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Detection of Ratoon Stunting Disease in Virus-free Seedcane via Real-time Fluorescence Quantitative PCR 被引量:1
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作者 Ming DAN Song LI +3 位作者 Kunxing YU Limin LIU Hongjian LIU Manman LU 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2012年第5期24-26,共3页
This study was to develop the real-time fluorescence quantitative PCR technique for detecting the ratoon stunting disease (RSD) in virus-free seedcane seedlings. Healthy tissue culture seedlings were obtained from s... This study was to develop the real-time fluorescence quantitative PCR technique for detecting the ratoon stunting disease (RSD) in virus-free seedcane seedlings. Healthy tissue culture seedlings were obtained from six plants of sugarcane ROC22, which had been confirmed RSD-positive by detecting the sugarcane juice, by employing the sugarcane seedlings production protocol. Real-time fluorescence quantitative PCR was used to detect RSD pathogens in tissue culture sam- pies. The results showed that target fragment of RSD pathogens was not found in all 10 samples in real-time fluorescence quantitative PCR, with the Ct values of 37 - 39. The healthy tissue culture sugarcane seedlings do not carry RSD pathogens, indicating that adopting healthy seedcane seedlings production technique could thoroughly get rid of RSD pathogens. 展开更多
关键词 SUGARCANE Virus-free seedcane ratoon stunting disease Real-time fluorescence quantitative PCR
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Molecular Detection of Sugarcane Ratoon Stunting Disease in Hainan Sugarcane-growing Areas
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作者 Shen Linbo Xiong Guoru +6 位作者 Feng Xiaoyan Wang Wenzhi Feng Cuilian Zhao Tingting Wang Jungang Wu Nannan Zhang Shuzhen 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2020年第1期6-9,共4页
[Objective]The paper was to clarify the occurrence of sugarcane ratoon stunting disease(RSD)in Hainan sugarcane-growing areas.[Method]In 2019,270 samples of sugarcane leaves were collected from six main sugarcane-grow... [Objective]The paper was to clarify the occurrence of sugarcane ratoon stunting disease(RSD)in Hainan sugarcane-growing areas.[Method]In 2019,270 samples of sugarcane leaves were collected from six main sugarcane-growing areas in Hainan Province,and RSD was detected by PCR assay with specific primers.[Result]RSD was detected out in 41 out of 270 sugarcane samples,with an average detection rate of15.19%.The detection rates of RSD were different in six sugarcane-growing areas;the detection rate of RSD in Danzhou sugarcane-growing area was the highest of 22.00%;the detection rate of RSD in Lingao sugarcane-growing area was the lowest of 9.26%.RSD was detected out in 8 out of10 main sugarcane cultivars,among which Xintaitang 22 suffered the heaviest damage,with the positive detection rate of 45.83%;RSD had not been detected out in Zhongtang 1 and Zhongtang 2,while the positive detection rates of RSD in the remaining seven sugarcane cultivars were10.00%-31.25%.[Conclusion]RSD commonly occurs in Hainan sugarcane-growing areas.The research results provide a basis for scientific prevention and control of RSD and promotion and application of healthy virus-free sugarcane seedlings. 展开更多
关键词 SUGARCANE SUGARCANE ratoon stunting disease(rsd) Molecular DETECTION DETECTION rate HAINAN
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Detection of Ratoon Stunting Disease in Virus-free Seedcane of Saccharum officinarum by PCR
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作者 淡明 李松 +3 位作者 余坤兴 刘丽敏 刘红坚 戴友铭 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2010年第11期111-113,共3页
[Objective]The study was carried out for providing good method to detect ratoon stunting disease(RSD)in virus-free seedcane of Saccharum officinarum.[Method]PCR method was used for the detection of RSD in virus-free... [Objective]The study was carried out for providing good method to detect ratoon stunting disease(RSD)in virus-free seedcane of Saccharum officinarum.[Method]PCR method was used for the detection of RSD in virus-free seedcane of sugarcane.[Result]During the different growth stages of healthy virus-free seedling including proliferation stage,rooting stage,sand culture stage and temporary planting stage,the RSD detection results were negative.PCR detection sensitivity in the present study showed that PCR could detect RSD pathogen in the solution with bacterium concentration 10-3.[Conclusion]PCR method showed a good specificity and higher sensitivity,so it was suitable for the batch detection in the production of healthy virus-free seedlings of sugarcane. 展开更多
关键词 SUGARCANE Virus-free seedcane ratoon stunting disease PCR
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甘蔗宿根矮化病(RSD)温水脱菌研究 被引量:22
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作者 李文凤 黄应昆 +5 位作者 范源洪 李俊 卢文洁 吴正焜 罗志明 杨洪昌 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期343-347,共5页
为寻求甘蔗宿根矮化病(RSD)的有效防控技术和方法,本研究根据甘蔗RSD的传播危害特点,选择五大主栽品种,采用温水处理设备对带菌蔗种进行温水(50±0.2℃)脱菌处理2h,分析研究温水处理对甘蔗RSD的脱菌效果。结果表明:温水(... 为寻求甘蔗宿根矮化病(RSD)的有效防控技术和方法,本研究根据甘蔗RSD的传播危害特点,选择五大主栽品种,采用温水处理设备对带菌蔗种进行温水(50±0.2℃)脱菌处理2h,分析研究温水处理对甘蔗RSD的脱菌效果。结果表明:温水(50±0.2℃)脱菌处理2h能有效去除甘蔗RSD,去除率为90%以上。与常规种苗相比,脱菌种苗在整个生长期中都表现出明显的生长优势,早生快发、伸长拔节早、长相健壮。粤糖93/159、ROC25号、ROC10号、闽糖69/421、桂糖17号5大主栽品种经温水脱菌处理均具有显著的增产增糖效果:新植增产甘蔗5.01~49.83t/hm^2,增幅5.97%-91.31%;甘蔗蔗糖分提高0.07%~0.86%(绝对值)。可见,种植温水脱菌种苗是防治甘蔗RSD最经济有效的措施,在生产上应加快推广,使之制度化,可大幅度提高甘蔗的产量和糖分,延长宿根年限,从而显著提高甘蔗生产的经济效益。 展开更多
关键词 甘蔗宿根矮化病(rsd) 温水处理 脱菌种苗
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快速简单组织定位甘蔗RSD致病菌Lxx的原位PCR方法 被引量:1
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作者 胡敏 汪文华 +2 位作者 何恩铭 孟红岩 郭莺 《华侨大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第2期221-226,共6页
提出对甘蔗冰冻切片中甘蔗宿根矮化病(RSD)致病菌Lxx(Leisonia xyli subsp. xyli)进行定位的原位多聚酶链式反应(in situ PCR)方法,为Lxx与甘蔗互作致病机理研究提供有效的实验手段.以染RSD甘蔗品种Badila及其健康株为材料取样制作冰冻... 提出对甘蔗冰冻切片中甘蔗宿根矮化病(RSD)致病菌Lxx(Leisonia xyli subsp. xyli)进行定位的原位多聚酶链式反应(in situ PCR)方法,为Lxx与甘蔗互作致病机理研究提供有效的实验手段.以染RSD甘蔗品种Badila及其健康株为材料取样制作冰冻切片,切片经溶菌酶消化后,利用病原菌Lxx 16S^23S rDNA内部转录间隔区(ITS)特异性引物进行原位PCR扩增,并对随机参入扩增片段的与地高辛-11-dUTP进行免疫组化,建立甘蔗样品冰冻切片中直接原位PCR方法.结果表明:直接原位PCR对RSD蔗株茎样品切片显色为阳性,阳性信号出现于甘蔗茎部的木质部、韧皮部,而健康蔗株茎样品无信号,方法特异性较好. 展开更多
关键词 甘蔗宿根矮化病 革兰氏阳性苛养致病菌 冰冻切片 原位多聚酶链式反应
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甘蔗品种RSD感病性检测及RSD病原菌分离培养 被引量:2
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作者 王丽 张剑亮 +1 位作者 王继华 曹干 《广东农业科学》 CAS 2015年第9期62-67,共6页
为了解不同甘蔗品种的甘蔗宿根矮化病(RSD)感病情况,采用PCR检测方法,对13个甘蔗品种进行RSD感病率检测。结果显示,在所检测的13个甘蔗品种中,不同品种感病率有所差异,其中所检测的2个CP系列感病率最低。同时,利用MSC培养基从感染RSD的... 为了解不同甘蔗品种的甘蔗宿根矮化病(RSD)感病情况,采用PCR检测方法,对13个甘蔗品种进行RSD感病率检测。结果显示,在所检测的13个甘蔗品种中,不同品种感病率有所差异,其中所检测的2个CP系列感病率最低。同时,利用MSC培养基从感染RSD的甘蔗蔗汁中分离培养到一种生长缓慢、菌落颜色为乳白色的杆状细菌。根据菌落形态、显微镜观察,以及特异引物和16S r DNA扩增多种方法鉴定,最终确认所分离到的杆状细菌即为甘蔗宿根矮化病病原菌(Leifsonia xyli subsp.xyli)。 展开更多
关键词 甘蔗宿根矮化病(rsd) 感病率 分离培养
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甘蔗核心种质花叶病和宿根矮化病自然抗病性调查与分子检测 被引量:3
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作者 王晓燕 马永德 +5 位作者 单红丽 李婕 张荣跃 李银煳 李文凤 黄应昆 《中国糖料》 2023年第4期47-56,共10页
抗病种质资源的发掘利用是抗病育种的基础和关键,筛选抗病种质对选育抗病品种具有重要意义。为明确国家甘蔗种质资源圃保存的核心种质花叶病和宿根矮化病病情及其自然抗病性,本研究于2021年,对国家甘蔗种质资源圃保存的105份甘蔗核心种... 抗病种质资源的发掘利用是抗病育种的基础和关键,筛选抗病种质对选育抗病品种具有重要意义。为明确国家甘蔗种质资源圃保存的核心种质花叶病和宿根矮化病病情及其自然抗病性,本研究于2021年,对国家甘蔗种质资源圃保存的105份甘蔗核心种质进行花叶病和宿根矮化病田间自然发病调查及其病原检测与抗性评价。结果表明,105份核心种质中,花叶病1级高抗到3级中抗的有75份,占71.4%;105份核心种质样品检测到SCSMV、SrMV两种病毒,所有样品均未检测出SCMV病毒;38份核心种质受SCSMV单独侵染检测出SCSMV、检出率为36.2%,15份核心种质受SrMV单独侵染检测出SrMV、检出率为14.3%,20份核心种质受SCSMV和SrMV复合侵染检测出SCSMV和SrMV、检出率为19.0%;105份核心种质中88份感RSD呈阳性、阳性检出率为83.8%,17份未感RSD呈阴性、占总检测数的16.2%。综合分析结果显示,21份核心种质对SCSMV和SrMV 2种病毒均表现为高抗,占20.0%;27份核心种质双抗SCSMV和SrMV 2种病毒,占25.7%;17份核心种质抗RSD,占16.2%;其中11份核心种质多抗SCSMV、SrMV和RSD,占10.5%。研究结果明确了105份甘蔗核心种质花叶病和宿根矮化病田间病情及其病原类群,筛选出11份多抗SCSMV、SrMV和RSD核心种质,为深入开展甘蔗抗病育种提供了抗病基因源和参考依据。 展开更多
关键词 甘蔗 核心种质 花叶病和宿根矮化病 病原检测 自然抗病性
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我国华南蔗区甘蔗宿根矮化病的PCR分子检测 被引量:1
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作者 尉耀升 许珲镁 +4 位作者 呼忠婷 刘婷 刘玮婷 高三基 傅华英 《中国糖料》 2023年第2期61-67,共7页
宿根矮化病Ratoon stunting diseases(RSD)是由木质部限制性赖氏细菌木质部变种Leifsonia xyli subsp.xyli(Lxx)引起的一种主要甘蔗细菌性病害之一,在世界各甘蔗产区普遍发生。为明确我国主要蔗区RSD发生率和收获方式对RSD发生率的影响... 宿根矮化病Ratoon stunting diseases(RSD)是由木质部限制性赖氏细菌木质部变种Leifsonia xyli subsp.xyli(Lxx)引起的一种主要甘蔗细菌性病害之一,在世界各甘蔗产区普遍发生。为明确我国主要蔗区RSD发生率和收获方式对RSD发生率的影响,本文从广东和福建的罹病甘蔗蔗茎样品成功分离获得病原细菌,基于细菌16S核糖体和16-23S核糖体间隔序列(ITS)证实为Lxx。随后,从广西、广东和福建主要蔗区采集甘蔗品种蔗茎样品1446份,以靶标16-23S核糖体ITS区域的Lxx-F/Lxx-R为检测引物,开展RSD分子检测。结果表明,福建蔗区RSD检出率较低,为0~9.4%,广西、广东蔗区RSD检出率分别为20.4~85.2%和82.1%,尤其是广西龙州县和广东遂溪县蔗区,RSD检出率高达80%以上。在机械收获和人工砍刀收获方式下的宿根蔗蔗茎样品RSD检出率没有显著差异。本研究结果为我国蔗区RSD的科学防控提供依据。 展开更多
关键词 甘蔗 宿根矮化病 木质部限制性赖氏细菌木质部变种 PCR检测 检出率
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云南耿马甘蔗宿根矮化病的发生分布和病原分子检测 被引量:2
9
作者 马永德 王晓燕 +4 位作者 李银煳 李婕 张荣跃 单红丽 黄应昆 《甘蔗糖业》 2023年第2期10-15,共6页
为摸清云南耿马甘蔗宿根矮化病的发生分布,为甘蔗温水脱毒健康种苗生产和推广应用提供科学依据,本研究对云南耿马不同甘蔗品种植期的80个样本进行宿根矮化病菌分子检测。结果表明:61个样本为阳性,阳性检出率76.25%,其中强阳性样本34个,... 为摸清云南耿马甘蔗宿根矮化病的发生分布,为甘蔗温水脱毒健康种苗生产和推广应用提供科学依据,本研究对云南耿马不同甘蔗品种植期的80个样本进行宿根矮化病菌分子检测。结果表明:61个样本为阳性,阳性检出率76.25%,其中强阳性样本34个,占42.50%;10个主栽或主推品种均发病,发病率在37.50%~100%之间,以粤糖93-159、粤糖83-88、云瑞07-1433、盈育91-59、柳城05-136发病最重,发病率为77.27%~100%,强阳性率为44.44%~66.67%,其次是新台糖22号、云瑞06-189、云瑞10-328、云蔗05-51和云蔗08-1609,发病率为37.50%~100%,强阳性率为0%~14.29%;植期上1~5年均不同程度发病,但无明显的规律性差异。本研究检测表明甘蔗宿根矮化病已在云南耿马蔗区普遍发生且危害严重,急需生产和推广种植甘蔗温水脱毒健康种苗,以促进蔗糖产业的可持续高质量发展。 展开更多
关键词 云南耿马 甘蔗宿根矮化病 发生分布 分子检测
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云南澜沧不同甘蔗品种植期宿根矮化病菌检测分析
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作者 李茅苗 鲁宾 +4 位作者 李婕 王晓燕 王长秘 李文凤 黄应昆 《甘蔗糖业》 2023年第1期7-13,共7页
甘蔗宿根矮化病(Ratoon Stunting Disease,RSD)是严重影响蔗糖产业高质量发展的一种种传甘蔗病害。摸清不同甘蔗品种植期RSD的感染情况,是科学推广温水脱毒种苗,有效防控RSD的关键。本文对云南澜沧蔗区RSD的发生和分布进行了调查和田间... 甘蔗宿根矮化病(Ratoon Stunting Disease,RSD)是严重影响蔗糖产业高质量发展的一种种传甘蔗病害。摸清不同甘蔗品种植期RSD的感染情况,是科学推广温水脱毒种苗,有效防控RSD的关键。本文对云南澜沧蔗区RSD的发生和分布进行了调查和田间采样,采用PCR法,对田间采集的124个样本进行RSD检测。结果表明:73个样本为阳性,阳性检出率58.87%,其中强阳性样品42个,占33.87%;15个主栽和主推品种均发病,发病率在28.57%~100%之间,以云引58号、粤糖82-882和德蔗09-84发病最重,发病率和强阳性率均高达100%,其次是粤糖93-159和粤糖00-236,发病率分别为90.00%和87.5%;植期上1~6年均不同程度发病,但无明显的规律性差异。本研究检测明确了澜沧蔗区不同品种植期RSD发生状况,为应用推广温水脱毒种苗、有效防控RSD提供了科学依据。 展开更多
关键词 云南澜沧 甘蔗宿根矮化病 发生 检测
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甘蔗宿根矮化病病原菌致病因子pglA基因的序列分析与原核表达
11
作者 梁永检 宋修鹏 +5 位作者 颜梅新 王泽平 黄冬梅 黎海涛 韦振飞 张小秋 《农业研究与应用》 2023年第5期1-7,共7页
多聚半乳糖醛酸内切酶(endo-PG)是植物与微生物互作中极其重要的细胞壁降解酶,是病原菌定殖寄主与产生致病性的必需因子,革兰氏阴性菌Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx)是甘蔗宿根矮化病的致病菌,pglA是Lxx的关键致病因子。为了揭示pgl... 多聚半乳糖醛酸内切酶(endo-PG)是植物与微生物互作中极其重要的细胞壁降解酶,是病原菌定殖寄主与产生致病性的必需因子,革兰氏阴性菌Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx)是甘蔗宿根矮化病的致病菌,pglA是Lxx的关键致病因子。为了揭示pglA基因的功能,本研究采用重叠延伸PCR的方法获得了pglA基因的开放阅读框(ORF),ORF长1491 bp的,编码496个氨基酸,序列保守结构域包含Gly_hydro_28 (Polygalacturonase)与Rho超家族,与Lxx CTCB07、Lxc DSM46306归为一类,相似性达100%。氨基酸序列分析显示,pglA蛋白属于疏水性蛋白,包含信号肽和跨膜区。在大肠杆菌中表达纯化获得pglA蛋白,以包涵体的形式存在于菌体中。研究结果为进一步进行Lxx的致病机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 甘蔗 宿根矮化病 pglA基因 克隆
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甘蔗宿根矮化病研究进展 被引量:7
12
作者 徐景升 许莉萍 +2 位作者 阙友雄 高三基 陈如凯 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期184-188,共5页
综述了近年来甘蔗宿根矮化病的检测、传播、防治及其致病菌Leifsoniaxyli subsp.xyli的分类归属和致病机理等方面的研究进展,并探讨了研究策略。
关键词 甘蔗 rsd(ratoon stunthlg disease) Leifsonia xyli subsp.xyli
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甘蔗花叶病和宿根矮化病多重PCR检测方法的建立 被引量:19
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作者 张显勇 蔡文伟 +2 位作者 杨本鹏 张树珍 王业桥 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期4321-4327,共7页
【目的】建立能同时检测甘蔗花叶病(sugarcane mosaic virus,SCMV)和宿根矮化病(ratoon stunting disease,RSD)的多重PCR检测方法。【方法】以病株带鞘叶组织总核酸反转录物为模板,根据中国甘蔗花叶病的主要致病病原高梁花叶病毒SrMV和... 【目的】建立能同时检测甘蔗花叶病(sugarcane mosaic virus,SCMV)和宿根矮化病(ratoon stunting disease,RSD)的多重PCR检测方法。【方法】以病株带鞘叶组织总核酸反转录物为模板,根据中国甘蔗花叶病的主要致病病原高梁花叶病毒SrMV和甘蔗花叶病毒中国大陆优势株系SCMV-A,结合B、D、E和SC株系的外壳蛋白核苷酸序列的保守区设计PCR引物对和已有的检测甘蔗宿根矮化病病原木质部赖氏杆菌木质部亚种(Leifsonia xyli subsp.Xyli,Lxx)的PCR引物对,在SCMV RT-PCR和RSD单一PCR体系的基础上,建立并优化可同时检测SCMV和RSD的多重PCR检测方法。【结果】此检测方法可特异地从感染SCMV和RSD的样品中扩增出SCMV(400 bp)和RSD(265 bp)2个条带,扩增产物测序结果表明,SCMV扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为81%~99%,RSD扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为91%~99%。【结论】应用此检测方法可稳定、特异地检测出蔗株中是否有导致甘蔗花叶病和宿根矮化病的单一或混合的病原。 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 甘蔗宿根矮化病 RT-PCR 病原检测 多重PCR
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宿根矮化病菌诱导甘蔗差异表达基因的cDNA-SCoT分析 被引量:20
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作者 陈明辉 张保青 +4 位作者 宋修鹏 陈虎 杨丽涛 李杨瑞 陈保善 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1119-1126,共8页
宿根矮化病是危害严重的世界性甘蔗主要病害之一,为了探究甘蔗在该病胁迫下的抗病分子机制,本研究以甘蔗品种新台糖22健康植株为材料,利用含有宿根矮化病病原菌的蔗汁诱导其抗性,分别在接种后2、4、6、8和10d取样,构建宿根矮化病... 宿根矮化病是危害严重的世界性甘蔗主要病害之一,为了探究甘蔗在该病胁迫下的抗病分子机制,本研究以甘蔗品种新台糖22健康植株为材料,利用含有宿根矮化病病原菌的蔗汁诱导其抗性,分别在接种后2、4、6、8和10d取样,构建宿根矮化病侵染处理与对照的RNA混合池,利用cDNA-SCoT法进行差异显示研究。结果表明,80条SCoT引物扩增出500多条带,长度在100~1800bp之间。从中筛选出30个差异明显的条带,测序后序列拼接,获得22条高质量的EST序列。生物信息学分析显示,对甘蔗宿根矮化病的差异基因主要涉及能量代谢、防卫反应、信号转导、蛋白质类代谢等方面。进一步基因功能分析显示,油菜素内酯合成蛋白、NBS-LRR类抗性蛋白、茉莉酸诱导蛋白、α-微管蛋白、ABA胁迫成熟蛋白、富含脯氨酸蛋白、翻译起始因子eif-2b α亚族等可能参与了甘蔗宿根矮化病病原菌互作的过程。 展开更多
关键词 甘蔗 宿根矮化病 cDNA-SCoT 差异基因
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宿根矮化病菌对甘蔗生长和内源激素的影响 被引量:7
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作者 陈明辉 黄杏 +3 位作者 谢晓娜 杨丽涛 李杨瑞 陈保善 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期57-61,共5页
甘蔗宿根矮化病(ratoon stunting disease,RSD)是由Leifsonia xyli subsp.xyli引起的病害。为研究该病对甘蔗的生长和内源激素的影响,选择2个甘蔗品种新台糖22号(ROC22)和果蔗(Badila),采用桶栽种植分别进行3个处理:感染RSD病菌蔗株进... 甘蔗宿根矮化病(ratoon stunting disease,RSD)是由Leifsonia xyli subsp.xyli引起的病害。为研究该病对甘蔗的生长和内源激素的影响,选择2个甘蔗品种新台糖22号(ROC22)和果蔗(Badila),采用桶栽种植分别进行3个处理:感染RSD病菌蔗株进行52℃温汤脱菌处理30 min、感染RSD病菌蔗株、健康蔗株(对照),在出苗后90、120、150、180 d测定株高和内源激素的含量,并利用PCR检测确定感病和健康蔗株。结果表明:感染RSD病菌蔗株的株高显著低于对照和温汤脱菌处理;感染RSD病菌处理植株的赤霉素(GA3)、生长素(IAA)含量明显低于对照和温汤脱菌处理,而脱落酸(ABA)含量则相反,感染RSD病菌处理的ABA含量明显高于对照和温汤脱菌处理;对照和温汤脱菌处理的株高和激素含量差异不显著。 展开更多
关键词 甘蔗 宿根矮化病 内源激素
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甘蔗种质资源抗宿根矮化病特性鉴定 被引量:4
16
作者 张妍 范业赓 +4 位作者 莫璋红 吴凯朝 李鸣 秦新民 梁俊 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1963-1967,共5页
【目的】筛选抗甘蔗宿根矮化病(RSD)种质资源材料,为选育抗RSD甘蔗品种提供优良抗原。【方法】采用浸蔗种的方法对6个系列100份甘蔗品种进行侵染,用建立的RSD-PCR检测方法进行检测,计算各甘蔗品种RSD发病率,并对甘蔗种质资源进行抗性评... 【目的】筛选抗甘蔗宿根矮化病(RSD)种质资源材料,为选育抗RSD甘蔗品种提供优良抗原。【方法】采用浸蔗种的方法对6个系列100份甘蔗品种进行侵染,用建立的RSD-PCR检测方法进行检测,计算各甘蔗品种RSD发病率,并对甘蔗种质资源进行抗性评价。【结果】100份甘蔗品种材料中,GT02/351、CP89/2134、ROC26、粤94/28、福农89/209、崖96/45等品种RSD发病率为0,表现为A级抗性;GT99/181、GT97/228、GT90/95等品种RSD发病率等于10%,表现为B级抗性;GT02/208、GT96/156、ROC22等品种表现为C级抗性;GT21、GT02/237、CP88/1762等品种表现为D级抗性。6个不同系列中,CP系列RSD平均发病率最低,为12.00%,抗性最强;粤糖系列RSD平均发病率最高,为28.57%,抗性较弱。【结论】GT02/351、CP89/2134、ROC26、粤94/28、福农89/209、崖96/45等甘蔗品种具有良好的抗性,具有推广应用价值;CP系列的抗性较强,可作为抗RSD的育种材料。 展开更多
关键词 甘蔗 种质资源 宿根矮化病 抗性评价
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应用DB-EIA技术快速检测甘蔗宿根矮化病研究 被引量:14
17
作者 沈万宽 邓海华 +1 位作者 周国辉 李奇伟 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期110-113,共4页
就甘蔗宿根矮化病DB-EIA检测技术、检测灵敏度、样品蔗汁保存方式及保存时间进行研究。结果表明DB-EIA检测甘蔗宿根矮化病具有操作简单、高效、重复性好、灵敏度高、对蔗汁新鲜度要求不高等优点。该方法检测灵敏度为1~1/10(稀释倍数);... 就甘蔗宿根矮化病DB-EIA检测技术、检测灵敏度、样品蔗汁保存方式及保存时间进行研究。结果表明DB-EIA检测甘蔗宿根矮化病具有操作简单、高效、重复性好、灵敏度高、对蔗汁新鲜度要求不高等优点。该方法检测灵敏度为1~1/10(稀释倍数);蔗汁保存于4℃或-20℃条件下3d,对检测结果无显著影响,-20℃条件下保存45d,大部分样品检测结果不受影响,少部分样品出现假阴性。 展开更多
关键词 甘蔗 宿根矮化病 DE—EIA
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甘蔗宿根矮化病PCR检测技术优化分析 被引量:13
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作者 周丹 谢晓娜 +2 位作者 陈明辉 杨丽涛 李杨瑞 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期616-620,共5页
【目的】在PCR的基本程序上,以甘蔗宿根矮化病菌Lxx16S~23S rDNA内部转录间隔区特异性引物,优化PCR反应条件,以建立稳定、快速、灵敏度高的甘蔗宿根矮化病PCR检测技术。【方法】以Lxx基因组DNA为模板,采用TaKaRa的Ex Taq Polymerase和2... 【目的】在PCR的基本程序上,以甘蔗宿根矮化病菌Lxx16S~23S rDNA内部转录间隔区特异性引物,优化PCR反应条件,以建立稳定、快速、灵敏度高的甘蔗宿根矮化病PCR检测技术。【方法】以Lxx基因组DNA为模板,采用TaKaRa的Ex Taq Polymerase和2×GCBufferⅡ,调整退火温度和引物浓度等主要因子,优化PCR反应体系;稀释Lxx基因组DNA模板的浓度,检测优化PCR的灵敏度;用优化的PCR对田间生长的甘蔗品种GT11叶片总DNA进行RSD测定。【结果】优化的PCR得到清晰特异的条带为Lxx16S~23S rDNA内部转录间隔区序列;能从稀释1000倍的Lxx基因组DNA(15.9pg/μL)中检测到Lxx,而常规的PCR只能从稀释100倍的Lxx基因组DNA(159pg/μL)中检测到Lxx,且出现假阴性,不稳定。对田间生长的甘蔗品种GT11叶片总DNA进行PCR检测,结果用优化后的PCR检测RSD感染率为66.7%,而常规的PCR检测RSD感染率为0。【结论】优化的PCR体系为:2×GCBufferⅡ12.5μL,Ex Taq DNA酶(5U/μL)0.2μL;dNTP(2.5mmol/L)1.5μL;Lxx1(10μmol/L)1.0μL,Lxx2(10μmol/L)1.0μL,DNA模板1.0μL,用ddH2O双蒸水补足至25.0μL。PCR反应程序为:95℃预变性10min,94℃15s,57℃15s,72℃30s,40个循环;72℃延伸10min。优化的PCR比常规PCR的灵敏度高、结果稳定、检测效率高,更适合于田间大批量样品快速检测。 展开更多
关键词 甘蔗 宿根矮化病 PCR检测 16S^23SrDNA 优化体系
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广东甘蔗宿根矮化病菌的分离培养及鉴定 被引量:5
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作者 陈健文 刘睿 +2 位作者 沈万宽 杨湛端 邓海华 《广东农业科学》 CAS CSCD 2008年第8期68-70,共3页
利用改良的SC培养基,从甘蔗蔗汁中分离培养到一种杆状细菌,根据菌落的形态特征,并结合血清学和PCR检测方法,确认所分离到的菌是甘蔗宿根矮化病的致病菌Leifsonia xyli subsp.xyli。该菌的分离培养在广东还是首次报道,这使分离高纯度的... 利用改良的SC培养基,从甘蔗蔗汁中分离培养到一种杆状细菌,根据菌落的形态特征,并结合血清学和PCR检测方法,确认所分离到的菌是甘蔗宿根矮化病的致病菌Leifsonia xyli subsp.xyli。该菌的分离培养在广东还是首次报道,这使分离高纯度的甘蔗宿根矮化病菌DNA成为可能,促进了该菌以DNA为基础的检测方法的发展,同时也为今后对该菌开展遗传多样性等研究奠定了基础。 展开更多
关键词 甘蔗宿根矮化病菌 分离培养 鉴定
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宿根矮化病菌侵染后甘蔗防御酶活性变化 被引量:5
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作者 谢晓娜 张小秋 +2 位作者 梁永检 杨丽涛 李杨瑞 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1551-1557,共7页
【目的】研究接种甘蔗宿根矮化病(Ratoonstuningdisease,RSD)菌后甘蔗防御酶活性的变化,为进一步探明甘蔗与RSD病菌的互作机制提供理论依据。【方法】以温汤脱毒后的甘蔗品种桂糖11号(GT11)为材料,设RSD菌液浸种为处理,ddH2O浸种为对照... 【目的】研究接种甘蔗宿根矮化病(Ratoonstuningdisease,RSD)菌后甘蔗防御酶活性的变化,为进一步探明甘蔗与RSD病菌的互作机制提供理论依据。【方法】以温汤脱毒后的甘蔗品种桂糖11号(GT11)为材料,设RSD菌液浸种为处理,ddH2O浸种为对照,测定甘蔗茎、叶不同时期超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)等5种防御酶活性变化。【结果】在RSD病菌胁迫下,甘蔗茎和叶片中相关防御酶活性均有所变化,茎中除APX活性一直高于对照外,其他酶活性均表现为在90d时低于对照,180d时高于对照;叶中除POD活性一直高于对照外,其他酶活性在90d时高于对照,180d时低于对照。【结论】在RSD病菌胁迫下,甘蔗茎和叶片中CAT、SOD、POD、APX及GR活性均有所提高,随着胁迫时间的延长在茎中出现逐渐高于对照的趋势,叶片则与此相反。 展开更多
关键词 甘蔗 宿根矮化病 防御酶活性
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