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Expression and Evaluation of Wb-SXP-1 and Wb-123 Recombinant Antigens as Potential Diagnostic Biomarkers for Lymphatic Filariasis
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作者 Sharlene Kerubo Mageto Rebecca Wanjiku Waihenya +11 位作者 Anne Wanjiru Mwangi Peter Kipkemboi Rotich Matthew Mutinda Munyao Tonny Teya Robinson Mugasiali Irekwa Joanne Jepkemei Yego Caroline Wangui Njoroge Grace Ng’endo Kanyita Nicole Sian Tanchu Dawala Koromtili Oumar Primrose Muthoni Ndungu Samson Muuo Nzou 《American Journal of Molecular Biology》 CAS 2023年第2期95-112,共18页
Lymphatic filariasis (LF) remains a public health concern as it can cause permanent morbidity and disability to those infected. While the global elimination of LF in these endemic areas is ongoing through mass drug ad... Lymphatic filariasis (LF) remains a public health concern as it can cause permanent morbidity and disability to those infected. While the global elimination of LF in these endemic areas is ongoing through mass drug administration, there is the need to develop diagnostic tools that would be utilized to track the progress of total global eradication as well as perform surveillance for the recurrence of lymphatic filariasis transmission. Currently, approved LF diagnosis tools are faced with lack of specificity, low sensitivity, and periodicity dependence. Recombinant filarial antigen-based assays can address these drawbacks and offer practical instruments for LF diagnosis and surveillance. This present study, evaluated rWb-SXP-1 and rWb-123 antigens as potential diagnostic biomarker tools for Wuchereria banchrofti in human sera using microspheres-based multiplex serological assay. Based on statistical analysis using XLSTAT 2019 (Addinsoft) on data generated from multiplex technology assay, generated ROC curves for both rWb-SXP-1 and rWb-123 demonstrated 87.1% sensitivity to Wuchereria banchrofti human sera with rWb-SXP-1 antigens having the highest specificity of 96%. Indication that rWb-SXP-1 and rWb-123 antigens are capable of detecting immunoglobulin G4 (IgG4) antibodies in human sera synthesized specifically against W. banchrofti infections. Therefore, rWb-SXP-1 and rWb-123 antigens can be utilized to detect W. banchrofti infections by antibody profiling with excellent diagnostic sensitivity and specificity using microsphere-based multiplex serological tests. This method can be particularly practical for screening a large number of sera samples and/or for quick, extensive field-testing due to the high-throughput and quick formats applied. 展开更多
关键词 Lymphatic Filariasis recombinant antigens DIAGNOSIS
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经直肠超声联合血清EPCA-2、hK2对前列腺癌的早期诊断价值研究
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作者 张涛 宋新浩 +1 位作者 王小兵 陈争光 《成都医学院学报》 CAS 2024年第4期633-636,共4页
目的探究经直肠超声联合血清早期前列腺癌抗原-2(EPCA-2)、己糖激酶-2(hK2)对前列腺癌的早期诊断价值。方法选取2022年6月至2023年12月在郑州大学第一附属医院确诊的98例前列腺癌患者作为试验组,另选取同期在本院确诊的72例前列腺增生... 目的探究经直肠超声联合血清早期前列腺癌抗原-2(EPCA-2)、己糖激酶-2(hK2)对前列腺癌的早期诊断价值。方法选取2022年6月至2023年12月在郑州大学第一附属医院确诊的98例前列腺癌患者作为试验组,另选取同期在本院确诊的72例前列腺增生患者为对照组。比较两组患者血清EPCA-2、hK2水平;ROC曲线分析经直肠超声联合血清EPCA-2、hK2对前列腺癌的诊断价值。结果与对照组相比,试验组的血清EPCA-2、hK2水平均明显升高(P<0.05);血清EPCA-2、hK2水平对前列腺癌早期诊断的曲线下面积(AUC)分别为0.845、0.869;经直肠超声对前列腺癌早期诊断的AUC为0.836,三者联合诊断的AUC为0.870。结论前列腺癌患者血清EPCA-2、hK2水平均明显上调,经直肠超声联合血清EPCA-2、hK2对前列腺癌早期诊断的准确率明显高于血清EPCA-2、hK2单独诊断,具有更高的诊断效能。 展开更多
关键词 前列腺癌 经直肠超声 早期前列腺癌抗原-2 己糖激酶-2 早期诊断
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脓毒症合并2型糖尿病患者单核细胞人白细胞DR抗原的表达水平分析
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作者 贾育梅 赵永祯 梅雪 《中国中西医结合急救杂志》 CAS CSCD 2024年第1期14-19,共6页
目的观察2型糖尿病(T2DM)对脓毒症患者外周血单核细胞表面人白细胞DR抗原(HLA-DR)表达水平的影响。方法选取首都医科大学附属北京朝阳医院2021年3月至2022年2月收治的65例脓毒症合并T2DM(脓毒症合并T2DM组)、67例脓毒症未合并T2DM(脓毒... 目的观察2型糖尿病(T2DM)对脓毒症患者外周血单核细胞表面人白细胞DR抗原(HLA-DR)表达水平的影响。方法选取首都医科大学附属北京朝阳医院2021年3月至2022年2月收治的65例脓毒症合并T2DM(脓毒症合并T2DM组)、67例脓毒症未合并T2DM(脓毒症组)、60例T2DM患者(T2DM组)作为研究对象,以45例同期本院健康体检志愿者作为健康对照组。收集受试者性别、年龄、既往史、糖化血红蛋白(HbAlc)、入院时血糖、白细胞计数(WBC)淋巴细胞计数(LYM)超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、主要感染部位,入院24h内进行序贯器官衰竭评分(SOFA)。采用流式细胞术检测外周血HLA-DR+CD14^(+)细胞表达百分比及平均荧光强度(MFI);并随访28d,观察T2DM对脓毒症患者28d预后的影响,比较不同预后患者HLA-DR^(+)CD14^(+)水平的差异。结果T2DM组HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比和MFI均明显低于健康对照组[HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比:87.72%(76.18%,93.64%)比94.86%(92.91%,95.70%),HLA-DR^(+)CD14^(+)MFI:10.80(8.45,14.45)比12.40(1.45,15.28)],脓毒症合并T2DM组和脓毒症组HLA-DRCD14^(+)细胞表达百分比和MFI均较健康对照组及T2DM组进一步降低[HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比:70.78%(42.22%,84.73%)、68.95%(44.95%,87.00%)比94.86%(92.91%,95.70%)、87.72%(76.18%,93.64%),HLA-DR^(+)CD14^(+)MFI:5.50(3.81,9.20)、5.29(3.35,9.59)比12.40(1.45,15.28)、10.80(8.45,14.45),均P<0.05]。脓毒症组和毒症合并T2DM组两组HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比和MFI、SOFA评分、28d病死率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。脓毒症组和脓毒症合并T2DM组死亡者的年龄明显大于生存者[岁:脓毒症组为68(60,74)比61(52,69),脓毒症合并T2DM组为66(64,73)比60(53,68),均P<0.05],SOFA评分明显高于生存者[分:脓毒症组为14(11,16)比8(5,11),脓毒症合并T2DM组为12(9,16)比8(6,11),均P<0.05],死亡组的HLA-DR^(+)CD14^(+)百分比和HLA-DR^(+)CD14^(+)MFI均明显低于生存组[HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比:脓毒症组为44.94%(28.01%,64.45%)比77.14%(47.41%,88.35%),脓毒症合并T2DM组为40.68%(34.83%,66.64%)比73.46%(58.44%,85.31%);HLA-DR^(+)CD14^(+)MFI:脓毒症组为3.92(2.30,5.44)比7.07(3.39,10.55),脓毒症合并T2DM组为3.90(3.34,6.04)比6.81(4.41,9.32),均P<0.05]。相关性分析显示:T2DM组、脓毒症组和脓毒症合并T2DM组HLA-DR^(+)CD14^(+)细胞表达百分比与hs-CRP均呈负相关(r值分别为-0.448、-0.628、-0.457,均P<0.001),MFI与hs-CRP亦呈负相关(r值分别为-0.289、-0.540、-0.323,均P<0.05)。脓毒症组和脓毒症合并T2DM组的HLA-DR^(+)CD14^(+)百分比与SOFA评分均呈负相关(r值分别为-0.520、-0.558,均P<0.001),MFI与SOFA评分也均呈负相关(r值分别为-0.327、-0.482,均P<0.01)。结论仑HLA-DR^(+)CD14^(+)水平在T2DM和脓毒症时均下降,但当脓毒症合并T2DM时,HLA-DR+CD14^(+)水平未发现进一步下降。 展开更多
关键词 脓毒症 2型糖尿病 单核细胞 人白细胞DR抗原
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密码子优化的RHDV2双VP60基因重组杆状病毒构建及表达蛋白免疫原性分析
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作者 于吉锋 谢晶 +8 位作者 黄勇 肖璐 林毅 曹冶 叶勇刚 魏勇 吴学婧 李江凌 康润敏 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期668-677,共10页
[目的]试验旨在优化兔出血症病毒2型(Rabbit hemorrhagic disease virus 2,RHDV2)病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)疫苗的制备策略,探究RHDV2 VLP疫苗对家兔的免疫原性,为低成本、高产量RHDV2新型疫苗研发提供新思路。[方法]根据... [目的]试验旨在优化兔出血症病毒2型(Rabbit hemorrhagic disease virus 2,RHDV2)病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)疫苗的制备策略,探究RHDV2 VLP疫苗对家兔的免疫原性,为低成本、高产量RHDV2新型疫苗研发提供新思路。[方法]根据昆虫细胞的密码子偏好性优化合成RHDV2 VP60全基因,将双VP60基因插入真核载体pFastBacTMDual,转化携带Bacmid质粒的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,构建含双VP60基因的重组杆粒Bacmid-VP60-VP60,转染Sf9昆虫细胞,通过Western blotting、间接免疫荧光试验(IFA)及透射电镜对重组杆状病毒Bacmid-VP60-VP60进行表达验证;将优化策略制备的重组蛋白抗原与氢氧化铝佐剂按照9∶1比例制备VLP灭活疫苗,通过安全性检验、最小免疫剂量、免疫持续期等评估优化策略制备的RHDV2 VLP疫苗的保护效果。[结果]试验成功构建重组杆粒Bacmid-VP60-VP60。Western blotting鉴定结果显示,重组杆状病毒转染Sf9细胞表达出大小约60 ku的RHDV2 VP60蛋白。IFA鉴定结果显示,感染重组杆状病毒的Sf9细胞产生了大量的黄绿色荧光,表明重组杆状病毒在Sf9细胞中大量表达VP60蛋白。透射电镜观察结果显示,VP60蛋白折叠成VLP,大小为40 nm左右,呈现球形结构,表面光滑。优化策略制备的RHDV2 VLP疫苗对家兔具有良好的安全性和免疫原性,最小免疫剂量为0.5 mL/只,免疫持续期可达210 d以上。[结论]试验构建了含有密码子优化的双VP60基因的重组杆状病毒,并在昆虫细胞中成功表达RHDV2 VP60蛋白,该蛋白制备的VLP疫苗对家兔具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 兔出血症病毒2型(RHDV2) 病毒样颗粒(VLP) 密码子偏好性 重组杆状病毒 免疫原性
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PCNA、Bcl-2及EGFR在喉癌组织中的表达及与临床病理特征、生存的关系 被引量:1
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作者 黄海平 李佳宸 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第2期76-82,共7页
目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及表皮生长因子受体(EGFR)在喉癌组织中的表达及与临床病理特征、生存的关系。方法选取2017年3月—2020年1月在苏州大学附属第一医院因喉癌行手术治疗的92例患者的喉癌组织及对应癌... 目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及表皮生长因子受体(EGFR)在喉癌组织中的表达及与临床病理特征、生存的关系。方法选取2017年3月—2020年1月在苏州大学附属第一医院因喉癌行手术治疗的92例患者的喉癌组织及对应癌旁组织标本。检测癌组织与癌旁组织PCNA mRNA、Bcl-2mRNA、EGFR mRNA相对表达量,多元线性回归分析其癌组织表达与临床病理特征的关系。随访3年,采用Kaplain-Maier曲线分析不同PCNA、Bcl-2、EGFR表达水平患者生存情况差异。结果癌组织PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA、EGFR mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05)。不同年龄、肿瘤部位患者PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA、EGFR mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);低分化,临床分期Ⅲ、Ⅳ期及淋巴结转移患者PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA、EGFR mRNA相对表达量分别高于中、高分化,临床分期Ⅰ、Ⅱ期,无淋巴结转移患者(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移是喉癌组织PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA、EGFR mRNA表达的影响因素。Kaplain-Maier曲线分析结果显示,PCNA mRNA高表达患者3年无进展生存率、总生存率分别为59.57%和70.21%,低于低表达患者的80.00%和88.89%(P<0.05);Bcl-2 mRNA高表达患者3年无进展生存率、总生存率分别为60.78%和70.59%,低于低表达患者的80.49%和90.24%(P<0.05);EGFR mRNA高表达患者3年无进展生存率、总生存率分别为59.09%和70.45%,低于低表达患者的79.17%、87.50%(P<0.05)。结论喉癌组织PCNA、Bcl-2、EGFR呈高表达,且其高表达状态与肿瘤分期高、分化程度低、淋巴结转移有关,PCNA、Bcl-2、EGFR表达水平可在一定程度上反映患者预后。 展开更多
关键词 喉癌 临床病理 生存率 增殖细胞核抗原 B淋巴细胞瘤-2 表皮生长因子受体
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EBNA2免疫组化在EB病毒阳性淋巴组织疾病中的表达意义
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作者 张燕林 贺文 +3 位作者 谢建兰 郑晓丹 郑媛媛 周小鸽 《诊断病理学杂志》 2024年第4期300-303,共4页
目的观察EBNA2免疫组化在不同EB病毒阳性淋巴组织疾病中的表达差异、分析其在病理诊断与鉴别诊断中的价值。方法收集344例EB病毒阳性的淋巴组织疾病,总结EBNA2免疫组化在病变中的表达特点。结果不同的EBV阳性淋巴组织病变,EBNA2的阳性... 目的观察EBNA2免疫组化在不同EB病毒阳性淋巴组织疾病中的表达差异、分析其在病理诊断与鉴别诊断中的价值。方法收集344例EB病毒阳性的淋巴组织疾病,总结EBNA2免疫组化在病变中的表达特点。结果不同的EBV阳性淋巴组织病变,EBNA2的阳性表达不同:IM中阳性39例(39/46),EBV阳性的弥漫大B细胞淋巴瘤3例(3/30),淋巴瘤样肉芽肿1例(1/5),纤维素相关弥漫大B细胞淋巴瘤2例(2/2),浆母细胞淋巴瘤1例(1/14),免疫相关淋巴组织增殖性疾病32例(32/58)(包括移植后淋巴组织增殖性疾病21例,HIV相关Burkitt淋巴瘤1例,HIV相关弥漫大B细胞淋巴瘤2例,原发免疫缺陷疾病相关淋巴组织疾病6例,医源性免疫相关淋巴组织增殖性疾病2例)。其余均显示EBNA2阴性。②不同病变中的EBNA2阳性细胞表达明显不同:传染性单核细胞增多症中的EBNA2阳性细胞相对较少,并且多呈散在分布,几乎很少见到簇状聚集的情况。EBNA2阳性细胞多表现为≤10个/HPF,少见11~50个/HPF,仅有个别病例显示大于50个/HPF。免疫相关淋巴组织增殖性疾病中,出现大量EBNA2阳性细胞,阳性细胞较弥漫分布,大部分为强阳性,并且阳性细胞多显示大于50个/HPF。结论EBNA2阳性在疾病的诊断及鉴别诊断提供了新的依据,具有一定的价值;当病变表达EBNA2时,提示患者可能存在免疫缺陷或处于免疫失调状态,对临床诊断及治疗具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 EB病毒 淋巴组织疾病 传染性单核细胞增多症 EBV核抗原2
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重组贻贝粘蛋白在点阵CO_(2)激光治疗面部痤疮萎缩性瘢痕术后创面修复中的应用研究
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作者 陈日新 裴理皓 +1 位作者 许丛丛 司佳薇 《中国美容医学》 CAS 2024年第7期11-14,共4页
目的:探究重组贻贝粘蛋白水凝胶敷料(Recombined mussel adhesive protein hydrogel dressing,Rmaphd)在点阵CO_(2)激光治疗面部痤疮萎缩性瘢痕术后创面修复中的应用效果。方法:选择2022年6月-2023年2月面部痤疮萎缩性瘢痕患者117例,分... 目的:探究重组贻贝粘蛋白水凝胶敷料(Recombined mussel adhesive protein hydrogel dressing,Rmaphd)在点阵CO_(2)激光治疗面部痤疮萎缩性瘢痕术后创面修复中的应用效果。方法:选择2022年6月-2023年2月面部痤疮萎缩性瘢痕患者117例,分为Rmaphd组、重组人表皮生长因子(Recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)组和对照组,每组39例,三组均给予点阵CO_(2)激光术治疗,术后分别给予Rmaphd、rhEGF及生理盐水处理,比较三组疗效、ECCA评分、症状持续时间以及生活质量评分。结果:Rmaphd组和rhEGF组总有效率分别为92.31%和94.87%,均高于对照组76.92%(P<0.05),术后ECCA评分低于对照组(P<0.05),术后疼痛、红斑、痂皮持续时间短于对照组(P<0.05),Acne-QoL各指标得分优于对照组(P<0.05);上述各临床Rmaphd组与rhEGF组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Rmaphd用于点阵CO_(2)激光治疗面部痤疮萎缩性瘢痕术后创面修复疗效显著,具备在临床上辅助激光治疗术后修复的应用潜力。 展开更多
关键词 重组贻贝粘蛋白 水凝胶敷料 点阵CO_(2)激光 痤疮 瘢痕 创面 修复
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乳腺癌患者HER2、CA153表达与声触诊组织成像定量技术参数的相关性分析
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作者 丁颖 李家菊 王国亮 《中国医学装备》 2024年第3期78-81,107,共5页
目的:分析乳腺癌患者人表皮生长因子受体2(HER2)、糖类抗原153(CA153)表达与声触诊组织成像定量(VTIQ)技术参数的相关性。方法:选取2018年5月至2020年5月合肥市第三人民医院收治的80例女性乳腺癌患者,其中世界卫生组织(WHO)分期Ⅰ期14... 目的:分析乳腺癌患者人表皮生长因子受体2(HER2)、糖类抗原153(CA153)表达与声触诊组织成像定量(VTIQ)技术参数的相关性。方法:选取2018年5月至2020年5月合肥市第三人民医院收治的80例女性乳腺癌患者,其中世界卫生组织(WHO)分期Ⅰ期14例、Ⅱ期22例、Ⅲ期31例、Ⅳ期13例;另选取同时间段收治的53例女性乳腺良性疾病患者为对照。所有患者先行常规超声检查,随后进入超声VTIQ成像模式获得剪切波速度(SWV)均值参数;采用免疫组织化学法检测乳腺组织中HER2表达,采用罗氏E411电化学发光免疫分析仪检测血清CA153水平;采用Pearson法分析乳腺癌患者血清CA153水平与SWV均值的相关性。结果:与良性患者比较,乳腺癌患者VTIQ技术参数SWV均值、血清CA153水平及HRR2阳性表达率均显著升高,差异有统计学意义(F=39.107,78.353,P<0.05);与乳腺癌Ⅰ+Ⅱ期患者比较,乳腺癌Ⅲ、Ⅳ期患者VTIQ技术参数SWV均值、血清CA153水平、HRR2阳性表达率均显著升高,差异有统计学意义(t=2.685、3.556、8.326、10.455,P<0.05);与乳腺癌Ⅲ期比较,乳腺癌Ⅳ期患者VTIQ技术参数SWV均值、血清CA153水平、HRR2阳性表达率均显著升高,差异有统计学意义(t=4.632、8.659,P<0.05)。与HER2阴性表达乳腺癌患者SWV均值比较,HER2阳性表达乳腺癌患者SWV均值升高,差异有统计学意义(χ^(2)=59.751,P<0.05)。乳腺癌患者血清CA153水平与SWV均值呈正相关(r=0.501,P<0.05)。结论:乳腺癌患者VTIQ参数SWV均值与乳腺癌患者生物标志物HER2、CA153表达水平密切相关。 展开更多
关键词 乳腺癌 声触诊组织成像定量技术 人表皮生长因子受体2(HER2) 糖类抗原153(CA153)
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血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2/Bax与颈动脉粥样硬化斑块破裂所致脑梗死的关系及联合检测价值
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作者 代建霞 刘媛 于媛媛 《脑与神经疾病杂志》 CAS 2024年第6期336-341,共6页
目的 探讨血清沉默信息调节蛋白1 (SIRT1)、衰老关键蛋白抗原-5 (Fibulin-5)、B淋巴细胞瘤基因-2(Bcl-2)/B淋巴细胞瘤基因-2相关X蛋白(Bax)与颈动脉粥样硬化(CAS)斑块破裂所致脑梗死(ACI)的关系及联合检测价值。方法 选取新疆维吾尔自... 目的 探讨血清沉默信息调节蛋白1 (SIRT1)、衰老关键蛋白抗原-5 (Fibulin-5)、B淋巴细胞瘤基因-2(Bcl-2)/B淋巴细胞瘤基因-2相关X蛋白(Bax)与颈动脉粥样硬化(CAS)斑块破裂所致脑梗死(ACI)的关系及联合检测价值。方法 选取新疆维吾尔自治区人民医院2021年1月至2023年2月CAS斑块破裂所致ACI患者98例作为研究组,另选取同期CAS斑块未破裂患者98例作为对照组,比较两组血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2、Bax水平,分析各血清指标对CAS斑块破裂所致ACI风险的影响及与病情的关系,并评价各血清学指标单独及联合预测CAS斑块破裂所致ACI的价值。结果 研究组血清SIRT1、Bcl-2水平低于对照组,Fibulin-5、Bax水平高于对照组(P<0.05);大面积梗死(MCI)患者血清SIRT1、Bcl-2水平<小面积梗死患者<腔隙性梗死(LI)患者,Fibulin-5、Bax水平>小面积梗死患者> LI患者(P<0.05);重度神经功能缺损患者血清SIRT1、Bcl-2水平<中度神经功能缺损患者<轻度神经功能缺损患者,Fibulin-5、Bax水平>中度神经功能缺损患者>轻度神经功能缺损患者(P<0.05);血清SIRT1、Bcl-2低水平患者CAS斑块破裂所致ACI风险是高水平患者的2.311倍、2.921倍,Fibulin-5、Bax高水平患者CAS斑块破裂所致ACI风险是低水平患者的3.470倍、3.184倍(P<0.05);血清SIRT1、Bcl-2与梗死面积、神经功能缺损程度呈负相关,Fibulin-5、Bax与梗死面积、神经功能缺损程度呈正相关(P<0.05);血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2、Bax预测CAS斑块破裂所致ACI的AUC分别为0.716 (95%CI:0.648~0.778)、0.796 (95%CI:0.733~0.850)、0.728 (95%CI:0.660~0.789)、0.763 (95%CI:0.698~0.821),联合预测CAS斑块破裂所致ACI的AUC为0.909 (95%CI:0.860~0.945),优于各血清指标单独预测。结论 血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2/Bax与CAS斑块破裂所致ACI及其病情程度密切相关,联合预测价值可靠,对临床开展防治工作具有指导意义。 展开更多
关键词 颈动脉粥样硬化斑块 脑梗死 沉默信息调节蛋白1 衰老关键蛋白抗原-5 B淋巴细胞瘤基因-2 B淋巴细胞瘤基因-2相关X蛋白
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小剂量重组人白细胞介素-2维持治疗对肿瘤患儿免疫细胞亚群的影响
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作者 雷嘉颖 黎阳 +6 位作者 李春谋 熊稀霖 冯楚础 翁文骏 彭晓敏 周敦华 黄科 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期445-449,共5页
目的:探讨小剂量重组人白介素-2(r IL-2)维持治疗对恶性实体肿瘤患儿免疫细胞亚群的影响及相关副反应。方法:选取2012年12月-2017年11月在本科治疗的22例肿瘤患儿,男女各11例,开始IL-2治疗的中位年龄9(3-16)岁,给予小剂量r IL-2免疫治... 目的:探讨小剂量重组人白介素-2(r IL-2)维持治疗对恶性实体肿瘤患儿免疫细胞亚群的影响及相关副反应。方法:选取2012年12月-2017年11月在本科治疗的22例肿瘤患儿,男女各11例,开始IL-2治疗的中位年龄9(3-16)岁,给予小剂量r IL-2免疫治疗前均完成全部手术及放化疗,其中完全缓解17例,部分缓解5例。化疗结束1个月后开始使用rIL-2小剂量维持治疗:4×10^(5)IU/(m^(2)·d),隔日皮下注射,每周3次,共1年。每3个月行免疫细胞亚群检测至治疗终止,同时随访患儿病情转归及治疗相关副反应。结果:22例患儿经r IL-2治疗后外周血T淋巴细胞(CD3^(+))、自然杀伤细胞(CD3-CD56^(+))、辅助性T细胞(CD3^(+)CD4^(+))、杀伤性T细胞(CD3^(+)CD8^(+))的绝对值及辅助T细胞/抑制T细胞比例均显著升高(均P<0.05),而调节性T细胞(CD4^(+)CD25^(+)CD127^(-))治疗前后的绝对值及比例无显著性差异(P>0.05)。在治疗前获得完全缓解的17例患儿中,14例在治疗后继续保持完全缓解,3例复发,其中2例放弃治疗后死亡;治疗前获得部分缓解的5例患儿经治疗后行PET/CT扫描后评估为完全缓解。在小剂量r IL-2免疫治疗初期,出现注射部位皮疹1例,注射后低至中度一过性发热2例,均给予对症处理后消失,未见治疗相关器官功能损害。结论:小剂量r IL-2维持治疗耐受性良好,可显著改善肿瘤患儿外周血部分抗肿瘤免疫细胞亚群的分布,且不会导致调节性T细胞绝对值及比例的升高。 展开更多
关键词 重组人白介素2 儿童 实体瘤 免疫细胞 调节性T细胞
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Use of recombinant human bone morphogenetic protein-2 in spine surgery 被引量:5
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作者 Marios Lykissas Ioannis Gkiatas 《World Journal of Orthopedics》 2017年第7期531-535,共5页
Bone morphogenetic proteins are osteoinductive factors which have gained popularity in orthopaedicsurgery and especially in spine surgery. The use of recombinant human bone morphogenetic protein-2 has been officially ... Bone morphogenetic proteins are osteoinductive factors which have gained popularity in orthopaedicsurgery and especially in spine surgery. The use of recombinant human bone morphogenetic protein-2 has been officially approved by the United States Food and Drug Administration only for single level anterior lumbar interbody fusion, nevertheless it is widely used by many surgeons with off-label indications. Despite advantages in bone formation, its use still remains a controversial issue and several complications have been described by authors who oppose their wide use. 展开更多
关键词 recombinant human BONE morphogenetic protein-2 SPINE FUSION BONE GRAFT Yale UNIVERSITY Open Data project
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FOXP3在BRCA1/2突变乳腺癌中的表达及临床意义
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作者 陈琳茜 胡丽 +4 位作者 陈久安 姚璐 张娟 徐晔 解云涛 《肿瘤防治研究》 CAS 2024年第7期561-566,共6页
目的探讨BRCA1/2突变乳腺癌FOXP3表达情况及潜在意义。方法选取北京大学肿瘤医院48例BRCA突变者(BRCA116例,BRCA232例)和78例年龄匹配的非突变者,采用免疫组织化学检测乳腺癌组织FOXP3的表达情况。为验证免疫组织化学结果,分析TCGA-BRCA... 目的探讨BRCA1/2突变乳腺癌FOXP3表达情况及潜在意义。方法选取北京大学肿瘤医院48例BRCA突变者(BRCA116例,BRCA232例)和78例年龄匹配的非突变者,采用免疫组织化学检测乳腺癌组织FOXP3的表达情况。为验证免疫组织化学结果,分析TCGA-BRCA中39例BRCA1、36例BRCA2和948例非携带者乳腺癌的FOXP3 RNA表达水平及其与同源重组缺陷评分的关系。结果在BRCA1突变者中FOXP3阳性率43.8%(7/16),BRCA2突变者为59.4%(19/32),非携带者为9.0%(7/78)。BRCA1/2突变患者FOXP3阳性率均显著高于非突变者(P=0.002;P<0.001)。TCGA-BRCA结果显示,BRCA1/2突变乳腺癌的FOXP3 RNA水平也显著高于非携带者(P=0.02,P=0.004)。FOXP3 RNA水平与同源重组缺陷评分正相关(Spearman R=0.30,P<2.2e-16)。结论BRCA1/2突变乳腺癌较非突变者FOXP3表达更高,可能对免疫治疗更敏感。 展开更多
关键词 BRCA1/2突变 乳腺癌 FOXP3 同源重组修复缺陷
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猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的初步建立
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作者 严杰聪 王帅勇 +11 位作者 王曼茱 王娟 荣新利 邢燕茹 虞凌雪 周艳君 单同领 童武 郑浩 刘长龙 童光志 于海 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期79-84,共6页
Cap蛋白作为猪圆环病毒2型(PCV2)的主要结构蛋白,构成病毒的核衣壳,是PCV2的主要免疫保护性抗原,在PCV2血清学诊断中具有重要意义。本研究根据PCV2的ORF2基因序列设计特异性引物,通过PCR方法扩增得到去核定位信号肽的ORF2基因,并通过同... Cap蛋白作为猪圆环病毒2型(PCV2)的主要结构蛋白,构成病毒的核衣壳,是PCV2的主要免疫保护性抗原,在PCV2血清学诊断中具有重要意义。本研究根据PCV2的ORF2基因序列设计特异性引物,通过PCR方法扩增得到去核定位信号肽的ORF2基因,并通过同源重组将其克隆至原核表达载体pCold-Ⅰ中,经测序鉴定成功获得重组质粒pCold-Ⅰ-Cap。将重组质粒转化至感受态细胞BL21中进行表达,通过考马斯亮蓝染色以及免疫印迹试验检测Cap蛋白的表达,同时将纯化后的重组蛋白通过优化反应条件建立检测PCV2血清抗体的间接ELISA方法。结果表明:重组去核定位信号肽Cap蛋白可溶性表达且可以与PCV2阳性血清特异性结合,通过探索不同蛋白包被浓度以及不同一抗孵育浓度初步建立了间接ELISA检测方法,进而为PCV2抗体的有效监测奠定基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2 CAP蛋白 同源重组 表达纯化 ELISA
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玻璃体内注射原纤维蛋白-2(FBN2)重组蛋白对FBN2缺陷型视网膜病变的影响
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作者 张瑞雪 蒋文君 +3 位作者 郭大东 石永伟 毕宏生 温莹 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第6期428-432,共5页
目的探讨玻璃体内注射原纤维蛋白-2(FBN2)重组蛋白对FBN2缺陷型视网膜病变的影响。方法取SPF级C57BL/6J小鼠32只,随机分为4组:正常对照组、阴性对照组、FBN2敲减组、FBN2重组蛋白组,每组8只小鼠,取右眼作为实验眼。入组后,正常对照组小... 目的探讨玻璃体内注射原纤维蛋白-2(FBN2)重组蛋白对FBN2缺陷型视网膜病变的影响。方法取SPF级C57BL/6J小鼠32只,随机分为4组:正常对照组、阴性对照组、FBN2敲减组、FBN2重组蛋白组,每组8只小鼠,取右眼作为实验眼。入组后,正常对照组小鼠不进行干预,阴性对照组小鼠玻璃体内注射3μL空载体(1 mg·L^(-1)),FBN2敲减组及FBN2重组蛋白组小鼠玻璃体内注射3μL腺相关病毒(AAV)(1 mg·L^(-1)),4周后FBN2重组蛋白组小鼠玻璃体内注射3μL FBN2重组蛋白(1 mg·L^(-1))。采用视网膜电图(ERG)视觉电生理仪和光学相干断层扫描(OCT)仪分别检测小鼠视网膜Rod-b、Max-a波振幅和视网膜结构变化;RT-PCR、Western blot检测小鼠视网膜中FBN2、微原纤维相关糖蛋白(MAGP-2)、Ⅰ型胶原蛋白(COL1)mRNA和蛋白表达变化。结果ERG检测结果显示,与阴性对照组和正常对照组相比,FBN2敲减组和FBN2重组蛋白组小鼠视网膜ERG Rod-b、Max-a波振幅均变小(均为P<0.05);与FBN2敲减组相比,FBN2重组蛋白组视网膜ERG Rod-b、Max-a波振幅均明显增加(均为P<0.05)。OCT检测结果显示,与FBN2敲减组相比,FBN2重组蛋白组小鼠视网膜色素上皮层组织结构恢复正常,光反射变规则。RT-PCR检测结果显示,与FBN2敲减组相比,FBN2重组蛋白组小鼠视网膜组织FBN2 mRNA表达明显升高,COL1、MAGP-2 mRNA表达均明显降低(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,与FBN2敲减组相比,FBN2重组蛋白组小鼠视网膜组织FBN2蛋白表达明显升高,COL1、MAGP-2蛋白表达均明显降低(均为P<0.05)。结论玻璃体内注射FBN2重组蛋白可以弥补FBN2缺陷型视网膜病变小鼠FBN2内源性缺失,通过调控COL1、MAGP-2表达可达到治疗疾病的作用。 展开更多
关键词 原纤维蛋白-2 重组蛋白 视网膜病变 微原纤维相关糖蛋白-2 Ⅰ型胶原蛋白
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SARS-CoV-2重组痘苗病毒疫苗rVTT△TK-RBD的构建、筛选及免疫原性研究
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作者 赵仁双 朱羿龙 +10 位作者 尚超 韩继成 刘子睿 修志儒 李善智 李雅茹 杨霞 李霄 金宁一 金鑫 李一权 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期19-25,共7页
目的 构建重组痘苗病毒载体疫苗rVTT△TK-RBD,并评价其安全性和免疫原性。方法 参考严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)基因序列合成受体结合域(RBD)基因,并将其插入自主构建的重组质粒pSTKE的多克隆位点上,构建重组痘苗病毒穿梭... 目的 构建重组痘苗病毒载体疫苗rVTT△TK-RBD,并评价其安全性和免疫原性。方法 参考严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)基因序列合成受体结合域(RBD)基因,并将其插入自主构建的重组质粒pSTKE的多克隆位点上,构建重组痘苗病毒穿梭载体pSTKE-RBD,并转染到预先感染天坛株痘苗病毒(VTT)的BHK-21细胞内,经多轮的荧光噬斑筛选成功获得重组痘苗病毒rVTT△TK-RBD;通过滴鼻方式免疫小鼠后,检测rVTT△TK-RBD对BALB/c小鼠体质量的影响;通过肌肉免疫小鼠后,分析rVTT△TK-RBD对BALB/c小鼠产生的特异性抗体和中和抗体的水平;通过流式细胞术检测rVTT△TK-RBD对BALB/c小鼠T细胞亚群的影响。结果 利用同源重组、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)筛选标记和多次荧光噬斑筛选,成功筛选获得了表达RBD的胸腺激酶(TK)基因缺失型重组痘苗病毒rVTT△TK-RBD,且PCR验证成功。BALB/c小鼠体内实验表明rVTT△TK-RBD具有较好的抗SARS-CoV-2的免疫原性且相比于亲本株VTT明显降低了对机体的毒性作用。结论 成功构建并获得SARS-CoV-2重组痘苗病毒疫苗rVTT△TK-RBD并通过各项试验证明其安全性和免疫原性。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) 天坛株痘苗病毒 TK基因 同源重组
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Association of Haplotypes in Exon 4 of KLK2 Gene with Raised Serum Prostate-Specific Antigen
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作者 Innocent S. I. Ogbu Ogochukwu A. Nwankwo +4 位作者 Chinemere C. Ogbu Emmanuel Nna Kingsley K. Anya Malachy O. Odoh David C. Obasi 《American Journal of Molecular Biology》 CAS 2023年第1期57-66,共10页
The standard diagnostic modalities for Prostate Cancer (PC) include serum Prostate-Specific Antigen (PSA) assay, Digital Rectal Examination (DRE), and histological examination of prostate biopsy. They are limited by l... The standard diagnostic modalities for Prostate Cancer (PC) include serum Prostate-Specific Antigen (PSA) assay, Digital Rectal Examination (DRE), and histological examination of prostate biopsy. They are limited by low predictive potential and inability to predict which patients are at risk of developing metastatic disease. The aim of this study is to investigate the exon 4 of the KLK2 gene of subjects for changes in its nucleotide sequences (SNPs) and determine the correlation of these changes with serum PSA in an Igbo population of Nigeria. One hundred male subjects aged 40 years and above, who gave their consent, were used for the study. Their PSA determinations were done using ELISA technique while genetic studies were carried out using real-time PCR. tPSA, fPSA, and % fPSA of the subjects ranged between 0.8% - 18.30%, 0.10% - 1.60% and 0.0% - 0.7% respectively. Of the 100 subjects, 28 subjects had tPSA levels above 4.0 ng/ml with a mean of 7.10 (±3.30) ng/ml. Those with tPSA less than 4 ng/ml had a mean of 1.87 (±0.85) ng/m. 15 subjects showed SNPs with a mean tPSA of 6.87 (±4.82) ng/ml while the remaining 85 subjects without SNPs had a mean of 1.86 (±0.80) ng/ml. Results from direct DNA sequencing showed 11 SNPs. Ten subjects are curated in SNP database while one is uncurated. The Chi-square test showed significant association (p = 0.00) between tPSA levels and SNPs mutation (X<sup>2</sup> = 17.35, p = 0.00). A Kruskal-Wallis test demonstrated that the positional arrangement of the SNP mutations had no effect on PSA-total or free-values (H (10) = 10.92, p = 0.28;H (10) = 10.07, p = 0.38 respectively). Two SNPs: rs6072 and rs74478031 were associated with elevated PSA levels (p < 0.05). Their presence, therefore, has the potential to serve, in conjunction with raised PSA, as biomarkers of prostate cancer in the study population. 展开更多
关键词 Prostate Cancer Prostate-Specific antigen Kallikrein 2 Gene Genetic Mutations Haplotypes Short Nucleotidepolymorphism
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Enzyme-Linked Immunosorbent Assays Using the Recombinant gp51 and p24 of Bovine Leukemia Virus for Immunodetection of the Disease 被引量:1
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作者 Alejandra Larsen Santiago Corva +2 位作者 Javier Panei Christoph Geisler Eduardo Mortola 《Open Journal of Animal Sciences》 2017年第3期241-253,共13页
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is often used to test bovine leukemia virus (BLV) infection. However, commercially available kits test in South America detect only antibodies against the gp51 protein. With t... Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is often used to test bovine leukemia virus (BLV) infection. However, commercially available kits test in South America detect only antibodies against the gp51 protein. With the aim to improve the sensitivity of the test, we developed here a two-step indirect dual ELISA test that included both proteins p24 and gp51, expressed and produced in E. coli and baculovirus expression system respectively. Two hundred ten BLV sera, stated as double positive or double negative by the combination of commercial agar gel immunodiffusion (AGID) assay and a gp51-ELISA test, were tested with our in house dual rp24/rgp51 ELISA. Firstly, we checked the purified, optimized and standardized proteins as antigen by the checkerboard technique, and set up our in house ELISA test. The concordance correlation coefficient (CCC) and coefficient of variation (CV) intraplate repeatability levels were within the values established by the international standards. The statistical analysis demonstrated the value of sera correctly ranked highest (93.48%), and for 0.3 cutoff, the sensitivity was 95.65% and the specificity 91.30%. In conclusion, the rp24/rgp51 ELISA developed and standardized here demonstrated to have good analytical characteristics to be considered for screening of BLV. 展开更多
关键词 BOVINE LEUKEMIA Virus Indirect Dual ELISA recombinant antigenS
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表达PCV2 ORF2的重组T7噬菌体在猪体内的存留分析
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作者 杨柳 牟豪 +5 位作者 吕林丹 胡霞 许国洋 郑华 张邑帆 沈克飞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期38-43,共6页
为了检测经颈部肌肉注射入猪体的、表达猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白(ORF2)的重组T7噬菌体(T7-ORF2)在体内的存留情况,本试验将PCV2抗原和抗体均为阴性的20日龄仔猪随机分为试验组和对照组,每组5只;试验组猪只以1.5mL/只剂量颈部肌肉注... 为了检测经颈部肌肉注射入猪体的、表达猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白(ORF2)的重组T7噬菌体(T7-ORF2)在体内的存留情况,本试验将PCV2抗原和抗体均为阴性的20日龄仔猪随机分为试验组和对照组,每组5只;试验组猪只以1.5mL/只剂量颈部肌肉注射增殖收获的T7-ORF2,对照组猪只以相同途径注射等体积的洗脱液;于注射前1 d、注射后10 h、1~7 d测量体温,观察猪只的临床症状和死亡情况;分别于注射后1 h、3 h、5 h、10 h、1 d、3 d、5 d和7 d采集猪只的血液和粪便样品,注射后10 h、1 d、3 d、5 d和7 d采集肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结样品;将收集的各样品处理上清与宿主菌(大肠埃希菌BLT5403株)混合培养,通过细菌裂解分析T7-ORF2的感染性;以细菌裂解液提取的基因组DNA为模板进行PCR,检测ORF2基因;通过免疫组织化学检测T7-ORF2在肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结中的分布和存留时间。结果显示,试验组猪只在试验期体温、采食、饮水和精神状态正常,无不良症状和死亡发生;注射后5 d能从血清和粪便中检测到感染性的T7-ORF2;注射后3 d能从肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结中检测到感染性的T7-ORF2;从细菌裂解液中可扩增检测到PCV2 ORF2基因片段;免疫组织化学切片观察结果显示,T7-ORF2在机体中逐渐被清除,在脾脏中存留至少5 d,在肝脏和腹股沟淋巴结中存留至少7 d。结果表明,T7-ORF2可进入猪只的血液循环、肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结中,并随粪便排出体外。本试验为利用T7-ORF2深入开发PCV2新型疫苗提供数据支撑。 展开更多
关键词 重组T7噬菌体 猪圆环病毒2型(PCV2) 肌肉注射 检测 疫苗
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大肠杆菌合成2'-岩藻糖基乳糖基因组整合型菌株构建及发酵优化
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作者 劳才文 吴金勇 +5 位作者 李忠奎 廖迎雪 王纪 袁丽霞 陈祥松 姚建铭 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2024年第1期124-131,共8页
2’-岩藻糖基乳糖(2’-Fucosyllactose,2’-FL)是一种岩藻糖化人乳低聚糖,具有预防肠道疾病、提高免疫力、促进大脑发育等重要生理功能。基于基因组水平,通过敲除大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中2’-FL合成前体物质相关代谢基因,... 2’-岩藻糖基乳糖(2’-Fucosyllactose,2’-FL)是一种岩藻糖化人乳低聚糖,具有预防肠道疾病、提高免疫力、促进大脑发育等重要生理功能。基于基因组水平,通过敲除大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中2’-FL合成前体物质相关代谢基因,如β-半乳糖苷酶基因(β-galactosidase,lac Z)、UDP-葡萄糖脂质载体转移酶基因(undecaprenyl-phosphate glucose-1-phosphate transferase,wca J)和GDP-甘露糖基水解酶基因(GDP-mannose mannosyl hydrolase,nud D),构建2’-FL合成底盘细胞;在此基础上,将外源α-1,2-岩藻糖基转移酶基因(α-1,2-Fucosyltransferase,wbg L)和磷酸甘露糖变位酶基因(phosphomannomutase,man B)、甘露糖-1-磷酸鸟苷转移酶基因(annose-1-phosphate guanylyltransferas,man C)、GDP-D-甘露糖-4,6-脱水酶基因(GDP-mannose 4,6-dehydratase,gmd)和GDP-岩藻糖合酶基因(GDP-L-fucose synthase,wca G)引入到大肠杆菌基因组中,探究在基因组水平过表达2’-FL合成基因对2’-FL产量的影响。结果表明,2’-FL在所构建菌株B-05的摇瓶含量达到了1.99 g·L^(-1)。进一步通过摇瓶发酵优化确定了最优发酵条件:IPTG诱导浓度为0.4 mmol·L^(-1)、诱导时OD600为2.4,诱导温度为28℃。在此条件下,摇瓶中2’-FL合成量达到了3.92 g·L^(-1)。最后在5 L发酵罐中,2’-FL含量达到了43.48 g·L^(-1)。研究表明通过将外源2’-FL相关合成基因导入基因组中进行过表达,实现了2’-FL高效合成,为构建整合型2’-FL菌株提供了数据支撑。 展开更多
关键词 2’-岩藻糖基乳糖 重组大肠杆菌 基因敲除 发酵优化
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Antitumor Activity of Recombinant Antimicrobial Peptid Penaeidin-2 against Kidney Cancer Cells 被引量:1
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作者 孟明翔 宁建芳 +4 位作者 于京佑 陈丹丹 孟小林 徐进平 张杰 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2014年第4期529-534,共6页
Penaeidin-2(Pen-2) is an important antimicrobial peptide derived from the Pacific white shrimp, Penaeus vannamei, and possesses both antibacterial and antifungal activities. Recent studies suggest that recombinant p... Penaeidin-2(Pen-2) is an important antimicrobial peptide derived from the Pacific white shrimp, Penaeus vannamei, and possesses both antibacterial and antifungal activities. Recent studies suggest that recombinant penaeidins show similar activities to the native Pen-2 protein. Previous researches have shown that some antimicrobial peptides(AMPs) exhibit cytotoxic activity against cancer cells. To date, there have been no studies on the antitumor effects of Pen-2. This study evaluated the potential of recombinant pen-2(rPen-2) in the selective killing of kidney cancer cell lines ACHN and A498, and its action mechanism. MTT assays found the maximal growth inhibition of HK-2, ACHN and A498 cells treated with 100 μg/mL rPen-2 at 48 h was 13.2%, 62.4%, and 70.4%, respectively. DNA-specific fluorescent dye staining showed a high percentage of apoptosis on cancer cells. Flow cytometry revealed that the apoptosis rate of HK-2, ACHN and A498 cells was 15.2%, 55.2%, and 61.5% at 48 h respectively, suggesting that rPen-2 induced higher apoptosis rate in cancer cells than in HK-2 cells. Laser confocal scanning microscopy demonstrated that the plasma membrane was the key site where rPen-2 interacted with and destroyed tumor cells. Scanning electron microscopy showed the morphologic changes of the cell membranes of kidney cancer cells treated with rPen-2. These results suggest that rPen-2 is a novel potential therapeutic agent that may be useful in treating kidney cancers. 展开更多
关键词 recombinant Penaeidin-2 kidney cancer cell plasma membrane apoptosis LYSIS
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