网站信息流对现实人流替代函数的计算与应用——以中国互联网络发展状况统计报告为例

关于信息流对现实人流替代问题,不少学者曾进行了定量研究,构造了两者的替代模型并进行了部分印证。文章对其方法予以推广检验。具体是加工中国互联网络发展状况统计报告的数据,得到网站信息流指标和现实人流指标两列指标,带入模型中计算出网站信息流对现实人流的替代函数,并应用所获得的替代函数对模型进行了预测检验。

干眼与CC趋化因子受体5和CXC趋化因子受体3及其配体介导的炎性反应的关系

背景 干眼患者泪液分泌功能的持续异常导致眼表和泪腺处于长期炎性细胞浸润状态,炎症反应刺激淋巴细胞增生以产生对泪腺的免疫攻击,且炎症本身亦干扰腺体的正常分泌,其中趋化因子及其受体对淋巴细胞趋化、聚集到炎症部位起着关键的作用. 目的 分析干眼患者眼表细胞中CC趋化因子受体5（CCR5）、CXC趋化因子受体3（CXCR3）及其配体的表达变化,探讨以CCR5、CXCR3为特征的Th1细胞诱导的迟发性变态反应在干眼发生和发展中的机制.方法 采用前瞻性研究方法.纳入2012年6-12月在新疆医科大学第一附属医院眼科确诊的干眼患者30例60眼及年龄和性别匹配的健康志愿者30人60眼,受试者均接受泪膜破裂试验（BUT）、基础泪液分泌试验Ⅰ（SⅠt）和角膜结膜荧光素染色检查.采用结膜印记细胞学的方法获取2个组受试者的结膜上皮细胞,应用流式细胞术分析2个组受试者结膜组织CCR5、CXCR3表达阳性细胞率;应用real-time PCR对受检者结膜中正常T细胞表达和分泌调节活性因子（RANTES）、巨噬细胞炎性蛋白（MIP）-1α、MIP-1 β、γ干扰素诱导的单核因子（MIG）、γ干扰素诱导蛋白10（IP10）及干扰素诱导T细胞α趋化因子（I-TAC） mRNA的相对表达量进行检测,比较干眼组和健康对照组受试者间CCR5、CXCR3及其配体表达的差异,分析CCR5、CXCR3阳性表达率与BUT、SⅠt及角膜结膜荧光素染色评分的关系.结果 干眼组BUT、SⅠt值分别为（2.90 ±1.37）s和（4.00 ±2.49） mm/5 min,明显低于健康对照组的（8.56 ±4.69）s和（11.31 ±5.23） mm/5 min,差异均有统计学意义（t=3.172、2.186,均P＜0.05）;干眼组角膜结膜荧光素染色评分及CCR5和CXCR3的阳性表达率分别为0.90 ±0.57、（3.38±0.66）％和（2.64±0.47）％,均明显高于对照组的0.14 ±0.06、（2.12±0.21）％和（1.12±0.11）％,差异均有统计学意义（t=2.297、3.151、5.454,均P＜0.05）.干眼组CCR5阳性细胞率与BUT、SⅠt值均呈负相关（r=-0.473、-0.385,均P＜0.05）,CXCR3阳性细胞率与BUT、SⅠt值均呈负相关（r=-0.753、-0.684,均P＜0.05）;CCR5与CXCR3阳性细胞率及角膜结膜荧光素染色评分均呈正相关（r=0.231、0.336,均P＜0.05）.干眼组RANTES、MIP-1α、MIG和IP10 mRNA的相对表达量明显高于健康对照组,差异均有统计学意义（t=3.091、2.894、2.688、2.245,均P＜0.05）,而2个组间MIP-1β和I-TAC mRNA相对表达量的差异均无统计学意义（t=0.512、1.979,均P＞0.05）.CCR5阳性细胞率与结膜中RANTES和MIP-1αmRNA相对表达量均呈正相关（r=0.473、0.285,均P＜0.05）,而CCR5与MIP-1β则无明显相关性（r=0.214,P＞0.05）.CXCR3阳性细胞率与MIG和IP10 mRNA相对表达量均呈正相关（r=0.553、0.314,均P＜0.05）;CXCR3与I-TAC mRNA的相对表达量间无明显相关（r=0.364,P＞0.05）.结论 干眼的发生可能伴随着炎性细胞的长期浸润,以CCR5、CXCR3为标志的Th1型细胞及自然杀伤细胞诱导的迟发性变态反应可能是导致干眼眼表损伤的主要原因,CCR5和CXCR3及其配体可作为调节干眼组织免疫炎症反应的靶点.

敲低膜联蛋白A5对人胃癌MGC-803和MKN-45细胞周期的影响

目的探讨敲低膜联蛋白A5(ANXA5)对人胃癌细胞系MGC-803、MKN-45细胞周期相关蛋白表达的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组及空白对照组,采用脂质体转染法将靶向膜联蛋白A5的siRNA以及阴性siRNA分别转染干扰组和阴性对照组MGC-803、MKN-45细胞,空白对照组不加任何试剂。转染后48 h采用Real-time PCR和Western bloting分别从mRNA和蛋白水平检测ANXA5的表达,确定ANXA5被敲低之后,Realtime PCR和Western bloting检测各组p21^(cip1)mRNA和P21^(cip1)的表达,Western bloting检测各组细胞周期蛋白D1(cyclin D1)蛋白的表达,流式细胞术检测各组细胞周期的变化情况。结果敲低ANXA5后,与阴性对照组和空白对照组相比,两种细胞的p21^(cip1)mRNA和P21^(cip1)蛋白均显著降低(P<0.05),cyclin D1(P<0.05)也显著降低。结论敲低ANXA5可下调MGC-803、MKN-45细胞中p21^(cip1)mRNA和P21^(cip1)蛋白以及cyclin D1的表达,推测ANXA5可能通过作用于细胞周期相关蛋白而引发细胞周期阻滞从而影响着胃癌的发展。

两种人乳头状瘤病毒检测方法的比较

目的评价导流杂交和实时荧光定量(real-time)PCR对宫颈癌患者HPV感染检测的临床意义。方法采用导流杂交和real-time PCR分别对190例患者进行HPV感染检测,并对检测结果进行分析。结果在190例检测标本中,导流杂交法检测出113例HPV阳性,阳性检出率为59.5%,筛查宫颈癌的敏感度为58.1%,特异度为39.2%,阳性预测值为47.8%,阴性预测值为49.4%。real-time PCR检测出106例阳性,阳性检出率为55.8%,筛查宫颈癌的敏感度为54.8%,特异度为43.3%,阳性预测值为48.1%,阴性预测值为50.0%。导流杂交和real-time PCR检出的HPV阳性率差异无统计学意义,而且一致性检验显示两种方法具有较高的一致性(符合率为87.9%)。结论本研究结果表明,导流杂交和real-time PCR方法检测HPV未表现出较大的差异,在宫颈癌筛查中可以将两种方法结合使用,以提高检测的准确性,降低漏诊率。

三叶因子3/磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/核因子-κB在人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1增殖和凋亡中的作用

目的探讨三叶因子3(TFF3)对人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法构建TFF3基因过表达和敲低表达的慢病毒表达载体,包装293T细胞,产生慢病毒颗粒,病毒液转染TPC-1细胞,构建稳定增强TFF3表达的TFF3-TPC-1细胞系以及增强对照组细胞系ConT FF3-TPC-1;构建抑制TFF3表达的shRNA-TFF3-TPC-1细胞系以及沉默对照组细胞系shC on-TPC-1;利用Western blotting实验与Real\|time PCR验证TFF3过表达和沉默效率;生长曲线和集落形成实验检测4组细胞增殖状况;流式细胞术检测4组细胞凋亡情况;Western blotting和免疫细胞化学染色检测凋亡相关蛋白和磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、核因子-κB(NF-κB)通路蛋白表达水平。结果1.成功构建TFF3过表达和抑制表达稳转细胞系TFF3-TPC-1及细胞系shRNA-TFF3-TPC-1;2.TFF3-TPC-1细胞增殖能力和集落形成能力明显高于ConT FF3-TPC-1组(P<0.05或P<0.01),shRNA-TFF3-TPC-1细胞增殖能力和集落形成能力明显低于shC on-TPC-1组(P<0.01);3.TFF3-TPC-1细胞凋亡率低于ConT FF3-TPC-1(0.75%±0.08%vs 5.62%±0.3%,P<0.01),shRNA-TFF3-TPC-1凋亡率高于shC on-TPC-1(22.2%±1.2%vs 5.34%±0.4%,P<0.01);4.沉默TFF3基因后,Bax、细胞色素C(Cyt-C)、cleaved-Caspase-9、cleaved-Caspase-3表达升高,Bcl-2、通路蛋白Akt、p-Akt、NF-κB-P65表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论TFF3可能通过影响PI3K/Akt/NF-κB信号通路调节TPC-1细胞的增殖和凋亡。

微小RNA-423-5p靶向乙醛脱氢酶2减轻脂多糖诱导的人脐静脉血管内皮细胞损伤

目的探讨微小RNA-423-5p(miR-423-5p)对脂多糖(LPS)诱导血管内皮细胞损伤的保护及作用机制。方法用1 mg/L LPS诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)24 h,Real-time PCR和Western blotting检测细胞中miR-423-5p和乙醛脱氢酶2(ALDH2)的表达。通过转染anti-miR-423-5p和pc DNA-ALDH2下调miR-423-5p和上调ALDH2表达,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,并用ELISA试剂盒检测LPS诱导后细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;双荧光素酶报告系统验证miR-423-5p与ALDH2的调控关系。结果与对照相比,LPS可诱导HUVECs凋亡和损伤,使HUVECs中miR-423-5p、Bax表达量及IL-6和TNF-α分泌量均显著升高(P<0.05),ALDH2的mRNA和蛋白表达量及Bcl-2量显著降低(P<0.05);下调miR-423-5p表达和过表达ALDH2均可减轻LPS诱导的HUVECs损伤并抑制细胞凋亡;miR-423-5p靶向负调控ALDH2的表达;抑制ALDH2表达逆转了下调miR-423-5p表达对LPS诱导的HUVECs损伤的作用。结论下调miR-423-5p表达可靶向ALDH2减轻LPS对HUVECs的损伤并抑制细胞凋亡。

基于连续帧的在线实时人体行为检测

提出一种基于连续帧的在线实时人体行为检测方法,在原有在线实时人体行为检测的基础上通过对时空流的融合和连续帧输入来提高人体行为检测的准确性,时空流融合和连续帧输入都是为了更好地提取时序信息,进而对视频特征有更好的表达。实验表明,当使用连续帧(6帧)作为输入,并采用时空流融合,提出的方法在保证在线实时性要求的同时有更高的准确率。

微小RNA-27a在子宫颈癌中的表达变化及作用机制

目的探讨微小RNA(miR)-27a靶向调控F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)对子宫颈癌细胞的增殖、凋亡及侵袭的影响。方法30例宫颈癌组织和癌旁组织、30例正常宫颈组织新鲜标本用于实验。Real-time PCR检测宫颈癌、癌旁组织、正常宫颈组织以及宫颈癌细胞(SiHa、Caski、He La、HCC94)、子宫颈鳞状上皮永生化细胞H8中miR-27a的表达。应用脂质体转染法将miR-27a抑制剂(inhibitor)及其阴性对照转染至SiHa细胞,CCK-8法、流式细胞术、Transwell法分别检测miR-27a对SiHa细胞增殖活性、细胞周期、凋亡率和侵袭能力的影响。生物学信息法预测miR-27a的靶向基因,双荧光素酶报告基因实验结合Western bloting验证miR-27a对FBXW7的靶向调控作用。结果与癌旁组织和正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中miR-27a高表达(P<0.05);与子宫颈鳞状上皮永生化细胞H8相比,宫颈癌细胞SiHa、Caski、He La、HCC94中miR-27a高表达(P<0.05)。抑制SiHa细胞中miR-27a的表达,能够明显降低细胞的增殖活性(P<0.05),提高G0/G1期细胞比例(P<0.05),降低S期和G2/M期细胞比例(P<0.05),提高细胞凋亡率(P<0.05),抑制细胞的侵袭能力(P<0.05)。生物学信息法预测FBXW7可能是miR-27a的靶向调控基因;双荧光素酶报告基因实验显示,miR-27a可以与FBXW7基因的3’UTR区特异性结合(P<0.05),并负调控FBXW7蛋白的表达(P<0.05)。结论MiR-27a在宫颈癌的发生发展中起着癌基因的作用,抑制miR-27a表达能够明显抑制宫颈癌细胞的恶性生物学行为,其机制可能与靶向调控FBXW7的表达有关。

长链非编码RNA alpha-2-巨球蛋白反义RNA 1靶向微小RNA-106b-5p调控氧化型低密度脂蛋白诱导的人脑微血管内皮细胞损伤

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)alpha-2-巨球蛋白反义RNA 1(A2M-AS1)靶向微小RNA(miR)-106b-5p对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脑微血管内皮细胞损伤的影响。方法用ox-LDL诱导人脑微血管内皮细胞设为ox-LDL组,正常培养细胞为对照(Ctrl)组;A2M-AS1过表达(pcDNA-A2M-AS1组)、空载体(pcDNA组)、miR-106b-5p抑制剂(anti-miR-106b-5p组)、阴性对照(anti-miR-NC组)、pcDNA-A2M-AS1与对照mimic NC(miR-NC组)、pcDNA-A2M-AS1与miR-106b-5p模拟物(miR-106b-5p mimics组)转染细胞后加ox-LDL处理,n=9;Real-time PCR检测A2M-AS1与miR-106b-5p表达;试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平;流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因实验检测A2M-AS1与miR-106b-5p靶向关系;Western blotting检测Bcl-2和Bax蛋白表达量。结果与Ctrl组比较,ox-LDL组A2M-AS1表达水平、SOD和CAT活性、Bcl-2蛋白水平降低,miR-106b-5p表达水平、MDA水平、凋亡率、Bax蛋白水平升高(P<0.05);过表达A2M-AS1或干扰miR-106b-5p降低ox-LDL诱导细胞后MDA水平、凋亡率与Bax蛋白水平,升高SOD、CAT活性和Bcl-2蛋白水平(P<0.05);A2M-AS1靶向miR-106b-5p;上调miR-106b-5p逆转过表达lncRNA A2M-AS1对ox-LDL诱导的人脑微血管内皮细胞损伤的作用。结论A2M-AS1通过靶向miR-106b-5p减轻ox-LDL诱导的人脑微血管内皮细胞损伤。

导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测人乳头瘤病毒的临床价值

目的评价导流杂交基因芯片(HybriMax)、实时定量PCR(RT-qPCR)在人乳头瘤病毒(HPV)分型和定量分析以及对筛查高级别宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌的临床价值。方法选取2007年5月至2007年10月103例在复旦大学附属妇产科医院宫颈疾病诊疗中心就诊妇女作为研究对象,取宫颈脱落细胞行杂交捕获二代(HCⅡ)、HybriMax及RT-qPCR检测HPV,同时在阴道镜引导下取宫颈活体组织行病理学检查。以HCⅡ检测结果为对照,分析并比较HybriMax及RT-qPCR检测HPV感染与HCⅡ检测结果的一致性;以病理诊断为金标准,分析HybriMax及RT-qPCR对筛查CINⅡ以上病变的灵敏度、阴性预测值。结果 HybriMax、RT-qPCR检测HPV与HCⅡ的符合率分别为86.41%、96.12%;HybriMax筛查CINⅡ以上病变的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为96.30%、50.00%、40.63%、97.44%,RT-qPCR筛查CINⅡ以上病变的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为100%、56.58%、45.00%、100%,且HybriMax、RT-qPCR分别能够将HPV分型和定量。结论导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测HPV与HCⅡ比较有较好的一致性,对于CINⅡ以上病变有较高的灵敏度和阴性预测值,且能行HPV分型及定量,可用于宫颈病变的初步筛查。

房地产价格、要素空间关联与区域创新绩效

从经济特征、人力资本特征和创新要素流动三个视角,系统剖析了区域创新活动产生空间关联的根本原因,之后利用空间SDM模型,实证考察了房价对区域创新绩效的影响。研究发现,我国东、西部地区的房价呈现出显著的空间溢出效应,中部地区并不显著;在考虑了人力资本差异和创新要素的流动以后,全国、东部、中部和西部地区的房价均对区域创新绩效产生显著的抑制作用。传导机制检验结果显示,成本效应、人力资本错配效应、产业结构效应和企业家精神扭曲效应的传导作用显著,而融资约束效应并不显著。