再生胰岛衍生家族成员4在不同分子分型乳腺癌中的表达及其与预后的关系

目的再生胰岛衍生家族成员4(Reg Ⅳ)与多种肿瘤的发生发展密切相关,但在浸润性乳腺癌中鲜见报道。文中旨在检测Reg Ⅳ在腺腔A型(LA)、腺腔B型(LB)、HER-2过表达型(HER-2+)和三阴性(TNBC)4种不同分子分型乳腺癌中的表达情况及与临床病理特征、生存预后之间的关系。方法收集2011年3月至2017年10月连云港市第一人民医院病理科284例乳腺癌患者的病理资料。分析Reg Ⅳ在不同分子分型(LA、LB、HER-2+和TNBC型)中的表达情况及与临床病理特征之间的关系;分析数据库内Reg ⅣmRNA在乳腺癌中的表达水平及与患者预后的关系。结果 Reg Ⅳ在LA型、LB型、HER-2+及TNBC型乳腺癌中的阳性率分别为52.11%、50.00%、65.22%、20.00%,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。Reg Ⅳ在乳腺癌中的表达与肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05)。Reg Ⅳ高表达的乳腺癌患者复发风险明显低于低表达者(HR=0.59,95%CI:0.50～0.69),进一步分析发现Reg Ⅳ高表达的LA乳腺癌患者复发风险明显低于低表达者(HR=0.63,95%CI:0.48～0.82),Reg Ⅳ高表达的LB乳腺癌患者复发风险明显低于低表达者(HR=0.56,95%CI:0.40～0.76),Reg Ⅳ高表达的TNBC乳腺癌患者复发风险明显低于低表达者(HR=0.51,95%CI:0.36～0.71)。结论 Reg Ⅳ可为乳腺癌的分子分型诊断提供参考,并可作为评估乳腺癌不同分子分型患者预后良好的指标之一。

RegⅣ、EGFR和Survivin在结直肠腺瘤癌变过程中的表达及意义

目的研究再生基因Ⅳ(RegⅣ)、表皮生长因子受体(EGFR)及Survivin在结直肠腺瘤癌变过程中的表达,并分析其与结直肠腺瘤及结直肠癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学结合组织芯片法检测结直肠正常黏膜(150例)、腺瘤(77例)、结直肠癌(150例)RegⅣ、EGFR及Survivin的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果 RegⅣ、EGFR、Survivin在结直肠正常黏膜、腺瘤及癌组织中,表达逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。RegⅣ、Survivin与结直肠腺瘤大小及分级相关,EGFR仅与腺瘤的分级相关;RegⅣ、EGFR与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关,Survivin与结直肠癌的淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05),而3者与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤大小及浸润深度无关(P>0.05)。结直肠腺瘤组织内RegⅣ、EGFR、Survivin 3者无相关性(P>0.05);结直肠癌组织内RegⅣ与EGFR、RegⅣ与Survivin、EGFR与Survivin表达呈正相关(P<0.05)。结论 RegⅣ、EGFR及Survivin在结直肠腺瘤癌变过程中逐渐升高,提示3者共同参与结直肠腺瘤癌变的发生,且与结直肠癌的TNM分期密切相关,联合检测有利于对结直肠癌的预后进行评估,并为研发靶向药物提供理论支持。

人再生基因蛋白Ⅳ和细胞角蛋白18在胃癌患者血清中的表达及临床意义

目的探讨人再生基因蛋白Ⅳ（REGⅣ）和细胞角蛋白18（CK18）在胃癌患者血清中的表达及其在疗效监测中的应用价值。方法收集2008年5月-2010年7月在北京肿瘤医院消化肿瘤内科接受化疗的61例晚期胃腺癌患者及32例同期健康成年人的血清标本，采用ELISA法检测胃癌患者化疗前后以及健康对照者的血清REGIV、CK1871水平。所有化疗均为一线治疗，方案以氟尿嘧啶类药物为基础，联合铂类（顺铂或奥沙利铂）加或不加紫杉类的三药或两药联合方案，根据RECIST1．0标准行疗效评价，分为完全缓解（CR）、部分缓解（vR）、稳定（SD）和进展（VD）。结果胃癌组血清REGIV和CK18水平显著高于对照组[P〈0．01，REGIV5．15（2．14—22．55）ng／mlvs2．22（0．02～12．29）ng／ml，CK-18132．29（24．97～473．62）U／Lvs63．05（16．06—294．58）U／L]。在胃癌患者中，有淋巴结转移者的REGⅣ和CK18水平高于无淋巴结转移者（p〈0．05）。61例胃癌患者中，26例对化疗敏感（CR＋PR），35例不敏感（SD＋PD），这两类患者化疗前的REGIV、CK18表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。36例有化疗前后配对血清标本的患者中，CR＋PR患者14例，sD16例，PD6N，各类患者的REGIV、CK18表达水平在化疗前后差异无统计学意义（p〉0．05）。结论REGIV和CK18作为血清标志物对胃癌有一定诊断价值，但两者化疗前水平及化疗前后变化与晚期胃癌疗效无明显相关性。

慢病毒shRNA靶向干扰RegⅣ基因胰腺癌细胞株的构建

目的构建并鉴定再生基因4(regenerating islet-derived family member 4,RegⅣ)短发夹干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,继而建立稳定干扰RegⅣ基因表达的胰腺癌细胞株PANC-1。方法使用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测RegⅣ基因在胰腺癌细胞株中的表达情况。构建重组靶向干扰RegⅣ基因的shRNA慢病毒表达质粒pGC-shRNA-RegⅣ,用脂质体转染的方法将载体导入胰腺癌细胞,建立稳定表达shRNA的细胞株。使用荧光定量PCR检测干扰效率。RegⅣ基因过表达载体的构建方法为:将获取的目的基因与pEGFP-RegⅣ-3FLAG过表达质粒载体分别进行双酶切,利用电泳回收双酶切产物,转化感受态细胞并进行测序验证,验证成功后,使用Western blot检测其在293T细胞中的表达强度。结果 PCR结果显示RegⅣ在PANC-1中表达最高,在BxPC-3中表达最低。测序验证pGC-shRNA-RegⅣ重组质粒构建成功。将重组质粒稳定转染入胰腺癌细胞株PANC-1后能明显抑制RegⅣmRNA表达水平。过表达载体pEGFP-N1-3FLAG-RegⅣ合成成功后进行Western blot鉴定,验证pEGFP-N1-3FLAG-RegⅣ过表达载体构建成功。过表达RegⅣ基因转染BxPC-3后,与空质粒组相比,RegⅣ表达量明显提高。结论成功建立了靶向稳定干扰RegⅣ基因表达的shRNA胰腺癌细胞株PANC-1。

RegⅣ与消化系肿瘤研究进展

再生基因4(regenerating islet-derived family,member 4,RegⅣ)是再生基因家族的新成员,定位于1p12-13.1,编码为17kDa的分泌性蛋白.RegⅣ选择性表达于正常胰腺和胃肠道上皮,炎症或肿瘤时可见原位或异位高表达.RegⅣ与消化系肿瘤的发生、发展、转移、抗药性及预后密切相关,其可能成为预防、诊断和治疗整个消化系肿瘤的新的重要靶分子.

麝香灸联合替吉奥与食物疗法治疗晚期胰腺癌患者的临床效果

目的观察麝香灸联合替吉奥与食物疗法治疗晚期胰腺癌的临床效果。方法采用单盲法、随机数字表法将66例晚期胰腺癌患者随机分为常规组22例、艾灸组22例及麝香灸组22例。常规组患者给予食物疗法联合替吉奥治疗,艾灸组患者在常规组基础上给予艾灸治疗,麝香灸组患者在常规组基础上给予麝香灸治疗。治疗前后检测3组患者血浆P物质(SP)、血清β内啡肽(β-EP)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))、自然杀伤T细胞(NKT)、γ干扰素(IFN-γ)、胰腺再生蛋白4(REG4)、巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)、T淋巴细胞亚群水平,评价两组患者疼痛数字评分法(NRS)、中医证候、卡氏功能状态(KPS)、癌症患者生命质量测定量表(QLQ-C30)评分,记录3组患者3个月及6个月生存率。结果治疗后,3组患者NKT、IFN-γ、β-EP水平均高于治疗前,REG4、MIC-1、PGE_(2)、SP水平均低于治疗前,且艾灸组、麝香灸组患者NKT、IFN-γ、β-EP水平均高于常规组,REG4、MIC-1、PGE_(2)、SP水平均低于常规组,麝香灸组患者NKT、IFN-γ、β-EP水平均高于艾灸组,REG4、MIC-1、PGE_(2)、SP水平均低于艾灸组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。治疗后,3组患者CD4^(+)、CD3^(+)、CD8^(+)水平均低于治疗前,且艾灸组、麝香灸组患者CD4^(+)、CD3^(+)、CD8^(+)水平均高于常规组,麝香灸组患者CD4^(+)、CD3^(+)、CD8^(+)水平均高于艾灸组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。治疗后,3组患者NRS、中医证候评分均低于治疗前,KPS、QLQ-C30评分均高于治疗前,且艾灸组、麝香灸组患者NRS、中医证候评分均低于常规组,KPS、QLQ-C30评分均高于常规组,麝香灸组患者NRS、中医证候评分均低于艾灸组,KPS、QLQ-C30评分均高于艾灸组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。艾灸组、麝香灸组患者3个月、6个月生存率均高于常规组,麝香灸组患者3个月、6个月生存率均高于艾灸组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论麝香灸联合替吉奥与食物疗法治疗晚期胰腺癌患者,可降低患者REG4、MIC-1水平,保护机体免疫功能,减少机体疼痛介质,改善患者临床症状,提升患者生活质量。