重组人白细胞介素-1受体拮抗剂对甲苯-2,4-二异氰酸酯诱发豚鼠变应性鼻炎的治疗作用

目的 利用甲苯-2,4-二异氰酸酯（TDI）诱发的变应性鼻炎豚鼠模型,评价重组人白细胞介素-1受体拮抗剂（rh IL-1ra）的治疗效果。方法 以TDI作为致敏剂,通过致敏和激发两步法制作变应性鼻炎模型,同时设置正常对照组,仅给予致敏剂溶媒。豚鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、阳性药物（布地奈德鼻喷雾剂25.6μg/kg）组和rh IL-1ra 50、100和200μg/kg剂量组,每组10只动物。各给药组动物从激发前1 d（第8天,d 8）开始鼻腔给药,1次/d,连续14 d,正常对照及模型组动物相同方法给予rh IL-1ra溶媒。实验期间,按照临床评分标准对动物进行动态记录评分。待最后一次给药且临床评分结束后,麻醉并活杀动物,快速制备血清用于Ig E水平测定;分离鼻黏膜组织用于组胺含量测定及组织病理学观察。结果 与正常组比较,模型组豚鼠表现出典型的变应性鼻炎症状;与模型组比较,rh IL-1ra给药组动物的临床评分、喷嚏数、血清Ig E水平、鼻黏膜组胺含量均显著降低（P〈0.05）,且鼻黏膜组织病理学变化有显著改善。阳性药物组的表现与rh IL-1ra给药组基本相同,二者无显著性差异。结论 成功建立了TDI诱发的变应性鼻炎豚鼠模型;在（50~200）μg/kg剂量范围内,rh IL-1ra显示出肯定的治疗效果,提示rh IL-1ra有望成为变应性鼻炎的新型防治药物。

人可溶性白介素-4受体(sIL-4R)在甲醇酵母中的表达

白细胞介素 4(IL 4)作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用。IL 4通过结合细胞表面的白介素 4受体 (IL 4R)发挥其生物学效应。sIL 4R缺少跨膜和胞内结构域 ,结合IL 4后不能产生信号传递来介导IL 4的生物学活性 ,但sIL 4R与IL 4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL 4拮抗剂应用于哮喘等疾病的治疗。采用RT PCR方法以人的单核细胞总RNA为模板扩增得到编码sIL 4R的基因片段 ,经测序证实后插入到甲醇酵母分泌表达质粒pPIC9K中 ,得到重组质粒pPIC9K sIL 4R ,利用限制性内切酶BglⅡ将其线性化后用电穿孔法导入PichiapastorisGS115。分别用SDS PAGE、Westernblot和Ligandbindingblot对重组菌发酵上清中的sIL 4R进行鉴定。结果表明 ,在分子量约为 3 0kD处有sIL 4R特异条带出现 ,并具有结合其配基IL

人可溶性白介素4受体(sIL4R)在大肠杆菌中的表达和纯化

白细胞介素 4 (IL 4 )作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用 .IL 4通过结合细胞表面的白介素 4受体 (IL 4R)发挥其生物学效应 .sIL 4R缺少跨膜和胞内结构域 ,结合IL 4后不能产生信号传递介导IL 4的生物学活性 ,但sIL 4R与IL 4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL 4拮抗剂 ,应用于哮喘等疾病治疗 .采用RT PCR方法 ,以人单核细胞总RNA为模板扩增得到编码sIL 4R的基因片段 ,经测序确证后插入大肠杆菌高效表达质粒pBV2 2 0 ,得到重组质粒pBV2 2 0 sIL 4R ,重组质粒转化E .coliDH5α .重组菌经温度诱导后超声破碎得到包涵体 ,经SuperdexHR75分子筛柱和DEAE SepharoseFastFlow离子交换柱进行纯化 ,HPLC检测表明纯度达到 90 % .N端测序证明 ,重组sIL 4R与天然sIL 4RN端序列完全一致 .Western印迹、配基结合印迹对重组sIL 4R进行鉴定 .结果表明 ,重组sIL 4R具有结合IL

重组人骨形成蛋白-4的大规模制备

含有能够高表达重组人骨形成蛋白成熟肽(recombinant human bone morphogenetic protein 4 mature peptide,rhBMP- 4m)质粒的工程菌株,导入15 L NBS发酵罐中进行恒溶氧高密度发酵和诱导表达,测定发酵菌液OD600值为30．8。离心收集菌体, PAGE电泳后光密度扫描表明hBMP-4m占细菌总蛋白量的42％。悬浮所收集的菌体,裂菌,洗涤4次后的包涵体中hBMP-4m占蛋白量的83．2％。预先取少量样品进行探索实验后,全部包涵体用8 mol尿素缓冲液溶解,上SP-Sepharose FF阳离子柱,以0.35 mol NaCl洗脱,获得纯度为96％的hBMP-4m。其收获量为1．34g/L发酵液;收得率为36．4％。结果表明:使用这套工艺流程大规模制备hBMP-4m,能够得到较好的收得率、较高的收获量和纯度。

人sIL-4R基因克隆及表达的研究

目的 获得人sIL-4R重组蛋白的表达。方法 利用RT-PCR从Rail细胞分离出人sIL-4R基因,将编码的sIL-4RcDNA片段克隆到pMD18-T载体中进行DNA测序,进一步酶切sIL-4R DNA片段克隆于pQE80L表达载体,筛选鉴定pQE80L/sIL-4R重组质粒后转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达后用SDS-PAGE、Western blotting检测sIL-4R基因的表达。结果 扩增获得621bp特异的sIL-4R DNA目的片段,并在大肠杆菌中获得人sIL-4R重组蛋白的表达。结论 为人sIL-4R的临床应用研究奠定了基础。

血清HE4、PKM2、sFLT1水平结合3D-TVS血流动力学指数对子宫内膜癌的诊断价值

目的:探究血清人附睾蛋白4(HE4)、丙酮酸激酶M2型(PKM2)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFLT1)水平结合经阴道三维超声(3D-TVS)血流动力学参数对子宫内膜癌的诊断价值。方法:回顾性分析2019年1月-2020年12月在佳木斯市妇幼保健院就诊的172例子宫内膜病变患者的临床资料,根据病理诊断结果,将其分为子宫内膜癌组(n=93)和良性疾病组(n=79)。比较两组HE4、PKM2、sFLT1、3D-TVS血流动力学参数[血流指数(FI)、血管形成指数(VI)、血管形成-血流指数(VFI)]水平,并采用受试者工作特征曲线(ROC)分析这些指标单独及联合检测对子宫内膜癌的诊断价值。结果:子宫内膜癌组HE4、PKM2水平均高于良性疾病组,sFLT1水平低于良性疾病组,差异均有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌组VI、FI、VFI均高于良性疾病组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,HE4、PKM2、sFLT1、3D-TVS以及各指标联合对子宫内膜癌的诊断价值的AUC分别为0.755、0.816、0.798、0.927、0.999,且各项联合的AUC显著高于HE4、PKM2、sFLT1、3D-TVS的AUC(Z=6.419、5.900、5.741、3.994,P<0.05)。根据最佳临界值,当HE4高于80.67 pmol/L时,其敏感度为50.5%,特异度为98.7%;当PKM2高于13.66 ng/mL时,其敏感度为91.4%,特异度为58.2%;当sFLT1低于74.24 pg/mL时,其敏感度为69.6%,特异度为80.6%;当3D-TVS高于18.41时,其敏感度为83.9%,特异度为82.3%;当联合预测因子高于11.54时,其敏感度为96.8%,特异度为100%。结论:血清HE4、PKM2在子宫内膜癌中水平均升高,sFLT1水平降低,且HE4、PKM2、sFLT1结合3D-TVS血流动力学参数对子宫内膜癌的诊断价值较高。

重组人可溶性白细胞介素-4受体蛋白抑制大鼠哮喘研究

目的探讨重组可溶性白细胞介素-4受体(IL-4R)对大鼠哮喘模型的影响。方法根据Gen Bank公布的Homo sapiens(human)IL-4R基因序列(XM_005255309),合成srh IL-4R基因片段,将合成基因片段插入p ET-28a(+)构建重组表达载体p ET-28a(+)-srh IL-4R,酶切鉴定后,将载体转入表达菌株BL21(DE3)进行诱导表达重组蛋白srh IL-4R,并用SDS-PAGE和Western-blotting方法分析重组蛋白。提取重组蛋白干预哮喘模型大鼠,取肺组织进行病理切片观察。结果重组载体p ET-28a(+)-srh IL-4R酶切获得长度为500bp^750bp的目的片段,表达载体p ET-28a(+)-srh IL-4R转入表达菌BL21(DE3)后经IPTG诱导表达出的重组蛋白经SDS-PAGE和Westernblotting方法可见重组蛋白分子量约为25k Da;重组人可溶性IL-4R蛋白干预哮喘大鼠可见肺组织炎细胞数量较模型组明显减少。结论 srh IL-4R防治哮喘具有一定作用。

CXCR4-shRNA重组腺病毒表达载体的构建及鉴定

目的选择性构建CXC趋化因子受体4(CXCR4)的特异RNA干扰载体。方法在GenBank中获取CXCR4基因的核苷酸序列,设计并合成3条短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,并克隆到PL-Dest腺病毒骨架载体(shpAd/PL-Dest)中,组成人趋化因子受体重组腺病毒基因沉默子(shpAd-hCXCR4-eGFP),采用酶切、PCR和DNA测序方法验证。将验证后3种沉默子经酶切后转染至HEK293A细胞包装病毒,得到CXCR4的腺病毒表达载体。结果构建的shRNA-Ad-hCXCR4-eGFP 3种基因沉默子序列正确并成功克隆到腺病毒表达载体上。结论成功构建CXCR4-shRNA腺病毒表达载体。

上皮性卵巢癌患者血清可溶性白细胞介素-2受体、人附睾蛋白4、T淋巴细胞亚群水平及临床意义

目的探讨上皮性卵巢癌患者的血清可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)、人附睾蛋白4(HE4)、T淋巴细胞亚群水平及临床意义。方法选择100例上皮性卵巢癌患者和100例卵巢良性肿瘤患者,分别作为观察组和对照组,比较两组患者的血清SIL-2R、HE4及T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)和CD4^(+)/CD8^(+))水平,分析不同临床特征上皮性卵巢癌患者的血清SIL-2R、HE4及T淋巴细胞亚群水平。结果观察组患者的血清SIL-2R、HE4水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。观察组患者的血清CD3^(+)、CD4^(+)水平及CD4^(+)/CD8^(+)均明显低于对照组,CD8^(+)水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、中/低分化、有腹腔积液的上皮性卵巢癌患者的血清SIL-2R、HE4水平分别高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、高分化、无腹腔积液的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。中/低分化、有淋巴结转移、有腹腔积液上皮性卵巢癌患者的血清CD3^(+)、CD4^(+)水平分别低于高分化、无淋巴结转移、无腹腔积液的患者,CD8^(+)水平分别高于高分化、无淋巴结转移、无腹腔积液的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。上皮性卵巢癌患者的血清SIL-2R、HE4水平与CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均呈负相关(P﹤0.05),与CD8^(+)呈正相关(P﹤0.05)。结论上皮性卵巢癌患者血清中SIL-2R、HE4水平均较高,T淋巴细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)水平及CD4^(+)/CD8^(+)均较低,SIL-2R、HE4水平与T淋巴细胞亚群之间具有相关性。

神经节苷脂联合rhuEPO对低氧性脑损伤早产儿血清UCH-L1、GFAP、MBP、TLR-4的影响

目的 探析神经节苷脂联合重组人促红细胞生成素(rhuEPO)对低氧性脑损伤早产儿血清泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)、神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、Toll样受体-4(TLR-4)的影响。方法 收集淮安市第二人民医院新生儿科2017年3月至2018年9月治疗的低氧性脑损伤早产儿(<36w)71例,遵循单中心、前瞻性对照研究标准,行单盲、随机分组,观察组36例,采取神经节苷脂联合rhuEPO用药,对照组35例,采取rhuEPO单一用药。比较两组治疗前(患儿娩出12h内)、用药14d神经损伤相关分子(TLR-4、GFAP、UCH-L1、MBP),神经行为(NBNA)评分及临床表征改善情况。结果 两组治疗14d后NBNA评分均显著高于治疗前(P<0.05);且观察组治疗14d后NBNA评分提高水平明显优于对照组(P<0.05);观察组患儿意识恢复、原始反射、吸吮能力、肌张力恢复时间均明显短于对照组(P<0.05)。两组治疗14d后UCH-L1、GFAP、MBP、TLR-4等指标均明显低于治疗前(P<0.05);且观察组治疗14d后UCH-L1、GFAP、MBP、TLR-4降低幅度明显优于对照组(P<0.05)。结论 神经节苷脂与rhuEPO联合治疗低氧性脑损伤早产儿效果优异,可改善神经功能,减轻脑损伤,促进神经元再生修复。

急性缺血性脑卒中患者血清IRAK4、ARG1、UCH-L1的表达及其预测价值

目的分析急性缺血性脑卒中患者血清白介素1受体关联激酶4(IRAK4)、重组人精氨酸酶1(ARG1)、泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)的表达及其预测价值。方法选取2021年7月至2022年7月周口东新医院收治的52例急性缺血性脑卒中患者为研究组,另选取同期于周口东新医院进行健康体检的志愿者50例为对照组。检测两组IRAK4、ARG1、UCH-L1水平。结果与对照组相比,研究组IRAK4(310.44±40.36)μg/L VS(360.59±52.88)μg/L、ARG1(80.59±9.01)ng/mL VS(109.58±11.73)ng/mL、UCH-L1(0.90±0.11)μg/L VS(1.62±0.20)μg/L水平较高(P<0.05)。与研究组轻度患者相比,中度、重度患者IRAK4(340.55±48.36)μg/L VS(359.73±50.93)μg/L VS(385.83±53.79)μg/L、ARG1(92.36±10.37)ng/mL VS(106.88±11.50)ng/mL VS(135.52±12.59)ng/mL、UCH-L1(1.21±0.16)μg/L VS(1.60±0.19)μg/L VS(2.14±0.23)μg/L水平较高(P<0.05);与中度患者相比,重度患者IRAK4(359.73±50.93)μg/L VS(385.83±53.79)μg/L、ARG1(106.88±11.50)μg/L VS(135.52±12.59)μg/L、UCH-L1(1.60±0.19)μg/L VS(2.14±0.23)μg/L水平较高(P<0.05)。结论急性缺血性脑卒中患者IRAK4、ARG1、UCH-L1表达较高,且随病情严重程度的加重、预后不良的发生,IRAK4、ARG1、UCH-L1表达水平升高加剧,IRAK4、ARG1、UCH-L1三者联合检测对急性缺血性脑卒中患者预后不良的预测价值较高。

恩格列净联合rhBNP治疗射血分数降低型心力衰竭的疗效及对患者心功能和血清FGF-21、sVEGFR-2水平的影响

目的探究恩格列净联合重组人脑利钠肽(rhBNP)治疗射血分数降低型心力衰竭(HFrEF)的疗效及对患者心功能和血清成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)、可溶性血管内皮生长因子受体-2(sVEGFR-2)水平的影响。方法前瞻性选取2022年1月至2023年3月山东第一医科大学附属人民医院心内科收治的100例HFrEF患者为研究对象。按照随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组各50例。对照组予以常规强心、利尿治疗及静脉泵入rhBNP,观察组在对照组基础上加用恩格列净。比较两组治疗前、治疗3个月后糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、6 min步行距离测试(6MWD)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、左室射血分数(LVEF)及血清FGF-21、sVEGFR-2水平,并记录两组主要心血管不良事件(MACE)发生情况。结果观察组临床总有效率为94.00%,高于对照组(80.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,观察组HbA1c水平为(5.34±1.51)%,低于对照组[(6.03±1.65)%],差异有统计学意义(P<0.05);两组患者的总胆固醇、LDL-C水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗3个月后,观察组LVEF、6MWD水平分别为(38.52±7.24)%、(493.66±47.79)m,均高于对照组[(34.02±8.06)%、(455.92±50.25)m],NT-proBNP水平为(4386.75±875.89)pg/mL,低于对照组[(4326.04±843.66)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,观察组血清FGF-21水平为(54.93±12.51)pg/mL,低于对照组[(61.50±15.66)pg/mL],sVEGFR-2水平为(8.96±1.95)ng/mL,高于对照组[(8.14±1.67)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组与对照组MACE总发生率分别为6.00%、16.00%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在rhBNP治疗HFrEF的基础上加用恩格列净可明显提高临床疗效,改善患者心功能,降低HbA1c、FGF-21水平,并提高sVEGFR-2水平可能是其增效的作用机制。

胃肠道恶性肿瘤患者应用重组人生长激素后免疫功能的变化

为探讨重组人生长激素（ｒｈ Ｇ Ｈ）对胃肠道恶性肿瘤患者免疫功能的影响，对 １２ 例胃肠道恶性肿瘤患者手术前、后及使用重组人生长激素后外周血 Ｔ 淋巴细胞亚群（ Ｔ Ｌ Ｓ）和血清可溶性白介素２ 受体（ｓ Ｉ Ｌ２ Ｒ）进行了检测，并与１８ 例未使用ｒｈ Ｇ Ｈ 的胃肠道恶性肿瘤患者及 ２０ 例健康人进行比较。结果： ①胃肠道恶性肿瘤患者 Ｔ 淋巴细胞亚群中 Ｃ Ｄ＋３ 、 Ｃ Ｄ＋４ 细胞减少， Ｃ Ｄ＋４ ／ Ｃ Ｄ＋８ 细胞比值下降，ｓ Ｉ Ｌ２ Ｒ水平升高； ②手术切除肿瘤后， Ｃ Ｄ＋３ 、 Ｃ Ｄ＋４ 细胞增加， Ｃ Ｄ＋４ ／ Ｃ Ｄ＋８细胞比值升高，ｓ Ｉ Ｌ２ Ｒ 水平降低； ③使用 ｒｈ Ｇ Ｈ 后， Ｃ Ｄ＋３ 、 Ｃ Ｄ＋４ 细胞与未使用 ｒｈ Ｇ Ｈ 的患者比较有显著性差异， Ｃ Ｄ＋４ ／ Ｃ Ｄ＋８ 细胞比值明显下降（ Ｐ＜ ０．０１），ｓ Ｉ Ｌ２ Ｒ 水平也明显降低（ Ｐ＜ ０．０１），并接近正常人。本实验结果提示： 应用ｒｈ Ｇ Ｈ 能增强胃肠道恶性肿瘤患者的免疫功能。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对中重度银屑病患者血清脂肪因子水平的影响:前瞻性非随机对照试验

目的分析注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对中重度斑块型银屑病患者血清脂联素(adiponectin,APN)、视黄醇结合蛋白4 (retinol binding protein 4,RBP4)、瘦素(leptin,LEP) 3种脂肪因子水平的影响。方法选取2016年11月至2018年5月在北京协和医院皮肤科就诊的30例中重度斑块型银屑病患者作为治疗组,同时选取在本院健康医学部进行体检的25名健康人作为健康对照组。治疗组均给予重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白50 mg皮下注射,每周1次,共12次。检测健康对照组及治疗组治疗前(基线)和治疗后12周血清APN、RBP4、LEP的浓度;分析两组之间以及治疗组治疗前后血清脂肪因子水平是否存在差异,并采用Spearman相关分析法评估治疗组基线血清APN、RBP4、LEP表达水平与银屑病皮损面积和严重程度指数(psoriasis area and severity index,PASI)之间有无线性相关关系。结果治疗组基线APN水平[9. 73(6. 69,12. 37)比(14. 25 (10. 53,23. 28),P <0. 001]、LEP水平[0. 42 (0. 17,2. 60)比3. 90 (1. 38,7. 20),P=0. 002]较健康对照组降低, RBP4较健康对照组升高[12. 29 (10. 62, 21. 33)比9. 13 (7. 36,15. 78),P=0. 024];治疗组治疗后APN水平[11. 95 (8. 12,15. 26)比9. 73 (6. 69, 12. 37), P=0. 027]、LEP水平[2. 84 (1. 04,9. 34)比0. 42 (0. 17,2. 60),P<0. 001]较治疗前明显升高,而RBP4水平较治疗前差异无统计学意义(P=0. 125);基线APN、RBP4、LEP浓度均与PASI无线性相关关系。结论脂肪因子可能参与了银屑病的慢性炎症过程,抗肿瘤坏死因子α治疗可能改善银屑病的炎症状态。

大剂量rHuEPO对肾性贫血患者可溶性转铁蛋白受体及其铁代谢的影响

目的观察应用大剂量rHuEPO(重组促红细胞生成素)治疗肾性贫血患者时对机体可溶性转铁蛋白受体(sTfR)及其相关铁代谢的影响。方法对36例肾性贫血患者给予rHuEPO 1万IU皮下注射,每周1次,连续8周,在治疗前后分别采血、行骨髓穿刺检查以检测血中sTfR、血清铁蛋白(SF)、血清铁(SI)、促红细胞生成素(EPO)及红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、网织红细胞计数(Ret%)和骨髓外铁、铁粒幼细胞、总红系所占百分数(E%)并进行自身对照。结果患者治疗后sTfR显著增高(P<0.01);而骨髓外铁、铁粒幼细胞、SF均显著降低;红系增生较治疗前明显活跃(P<0.01)。sTfR与RBC呈正相关(r=0.632,P<0.01);与Hct呈正相关(r=0.757,P<0.01);与骨髓E%呈正相关(r=0.775,P<0.01);与其他参数无相关性。结论sTfR在大剂量重组促红细胞生成素治疗肾性贫血患者后迅速升高,作为一种新的评价治疗效果的指标,不仅准确地反映机体铁贮存状况,也反映机体骨髓红细胞的增殖活性。

重组质粒PcDNA3.1/sTNFRⅠ在小鼠体内表达的初步研究

目的检测构建的PcDNA3.1/sTNFRⅠ真核表达载体在小鼠体内能否有效表达目的产物,为探索利用该载体基因治疗TNFα介导的炎性疾病奠定一定的实验基础。方法将PcDNA3.1/sTNFRⅠ载体直接注入小鼠胫前肌,ELISA法检测肌肉匀浆中的sTNFRⅠ表达。结果在注射后7d与10d,PcDNA3.1/sTNFRⅠ注射组小鼠肌肉匀浆中sTNFRⅠ表达的量均显著高于PcDNA3.1注射组(P<0.01),注射后第10天sTNFRⅠ表达量高于第7天sTNFRⅠ表达量(P<0.01)。结论采用直接注射法将PcDNA3.1/sTNFRⅠ载体转移入肌肉内可以使目的基因得到一定的表达。

血透患者可溶性转铁蛋白受体测定及其影响因素

目的探讨慢性血液透析(HD)并用重组人促红细胞生成素(rHuEpo)治疗的患者,体内可溶性转铁蛋白受体水平(sTfR)测定的临床意义及其相关影响因素。方法随机观察35例慢性HD患者和18例贫血但肾功能正常的患者,测定血红蛋白(Hb)、红细胞压积(HCT)、网织红细胞百分比(Ret%)、血清铁蛋白(SF)、血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、转铁蛋白饱和度(TS)、血清促红细胞生成素(sEpo)、C-反应蛋白(CRP)、sTfR,并将结果进行组间对比。结果两组在Hb,HCT,SF,SI,TIBC以及TS方面差异均无显著性(P>0.05),HD组sTfR,sEpo和Ret%则低于对照组(P<0.05),HD患者CRP水平高于对照组(P<0.05)。单变量相关分析表明,HD组sTfR水平与sEpo呈正相关(r=0.770,P<0.01),与SF呈负相关(r=-0.523,P<0.01),与TS呈负相关(r=-0.325,P<0.01)。多变量逐步回归分析表明,sEpo,SF是两个能够独立影响sTfR水平的因素。结论在HD患者接受rHuEpo治疗时,循环中sTfR水平是反映骨髓红细胞生成活性的良好指标,反映了HD患者铁的贮存和红细胞生成刺激的综合效应。

重组人脑利钠肽对慢性心力衰竭患者血浆sRAGE、NF-κB及心功能的影响

目的探讨重组人脑利钠肽(rhBNP)对慢性心力衰竭患者血浆可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)、核转录因子-κB(NF-κB)及心功能的影响。方法选取2014年1月~2016年2月于解放军总医院第一附属医院住院治疗的86例慢性心力衰竭患者,按照随机数字表法分为对照组(n=43)和rhBNP组(n=43)。对照组给予硝酸甘油治疗,rhBNP组在对照组基础上加用rhBNP治疗。观察两组的临床疗效及不良反应,采用酶联免疫吸附法检测血浆sRAGE、NF-κB水平,分析两组患者治疗前后心功能及血浆sRAGE、NF-κB水平。结果 rhBNP组总有效率(83.7%)显著高于对照组(65.1%)(P<0.05)。两组治疗后左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室内径(LADD)明显低于治疗前(P<0.01),心指数(CI)、左室射血分数(LVEF)明显高于治疗前(P<0.05或P<0.01)。与对照组治疗后比较,rhBNP组各心功能指标改善更明显(P<0.05或P<0.01)。两组治疗后血浆sRAGE、NF-κB较治疗前降低(P<0.05或P<0.01);与对照组治疗后比较,rhBNP组血浆sRAGE、NF-κB水平改善更明显(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 rhBNP治疗可有效改善心功能,降低慢性心力衰竭患者血浆sRAGE、NF-κB水平。

重组人干扰素α-1b对RSV感染性肺炎患儿免疫及TLR4蛋白表达的影响

目的研究重组人干扰素α-1b(rhIFNα-1b)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染性肺炎患儿单核细胞Toll样受体4(TLR4)蛋白表达、免疫功能的影响。方法本研究为病例对照研究。采用单纯随机抽样法,选取青岛市胶州中心医院2017年9月至2018年9月104例RSV感染性肺炎患儿作为研究对象,按照随机抽签法分为观察组与对照组,每组各52例。对照组采用常规治疗,观察组在对照组基础上加用rhIFNα-1b,持续治疗8 d。观察2组临床疗效、临床症状的改善情况、治疗前后免疫指标水平[CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、血清免疫球蛋白(IgE)]、治疗前后单核细胞TLR4表达情况(TLR4 mRNA、TLR4阳性率)、药物不良反应发生情况。结果治疗后观察组总有效率高于对照组(90.38%比73.08%,χ2=5.22,P=0.022);观察组白细胞计数及体温恢复正常时间、咳嗽症状消失时间、哮喘缓解及喘息音消失时间、肺部查体阳性体征消失时间及住院时长等临床疗效指标均优于对照组(P值均<0.05);而CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组(P值均<0.05),CD8^(+)、IgE水平低于对照组(P值均<0.05);治疗后观察组TLR4 mRNA表达、TLR4阳性率低于治疗前及对照组治疗后(P值均<0.05);2组均未记录到药物不良反应。结论rhIFNα-1治疗RSV肺炎患儿疗效显著,可以显著加速患儿症状改善,同时增强患儿机体免疫功能,降低体内单核细胞TLR4表达。

重组人Flt3配体在毕氏酵母中的表达及其对恶性造血细胞的体外作用

目的 用毕氏酵母 (Pichiapastoris)表达人可溶性Flt3配体 (rhFL) ,并观察rhFL对恶性造血细胞增殖的作用 ;探讨地塞米松 (DXM)对Flt3受体 (Flt3R)表达及rhFL介导的恶性造血细胞增殖的影响。方法 人工合成FL基因片段 ,经基因重组技术获得重组质粒pPICZα FL ,电转化毕氏酵母 ,筛选分泌rhFL的基因工程菌株。用流式细胞仪测定恶性造血细胞表面Flt3R的表达 ,用MTT法分析rhFL对恶性造血细胞的增殖作用及DXM的影响。结果 经筛选 ,获得稳定分泌rhFL的基因工程菌株 ,表达量达 30mg/L。rhFL在 10～ 10 0ng/ml时 ,刺激Raji和HL 6 0细胞的增殖 ,但对绝大多数的恶性造血细胞无刺激作用 ;18株恶性造血细胞株中 5株细胞表达Flt3R ;对部分病理类型的白血病新鲜标本的研究发现 ,6 0 %患者的外周血或骨髓细胞表达Flt3R ,急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白血病患者Flt3R的阳性率较高 ,但仅有部分患者的白血病细胞在体外对FL的刺激有增殖效应。DXM可抑制rhFL对Raji、HL 6 0细胞及部分新鲜白血病标本的白血病细胞的刺激增殖作用。结论 应用毕氏酵母表达具有生物学活性的rhFL ,rhFL可刺激Raji、HL 6 0和部分白血病患者白血病细胞在体外的增殖。DXM通过降低Flt3R的表达 ,抑制rhFL介导的恶性造血细胞的增殖。