指纹图谱结合一测多评法评价马鞭草质量的方法学研究

目的:建立马鞭草指纹图谱,同时运用一测多评法对马鞭草中3种指标性成分进行含量测定。方法:采用Agilent C18色谱柱,以0.1%磷酸水溶液-乙腈为流动相,采用梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长为230 nm,柱温30℃。应用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》软件建立16批马鞭草药材的HPLC特征指纹图谱。以马鞭草苷为内参物,分别计算与戟叶马鞭草苷和毛蕊花糖苷的相对校正因子,实现一测多评。同时应用外标法和一测多评法测定3种指标性成分的含量,比较2种方法的测定结果是否有差异。结果:16批马鞭草的指纹图谱共标定11个共有峰,相似度为0.873~0.995,两种方法测定结果无显著性差异,相对校正因子重复性良好。16批不同产地马鞭草样品中戟叶马鞭草苷、马鞭草苷和毛蕊花糖苷的含量范围分别为0.31%~1.92%、0.25%~1.36%、0.16%~2.46%。结论:建立的指纹图谱结合一测多评法可以较为完整地反映马鞭草的质量差异,具有良好的精密度、重复性和稳定性,可为马鞭草的质量评价与控制提供科学依据。

一测多评法测定冀南产柴胡中柴胡皂苷类成分

目的:建立一测多评法测定冀南产柴胡中4种柴胡皂苷含量的方法,并进行方法学和耐用性考察。方法:以冀南产柴胡为研究对象,以柴胡皂苷a(SSa)为对照品,建立柴胡皂苷c(SSc)、柴胡皂苷d(SSd)和柴胡皂苷f(SSf)与内参物SSa间的相对校正因子。分别采用"一测多评"法和外标法测定冀南产柴胡中4种柴胡皂苷的含量,并将测定结果进行t检验评价,验证"一测多评"法测定冀南产柴胡中4种柴胡皂苷的准确性和科学性。结果:在线性范围内,冀南产柴胡中柴胡皂苷间的相对校正因子分别为f210nmSSc/SSa=0.75,f210nmSSd/SSa=0.97,f210nmSSf/SSa=1.08。一测多评法与外标法计算结果值之间无统计学差异(P>0.05)。结论:一测多评法适用于冀南产柴胡中4种柴胡皂苷的含量测定。

小金牛草质量控制方法研究

为了建立小金牛草药材的定性定量检测方法,为其质量评价提供依据,采用薄层色谱法对其进行定性鉴别;自制Telephenone B对照品,以芒果苷为参照物,建立芒果苷与Telephenone B间的相对校正因子,采用HPLC结合一测多评的方法进行含量测定,并将外标法测定的结果与计算值进行比较,评价所建立的一测多评方法的准确性和可行性。结果表明,薄层色谱斑点清晰,易于判断。芒果苷和Telephenone B分别在0.2-1.4μg（r=0.999 9）和0.13-0.91μg（r=0.999 4）范围内线性关系良好。所建立的相对校正因子重现性良好,采用相对校正因子计算的含量值与外标法的实测值之间没有显著性差异。该方法准确可行,可用于小金牛草的质量控制。

一测多评法同时测定栀子中6种成分

目的:采用多波长分段检测法,探索一测多评法应用于栀子中6种成分同时测定的方法学考察模式。方法:以栀子苷为参照物,建立其对栀子酸、绿原酸、藏红花素Ⅰ、藏红花素Ⅱ、藏红花素Ⅲ的相对校正因子,经不同色谱系统和不同色谱柱间比较验证。结果:方法具有良好的重现性和耐用性,用于20个批次栀子成分测定,与外标法检测结果线性相关系数大于0.999。结论:该方法可用于栀子多组分质量评价。

“一测多评”法测定三黄片中的大黄蒽醌类成分

目的:建立"一测多评"法测定三黄片中大黄蒽醌类成分含量的分析方法,并进行方法学考察。方法:以三黄片为研究对象,建立大黄酸(rhein)、大黄酚(chrysophanol)和大黄素甲醚(physcion)与内参物大黄素(emodin)间的相对校正因子。分别采用外标法和"一测多评"法测定三黄片中4种蒽醌类成分的含量,并将"一测多评"法的计算值与外标法实测值用相对误差进行评价,以验证"一测多评"法的合理性、可行性和可重复性。结果:三黄片中蒽醌类成分间的相对校正因子分别为f 254nm大黄酸/大黄素=1.13,f 254nm大黄酚/大黄素=1.46,f 254nm大黄素甲醚/大黄素=1.01。"一测多评"法的计算结果与外标法的实测值之间没有显著性差异,实验所得的相对校正因子可信。结论:"一测多评"法可作为一个新的质量评价模式用于三黄片中蒽醌类成分的质量评价。

一测多评法测定淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C及淫羊藿苷的含量

目的:在HPLC法同时测定淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷含量的基础上,建立一测多评法的方法学考察模式,验证此方法在淫羊藿中应用的可行性和技术适应性。方法:以淫羊藿药材为研究对象,药材中4个主要有效成分为指标成分,分别建立淫羊藿苷与朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的相对校正因子,计算朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的含量,实现一测多评;同时采用外标法测定药材中该4个指标成分的含量,并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果:12批淫羊藿药材中4个指标成分的含量计算值与实测值间无显著差异。结论:用一测多评法控制淫羊藿药材的质量是可行的、准确的。

一测多评法测定六神丸中5种蟾毒配基类成分含量

目的:建立一测多评法测定六神丸中蟾毒配基类成分含量的分析方法,并验证此方法在六神丸中的可行性和适应性。方法:采用高效液相色谱法,以华蟾酥毒基(S)为内参物,建立日蟾毒它灵(A)、蟾毒它灵(B)、蟾毒灵(C)和脂蟾毒配基(D)的相对校正因子。分别采用外标法和一测多评法测定六神丸中5种蟾毒配基类成分的含量,并比较测定值和计算值之间的差异。结果:六神丸中蟾毒配基类成分间的相对校正因子分别为fA/S=1.06,fB/S=0.896,fC/S=1.09,fD/S=0.914,一测多评法的计算值与外标法的实测值的相对误差小于1%。结论:以华蟾酥毒基为内参物建立的相对校正因子准确、可行,一测多评法可用于六神丸中蟾毒配基类成分的质量评价。

一测多评法与外标法测定双黄连制剂中黄酮类成分含量的比较分析

目的分别采用一测多评法(QAMS)与外标法(ESM)测定双黄连制剂中4种黄酮类成分的含量,以证明一测多评法在复方中应用的可靠性。方法采用RP-HPLC,色谱柱:XtimateTMC18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇(A)-0.2%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长274 nm。结果一测多评法的计算值和外标法的实测值无显著差异。结论 "一测多评"法可作为一个新的质量评价模式用于双黄连制剂中黄酮类成分的质量评价。

HPLC-UV-ELSD同时测定黄芪水提液与含醇提取物中6种成分

建立参芪扶正注射液2种中间品中6种药效成分的HPLC-UV-ELSD分析法,并探讨在不同检测器上建立一测多评分析法的可行性。选取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷分别作为黄酮类成分和皂苷类成分的内标,计算芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、2＇-羟基-3＇,4＇-二甲氧基异黄烷-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、黄芪皂苷Ⅱ相对于各自内标的相对校正因子,最后将样品一测多评法测定结果与外标法相比较。在黄酮类成分的UV检测中,14份样品一测多评方法的测定结果与外标法近似,相对偏差绝对值总体在5%以内。对于皂苷类成分的ELSD检测,2种方法测定结果相对偏差绝对值为0.48%~23.17%。在UV检测器上所建的一测多评方法较稳定,能够作为替代法起到节省对照品的作用,而在ELSD上所建一测多评方法准确度不如外标法,其原理与适用范围需要更进一步的探究。

一测多评法与外标法测定新清宁片中大黄蒽醌类成分含量

目的:采用"一测多评"法与外标法测定新清宁片中4种大黄蒽醌类成分的含量,并对测定结果进行比较。方法:采用RP-HPLC,Accurasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.4%磷酸水溶液(85∶15),流速1 mL.min-1,柱温30℃,检测波长254 nm。结果:20批新清宁片中4种蒽醌类成分QAMS计算值与ESM实测值无显著性差异,RSD<5%。结论:在一定色谱条件下,QAMS确定的相对校正因子可作为常数用于含大黄制剂的质量评价。

不同色谱条件对QAMS相对校正因子及相对保留值影响的实验研究

目的:考察不同色谱条件对"一测多评"(QAMS)相对校正因子及相对保留值的影响。方法:采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(85∶15),检测波长254 nm,柱温30℃,流速1 mL·min-1。以大黄中5种蒽醌类成分为研究对象,测定不同色谱条件下芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚和大黄素甲醚与内参物大黄素间的RCF和RTR。结果:5种大黄蒽醌间的RCF无显著性差异。结论:QAMS建立的蒽醌类成分间的RCF可作为一个常数用于中药或中成药中蒽醌类成分的含量测定。

一测多评法测定民族药铁包金提取物五种黄酮类成分

目的:建立民族药铁包金提取物中黄酮类成分含量测定的一测多评法,探讨一测多评法在民族药质量控制中的应用。方法:以儿茶素为内参物,分别建立花旗松素、香橙素、圣草酚和槲皮素与儿茶素的相对校正因子,分别采用外标法和一测多评法计算测定5种黄酮的含量,并比较二者结果相对误差。结果:4种黄酮类成分相对于儿茶素的相对校正因子分别为f280 nmcatechin/Taxifoli=1.229,f280 nmcatechin/Aromadendrin=1.145,f280 nmcatechin/Eriodictyol=1.364,f280 nmcatechin/Quercetin=0.897;相对保留时间分别为RTaxifoli/Catechin=1.49,RAroma dendrin/Catechin=2.22,REridictyol/Catechin=3.30,RQuercetin/Catechin=3.72;一测多评法的计算结果与外标法的实测值一致,实验所得的相对校正因子可靠、相对保留时间稳定。结论:建立的一测多评法可作为铁包金提取物中黄酮类成分的含量测定方法,一测多评法为民族药质量控制提供了一个新的模式与方法。

一测多评法测定槐角中异黄酮类成分的含量

目的:采用一测多评,建立槐角中异黄酮类成分的含量测定方法。方法:采用Agilent Extend C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),以甲醇-乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,流速为1.0 mL·min-1,柱温为30℃,检测波长为260 nm,建立槐角苷与槐属双苷、染料木苷和染料木素的相对校正因子,并以相对保留时间作为目标峰的定位标准。结果:色谱峰分离度良好,槐角苷在0.374～7.49μg、槐属双苷在2.16×10-2～0.432μg、染料木苷在2.61×10-2～0.522μg、染料木素在1.02×10-2～0.203μg呈良好线性关系,平均加样回收率槐角苷为100.7%、槐属双苷为96.3%、染料木苷为98.6%、染料木素为100.8%。槐角苷对槐属双苷、染料木苷和染料木素的相对校正因子分别为0.80、1.03、1.61。相对保留时间分别为0.42、0.81、1.26。结论:采用一测多评法测定槐角中异黄酮类成分的含量是准确、可行的。

指纹图谱与一测多评法相结合测定积雪草中5种三萜类成分

目的建立指纹图谱与一测多评法同时测定积雪草中5种代表性三萜类成分的含量,并验证该方法在积雪草质量控制中的适用性与准确性。方法首先采用HPLC建立积雪草药材指纹图谱;以积雪草为研究对象,以积雪草苷为内参物,建立积雪草酸、羟基积雪草酸、羟基积雪草苷、积雪草苷B与其之间的相对校正因子(fs/k),用fs/k计算其他4种成分的含量;同时对一测多评的计算值与外标法实测值进行比较。结果以收集的12个批次积雪草样品为研究对象,建立了积雪草药材HPLC指纹图谱,确定了23个明显的共有峰,对8个共有峰进行了化学成分指认;建立了积雪草多成分一测多评定量方法,在各自线性范围内,积雪草苷B、羟基积雪草苷、羟基积雪草酸和积雪草酸的fs/k分别为0.85、1.13、0.46和0.45;且在不同高效液相色谱仪和不同色谱柱等条件下具有较好的重复性和耐用性;利用一测多评法与外标法得到的12批积雪草样品中各成分含量没有显著性差异。结论建立的一测多评法可同时对积雪草中5种代表性三萜成分进行定量分析,该方法简便、准确、可靠,可为积雪草多指标成分质量评价提供参考。

一测多评法同时测定莨菪浸膏片中3个生物碱的含量

目的:建立同时测定莨菪浸膏片中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱含量的一测多评法。方法:采用Phenomenex C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.05%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 m L·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为218 nm。以硫酸阿托品为内参物,计算阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱的相对校正因子,采用一测多评法和外标法分别测定3个生物碱含量,并比较两者测定结果的差异。结果:经方法学验证,分离度、精密度、重复性、稳定性良好,4批莨菪浸膏片中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱质量浓度分别在分别在22.00~66.01、9.48~28.45、6.32~18.97μg·mL^(-1)范围内线性关系良好。阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱的相对校正因子分别为0.855 1、0.950 3、0.760 5,各相对校正因子重现性良好。一测多评法测得批号为1509559、151004、151005、151006的样品中阿托品含量分别为15.788、26.008、26.254、26.518μg·片^(-1),东莨菪碱含量分别为7.765、1.117、1.121、1.009μg·片-1,山莨菪碱含量分别为0.605、0.823、0.654、0.482μg·片^(-1),其结果与外标法测定结果基本一致。结论:本法可用于莨菪浸膏片中莨菪烷类生物碱的质量控制。

一测多评法测定不同味连饮片中6个生物碱类成分的含量

目的:采用一测多评,建立味连饮片中非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱6个生物碱类成分的含量测定方法。方法:采用C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(含0.3%磷酸及0.2%三乙胺)为流动相,梯度洗脱,流速0.7 m L·min^(-1),柱温20℃,检测波长268 nm,建立小檗碱与非洲防己碱、表小檗碱、巴马汀、黄连碱、药根碱的相对校正因子,并以相对保留时间作为目标峰的定位标准。结果:色谱峰分离度良好,非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱进样量分别在0.118~1.18、0.176~1.76、0.190~1.90、0.272~2.72、0.198~1.98、0.98~9.80μg范围内呈良好线性关系,平均加样回收率分别为102.4%、98.1%、100.2%、102.6%、103.6%、103.3%。小檗碱对非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀的相对校正因子分别为1.351、1.094、1.304、1.361、1.451;12批味连饮片中6个生物碱类成分一测多评法计算值与实测值间均无显著性差异(RE<5%)。结论:采用一测多评法测定味连中生物碱类成分的含量准确、可行。

一测多评法同时测定止痢宁片中4个萜类内酯的含量

目的:建立采用一测多评法测定止痢宁片中4个萜类内酯含量的分析方法,验证该方法的可行性。方法:采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~60 min,45%A→80%A),流速1.0 m L·min^(-1),检测波长225 nm(0~24 min,检测穿心莲内酯;33~60 min,测木香烃内酯和去氢木香内酯)、250 nm(24~33 min,检测脱水穿心莲内酯);以脱水穿心莲内酯为内标,建立穿心莲内酯、木香烃内酯和去氢木香内酯间的相对校正因子,分别采用一测多评法和外标法测定止痢宁片中4个萜类内酯的含量,比较一测多评法计算值与外标法实测值的差异。结果:在一定的线性范围内,穿心莲内酯、木香烃内酯和去氢木香内酯与脱水穿心莲内酯间的相对校正因子分别为0.872、1.424和1.337,一测多评法计算值与外标法实测值之间没有显著性差异,所得的相对校正因子可信。结论:一测多评法质量评价模式可用于止痢宁片中4个萜类内酯的含量测定。