丫啶橙/碘丙啶染色鉴定胰岛细胞活率,糖刺激胰岛素释放试验评价胰岛功能。结果:胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重对胰岛分离结果有重要影响。1mg/ml胶原酶P在37℃静止消化45分钟条件下,胰岛分离效果最佳,效果较其他酶浓度和消化时间条件下好(P<0.05)。体重350g的大鼠的胰岛收获量778.33±80.21IEQ/胰腺,而体重250g的大鼠的胰岛收获量655.00±56.56 IEQ/胰腺(P<0.05)。优化条件下分离的胰岛其纯度>90%,胰岛细胞活率>90%,低糖(2.8mmol/L)、高糖(16.7mmol/L)刺激胰岛素释放分别为(5.40±1.75)mIU/L/30IEQ,(12.27±2.55)mIU/L/30IEQ(P<0.05),刺激指数为2.33±0.29。结论:胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重影响胰岛分离结果,优化分离条件可改善大鼠胰岛分离结果。 展开更多
关键词 大鼠 胰岛 分离 纯化
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增龄对大鼠胰岛β细胞功能的影响 被引量:6
14
作者 谷昭艳 杜英臻 +4 位作者 李春霖 刘瑜 马丽超 龚燕平 田慧 《中华老年多器官疾病杂志》 2009年第2期166-169,共4页
目的观察不同月龄大鼠的糖代谢指标变化,了解在基础和糖刺激下增龄对大鼠胰岛β细胞功能的影响。方法以4月龄(青年组,n=15)、14月龄(中年组,n=15)和24月龄(老年组,n=15)健康雄性Wistar大鼠为研究对象,进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰... 目的观察不同月龄大鼠的糖代谢指标变化,了解在基础和糖刺激下增龄对大鼠胰岛β细胞功能的影响。方法以4月龄(青年组,n=15)、14月龄(中年组,n=15)和24月龄(老年组,n=15)健康雄性Wistar大鼠为研究对象,进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰岛素释放试验(IRT),比较三组间基础血糖和胰岛素水平的差异,计算糖负荷后胰岛素增值与血糖增值的比值(ΔI10/ΔG10),120min葡萄糖、胰岛素曲线下面积(AUCg,AUCi),葡萄糖与胰岛素曲线下面积比值(AUCi/g),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)等,以分析各组间胰岛功能的差异。结果随着月龄的增长,空腹血糖有升高的趋势,但未达到统计学差异。OGTT后老年组大鼠表现为血糖达峰时间延长,血糖峰值增加,OGTT2h血糖及AUCg增加,即老年组大鼠出现糖耐量异常状态,主要表现为餐后高血糖。青年组、中年组和老年组大鼠空腹胰岛素水平分别为(0.59±0.14)、(1.60±0.15)、(2.37±0.04)μg/L(两两相比均P<0.01);IRT中,老年组大鼠胰岛素达峰时间延迟,ΔI10/ΔG10降低,AUCi增加(P<0.05)。使用稳态模型评估,HOMA-β在青年、中年和老年组中呈递增趋势,但未达到统计学差异;而HOMA-IR在青年、中年和老年组分别为3.09±0.80、8.34±0.72、13.14±1.59(两两相比均P<0.01)。结论正常老龄大鼠存在一定的胰岛素抵抗和代偿性胰岛素分泌增加,但由于胰岛素分泌的早期时相受损,仍然出现糖负荷后血糖增高状态。 展开更多
关键词 大鼠 增龄 胰岛Β细胞 胰岛素
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原代分离的大鼠胰岛细胞对葡萄糖刺激胰岛素分泌的反应性研究 被引量:3
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作者 谢晓雁 王晓 +3 位作者 顾燕云 李纪平 李果 罗敏 《放射免疫学杂志》 CAS 2005年第5期356-359,共4页
目的:研究原代分离的大鼠胰岛对葡萄糖刺激的胰岛素分泌反应性。方法:胶原酶原位灌注法分离大鼠胰岛,在含0.5%BSA、5.5或11.1mmol/L葡萄糖的培养基中培养不同时间后,用含0.2%BSA、3.3mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液预培养胰岛30min,分别换入... 目的:研究原代分离的大鼠胰岛对葡萄糖刺激的胰岛素分泌反应性。方法:胶原酶原位灌注法分离大鼠胰岛,在含0.5%BSA、5.5或11.1mmol/L葡萄糖的培养基中培养不同时间后,用含0.2%BSA、3.3mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液预培养胰岛30min,分别换入含不同浓度葡萄糖KRB缓冲液,培养1h,收集上清,RIA法测定胰岛素浓度。结果:大鼠胰岛过夜培养后,在基础(3.3mmol/L)和高浓度(16.7mmol/L)葡萄糖条件下胰岛素分泌量分别为(12.4±3.2)和(45.2±4.2)μU/ml/10islets/h;5.5mmol/L和11.1mmol/L葡萄糖浓度下培养12h和20h后,胰岛对葡萄糖的反应性均明显高于16.7mmol/L和22.5mmol/L葡萄糖组(P<0.05);体外培养5d后,对高糖的反应性为(4.28±0.67)倍。结论:原代分离的大鼠胰岛可在(1~5)d内保持对葡萄糖的反应性。 展开更多
关键词 分离的大鼠胰岛 胰岛素 分泌反应性 胰岛素分泌量 葡萄糖浓度 原代分离 反应性 大鼠 胰岛细胞 不同浓度 培养基 原位灌注法
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丹蛭降糖胶囊联合运动对糖尿病大鼠胰腺氧化应激及胰岛功能的影响 被引量:22
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作者 吴元洁 方朝晖 +4 位作者 郑书国 吴元波 吕明安 王正 范爱华 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1531-1534,共4页
目的探讨运动与中药对糖尿病大鼠胰岛β细胞功能指数(isletβ-cell function index,HOMA-%β)、血糖及氧化应激状态的影响。方法 Wistar雄性大鼠60只,用小剂量链脲佐菌素加高脂饲料的方法建立糖尿病大鼠模型,观察运动、中药丹蛭降糖胶... 目的探讨运动与中药对糖尿病大鼠胰岛β细胞功能指数(isletβ-cell function index,HOMA-%β)、血糖及氧化应激状态的影响。方法 Wistar雄性大鼠60只,用小剂量链脲佐菌素加高脂饲料的方法建立糖尿病大鼠模型,观察运动、中药丹蛭降糖胶囊及两者联用对糖尿病大鼠空腹血糖(FBG)、空腹血清胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、胰腺匀浆中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响,并计算HOMA-%β,用多因素逐步回归分析探讨影响HOMA-%β的主要因素。结果与模型组比较,单纯运动或中药干预后,大鼠FBG、TG、TC、胰腺MDA均明显降低(P<0.05,P<0.01),HOMA-%β明显升高(P<0.01),运动组胰腺GSH-Px活性明显升高(P<0.01);运动与中药联用对FBG、TG、HOMA-%β、胰腺SOD、GSH-Px改变有协同作用(P<0.05)。FBG与胰腺SOD、GSH-Px呈显著负相关且有线性回归关系,HOMA-%β与FBG、TG、TC、胰腺MDA水平负相关,与胰腺SOD、GSH-Px水平正相关,且与FBG有线性回归关系。结论运动及丹蛭降糖胶囊可发挥协同作用,能明显改善糖脂代谢、提高胰腺抗氧化水平,从而减轻胰岛β细胞损伤。 展开更多
关键词 运动 丹蛭降糖胶囊 糖尿病大鼠 氧化应激 胰岛β细胞功能指数
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高产的大鼠胰岛提取法 被引量:2
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作者 刘杰 江红 +3 位作者 孔庆学 李洪波 吴靖芳 孙诚谊 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期462-465,共4页
目的探寻经济、高产的大鼠胰岛分离纯化方法。方法Wistar大鼠分别以质量浓度为0.1%、0.05%及0.03%的!型胶原酶胆管灌注,灌注量6~8mL,经过静态及震荡2步消化法后,用Dextran不连续密度梯度法纯化胰岛。通过DTZ和AO/PI染色及葡萄糖刺激试... 目的探寻经济、高产的大鼠胰岛分离纯化方法。方法Wistar大鼠分别以质量浓度为0.1%、0.05%及0.03%的!型胶原酶胆管灌注,灌注量6~8mL,经过静态及震荡2步消化法后,用Dextran不连续密度梯度法纯化胰岛。通过DTZ和AO/PI染色及葡萄糖刺激试验对分离纯化胰岛进行体外检测;通过体内肾被膜下移植检测其体内活性。结果3种胶原酶浓度平均胰岛收获量分别为(835±183)、(1243±339)及(711±103)个/只,通过体内外检测表明以0.1%、0.05%胶原酶分离纯化胰岛功能良好,0.05%收获量最大,0.05%和0.1%与0.03%之间比较P<0.05。结论以0.05%的胶元酶V6~8mL胆管灌注消化的方法是一种收获量较大,同时所提取胰岛数量多、活性良好,酶耗量较低的胰岛提取方法。 展开更多
关键词 大鼠胰岛 分离 胆管灌注消化法
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糖化终末产物刺激胰岛中NADPH氧化酶水平升高 被引量:3
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作者 林宁 李晓永 +1 位作者 张洪梅 苏青 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期875-878,共4页
目的:研究体外糖化终末产物(AGEs)对大鼠胰岛NADPH氧化酶表达的影响。方法:分离大鼠胰岛,用AGEs刺激胰岛细胞2、12、24、48 h,采用实时荧光定量PCR检测Nox2表达水平的变化,化学发光法检测NADPH氧化酶活力。结果:AGEs作用12、24 h后,Nox2... 目的:研究体外糖化终末产物(AGEs)对大鼠胰岛NADPH氧化酶表达的影响。方法:分离大鼠胰岛,用AGEs刺激胰岛细胞2、12、24、48 h,采用实时荧光定量PCR检测Nox2表达水平的变化,化学发光法检测NADPH氧化酶活力。结果:AGEs作用12、24 h后,Nox2 mRNA水平较对照组分别上升1.75、2.31倍(P<0.05),随着AGEs作用时间的延长,NADPH氧化酶活力逐渐升高,24 h时达最高,后有所下降,但仍高于对照组。结论:糖化终末产物作用于胰岛后导致NADPH氧化酶活性增加,进而引起胰岛损害。 展开更多
关键词 糖化终末产物 NADPH氧化酶 氧化应激 原代胰岛
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大鼠胰岛的分离纯化方法改进与功能鉴定 被引量:14
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作者 袁宇 丛聪 +7 位作者 张静 魏玲玲 李胜富 金熙 麦刚 李幼平 程惊秋 陆燕蓉 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期75-79,共5页
目的通过改进胰腺消化和分离的技术条件,提高成年大鼠胰岛分离纯化产率和质量。方法用胶原酶Ⅺ液灌注消化成年SD大鼠胰腺,对胰岛分离纯化方法加以改进:以4种比重的Euro-Ficoll(F1:D=1.132,F2:D=1.108,F4:D=1.069)Hank’s(F5:D=1.023)不... 目的通过改进胰腺消化和分离的技术条件,提高成年大鼠胰岛分离纯化产率和质量。方法用胶原酶Ⅺ液灌注消化成年SD大鼠胰腺,对胰岛分离纯化方法加以改进:以4种比重的Euro-Ficoll(F1:D=1.132,F2:D=1.108,F4:D=1.069)Hank’s(F5:D=1.023)不连续密度梯度离心,以离心半径15cm,2000r/min于4℃缓慢升降离心20min,收集位于F1和F2界面的胰岛。双硫腙特异染色法鉴定胰岛纯度;二醋酸酯荧光素/碘化丙啶染色法计算胰岛成活率;放射免疫分析法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌量,计算刺激指数。将胰岛当量(islets equivalent quantity,IEQ)为1000的胰岛移植于同品系糖尿病大鼠肾包膜下,9d内隔日观察动物血糖的变化,评价胰岛功能。比较分离条件优化前后收获胰岛的产率和质量。结果改进纯化方法后每只大鼠胰岛收获量为(920±122)IEQ,胰岛纯度>90%,胰岛细胞成活率为91%±2%。胰岛细胞功能良好,在低糖和高糖刺激后培养液中胰岛素浓度分别为(18.25±0.32)mU/L和(36.70±3.57)mU/L,刺激指数为2.01±0.15。1000 IEQ胰岛移植于糖尿病大鼠肾包膜下,观察期内可维持动物血糖水平正常。结论改进后的胶原酶灌注消化和不连续梯度离心方法提高了胰岛的产率,保证了胰岛的高纯度及高成活率。 展开更多
关键词 胰岛 分离 纯化 胰岛素 大鼠
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Dextran不连续密度梯度离心法纯化大鼠胰岛 被引量:5
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作者 马海霞 江红 +5 位作者 高秀峰 段翠密 郭希民 董宝军 董灵芝 王常勇 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第4期212-214,F0006,共4页
目的评价Dextran不连续密度梯度离心法纯化大鼠胰岛的效果。方法采用V型胶原酶分离出大鼠胰岛,并应用Dextran不连续密度梯度离心法纯化胰岛。在体视镜下计数双硫腙染色的胰岛并测量染色胰岛的直径。放免法测定胰岛素含量。AO-PI双染色... 目的评价Dextran不连续密度梯度离心法纯化大鼠胰岛的效果。方法采用V型胶原酶分离出大鼠胰岛,并应用Dextran不连续密度梯度离心法纯化胰岛。在体视镜下计数双硫腙染色的胰岛并测量染色胰岛的直径。放免法测定胰岛素含量。AO-PI双染色确定胰岛的活力。结果平均每只成年Wistar大鼠的胰腺可分离950±24个胰岛,经Dextran纯化后平均每只成年Wistar大鼠的胰腺可获得784±10个胰岛,纯度可达到90%以上。结论采用Dextran不连续密度梯度纯化得到的Wistar大鼠胰岛结构完整、功能良好。 展开更多
关键词 胰岛 分离和纯化 糖尿病
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