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题名硒对幽门螺杆菌空泡毒素及其重组影响
被引量:4
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作者
段秀杰
王文凯
邵世和
刘继斌
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机构
江苏大学附属医院检验科
镇江市第一人民医院检验科
江苏大学医学技术学院微生物教研室
南通市肿瘤医院检验科
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出处
《中国公共卫生》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期833-835,共3页
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基金
江苏大学高级人才资助项目(JDG2004008)
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文摘
目的研究硒(Se)对幽门螺杆菌(Hp)空泡毒素(VacA)及重组VacA的影响。方法采用盐析、透析、柱层析、浓缩、抽滤等方法提纯幽门螺杆菌分泌的空泡毒素。通过琼脂糖凝胶电泳、基因序列分析鉴定重组载体,重组VacA产物经Ni-TEDTM蛋白纯化系统纯化,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、及免疫印迹(Western blot)鉴定,间接酶联免疫吸附(ELISA)法检测其抗原特异性。进行细胞培养、细胞爬片;采用分光光度计、倒置显微镜、透射电镜及流式细胞仪等方法检测硒对幽门螺杆菌分泌的VacA及重组毒素蛋白功能的影响。结果12 mmol/L硒即可使幽门螺杆菌形态发生球形变,鞭毛及菌毛出现脱落,溶血作用减弱,硒对VacA空泡毒作用无直接影响(P>0.05);硒通过抑制Hp生长减少VacA产生量从而使空泡毒作用减弱;通过抑制表达VacA的大肠埃希菌生长,减少重组VacA表达量;能增强重组VacA对人胃上皮癌细胞株(SGC-7901)生长抑制作用,使细胞分裂指数、集落形成率、S期细胞数量降低,G1期细胞总数增加;使表达重组VacA的大肠埃希菌产生脂溶性砖红色色素,并随硒浓度增加颜色加深。结论硒能抑制Hp生长,改变Hp的形态及结构;可使重组VacA表达量减少;能增强重组VacA对SGC-7901细胞的生长抑制及诱导细胞凋亡作用;可使表达重组VacA的大肠埃希菌产生脂溶性砖红色色素;不能直接抑制VacA的空泡毒作用。
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关键词
幽门螺杆菌(Hp)
空泡毒素(VacA)
重组空泡毒素
提纯
硒
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Keywords
Helicobacter pylori(Hp)
vacolating cytotoxin (vacA)
recombinant vacolating cytotoxin, extraction and purification
selenium (Se)
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分类号
R37
[医药卫生—病原生物学]
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