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血清sLOX-1、ESM-1对急性缺血性脑卒中患者rt-PA静脉溶栓后发生出血转化的预测价值 被引量:1
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作者 赵浩 王敏博 张子豪 《检验医学与临床》 2024年第3期333-337,共5页
目的探讨血清可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)对急性缺血性脑卒中(AIS)患者重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓治疗后发生出血转化(HT)的预测价值。方法选择2020年1月至2022年6月... 目的探讨血清可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)对急性缺血性脑卒中(AIS)患者重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓治疗后发生出血转化(HT)的预测价值。方法选择2020年1月至2022年6月在宝鸡市人民医院接受rt-PA静脉溶栓治疗的AIS患者320例为研究对象,根据治疗后头颅CT复查结果分为HT组和非HT组,采用酶联免疫吸附试验检测两组患者的血清sLOX-1、ESM-1水平,并进行比较;采多因素Logistic回归分析rt-PA静脉溶栓后发生HT的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sLOX-1、ESM-1对rt-PA静脉溶栓后发生HT的预测价值。结果治疗36 h后,47例患者发生HT(HT组),HT发生率为14.69%(47/320),剩余273例未发生HT患者为非HT组。HT组年龄、合并高血压患者占比、入院时NIHSS评分、治疗前血清sLOX-1和ESM-1水平高于非HT组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,入院时NIHSS评分>13.04分、血清sLOX-1>0.92 ng/mL、血清ESM-1>1.24μg/mL是AIS患者静脉溶栓后发生HT的独立危险因素(P<0.05)。治疗前血清sLOX-1、ESM-1单独及联合检测预测rt-PA静脉溶栓后发生HT的曲线下面积(AUC)分别为0.797、0.775和0.840。结论血清sLOX-1、ESM-1是AIS患者rt-PA静脉溶栓后发生HT的影响因素,二者联合检测对其具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1 内皮细胞特异性分子-1 急性缺血性脑卒中 重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓 出血转化 预测价值
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重组人血管内皮抑制素联合程序性细胞死亡蛋白1抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌的效果及安全性分析
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作者 侯春立 许佳睿 +4 位作者 何强 朱铁年 吴红海 陈虹 薛倩 《中国医药》 2024年第3期366-371,共6页
目的探讨持续静脉泵入重组人血管内皮抑制素联合程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床效果及安全性。方法回顾性选取2020年1月至2022年1月于中国人民解放军联勤保障部队第九八〇医院接受治疗的晚期NSCLC患... 目的探讨持续静脉泵入重组人血管内皮抑制素联合程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床效果及安全性。方法回顾性选取2020年1月至2022年1月于中国人民解放军联勤保障部队第九八〇医院接受治疗的晚期NSCLC患者90例,根据治疗方案不同分为A、B、C组,各30例。A组选用PD-1抑制剂+重组人血管内皮抑制素注射液+含铂两药的治疗方案;B组选用PD-1抑制剂+含铂两药的治疗方案;C组选用重组人血管内皮抑制素注射液+含铂两药的治疗方案。主要研究终点为客观缓解率(ORR)及无进展生存期(PFS),次要研究终点为疾病控制率(DCR)及安全性。结果3组ORR、DCR比较差异均有统计学意义(P=0.039、0.018),其中A组ORR、DCR[50.0%(15/30)、83.3%(25/30)]均最高。A、B、C组中位PFS分别为7.4、5.6、5.7个月,3组PFS比较差异有统计学意义(P<0.001)。多因素Cox回归模型分析结果显示性别、表皮生长因子受体突变及转移器官数量是影响晚期NSCLC患者PFS的危险因素(均P<0.05)。A组发生不良反应总计55例次,其中严重不良反应(3~4级)4例。B组发生不良反应总计54例次,其中严重不良反应(3~4级)4例。C组发生不良反应总计51例次,其中严重不良反应(3~4级)2例。结论重组人血管内皮抑制素联合PD-1抑制剂治疗晚期NSCLC显现出了良好的临床效果,且不良反应相对可控。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 重组人血管内皮抑制素 程序性细胞死亡蛋白1抑制剂
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稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株的筛选与鉴定 被引量:2
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作者 田泽维 董文其 刘朝霞 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第11期1174-1176,1180,共4页
目的建立稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株。方法将以HBV多表位复合基因取代脊区基因的杂合HBc真核表达质粒转染NS-1细胞,经G418及亚克隆筛选高表达阳性细胞株,并以RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blottin... 目的建立稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组NS-1细胞株。方法将以HBV多表位复合基因取代脊区基因的杂合HBc真核表达质粒转染NS-1细胞,经G418及亚克隆筛选高表达阳性细胞株,并以RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blotting等方法检测、鉴定重组细胞表达产物。结果筛选所得稳定表达细胞株经RT-PCR、ELISA、间接免疫荧光及Western blotting等方法检测均呈阳性反应,而阴性对照及空白对照未出现相应阳性反应。结论筛选获得稳定表达含HBV多表位短肽的杂合HBc颗粒的重组细胞株,命名为NS/HBc-Mep。为建立HBc-Mep特异的cELISA及CTL活性测定等实验方法提供可靠的靶细胞。 展开更多
关键词 重组ns-1细胞株 筛选 鉴定 乙型肝炎病毒核心抗原 多表位复合基因 杂合HBc颗粒
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Effects of adenoviral vector-mediated transduction of human p53,B7-1 and GM-CSF genes on liver cancer cells 被引量:1
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作者 王征旭 何振平 +2 位作者 吴祖泽 李元敏 张维维 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1999年第4期247-257,共11页
The potential efficacy and clinical feasibility of gene therapy for liver cancer were tested through therecombinant adenovirus-mediated (Ad-multigenes ) co-transfer of human wild-type p53, B7-l co-stimulation(CD8o) an... The potential efficacy and clinical feasibility of gene therapy for liver cancer were tested through therecombinant adenovirus-mediated (Ad-multigenes ) co-transfer of human wild-type p53, B7-l co-stimulation(CD8o) and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) genes into human hepatocellular carcinoma cell lines. The treated cells underwent apoptosis with specific DNA fragmentation and became more sensitiveto cisplatin, a chemotherapeutic drug. Their growth was partly inhibited. Efficient proliferation and generation ofCTLs and cytokine production were induced in mixed lymphocytes through tumor cell reaction (MLTR) using peripheral blood T lymphocytes from donors as effector cells and Ad-multigenes or Ad-p53-transfected human hepatocellular carcinoma cells (HepG2 or BEL7402) as stimulator cells. Ad-multigenes-transfected rat carcinosarcomaWalker 256 cells were inoculated subcutaneously into normal rats. Fourteen days later, the activity of spleen cellsin rats inoculated with Ad-multigenes-transduced Walker 256 cells was higher than that in Ad-p53-transducedones. These findings suggest that adenovirus-mediated multigenes p53, B7-1 and GM-CSF can induce apoptosis ofliver cancer cells and initiate a potent antitumor immune response against them. 展开更多
关键词 recombinant ADENOVIRUS TRANSDUCTION of mu1tigenes HUMAN LIVER cancer cell gene therapy
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F1t3 RECEPTOR EXPRESSION ON THE SURFACE OF MALIGNANT HEMATOPOIETIC CELLS AND RESPONSES TO F1t3 LIGAND STIMULATION
5
作者 许志祥 徐颖 +3 位作者 朱剑昆 李彩霞 李颖 张学光 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2000年第4期263-267,共5页
Objective: To investigate the F1t3 receptor expression on the surface of malignant hematopoietic cells, the effect of TNFα and dexamethasone (DXM) on its expression and the responses of those cells to recombinant hum... Objective: To investigate the F1t3 receptor expression on the surface of malignant hematopoietic cells, the effect of TNFα and dexamethasone (DXM) on its expression and the responses of those cells to recombinant human F1t3 ligand (rhFL). Methods: Eighteen malignant hematopoietic cell lines were determined for the F1t3 receptor expression by flow cytometric analysis. The effect of rhFL on the proliferation of malignant hematopoietic cellsin vitro was measured using MTT assay. Results: The expressions of F1t3 receptor on the surface of Raji, Daudi, HL-60, 8266 and XG-6 cells were detected by flow cytometric analysis. Following incubation with 20 ng/ml TNFα for 24h, the number of F1t3 receptor positive cells decreased in Raji and 8266, increased in HL-60 and XG-6, and no difference in Daudi cells. After incubation with 10?6 mol/L DXM for 24h, the number of F1t3 receptor positive cells decreased in all the 5 F1t3 receptor positive cell lines. rhFL stimulated the proliferation of HL-60 and Raji cells. Conclusion: For most of the malignant hematopoietic cells, there was neither the expression of F1t3 receptor nor the response to rhFL. DXM may be useful to reduce the effect of FL on the proliferation of some F1t3 receptor positive malignant hematopoietic cells in vitro andin vivo. 展开更多
关键词 F1t3 receptor recombinant human F1t3 ligand (rhFL) Malignant hematopoietic cell lines Proliferation Dexamethasone (DXM)
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Study on the Penetrability of PEP-1-P27mt for Cell Membranes in Vitro
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作者 严世荣 朱明磊 +2 位作者 邱方城 王立林 屈伸 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2007年第3期225-229,共5页
Double-stranded oligomeric nucleotide encoding PEP-1 peptides was synthesized, pro- karyotic expression pET15b-pep-1-p27mt recombinant constructed, E. coli BL21 (DE3)pLysS trans- formed and induced with IPTG to highly... Double-stranded oligomeric nucleotide encoding PEP-1 peptides was synthesized, pro- karyotic expression pET15b-pep-1-p27mt recombinant constructed, E. coli BL21 (DE3)pLysS trans- formed and induced with IPTG to highly express fusion protein PEP-1-P27mt. Fusion protein with an N-terminal His-tag could be purified by Ni2+-resin affinity chromatography and identified by SDS-PAGE and Western blotting. Cultured EC9706 cells treated with PEP-1-P27mt revealed that PEP-1-P27mt was transduced into cells after 15 min and reached maximal intracellular concentra- tions in 2 h. PEP-1-P27mt of 1 μmol/L final concentration could most strongly suppress the growth. It was suggested that PEP-1 can carry P27mt across membrane, which provides a new biological pro- tocol for using cyclin dependent kinase inhibitors p27mt in suppressing the growth of tumor cells. 展开更多
关键词 cell-penetrating peptides PEP-1 p27mt pET15b-pep-1-p27mt recombinant
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层粘连蛋白γ1基因沉默对膀胱癌细胞增殖及细胞周期的影响
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作者 李彬琦 李文明 《中国医药导报》 CAS 2023年第30期18-23,共6页
目的探讨层粘连蛋白γ1(LAMC1)在膀胱癌细胞中的表达情况,以及沉默LAMC1基因表达对膀胱癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法选取河北省邯郸市中心医院2019年1月至2021年12月收治的48例膀胱癌患者的癌及癌旁组织。采用RT-qPCR法检测UMUC3、... 目的探讨层粘连蛋白γ1(LAMC1)在膀胱癌细胞中的表达情况,以及沉默LAMC1基因表达对膀胱癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法选取河北省邯郸市中心医院2019年1月至2021年12月收治的48例膀胱癌患者的癌及癌旁组织。采用RT-qPCR法检测UMUC3、T24、5637及J82细胞中LAMC1的m RNA表达水平。将LAMC1-si RNA质粒转染至5637细胞中,设置LAMC1沉默组和阴性对照组,RT-qPCR和Western blot验证转染效率;采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术检测LAMC1基因沉默对膀胱癌细胞增殖、克隆形成能力及细胞周期的影响,Western blot检测细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin D1、p16和p21的表达水平。结果5637细胞中LAMC1 m RNA表达水平较UMUC3、T24、J82细胞高(P<0.05)。癌旁组织与膀胱癌组织中LAMC1阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。LAMC1沉默组中LAMC1 m RNA和蛋白表达水平低于阴性对照组(P<0.01)。LAMC1沉默组中细胞增殖活力和克隆形成能力低于阴性对照组(P<0.01)。LAMC1沉默组中细胞中S期细胞所占百分比低于阴性对照组(P<0.01),G1期细胞所占百分比高于阴性对照组(P<0.01)。LAMC1沉默组中的cyclin D1和cyclin A蛋白的表达水平低于阴性对照组(P<0.01),而p16和p21蛋白的表达水平高于阴性对照组(P<0.01)。结论沉默LAMC1基因表达能够抑制细胞周期相关蛋白的表达从而抑制膀胱癌5637细胞增殖能力,提示其可能是膀胱癌潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 层粘连蛋白γ1 基因表达调控 膀胱肿瘤 细胞增殖 细胞周期
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非小细胞肺癌组织EMSY、PIDD表达与同源重组修复基因的相关性及其临床意义
8
作者 陈丽萍 项保利 +3 位作者 王布 姬泽萱 郭志青 赵建清 《疑难病杂志》 CAS 2024年第2期186-191,共6页
目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EMSY转录抑制因子(EMSY)、p53诱导的死亡结构域蛋白1(PIDD)表达与同源重组修复基因表达的相关性及临床意义。方法选择2022年1月—2023年4月河北北方学院附属第一医院呼吸与危重症医学科诊治NSCLC患者8... 目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EMSY转录抑制因子(EMSY)、p53诱导的死亡结构域蛋白1(PIDD)表达与同源重组修复基因表达的相关性及临床意义。方法选择2022年1月—2023年4月河北北方学院附属第一医院呼吸与危重症医学科诊治NSCLC患者80例。采用实时荧光定量PCR检测癌组织及癌旁组织中EMSY、PIDD表达与同源重组修复基因人乳腺癌易感基因1(BRCA1)、切除修复交叉互补基因1(ERCC1),核糖核苷酸还原酶亚单位1(RRM1)表达。Pearson相关分析EMSY、PIDD表达与同源重组修复基因表达的相关性;分析EMSY、PIDD表达与NSCLC临床病理相关参数的关系及在NSCLC诊断中的价值。结果NSCLC癌组织中EMSY、PIDD、BRCA1、ERCC1、RRM1 mRNA相对表达量均高于癌旁组织(t/P=30.176/<0.001,27.821/<0.001,25.075/<0.001,16.680/<0.001,25.610/<0.001)。NSCLC癌组织中EMSY、PIDD mRNA与BRCA1、ERCC1、RRM1 mRNA表达均呈正相关(r/P=0.654/<0.001,0.712/<0.001,0.584/<0.001;0.724/<0.001,0.661/<0.001,0.563/<0.001)。低分化程度、有淋巴结转移及TNM分期Ⅲ期NSCLC癌组织EMSY、PIDD mRNA表达分别显著高于高中分化程度、无淋巴结转移及TNM分期Ⅰ~Ⅱ期NSCLC癌组织(t/P=13.693/<0.001,13.380/<0.001,12.197/<0.001;10.289/<0.001,11.130/<0.001,9.405/<0.001)。EMSY、PIDD mRNA及两项联合诊断NSCLC的AUC分别为0.834、0.802、0.906,两项联合诊断的AUC大于单一指标(Z=4.751、5.257,P均<0.001)。结论EMSY、PIDD在NSCLC癌组织中表达升高,与同源重组修复基因表达及不良临床病理特征有关,两者联合有助于NSCLC的诊断。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 EMSY p53诱导的死亡结构域蛋白1 同源重组修复基因 诊断
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人β_2糖蛋白1的重组表达及对抗磷脂抗体综合征患者血清诱导内皮细胞产生ICAM-1的影响 被引量:7
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作者 付嘉 方艳秋 +7 位作者 徐立 李明辉 刘桂英 姜艳芳 段秀梅 刘力华 许淑芬 谭岩 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期654-657,共4页
目的:探讨重组人β2糖蛋白1(hrβ2-GP1)对抗磷脂抗体综合征(APS)患者血清诱导内皮细胞系产生细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响。方法:应用pQE30表达载体表达hrβ2-GP1,Western blotting对重组蛋白进行鉴定;应用hrβ2-GP1处理前后的APS患... 目的:探讨重组人β2糖蛋白1(hrβ2-GP1)对抗磷脂抗体综合征(APS)患者血清诱导内皮细胞系产生细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响。方法:应用pQE30表达载体表达hrβ2-GP1,Western blotting对重组蛋白进行鉴定;应用hrβ2-GP1处理前后的APS患者血清分别与内皮细胞株EA.hy926共孵育,细胞ELISA和RT-PCR方法分析处理前后EA.hy926表达ICAM-1的变化。结果:成功构建pQE30-hβ2-GP1,并对表达产物进行了纯化和鉴定,所获得的蛋白与预期的大小一致,并具有人β2-GP1的抗原性;rhβ2-GP1处理后的APS患者血清与处理前比较,与其孵育的内皮细胞系EA.hy926表达ICAM-1在蛋白和mRNA水平均明显降低,这种抑制作用随着rhβ2-GP1的浓度增加而逐渐增强。结论:抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2GP1)促进内皮细胞系EA.hy926表达ICAM-1,hrβ2-GP1可中和此作用。 展开更多
关键词 重组人β2糖蛋白1 抗磷脂抗体综合征 内皮细胞系 细胞间黏附分子-1
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重组人白介素-11对白血病患者造血干细胞移植后血小板的影响 被引量:4
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作者 徐雅靖 陈方平 +2 位作者 李晓林 赵谢兰 何群 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期433-436,共4页
目的:观察重组人白介素-11(rhIL-11,商品名巨和粒)对白血病患者造血干细胞移植后巨核细胞系造血及血小板恢复的影响和不良反应。方法:24例行异基因外周血造血干细胞移植的急、慢性白血病患者随机分为巨和粒治疗组和对照组,治疗组于移植... 目的:观察重组人白介素-11(rhIL-11,商品名巨和粒)对白血病患者造血干细胞移植后巨核细胞系造血及血小板恢复的影响和不良反应。方法:24例行异基因外周血造血干细胞移植的急、慢性白血病患者随机分为巨和粒治疗组和对照组,治疗组于移植后13d(+13d)起应用巨和粒1.5mg/d,对照组主要采用对症治疗。结果:治疗组血小板计数由最低值恢复至>20×109/L的时间平均为+20.8d,对照组为+26.0d,较治疗组延长5.2d,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组血小板计数由最低值恢复至>50×109/L的时间平均为+25.7d,对照组为+32.3d,较治疗组延长6.6d,差异有统计学意义(P<0.01);治疗期间,治疗组平均输注单采血小板2.2次,对照组输注4.1次,较治疗组增加1.9次,差异有统计学意义(P<0.01);+30d,对照组骨髓产板型巨核细胞的数量平均为4.8个,治疗组为12.2个,较对照组增加7.4个,差异有统计学意义(P<0.01)。不良反应以恶心呕吐、乏力、头痛、头晕、注射部位疼痛为主,严重程度均为I^II度。结论:rhIL-11对白血病患者造血干细胞移植后巨核细胞系造血及血小板的恢复疗效确切,不良反应轻微,耐受性好。 展开更多
关键词 重组人白介素-11 白血病 造血干细胞移植 血小板
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重组促凋亡蛋白TFAR19对CNE-1细胞凋亡影响的初步研究 被引量:4
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作者 陶莹 李登清 +3 位作者 漆涌 伍勇 郑兰香 马大龙 《实用预防医学》 CAS 2006年第2期222-223,共2页
目的探讨重组凋亡蛋白TFAR19对鼻咽癌细胞株CNE-1的促凋亡效应。方法将不同浓度的高纯度重组凋亡蛋白TFAR19分别和人类鼻咽癌细胞株CNE-1共同培养,通过细胞形态学观察,TUNEL检测及DNA片断化分析,观察TFAR19对细胞的促凋亡效应。结果不... 目的探讨重组凋亡蛋白TFAR19对鼻咽癌细胞株CNE-1的促凋亡效应。方法将不同浓度的高纯度重组凋亡蛋白TFAR19分别和人类鼻咽癌细胞株CNE-1共同培养,通过细胞形态学观察,TUNEL检测及DNA片断化分析,观察TFAR19对细胞的促凋亡效应。结果不同浓度TFAR19蛋白均可促进细胞凋亡,加入5、10、15、20、30 mg/L的TFAR19蛋白后,鼻咽癌细胞株CNE-1的凋亡率分别是:15.26%、29.48%、37.11%、54.20%、72.36%。阴性对照组的细胞凋亡率为12.40%。结论TFAR19蛋白可直接进入CNE-1细胞并明显促进细胞凋亡,且呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 重组TFAR19蛋白 CNE-1细胞 细胞凋亡 重组促凋亡蛋白 鼻咽癌
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LMP1基因重组慢病毒载体的构建及体外表达 被引量:4
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作者 陈小艳 张弓 +4 位作者 刘芳 李慧灵 方唯意 江庆萍 赵彤 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期837-840,共4页
目的构建EB病毒潜伏膜蛋白I(LMP1)基因重组慢病毒载体,并检测其在体外的表达。方法采用DNA重组技术,将LMP1基因克隆到带绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体质粒pCDF中,筛选阳性克隆,经限制性酶切、PCR扩增和DNA测序鉴定重组载体。以脂质体介... 目的构建EB病毒潜伏膜蛋白I(LMP1)基因重组慢病毒载体,并检测其在体外的表达。方法采用DNA重组技术,将LMP1基因克隆到带绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体质粒pCDF中,筛选阳性克隆,经限制性酶切、PCR扩增和DNA测序鉴定重组载体。以脂质体介导法将慢病毒包装系统的包装质粒pFIV-34N、包膜质粒pVSV-G和带目的基因的质粒pCDF-LMP1共同转染到包装细胞293FT细胞内包装病毒,荧光显微镜观察包装细胞报告基因的表达情况,收集病毒上清,浓缩鉴定,测定重组病毒的滴度。将重组慢病毒转染小鼠B淋巴瘤细胞系A20,RT-PCR和Western blotting检测LMP1的表达。结果重组慢病毒表达载体质粒经限制性酶切和DNA测序分析证实LMP1基因准确克隆入pCDF的多克隆位点,LMP1序列与GenBank中的数据完全一致。荧光显微镜下观察可见293FT细胞的细胞浆与细胞膜有大量的绿色荧光,重组慢病毒浓缩后滴度为107Tu/ml,慢病毒转染A20细胞的效率>90%。RT-PCR和Western blotting检测A20细胞内有LMP1的表达。结论成功构建了LMP1基因重组慢病毒表达载体,慢病毒可高效转染A20细胞,为后期研究EBV致瘤基因LMP1在淋巴瘤发病机制中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 潜伏膜蛋白1 基因重组 慢病毒载体 A20细胞
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内毒素对重组人成骨蛋白-1诱导人牙髓细胞活性的影响 被引量:4
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作者 苏勤 何国华 +1 位作者 张郁 李强 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期116-118,共3页
目的:研究具核梭杆菌的内毒素(LPS)对重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)诱导牙髓细胞增殖、分化的影响。方法:采用噻唑盐比色测定(MTT)、酶动力学方法和放射免疫技术。结果:在较低浓度LPS作用时,可协同增加rhOP... 目的:研究具核梭杆菌的内毒素(LPS)对重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)诱导牙髓细胞增殖、分化的影响。方法:采用噻唑盐比色测定(MTT)、酶动力学方法和放射免疫技术。结果:在较低浓度LPS作用时,可协同增加rhOP-1对牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶(ALPase)活性,但对骨钙素(BGP)无明显影响,而高浓度LPS则起抑制作用。结论:提示适度的LPS在牙髓对龋病的防御反应过程中起着一定调节作用。 展开更多
关键词 脂多糖 rhOP-1 牙髓细胞 内毒素 龋齿
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重组腺病毒HIV-1 vpr基因的构建和表达 被引量:2
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作者 贺芳 曾耀英 +3 位作者 王通 吴晓萍 季煜华 林长乐 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期86-89,共4页
目的构建携带HIV-1 vpr基因的重组腺病毒,使CD4+T淋巴细胞C8166内源性的高表达Vpr蛋白。方法利用AdEasy-1系统,通过将含有目的基因片段的穿梭载体pAdTrack-CMV-vpr和骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183细菌内同源重组的方法构建重组腺病毒质粒Ad... 目的构建携带HIV-1 vpr基因的重组腺病毒,使CD4+T淋巴细胞C8166内源性的高表达Vpr蛋白。方法利用AdEasy-1系统,通过将含有目的基因片段的穿梭载体pAdTrack-CMV-vpr和骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183细菌内同源重组的方法构建重组腺病毒质粒Ad-vpr,用脂质体法将重组质粒转染至HEK293A细胞包装,获得重组腺病毒Ad-vpr,荧光显微镜观察Ad-vpr感染C8166细胞GFP的表达,Western blotting鉴定Vpr在C8166细胞内的特异性表达,流式细胞术检测Ad-vpr感染C8166细胞的效率。结果成功构建携带HIV-1vpr基因的重组腺病毒,Western blotting结果表明重组腺病毒Ad-vpr感染的C8166细胞内源性的高表达Vpr蛋白,流式细胞术检测结果表明Ad-vpr感染C8166细胞效率高(44.07±3.62)%。结论成功构建出携带HIV-1vpr基因的重组腺病毒,使C8166细胞内源性的高表达Vpr蛋白。 展开更多
关键词 重组腺病毒 HIV-1 VPR基因 C8166细胞
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硒蛋白PP1(SEPP1)过表达抑制786-O和769-P人肾癌细胞增殖并引起G2/M期阻滞 被引量:5
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作者 刘侃 赵超飞 +5 位作者 陈建文 巫胜攀 姚远新 武翀 罗国雄 张旭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期764-769,共6页
目的构建硒蛋白PP1(SEPP1)基因的慢病毒质粒并研究SEPP1对人肾透明细胞癌细胞增殖的影响。方法以HEK293T细胞的c DNA为模板,通过PCR法获得人SEPP1全长序列片段,并与慢病毒表达载体p LV-EGFP(2A)Puro质粒相连接,获得重组p LV-EGFP(2A)Pur... 目的构建硒蛋白PP1(SEPP1)基因的慢病毒质粒并研究SEPP1对人肾透明细胞癌细胞增殖的影响。方法以HEK293T细胞的c DNA为模板,通过PCR法获得人SEPP1全长序列片段,并与慢病毒表达载体p LV-EGFP(2A)Puro质粒相连接,获得重组p LV-EGFP(2A)Puro-SEPP1载体并进行基因测序验证。将重组慢病毒载体与包装质粒共同转染HEK293T细胞,进行病毒包装。用病毒上清感染786-O和769-P细胞,采用Western blot法检测SEPP1蛋白表达。按照重组慢病毒感染细胞、空载体感染细胞、未感染细胞进行分组,通过MTS法检测细胞增殖活性、细胞平板克隆形成实验检测克隆形成能力、流式细胞术检测细胞周期。结果酶切后凝胶电泳得到与SEPP1的DNA大小相一致的片段与空载体片段,基因测序的结果与SEPP1序列完全一致。经p LV-EGFP(2A)Puro-SEPP1感染的786-O、769-P细胞在感染48 h后,荧光显微镜下可见EGFP明显表达,实验组与空载体组、空白对照组相比较,SEPP1蛋白表达水平均明显提高。p LV-EGFP(2A)Puro-SEPP1感染组的细胞增殖能力降低,SEPP1过表达细胞集落形成能力明显降低,SEPP1过表达引起肾癌细胞G2/M期阻滞。结论在786-O和769-P细胞过表达SEPP1显著降低细胞增殖能力,并在786-O细胞中引起G2/M期阻滞。 展开更多
关键词 硒蛋白PP1(SEPP1) 重组慢病毒载体 肾透明细胞癌 肿瘤增殖
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ET-1、rhEGF、bFGF对培养的兔角膜内皮细胞的影响 被引量:6
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作者 胡维琨 张虹 +2 位作者 李贵刚 王毓琴 李鹏程 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期501-503,511,518,共5页
目的 研究内皮素 1(ET 1)、重组人表皮生长因子 (rhEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对培养的兔角膜内皮细胞增殖能力的影响及其相互作用。方法 在体外培养的兔角膜内皮细胞中单独使用或联合应用ET 1、rhEGF、bFGF ,采用MTT方法... 目的 研究内皮素 1(ET 1)、重组人表皮生长因子 (rhEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对培养的兔角膜内皮细胞增殖能力的影响及其相互作用。方法 在体外培养的兔角膜内皮细胞中单独使用或联合应用ET 1、rhEGF、bFGF ,采用MTT方法观察对细胞增殖的影响 ,免疫组化染色法和计算机图像分析系统检测对细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的影响。结果 一定浓度ET 1促进培养的兔角膜内皮细胞的增殖 ,且呈剂量相关性。 10 pmol/L时起作用 ,2 0 0 pmol/L时发挥最大作用。 10ng/mlrhEGF、 2ng/mlbFGF也促进培养的兔角膜内皮细胞的增殖。联合应用ET 1+rhEGF、ET 1+bFGF、ET 1+rhEGF +bFGF ,细胞吸光度 (A)值明显高于单独使用相应药物时A值之和。ET 1、rhEGF、bFGF单独使用可促进培养的兔角膜内皮细胞PCNA表达 ,联合应用时PCNA表达平均吸光度A值明显强于单独使用相应药物时表达强度之和。结论 ET 1可作为一种生长因子 ,它和rhEGF、bFGF单独使用可促进培养的兔角膜内皮细胞增殖能力 ,联合应用时具有协同作用。 展开更多
关键词 ET-1 RHEGF BFGF 角膜 内皮细胞 RHEGF 内皮素-1 细胞增殖 增殖细胞核抗原
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人重组骨形成蛋白-1对牙髓细胞生物学效应的研究 被引量:4
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作者 苏勤 何国华 +2 位作者 孙叶芳 陆怀秀 王胜朝 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期300-302,I016,共4页
通过细胞培养技术、噻唑盐比色测定(MTT)、酶动力学方法和放射免疫技术,了解人重组骨形成蛋白-1(rhOP-1)对体外培养的人牙髓细胞增殖、碱性磷酸酶活性及骨钙素表达的影响。结果表明,rhOP-1可促进牙髓细胞增殖,... 通过细胞培养技术、噻唑盐比色测定(MTT)、酶动力学方法和放射免疫技术,了解人重组骨形成蛋白-1(rhOP-1)对体外培养的人牙髓细胞增殖、碱性磷酸酶活性及骨钙素表达的影响。结果表明,rhOP-1可促进牙髓细胞增殖,提高牙髓碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达,在本实验剂量范围内呈浓度依赖关系,具有诱导牙髓细胞向成骨方向转化的趋势。 展开更多
关键词 rhOP-1 牙髓细胞 碱性磷酸酶 骨钙素 细胞增殖
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硫氧还蛋白1对胃癌细胞系BCG823生长的影响 被引量:2
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作者 石岩岩 丁士刚 +4 位作者 鲁凤民 张婷 张静 刘琳娜 王晔 《中国微创外科杂志》 CSCD 2011年第11期1030-1033,共4页
目的探讨硫氧还蛋白1(thioredoxin-1,Trx1)对胃癌细胞系细胞周期及增殖速度的影响。方法对BCG823、AGS、MNK45、NUGC3、PHM82五种胃癌细胞系的质粒转染效率进行测定,选择出转染效率高的细胞系;并用实时PCR(RT-PCR)测定胃癌细胞系中Trx1... 目的探讨硫氧还蛋白1(thioredoxin-1,Trx1)对胃癌细胞系细胞周期及增殖速度的影响。方法对BCG823、AGS、MNK45、NUGC3、PHM82五种胃癌细胞系的质粒转染效率进行测定,选择出转染效率高的细胞系;并用实时PCR(RT-PCR)测定胃癌细胞系中Trx1的表达水平,选择出表达较低的细胞系。将所构建的Trx1真核重组表达载体pcDNA3.1myc-His-Trx1转染入上述实验筛选出的胃癌细胞系,使细胞中Trx1过表达,用流式细胞仪检测过表达Trx1的胃癌细胞进入S期的比例。结果 BCG823、AGS两种细胞系的转染效率高,满足实验需要。BCG823的Trx1表达较AGS低[BCG823细胞系的ΔCT(Trx-GAPDH)=1.43,AGS细胞系的ΔCT(Trx-GAPDH)=1.10,ΔCT值与表达量成反比],选择BCG823作为实验对象。转染pcDNA3.1myc-His-Trx1的细胞Trx1表达升高(与内参蛋白的比值为0.45±0.02和0.26±0.03,n=3,t=9.127,P=0.000),进入S期的细胞比例升高(转染带有Trx1质粒的细胞进入S期的比例为28.54%,而转染了空载体者进入S期的比例为22.24%,χ2=104.759,P=0.000)。结论 Trx1表达水平上调可以促进胃癌细胞进入S期。 展开更多
关键词 硫氧还蛋白1 重组载体 细胞周期 BCG823
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槲皮素对乳腺癌细胞的影响及作用机制实验研究
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作者 胥柏宇 宋立强 +1 位作者 刘娜 陈平莲 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第8期1031-1034,1040,共5页
目的:探讨槲皮素对乳腺癌细胞的影响及其作用机制。方法:将人乳腺癌MDA-MB-231细胞分为空白对照组(无药物干预)、低、中及高剂量槲皮素组(分别加入10、20、40μmoL/L槲皮素共培养)和顺铂组(加入3 mg/L顺铂共培养)。显微镜下观察各组细... 目的:探讨槲皮素对乳腺癌细胞的影响及其作用机制。方法:将人乳腺癌MDA-MB-231细胞分为空白对照组(无药物干预)、低、中及高剂量槲皮素组(分别加入10、20、40μmoL/L槲皮素共培养)和顺铂组(加入3 mg/L顺铂共培养)。显微镜下观察各组细胞形态。Transwell实验检测各组细胞侵袭能力。划痕实验检测各组细胞迁移能力。流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。免疫印记实验检测细胞因子信号转导抑制蛋白1(SOCS1)、信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)表达。结果:空白对照组MDA-MB-231细胞呈不规则状生长,分布较紧密。低、中剂量槲皮素组MDA-MB-231细胞间隙变大,数目减少,细胞质变浑浊,而高剂量槲皮素组及顺铂组MDA-MB-231细胞形态呈片状球形,并出现肿胀破裂且数目减少。与空白对照组比较,低、中及高剂量槲皮素组MDA-MB-231细胞侵袭数目、划痕距离、STAT3水平降低,凋亡率、SOCS1水平升高(均P<0.05)。低、中及高剂量槲皮素组MDA-MB-231细胞侵袭数目、划痕距离、STAT3水平依次降低,凋亡率、SOCS1水平依次升高(均P<0.05)。高剂量槲皮素组与顺铂组细胞侵袭数目、划痕距离、凋亡率及STAT3、SOCS1水平比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:槲皮素能够抑制乳腺癌细胞侵袭和转移,促进细胞凋亡,其机制可能与上调SOCS1、抑制STAT3表达有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 槲皮素 细胞因子信号转导抑制蛋白1 信号传导及转录激活蛋白3 细胞侵袭 细胞转移 细胞凋亡
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HIF-1α条件性基因敲除嵌合体小鼠的获得 被引量:4
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作者 赵玲 杜晓兰 +5 位作者 苏楠 宋瑞华 何启芬 李福兵 戚华兵 陈林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第14期1361-1363,共3页
目的应用Cre/loxP系统建立HIF-1α条件性基因敲除小鼠模型。方法电击法将构建好的HIF-1α条件性基因敲除载体转染入小鼠ES细胞,用G418与Ganciclovir对转染的ES细胞进行正负筛选,经Southern杂交鉴定得到阳性ES细胞克隆后,将已发生正确重... 目的应用Cre/loxP系统建立HIF-1α条件性基因敲除小鼠模型。方法电击法将构建好的HIF-1α条件性基因敲除载体转染入小鼠ES细胞,用G418与Ganciclovir对转染的ES细胞进行正负筛选,经Southern杂交鉴定得到阳性ES细胞克隆后,将已发生正确重组的ES细胞显微注射入小鼠囊胚腔,对子代鼠进行基因型鉴定。结果经G418与Gan-ciclovir筛选培养得到490个阳性克隆,用5′端探针进行Southern杂交鉴定获得1株发生同源重组的ES细胞克隆,经显微注射,得到5只由基因敲除ES细胞和供体囊胚细胞共同发育而来的嵌合体小鼠。结论成功得到基于Cre/loxP系统的HIF-1α条件性基因敲除嵌合体小鼠模型。 展开更多
关键词 低氧诱导因子-1Α 条件性基因敲除 同源重组 胚胎干细胞 CRE/LOXP系统
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