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Mesenchymal stem cells and collagen patches for anterior cruciate ligament repair 被引量:2
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作者 Benjamin Gantenbein Neha Gadhari +2 位作者 Samantha CW Chan Sandro Kohl Sufian S Ahmad 《World Journal of Stem Cells》 SCIE CAS 2015年第2期521-534,共14页
AIM: To investigate collagen patches seeded with mesenchymal stem cells(MSCs) and/or tenocytes(TCs) with regards to their suitability for anterior cruciate ligament(ACL) repair. METHODS: Dynamic intraligamentary stabi... AIM: To investigate collagen patches seeded with mesenchymal stem cells(MSCs) and/or tenocytes(TCs) with regards to their suitability for anterior cruciate ligament(ACL) repair. METHODS: Dynamic intraligamentary stabilization utilizes a dynamic screw system to keep ACL remnants in place and promote biological healing, supplemented by collagen patches. How these scaffolds interact with cells and what type of benefit they provide has not yet been investigated in detail. Primary ACL-derived TCs and human bone marrow derived MSCs were seeded onto two different types of 3D collagen scaffolds, Chondro-Gide?(CG) and Novocart?(NC). Cells were seeded onto the scaffolds and cultured for 7 d either as a pure populations or as "premix" containing a 1:1 ratio of TCs to MSCs. Additionally, as controls, cells were seeded in monolayers and in co-cultures on both sides of porous high-density membrane inserts(0.4 μm). We analyzed the patches by real time polymerase chain reaction, glycosaminoglycan(GAG), DNA and hydroxyproline(HYP) content. To determine cell spreading and adherence in the scaffolds microscopic imaging techniques, i.e., confocal laser scanning microscopy(c LSM) and scanning electron microscopy(SEM), were applied.RESULTS: CLSM and SEM imaging analysis confirmed cell adherence onto scaffolds. The metabolic cell activity revealed that patches promote adherence and proliferation of cells. The most dramatic increase in absolute metabolic cell activity was measured for CG samples seeded with tenocytes or a 1:1 cell premix. Analysis of DNA content and c LSM imaging also indicated MSCs were not proliferating as nicely as tenocytes on CG. The HYP to GAG ratio significantly changed for the premix group, resulting from a slightly lower GAG content, demonstrating that the cells are modifying the underlying matrix. Real-time quantitativepolymerase chain reaction data indicated that MSCs showed a trend of differentiation towards a more tenogenic-like phenotype after 7 d.CONCLUSION: CG and NC are both cyto-compatible with primary MSCs and TCs; TCs seemed to perform better on these collagen patches than MSCs. 展开更多
关键词 Anterior cruciate LIGAMENT rupture Anteriorcruciate LIGAMENT TENOCYTE Dynamic intraligamentarystabilization system RESAZURIN red assay Mesenchymalstem cells real-time polymerase chain reaction Histology SCANNING electron MICROSCOPY MICROSCOPY SCANNING electron MICROSCOPY
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雷珠单抗选择性体外抑制睫状体恶性黑色素瘤 被引量:3
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作者 李姣 王兴荣 +3 位作者 崔彦 刘正峰 王影 李洋 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第11期1021-1025,共5页
目的探讨雷珠单抗是否能抑制恶性黑色素瘤细胞的生长并评估其在体外对人视网膜色素上皮细胞的安全性。方法人视网膜色素上皮细胞系(human retinal pigmental epithelial cell line,ARPE-19)和临床获得的恶性黑色素瘤细胞均分为空白对照... 目的探讨雷珠单抗是否能抑制恶性黑色素瘤细胞的生长并评估其在体外对人视网膜色素上皮细胞的安全性。方法人视网膜色素上皮细胞系(human retinal pigmental epithelial cell line,ARPE-19)和临床获得的恶性黑色素瘤细胞均分为空白对照组、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)处理组和雷珠单抗处理组。VEGF处理组预设VEGF浓度分别为1μg·L-1、5μg·L-1、10μg·L-1和20μg·L-1,雷珠单抗处理组预设雷珠单抗的浓度分别为0.10 g·L-1、0.25 g·L-1、0.50 g·L-1和1.00 g·L-1。采用实时细胞电子分析系统(RT-CES)分别监测各组细胞的动态变化,ELISA法检测对照组和雷珠单抗组VEGF的表达水平。结果与空白对照(0μg·L-1VEGF)组相比,10μg·L-1和20μg·L-1VEGF可促进恶性黑色素瘤细胞的生长(均为P<0.05)。但是同样浓度的VEGF作用下ARPE-19的生存率与对照组相比没有明显增长(均为P>0.05)。当加入0.25 g·L-1雷珠单抗时,恶性黑色素瘤细胞的生存率下降至(42.5±5.0)%(P<0.01)。0.50 g·L-1和1.00 g·L-1雷珠单抗作用于ARPE-19时,细胞生存率分别是(55.6±1.1)%和(42.8±4.0)%。与空白对照(0 g·L-1雷珠单抗)组恶性黑色素瘤细胞表达的VEGF水平(1533.4±7.0)ng·L-1相比,0.10 g·L-1、0.25 g·L-1、0.50 g·L-1和1.00 g·L-1雷珠单抗处理后其VEGF水平分别下降到(822.6±9.3)ng·L-1、(875.0±7.8)ng·L-1、(836.1±6.3)ng·L-1和(844.8±6.0)ng·L-1(均为P<0.05)。正常的ARPE-19可表达(908.8±9.1)ng·L-1VEGF,而经不同浓度雷珠单抗处理后,其表达的VEGF水平与对照组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论雷珠单抗选择性抑制恶性黑色素瘤细胞的增殖,而对ARPE-19的作用较弱。 展开更多
关键词 雷珠单抗 血管内皮生长因子 恶性黑色素瘤细胞 人视网膜色素上皮细胞 实时细胞电子分析系统
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牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达和分布的影响 被引量:1
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作者 刘淑清 李平俊 +3 位作者 鑫婷 侯绍华 朱鸿飞 贾红 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期83-90,共8页
为探讨牛分枝杆菌TB10.4蛋白与RAW264.7细胞的相互作用关系,表达纯化了rTB10.4,并采用IFN-γ释放试验和Western blot检测其细胞活性。使用不同剂量rTB10.4与RAW264.7细胞共孵育后,采用实时无标记动态细胞分析技术检测rTB10.4对RAW264.7... 为探讨牛分枝杆菌TB10.4蛋白与RAW264.7细胞的相互作用关系,表达纯化了rTB10.4,并采用IFN-γ释放试验和Western blot检测其细胞活性。使用不同剂量rTB10.4与RAW264.7细胞共孵育后,采用实时无标记动态细胞分析技术检测rTB10.4对RAW264.7细胞生长影响的最佳时间点和最佳剂量。在此基础上,采用量化流式细胞仪分析重组蛋白rTB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达的影响。结果表明,获得的rTB10.4具有较强的T细胞和B细胞活性,rTB10.4对RAW264.7细胞的作用呈剂量依赖性,作用起效时间为12~24h,诱导作用在16~18h达到最大效应值。量化流式分析仪分析结果表明,rTB10.4刺激可显著增强RAW264.7细胞的细胞膜上TLR2的表达。 展开更多
关键词 TB10.4重组蛋白 牛分枝杆菌 RAW264.7细胞 动态实时细胞分析检测技术 TLR2
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牛分枝杆菌TB9.8蛋白的表达及其诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞因子的分泌
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作者 刘淑清 贾红 +9 位作者 侯绍华 鑫婷 袁维峰 郭晓宇 张改梅 高新桃 李明 吴竞 董瑞凯 朱鸿飞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期735-739,共5页
为研究牛分枝杆菌TB9.8蛋白对小鼠巨噬细胞RAW264.7的生长及分泌细胞因子的影响,本研究将编码牛分枝杆菌TB9.8蛋白的基因克隆于pET-30a质粒中并在E.coli中进行表达。经SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白(rTB9.8)约9.8 ... 为研究牛分枝杆菌TB9.8蛋白对小鼠巨噬细胞RAW264.7的生长及分泌细胞因子的影响,本研究将编码牛分枝杆菌TB9.8蛋白的基因克隆于pET-30a质粒中并在E.coli中进行表达。经SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白(rTB9.8)约9.8 ku,具有良好抗原性。以不同剂量的纯化rTB9.8刺激巨噬细胞RAW264.7,采用动态实时细胞检测技术分析rTB9.8对RAW264.7生长影响的最佳时间点和最佳剂量,结果表明rTB9.8可以在8 h^24 h对RAW264.7细胞的增殖产生明显的抑制作用。此外,rTB9.8能够显著诱导RAW264.7细胞表达TNF-α、IL-6和IL-12。本实验为进一步研究牛分枝杆菌rTB9.8与宿主细胞相互作用提供了实验依据。 展开更多
关键词 牛分枝杆菌 TB9.8 实时动态检测技术 细胞因子
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A GSH-responsive PET-based fluorescent probe for cancer cells imaging 被引量:3
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作者 Xue Li Huaying Wang +2 位作者 Youhui Zhang Qianyong Cao Yong Chen 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2021年第4期1541-1544,共4页
An efficient PET-based probe,in which the ferrocene quencher and the naphthalimide fluorophore are linked by a disulfide bond,has been developed.This probe can be activated by GSH with fluorescence a turn-on response ... An efficient PET-based probe,in which the ferrocene quencher and the naphthalimide fluorophore are linked by a disulfide bond,has been developed.This probe can be activated by GSH with fluorescence a turn-on response for blocking the PET process.In addition,it was successfully applied for distinguishing cancer cells from normal cells。 展开更多
关键词 GSH sensing Photoinduced electron transfer Fluorescent sensor Cancer cells imaging
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基于细胞动态生物反应谱的抗肿瘤先导化合物筛选方法研究
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作者 马丽娜 张乐乐 +6 位作者 熊吟 韩玉梅 章从恩 郜丹 马莉 鄢丹 肖小河 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期695-700,共6页
为弥补抗肿瘤活性评估常规断点检测法操作繁琐、灵敏度低等局限,尝试建立基于细胞动态生物反应谱的抗肿瘤先导化合物筛选新方法。依据活细胞具有电阻抗生物传感属性,以细胞指数、半数抑制浓度IC50和脱附曲线为评价指标,采用实时在线分... 为弥补抗肿瘤活性评估常规断点检测法操作繁琐、灵敏度低等局限,尝试建立基于细胞动态生物反应谱的抗肿瘤先导化合物筛选新方法。依据活细胞具有电阻抗生物传感属性,以细胞指数、半数抑制浓度IC50和脱附曲线为评价指标,采用实时在线分析技术动态监测模式药表柔比星、顺铂、卡铂对HepG2细胞生长的影响,并辅以CCK-8(cell counting kit-8)和显微监视佐证。结果显示,以细胞指数-作用时间关系表征的细胞动态生物反应谱可灵敏地反映模式药抑制HepG2细胞的动态特征效应信息,3种药物的IC50分别为(0.53±0.04)、(9.79±0.26)和(597.00±3.79)μg·mL-1,进一步发现3种药物的脱附曲线差异明显,提示其作用特征可能不同,这与常规检测方法及文献报道一致。研究表明,具有无标记、非侵入、实时动态等特点的细胞动态生物反应谱技术,可定性定量地表征3种药物对HepG2细胞作用的过程动态信息,反映不同药物作用特征性差异,有望为抗肿瘤先导化合物的发现及作用特点或机制阐释提供线索。 展开更多
关键词 先导化合物 活性评价 实时细胞电子传感系统
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