Quantification of Porcine Follicle-stimulating Hormone Receptor Messenger Ribonucleic Acid by Reverse Transcription competitive Polymerase Chain Reaction

An easy and reliable method was developed for construction and quantification of competitive templates, which shared the same sequence as the amplified target DNA except for a 20 bp insertion in the middle by recombinant polymerase chain reaction (PCR). Among the advantages of competitive PCR is that any predictable or unpredictable variable that affects amplification has the same effect on both target and competitor species and that the final ratio of amplified products reflects exactly the initial targets. The utilization of a thermostable reverse transcriptase in the RT step was proposed to overcome the problem of the efficiency of target cDNA synthesis. In addition, to obtain reliable measurements, it was recommended to perform four PCR with amounts of competitive template flanking the concentration of the target mRNA.

芦丁调控miR-155和HMGB1/RAGE通路对糖尿病视网膜病变大鼠炎性反应的影响

目的:探讨芦丁对糖尿病视网膜病变大鼠炎性反应的影响及其机制。方法:采用腹腔注射链脲佐菌素的方法制备糖尿病大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组(0.9%氯化钠溶液灌胃)和芦丁低、中、高剂量组[分别以50、100、150 mg/(kg·d)芦丁灌胃],并取正常大鼠作为对照组(0.9%氯化钠溶液灌胃),每组20只,持续给药12周后,比较各组大鼠视网膜组织中伊凡斯兰渗透量、神经节细胞凋亡和微小RNA(miR)-155、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)mRNA表达水平,以及炎症因子水平。结果:对照组、模型组和芦丁低、中、高剂量组中伊凡斯兰渗透量分别为(1.61±0.31)μg/g、(12.84±1.24)μg/g、(9.85±0.62)μg/g、(6.80±0.53)μg/g、(2.87±0.51)μg/g,神经节细胞凋亡指数分别为(1.09±0.45)%、(30.96±2.50)%、(24.65±2.48)%、(18.61±1.41)%、(8.36±0.54)%,miR-155表达水平分别为(0.38±0.03)、(1.92±0.15)、(1.55±0.12)、(1.09±0.10)、(0.55±0.05),HMGB1 mRNA表达水平分别为(0.26±0.03)、(0.77±0.05)、(0.68±0.04)、(0.57±0.04)、(0.34±0.03),RAGE mRNA表达水平分别为(0.18±0.02)、(0.67±0.04)、(0.58±0.03)、(0.45±0.03)、(0.23±0.02)。模型组和对照组比较,伊凡斯兰渗透量、凋亡指数和miR-155、HMGB1、RAGE mRNA水平均升高(均P<0.05);芦丁低、中、高剂量组中上述指标呈剂量依赖性降低(均P<0.05)。模型组、对照组与芦丁低、中、高剂量组,芦丁各组的炎症因子水平低于模型组(均P<0.05)。结论:芦丁可保护糖尿病大鼠视网膜损伤,延缓视网膜炎症效应,其作用机制可能与抑制miR-155和HMGB1/RAGE通路有关。

胰高血糖素样肽1受体激动剂相关的消化系统不良反应综述

胰高血糖素样肽1受体激动剂(GLP-1RAs)近年来广泛应用于糖尿病和肥胖人群,同时也引起了一系列不良反应,其中最重要的是消化系统不良反应。GLP-1RAs相关的消化系统不良反应涉及胃肠道、胰腺和胆道,其中恶心、呕吐、便秘、腹泻发生率较高,是导致患者停药的主要原因。胰腺和胆道系统疾病的发病率较低,但尚无研究证据可排除其与GLP-1RAs的关联。替尔泊肽上市较晚,其安全性尚缺乏足够的真实世界数据。医护人员应对患者采用积极的饮食指导策略,并加强用药教育,以帮助患者积极预防、科学应对GLP-1RAs相关的消化系统不良反应的发生。

天沙合剂对EGFRIs致皮肤干燥大鼠水通道蛋白表达影响的实验研究

目的:探究天沙合剂通过调节水通道蛋白(aquaporins,AQPs)对表皮生长因子受体抑制剂(epidermal growth factor receptor inhibitors,EGFRIs)造成的皮肤干燥的治疗作用机制。方法:将36只大鼠随机分为6组,分别为正常对照组、EGFRIs模型组、维生素E阳性对照组和低、中、高剂量天沙合剂组,每组6只。除正常对照组,其余5组大鼠通过连续28 d吉非替尼(37.5 mg/kg)灌胃给药构建EGFRIs诱导的背部皮肤干燥模型;从吉非替尼给药第15天开始,给予维生素E(13.5 mg/kg)或天沙合剂(8、4、2 mg/kg)干预,正常对照组和模型组给予等量生理盐水。给药结束后,观察背部皮疹情况,通过测量经皮失水评估皮肤损伤情况;通过HE染色评估皮肤组织病理变化;Western blot测定皮肤组织AQP1,AQP3和AQP5表达。结果:维生素E和高、中剂量天沙合剂组大鼠背部皮疹明显改善,经皮失水较模型组降低。维生素E和3剂量天沙合剂组大鼠皮肤组织病理变化减轻,皮肤组织AQP1、AQP3和AQP5表达增加。结论:天沙合剂可减轻EGFRIs诱导的皮肤损伤,改善其造成的皮肤病理变化,调节AQPs表达是其作用途径之一。

模式识别受体在糖尿病心肌病中的研究进展

糖尿病心肌病(DCM)是糖尿病患者死亡的主要原因,但确切调控机制仍不清楚。近年研究发现,固有免疫应答是DCM发展过程的中心环节。模式识别受体是执行固有免疫功能的重要分子,主要包括Toll样受体、NOD样受体、视黄酸诱导基因Ⅰ样受体、C型凝集素受体、黑色素瘤缺乏因子2样受体、清道夫受体和环状GMP-AMP合成酶。现就上述几种模式识别受体在DCM中作用的研究进展进行综述,以期为DCM的临床治疗提供新思路和新靶点。

针灸治疗偏头痛作用机制研究进展

针灸治疗偏头痛的机制主要包括调节脑部血流速度、影响神经递质释放、抑制炎性反应、调节中枢镇痛机制、抑制神经元激活、抑制胶质细胞活化、促进阿片类受体、调节脑-肠-菌轴等。目前,针灸治疗偏头痛临床研究逐渐丰富,但仍存在以下问题:治法相对单一,主要集中在针刺研究方向;没有区别证型,未发挥最大疗效;缺乏对机制之间联系及整体的研究等。今后,可加强对灸法治疗偏头痛机制的研究,促进临床治疗多样性,充分发挥针灸治疗偏头痛的作用;研究针灸治疗不同证型偏头痛机制的区别,充分考虑患者个体差异性,提高临床疗效;进一步挖掘不同机制之间的内在联系,促进针灸治疗偏头痛整体机制研究的发展。

维生素D及受体在肾移植术后并发症中的作用

维生素D是一种维持人体正常生理功能的微量营养素及激素,其通过多种效应激活维生素D受体(VDR)发挥全身及局部作用。维生素D活性形式、VDR基因多态性与肾移植术后各项并发症的发生密切相关,除了参与调控肾移植受者钙磷代谢及心血管疾病外,维生素D及受体还参与调控肾移植受者术后骨异常、肌肉减少症、糖尿病、排斥反应及感染的发生,在肾移植领域发挥着不可替代的作用。本文就维生素D及受体在肾移植术后相关并发症中的作用进行综述,探讨维生素D及其类似物作为肾移植术后辅助用药、VDR作为治疗靶点在肾移植受者并发症预防及治疗中的作用。

沙棘黄酮通过调控TLR4/NF-κB信号通路改善大鼠多囊卵巢综合征的作用

目的:探究沙棘黄酮改善大鼠多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)的作用及机制,为PCOS的防治提供新的思路。方法:采用高脂饲料联合灌胃来曲唑法复制PCOS模型,并随机分为模型组、低、高剂量沙棘黄酮组(200、400 mg/kg)及二甲双胍组(100 mg/kg),灌胃21 d后检测相关指标变化。结果:与模型组比较,低、高剂量沙棘黄酮组大鼠卵巢指数、发情间期时像百分率、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)含量、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血清促黄体生成素(LH)活性及睾酮(T)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)含量显著降低(P<0.05,P<0.01),促卵泡刺激素(FSH)活性极显著增加(P<0.01);低、高剂量沙棘黄酮组大鼠卵巢组织病理形态有所改善,Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(My D88)、核转录因子κBp65(NF-κBp65)mRNA及TLR4、MyD88、p-NF-κBp65蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:沙棘黄酮可以改善PCOS大鼠症状,减轻胰岛素抵抗,调节性激素水平,修复卵巢组织病理改变,其机制与抑制TLR4/NF-κB信号通路介导的炎症反应有关。

胰高糖素样肽-1受体激动剂临床应用合理性和安全性分析

目的调查住院患者接受胰高糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1RA)治疗的情况,了解该类药物的应用现状和不良反应并分析其危险因素,为规范其临床合理应用提供依据。方法汇总国内外GLP-1RA权威指南、临床研究和专家共识,结合说明书形成GLP-1RA临床应用合理性评价标准。回顾性收集2021年1月至2023年4月广州医科大学附属第二医院使用GLP-1RA的住院患者的病历资料,按照已制订的评价标准进行合理性和安全性分析,并提出合理用药建议。结果共有261例患者应用GLP-1RA,其中有效病例258例,不合理使用病例共160例,不合理使用率达62.02%,以超适应证用药不合理和用法用量不适宜为主要原因;发生不良反应共3例,发生率为1.16%,主要是低血糖和转氨酶升高;临床使用期间应多关注患者血糖和肝肾功能指标,关注GLP-1RA的适应证、用法用量、禁忌证和联合用药等方面。结论GLP-1RA降糖、减重及保护心血管的作用备受关注,本研究针对医生使用GLP-1RA临床实践存在的问题和不良反应,提供具体可行的指导建议,以促进GLP-1RA的合理使用。

卡培他滨联合马来酸吡咯替尼与甲苯磺酸拉帕替尼治疗HER-2阳性晚期乳腺癌患者的近期效果及安全性研究

目的比较卡培他滨联合马来酸吡咯替尼与甲苯磺酸拉帕替尼治疗HER-2阳性晚期乳腺癌患者的近期效果及安全性。方法选取2021-06—2022-10就诊于郑州大学第二附属医院乳腺外科的60例HER-2阳性晚期乳腺癌患者,依据随机表法分为2组,各30例。观察组采用卡培他滨联合马来酸吡咯替尼方案,对照组采用卡培他滨联合甲苯磺酸拉帕替尼方案。以21 d为1个治疗周期,治疗至疾病进展或不能耐受药物副反应为终点。比较2组患者的临床疗效、疾病控制率(DCR)、疾病的无进展时间(PFS)及不良反应发生率。结果治疗2个周期后,观察组患者的DCR高于对照组,治疗后6个月、12个月及中位PFS均长于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组患者副反应发生率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论与马来酸吡咯替尼联合甲苯磺酸拉帕替尼比较,卡培他滨联合马来酸吡咯替尼治疗晚期HER-2阳性型乳腺癌,能提高患者的DCR、延长PFS,且不增加副反应发生率。

托法替布对类风湿关节炎患者的干预效果分析

目的:探讨与分析托法替布对类风湿关节炎患者的干预效果.方法:选择2021年6月—2023年1月我院收治的80例类风湿关节炎患者作为研究对象,根据随机数字表法分为托法替布组与对照组,各40例.对照组给予甲氨蝶呤治疗,托法替布组在对照组治疗的基础上给予托法替布治疗,2组均治疗观察12周,比较2组患者的滑膜增生程度与骨侵蚀变化情况、肌骨超声半定量评分、生活质量评分及治疗期间不良反应发生率.结果:2组治疗12周后的骨侵蚀评分、滑膜增生评分均低于治疗前,且托法替布组治疗12周后骨侵蚀评分、滑膜增生评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).2组治疗期间恶心呕吐、嗜睡、静脉血栓、白细胞减少等不良反应发生率对比,差异无统计学意义(P>0.05).2组治疗12周后的肌骨超声半定量评分均低于治疗前,且托法替布组治疗12周后的肌骨超声半定量评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).托法替布组治疗12周后的功能状况、情感状况、社会功能状况、生理功能状况等生活质量评分均高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论:托法替布在类风湿关节炎患者的应用能缓解滑膜增生程度与骨侵蚀程度,且不会增加不良反应的发生,还可降低患者的肌骨超声半定量评分,提高患者的生活质量,从而持续改善患者的预后.

基于美国数据库的P2Y12受体拮抗剂不良事件信号检测与分析

目的挖掘噻氯匹啶、氯吡格雷、普拉格雷和替格瑞洛4个P2Y12受体拮抗剂的不良事件(ADE)信号,为临床安全用药提供参考。方法在美国食品药品监督管理局(FDA)不良事件报告系统(FAERS)中提取4个P2Y12受体拮抗剂在2004年1月1日至2022年12月31日的报告数据,采用比例失衡法中的报告比值比(ROR)和贝叶斯置信度递进神经网络法(BCPNN)对所提取的数据进行挖掘与分析。结果4个P2Y12受体拮抗剂共得到1512个有效信号,其中噻氯匹啶101个,普拉格雷257个,氯吡格雷771个,替格瑞洛383个。ADE信号累及系统器官分类(SOC)22个。噻氯匹啶ADE信号数最多的SOC是血液及淋巴系统疾病,占28.71%;普拉格雷ADE信号数最多的SOC是心脏器官疾病,占18.36%;氯吡格雷ADE信号数最多的SOC是胃肠系统疾病,占23.75%;替格瑞洛ADE信号数最多的SOC是全身性疾病及给药部位各种反应,占22.86%。结论经挖掘FAERS数据库,发现噻氯匹啶、氯吡格雷、普拉格雷和替格瑞洛4个P2Y12受体拮抗剂均存在ADE信号累及的SOC以及常见的不良事件,故临床需密切关注这些ADE,以避免出现其累及的SOC,防范风险事件发生。

新型雄激素受体降解剂关键中间体合成工艺优化

YXG-158是具有全新结构的雄激素受体降解剂,有望解决去势抵抗性前列腺癌患者的临床耐药问题,而其放大生产的难点在于关键中间体(3S,10R,13S)-10,13-二甲基-17-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15-十二氢-1H-环戊并[a]菲-3-醇(6)的合成。以市售17-碘雄甾-5,16-二烯-3β-醇(7)为原料,仅经一步乌尔曼偶联反应实现中间体6的构建,收率可达30.7%,纯度可达99.72%,产物中区域异构体8仅占比0.28%。采用乌尔曼偶联合成中间体6大大简化了合成路线,提高了反应收率,且利于工业化生产。

妊娠期高血压疾病患者血清hs-CRP、sFlt-1水平变化及与妊娠结局的相关性

目的:探讨妊娠期高血压疾病(HDP)患者血清可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平变化及与妊娠结局的相关性。方法:收集2022年1月—2023年2月于赣州市妇幼保健院接受治疗的HDP患者108例作为病例组,并进行回顾性分析。根据病情严重程度将病例组患者分为妊娠期高血压组(43例)、子痫前期组(35例)、子痫组(30例),并选取同期正常妊娠的妇女82例作为对照组。分析所有研究对象中血清hs-CRP、sFlt-1水平变化情况。结果:病例组血清hs-CRP、sFlt-1水平均明显高于对照组(P<0.05)。妊娠期高血压组、子痫前期组、子痫组患者血清hs-CRP、sFlt-1水平比较差异均有统计学意义(P<0.05),且血清hs-CRP、sFlt-1水平随病情严重程度的加重而升高(P<0.05)。不良妊娠结局组患者血清hs-CRP、sFlt-1水平均高于妊娠结局良好组(P<0.05)。血清hs-CRP、s Flt-1水平反映HDP患者妊娠结局的AUC分别为0.758、0.763。相关性分析显示,hs-CRP、sFlt-1之间呈正相关(r=0.743,P<0.001)。结论:HDP患者血清中hs-CRP、sFlt-1水平均升高,且随疾病严重程度的加重而增加,并与妊娠结局有一定的相关性。

亚太地区肿瘤专家小组《德曲妥珠单抗相关不良反应的监测和管理指南》解读

对2023年8月亚太地区肿瘤专家小组发布的《德曲妥珠单抗相关不良反应的监测和管理指南》进行解读,旨在为临床医务人员监测和管理德曲妥珠单抗相关不良事件提供实用建议。

阿替利珠单抗不良反应94例文献分析

目的分析阿替利珠单抗发生不良反应(adverse reactions,ADRs)的临床特点与规律,为临床安全用药提供参考。方法搜索中国知网、维普、万方、Web of Science、PubMed数据库,收集关于阿替利珠单抗所致不良反应的报道文献并进行分析,研究时间为2022年4—8月。结果阿替利珠致不良反应报道共94例;其中男性56例(59.57%),女性38例(40.43%),男性占比较高;年龄(62.8±12.0)岁,中老年人居多;多数发生在用药后的90 d内(71例,71.0%);阿替利珠单抗致ADRs累及多个系统/器官,其中以神经系统损害(22例,22.0%)占比最多;3~4级严重ADRs占比最多(64例,64.0%);94例经治疗和(或)停药后,好转或治愈80例,死亡5例。结论阿替利珠单抗所致ADRs涉及不同性别与年龄段病人,累及多个系统/器官,临床使用应随时监测,警惕ADRs的发生,做到及时识别与治疗。

嵌合抗原受体T细胞治疗B细胞性急性淋巴细胞白血病的护理策略研究

探究嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(chimeric antigen receptor T cell immuno-therapy,CAR-T)治疗B细胞性急性淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)的护理策略。急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是一种临床常见的异质性很高的恶性血液病。CAR-T作为一种新兴的治疗方法,已经在B-ALL患者的治疗中表现出显著疗效。通过分析广东省第二人民医院接受CAR-T治疗的复发/难治性B-ALL患者的临床资料,对比采用规范化医疗及护理体系干预前后CAR-T治疗B-ALL的疗效及不良反应差异。结果显示,规范化医疗及护理体系干预对CAR-T治疗B-ALL的疗效无显著影响,但能够降低细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)的严重程度。研究发现,CAR-T治疗复发/难治性B-ALL疗效显著,通过规范化医疗及护理体系建设,能够增强医护人员CAR-T治疗全程管理能力,尤其是CAR-T细胞回输后相关并发症的早期观察、早期预防及早期处理能力,保障患者的治疗效果,降低不良反应发生率。

基于美国FAERS和日本JADER数据库的内皮素受体拮抗剂不良事件信号分析

目的 分析马昔腾坦、安立生坦和波生坦不良事件发生特点,为临床选择内皮素受体拮抗剂提供参考。方法 基于美国食品药品监督管理局(FDA)不良事件报告系统(adverse event reporting system, FAERS)和日本药品不良事件报告数据库(Japanese adverse drug event report database,JADER)中2013年10月1日至2023年12月31日以马昔腾坦、安立生坦、波生坦为首要怀疑药品的所有不良事件报告,采用ROR法和IC法对内皮素受体拮抗剂相关不良事件信号进行计算,筛选阳性信号进行对比分析。采用Log-rank检验和非参数检验比较内皮素受体拮抗剂相关不良事件诱发时间差异性。结果 基于2个数据库共获得马昔腾坦不良事件报告35 150例、安立生坦75 177例、波生坦22707例。马昔腾坦、安立生坦的诱发贫血在JADER中报告数量最多,马昔腾坦、安立生坦、波生坦诱发液体潴留在FAERS中报告数量最多。波生坦肝功能异常相关信号强度显著高于马昔腾坦和安立生坦。马昔腾坦贫血相关不良事件信号强度显著高于安立生坦和波生坦。安立生坦液体潴留相关信号强度显著高于马昔腾坦和波生坦。对未成年患者进行不良事件信号挖掘发现,波生坦相较其他内皮素受体拮抗剂更容易诱发未成年患者肝功能检验异常,安立生坦更容易诱发未成年患者鼻咽不适。未成年患者使用马昔腾坦应重点关注贫血、血小板降低、肝功能指标异常、鼻衄、血压降低、低钾血症。马昔腾坦联合一氧化氮受体拮抗剂[173(IQR 40~544)]不良事件诱发时间最短,波生坦联合前列环素受体拮抗剂[632.5(IQR 222.75~1225.5)]不良事件诱发时间最长。结论 不同内皮素受体拮抗剂不良事件风险信号强度和不良事件诱发时间可能存在差异。对患者应开展个体化用药和监护,减少可能的不良反应,保障患者用药安全。

肿瘤靶向药物相关皮肤不良反应及发生机制

近年来,肿瘤靶向药物快速发展,成为目前肿瘤治疗的重要选择之一。肿瘤靶向药物在发挥抗肿瘤作用的同时,可能损害正常组织功能,其中皮肤相关不良反应最为常见。部分皮肤不良反应严重影响患者的生活质量,导致其治疗依从性下降,最终影响患者的长期生存。因此,正确认识肿瘤靶向药物相关皮肤不良反应及发生机制,有助于指引未来基于机制的诊断与治疗,从而改善患者生活质量。

腧穴“解郁方”对慢性不可预测轻度应激抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴及BDNF/TrkB/CREB通路的影响

目的:观察腧穴“解郁方”对慢性不可预测轻度应激(CUMS)抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴和脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶B受体(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法:40只无特定病原体(SPF)级Sprague Danley(SD)雄性大鼠随机分为空白组(10只)、模型组(10只)、西药组(10只)、针刺组(10只),除空白组外,其余3组连续28 d构建CUMS抑郁大鼠模型,造模成功后,西药组连续14 d灌胃盐酸帕罗西汀混悬液,每日1次;针刺组针刺百会、太冲、神门,每日1次,每次20 min,连续针刺14 d。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)水平;免疫组化(IHC)检测海马BDNF、TrkB表达情况,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)及实时荧光定量-聚合酶链式反应(PCR)测定海马BDNF、TrkB、CREB蛋白及mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组血清CRH、ACTH和CORT含量上升(P<0.01),海马病理损伤严重,海马BDNF、TrkB平均光密度降低(P<0.01),BDNF、TrkB、CREB蛋白及mRNA明显下降(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,针刺组血清CRH、ACTH、CORT含量下降(P<0.05),海马病理损害明显减轻,BDNF、TrkB平均光密度明显增加(P<0.05),BDNF、CREB、TrkB蛋白及mRNA表达水平上升(P<0.05)。结论:腧穴“解郁方”可能通过调节HPA轴和调控BDNF/TrkB/CREB信号通路,改善CUMS诱导的大鼠抑郁样行为。