Runx 2在第三期牙本质形成过程中的分布及其意义

目的:研究Runx 2在牙髓炎症修复中的作用,探讨活髓保存的新途径。方法:建立大鼠第三期牙本质形成动物模型,用免疫组织化学染色方法研究Runx 2的表达变化及其意义。结果:Runx 2于牙髓损伤早期阶段表达于穿髓点下方细胞群;修复性牙本质形成初期于牙髓根尖部强表达,修复性牙本质形成中期表达减弱,而修复性牙本质形成末期表达为阴性。结论:Runx 2在牙髓损伤修复过程中的表达具有明显的时空特异性。

小鼠牙本质涎磷蛋白基因上游启动子的克隆和序列测定

目的 克隆并测定小鼠牙本质涎磷蛋白 (DSPP)基因上游启动子的序列。方法 提取成年Balb c鼠基因组DNA ,设计引物 ,通过聚合酶链反应 (PCR)得到小鼠牙本质涎磷蛋白基因上游启动子的序列。再将目的片段定向连入T载体 ,酶切鉴定并测序。结果 将小鼠牙本质涎磷蛋白基因上游启动子序列分 3段克隆 ,分别得到 997bp、10 0 4bp及 6 74bp大小的目的片段。连入载体后 ,酶切结果测定重组质粒成功。其测序结果与小鼠基因组染色体位置 5q2 1处的相应序列 99%一致。结论 成功克隆到牙本质涎磷蛋白基因上游启动子的序列 ,为进一步研究DSPP基因的转录调控机制奠定了基础。

Par3在成牙本质细胞胞间连接及其生物学功能中的作用研究

目的:通过下调分离缺陷基因3(partitioning defective-3,Par3)的表达探究其对小鼠成牙本质细胞系细胞(odontoblast lineage cells,OLCs)胞间连接的调控作用及相关生物学影响。方法:通过免疫荧光实验分别观察Par3在大鼠牙髓组织及小鼠成牙本质细胞中的表达及分布;利用Western blot检测炎症状态下成牙本质细胞Par3的表达情况;利用小干扰RNA(siRNA)敲低成牙本质细胞Par3的表达后,通过透射电镜观察Par3表达下调前后小鼠成牙本质细胞胞间连接结构的变化;利用Western blot及细胞免疫荧光技术检测Par3表达下调前后细胞紧密连接相关分子ZO-1(zonula occludens-1)的表达及分布情况;最后,通过EdU(5-ethynyl-2’-deoxyuridine)、Transwell及流式细胞术等检测Par3表达下调对成牙本质细胞增殖、迁移及凋亡等生物学功能的影响。结果:Par3在大鼠牙髓组织中与成牙本质细胞分布一致。体外条件下Par3表达于成牙本质细胞胞质内,且在炎症状态下表达水平下降。Par3表达下调后小鼠成牙本质细胞胞间连接不连续,紧密连接相关蛋白ZO-1表达下调且其分布由细胞膜转移至细胞质;Par3表达下调组与对照组相比,细胞增殖、迁移能力增强,凋亡能力受抑制。结论:Par3表达下调可通过影响ZO-1的表达/分布破坏小鼠成牙本质细胞胞间连接,同时通过促进细胞增殖及迁移等能力增强了细胞的修复能力。

Er:YAG激光去除老年人根面龋的临床研究

目的:通过分别采用Er:YAG激光与高速涡轮金刚砂车针处理老年人根面龋,观察患者的术中疼痛反应、去龋时间及充填效果。方法:共20位患者52颗患牙,随机分为2组,分别用Er:YAG激光和高速涡轮金刚砂车针去龋,去龋完成后用玻璃离子充填窝洞,记录两种方法去龋所用时间及术中疼痛程度,对患牙术后1个月后有无过敏感觉、6个月后充填体边缘着色,边缘密合等情况进行分析评价。结果:Er:YAG激光组较高速涡轮金刚砂车针组术中疼痛感明显降低,(P=0.0026);Er:YAG激光组和高速涡轮金刚砂车针组去龋时间分别为(394.8±27.92)和s(132.1±8.438)s。1个月复查,两组患者均未出现自发痛,牙本质过敏症状也无明显差异(P=0.159);术后六个月,两组充填体边缘着色(P=0.638)、边缘密合性(P=0.149)及脱落情况(P=0.685),均无明显差异。结论:Er:YAG激光组在去龋过程中疼痛感明显低于高速涡轮金刚砂车针组,但Er:YAG激光去龋所用时间更长,两组充填术后的疗效观察无明显差异。