期刊导航
期刊开放获取
河南省图书馆
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式:
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
抗阿尔茨海默病重组真核表达载体的构建
1
作者
何颖
黄力
+3 位作者
章亚男
黎怀星
陈蕊雯
孙树汉
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期55-57,共3页
目的 :将淀粉样蛋白 N端的抗原表位基因以 4种不同的组合与小鼠 Ig G重链区基因融合 ,构建抗阿尔茨海默病的重组质粒。方法 :通过 RT- PCR技术从小鼠脾组织中克隆 Ig G重链区 c DNA,将柔性接头与抗原表位基因序列设计在 5′端引物中 ,...
目的 :将淀粉样蛋白 N端的抗原表位基因以 4种不同的组合与小鼠 Ig G重链区基因融合 ,构建抗阿尔茨海默病的重组质粒。方法 :通过 RT- PCR技术从小鼠脾组织中克隆 Ig G重链区 c DNA,将柔性接头与抗原表位基因序列设计在 5′端引物中 ,然后以克隆出的小鼠 Ig G重链区 c DNA为模板 ,用 PCR法克隆出由柔性接头将抗原表位和 Ig G重链区基因融合在一起的序列 ,并插入到 p VAX质粒载体中。结果 :扩增出来的 4种不同组合的抗原表位基因和 Ig G重链区基因融合序列大小分别为 999、1 0 2 0、1 0 0 5、1 0 2 6 bp,均与 Gen Bank上登录的相符 ;p VAX重组质粒酶切结果表明融合基因正确地插入到 p VAX载体中 ,全自动测序亦显示抗原表位基因和 Ig G重链区基因为所需基因 ,接头序列也完全正确。结论 :成功构建了抗阿尔茨海默病的 4种表位基因 - Ig G重链区融合表达的重组质粒 。
展开更多
关键词
阿尔茨海默病
重组真核表达载体
抗原
基因序列
基因表达
下载PDF
职称材料
人淋巴毒素基因在中国仓鼠细胞中表达
被引量:
1
2
作者
刘军涛
李昌本
+2 位作者
倪铁华
邹益民
赵寿元
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
1991年第3期208-213,共6页
将人淋巴毒素(HuLT)基因插入哺乳动物细胞表达载体质粒p91023,经磷酸钙-DNA共沉淀法转入中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷型(CHO-DHFRˉ)细胞,获得了DIIFR+细胞克隆。RNA点渍杂交分析和MTT染料还原测定淋巴毒素的生物活性,均证明HuLT基因在DH...
将人淋巴毒素(HuLT)基因插入哺乳动物细胞表达载体质粒p91023,经磷酸钙-DNA共沉淀法转入中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷型(CHO-DHFRˉ)细胞,获得了DIIFR+细胞克隆。RNA点渍杂交分析和MTT染料还原测定淋巴毒素的生物活性,均证明HuLT基因在DHFR+细胞里巳被转录和转译,并被分泌到细胞外。其杀伤靶细胞——L929细胞的生物活性不低于每毫升培养液200单位。
展开更多
关键词
淋巴毒素基因
细胞毒活性
基因表达
下载PDF
职称材料
大鼠β-防御素2真核表达载体构建及转染大鼠角膜上皮细胞的研究
3
作者
但婧
宋秀胜
+1 位作者
杨燕宁
李霞
《国际眼科杂志》
CAS
2017年第3期422-426,共5页
目的:应用基因工程技术构建含大鼠β-防御素2(rat beta defensin 2,rBD-2)目的基因的真核重组质粒,通过脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,检测目的基因在转染细胞中的表达,探讨应用该载体获得重组rBD-2在眼表细胞中表达的可行性,并为进一...
目的:应用基因工程技术构建含大鼠β-防御素2(rat beta defensin 2,rBD-2)目的基因的真核重组质粒,通过脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,检测目的基因在转染细胞中的表达,探讨应用该载体获得重组rBD-2在眼表细胞中表达的可行性,并为进一步研究rBD-2的体内外抗微生物活性提供实验基础,以期为感染性角膜病防治提供新方法。方法:将采用PAS(PCR-based Accurate Synthesis)的方法合成rBD-2 DNA片段连接到真核表达载体pI RES2-ZsGreen1的XhoⅠ与BamHⅠ酶切位点之间,构建p IRES2-ZsGreen1-rBD-2真核重组表达载体,重组质粒转化大肠杆菌DH5a感受态细胞,卡那霉素筛选出阳性克隆子,经酶切、测序鉴定重组载体构建成功后,采用脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,此处实验分为三组即重组载体p IRES2-ZsGreen1-rBD-2转染的大鼠角膜上皮细胞组、未转染的空细胞组以及空载体p IRES2-ZsGreen1所转染的大鼠角膜上皮细胞组,在倒置荧光显微镜下观察细胞转染情况,最后经实时荧光定量RT-PCR相对定量法检测各组转染细胞中rBD-2基因mRNA的表达差异。结果:成功构建p IRES2-ZsGreen1-rBD-2真核重组质粒,应用实时荧光定量RT-PCR相对定量法检测到重组质粒p IRES2-ZsGreen1-rBD-2转染组的大鼠角膜上皮细胞中rBD-2基因的mRNA表达水平明显多于另两组。结论:应用基因工程技术构建的rBD-2真核表达载体p IRES2-ZsGreen1-rBD-2,通过脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,能够使外源rBD-2基因在大鼠角膜上皮细胞中被转录成mRNA。
展开更多
关键词
大鼠β-防御素2
真核表达载体
重组质粒
大鼠角膜上皮细胞
下载PDF
职称材料
题名
抗阿尔茨海默病重组真核表达载体的构建
1
作者
何颖
黄力
章亚男
黎怀星
陈蕊雯
孙树汉
机构
第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期55-57,共3页
基金
国家高新技术发展规划 ("863")课题( 2 0 0 1AA2 13 111) .
文摘
目的 :将淀粉样蛋白 N端的抗原表位基因以 4种不同的组合与小鼠 Ig G重链区基因融合 ,构建抗阿尔茨海默病的重组质粒。方法 :通过 RT- PCR技术从小鼠脾组织中克隆 Ig G重链区 c DNA,将柔性接头与抗原表位基因序列设计在 5′端引物中 ,然后以克隆出的小鼠 Ig G重链区 c DNA为模板 ,用 PCR法克隆出由柔性接头将抗原表位和 Ig G重链区基因融合在一起的序列 ,并插入到 p VAX质粒载体中。结果 :扩增出来的 4种不同组合的抗原表位基因和 Ig G重链区基因融合序列大小分别为 999、1 0 2 0、1 0 0 5、1 0 2 6 bp,均与 Gen Bank上登录的相符 ;p VAX重组质粒酶切结果表明融合基因正确地插入到 p VAX载体中 ,全自动测序亦显示抗原表位基因和 Ig G重链区基因为所需基因 ,接头序列也完全正确。结论 :成功构建了抗阿尔茨海默病的 4种表位基因 - Ig G重链区融合表达的重组质粒 。
关键词
阿尔茨海默病
重组真核表达载体
抗原
基因序列
基因表达
Keywords
Alzheimer disease
epitope
IgG heavy chain
recom binant plasmid
s
分类号
R749.16 [医药卫生—神经病学与精神病学]
R394 [医药卫生—医学遗传学]
下载PDF
职称材料
题名
人淋巴毒素基因在中国仓鼠细胞中表达
被引量:
1
2
作者
刘军涛
李昌本
倪铁华
邹益民
赵寿元
机构
复旦大学遗传学研究所
出处
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
1991年第3期208-213,共6页
文摘
将人淋巴毒素(HuLT)基因插入哺乳动物细胞表达载体质粒p91023,经磷酸钙-DNA共沉淀法转入中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷型(CHO-DHFRˉ)细胞,获得了DIIFR+细胞克隆。RNA点渍杂交分析和MTT染料还原测定淋巴毒素的生物活性,均证明HuLT基因在DHFR+细胞里巳被转录和转译,并被分泌到细胞外。其杀伤靶细胞——L929细胞的生物活性不低于每毫升培养液200单位。
关键词
淋巴毒素基因
细胞毒活性
基因表达
Keywords
Human lymphotoxin (LuLT) gene, Cytotoxic activity, DHFR,
recom
-
binant
plasmid
p91-HuLT
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
大鼠β-防御素2真核表达载体构建及转染大鼠角膜上皮细胞的研究
3
作者
但婧
宋秀胜
杨燕宁
李霞
机构
武汉大学人民医院眼科中心
恩施自治州中心医院眼科中心
出处
《国际眼科杂志》
CAS
2017年第3期422-426,共5页
基金
湖北省卫生和计划生育科研项目(No.WJ2015MB194)~~
文摘
目的:应用基因工程技术构建含大鼠β-防御素2(rat beta defensin 2,rBD-2)目的基因的真核重组质粒,通过脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,检测目的基因在转染细胞中的表达,探讨应用该载体获得重组rBD-2在眼表细胞中表达的可行性,并为进一步研究rBD-2的体内外抗微生物活性提供实验基础,以期为感染性角膜病防治提供新方法。方法:将采用PAS(PCR-based Accurate Synthesis)的方法合成rBD-2 DNA片段连接到真核表达载体pI RES2-ZsGreen1的XhoⅠ与BamHⅠ酶切位点之间,构建p IRES2-ZsGreen1-rBD-2真核重组表达载体,重组质粒转化大肠杆菌DH5a感受态细胞,卡那霉素筛选出阳性克隆子,经酶切、测序鉴定重组载体构建成功后,采用脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,此处实验分为三组即重组载体p IRES2-ZsGreen1-rBD-2转染的大鼠角膜上皮细胞组、未转染的空细胞组以及空载体p IRES2-ZsGreen1所转染的大鼠角膜上皮细胞组,在倒置荧光显微镜下观察细胞转染情况,最后经实时荧光定量RT-PCR相对定量法检测各组转染细胞中rBD-2基因mRNA的表达差异。结果:成功构建p IRES2-ZsGreen1-rBD-2真核重组质粒,应用实时荧光定量RT-PCR相对定量法检测到重组质粒p IRES2-ZsGreen1-rBD-2转染组的大鼠角膜上皮细胞中rBD-2基因的mRNA表达水平明显多于另两组。结论:应用基因工程技术构建的rBD-2真核表达载体p IRES2-ZsGreen1-rBD-2,通过脂质体法转染大鼠角膜上皮细胞,能够使外源rBD-2基因在大鼠角膜上皮细胞中被转录成mRNA。
关键词
大鼠β-防御素2
真核表达载体
重组质粒
大鼠角膜上皮细胞
Keywords
rat beta defensin-2
eukaryotic expression vector
recom binant plasmid
rat corneal epithelial cell
分类号
R772.2 [医药卫生—眼科]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗阿尔茨海默病重组真核表达载体的构建
何颖
黄力
章亚男
黎怀星
陈蕊雯
孙树汉
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
下载PDF
职称材料
2
人淋巴毒素基因在中国仓鼠细胞中表达
刘军涛
李昌本
倪铁华
邹益民
赵寿元
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
1991
1
下载PDF
职称材料
3
大鼠β-防御素2真核表达载体构建及转染大鼠角膜上皮细胞的研究
但婧
宋秀胜
杨燕宁
李霞
《国际眼科杂志》
CAS
2017
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部