高湿环境致大鼠肾功能损害与水通道蛋白-2的表达

目的观察高湿环境对SD大鼠肾功能的影响,探讨水通道蛋白-2(AQP2)和加压素受体-2(V2R)在高湿环境大鼠肾脏中的表达及其意义。方法 20只SD大鼠随机分为对照组和高湿组,每组10只。高湿组大鼠每日放入人工气候箱10 h[温度25℃,相对湿度(RH)为(90±2)%],对照组置常温常湿环境[温度(25±2)℃,RH(55±5)%]。处理20 d后,荧光定量PCR检测肾髓质AQP2和V2R mRNA表达水平,Western blot法检测肾髓质AQP2、磷酸化AQP2(p-AQP2)以及V2R的蛋白表达水平。结果与对照组相比,高湿组大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)显著升高(P<0.05);肾髓质AQP2和V2R mRNA表达较对照组显著降低(P<0.01),AQP2、V2R的蛋白表达水平和AQP2的磷酸化水平较对照组显著降低(P<0.05)。结论高湿环境可对大鼠肾功能造成一定损害,且使V2R和AQP2的表达水平降低,AQP2磷酸化水平也降低,提示V2R和AQP2可能参与了高湿环境引起的肾功能损害的发生发展。

高湿环境中大鼠肾脏AQP2与V2R的表达及意义

目的研究水通道蛋白-2(AQP2)与加压素受体-2(V2R)在高湿环境下在大鼠肾脏中的表达及其意义.方法选择50只SD大鼠,随机将其分成研究组和对照组,每组各25只.研究组大鼠每日放入人工气候箱,对照组大鼠放置于常温常湿环境下,观察两组大鼠AQP2和V2R的蛋白表达水平.结果两组大鼠在血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、肾髓质AQP2和V2R mRNA水平、AQP2、V2R的蛋白表达和AQP2的磷酸化水平方面相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论通过本研究发现,高湿环境对大鼠肾脏有一定伤害,能降低V2R和AQP2的表达水平和AQP2磷酸化水平,说明V2R和AQP2可能参与了高湿环境对大鼠肾脏损害的过程.

甘草对大戟缓解小鼠肝癌腹水的影响

目的观察不同比例的甘草-大戟配伍煎剂对肝癌腹水小鼠的干预作用。方法 120只昆明小鼠随机分为空白、模型、大戟与甘草不同配比(1∶0.5、1∶1、1∶2和1∶4)、大戟单煎和甘草单煎共8组,每组15只。除空白组外,其他组小鼠腹腔均接种制备肝癌腹水小鼠模型,并分别灌胃给药12d,模型组给予等量生理盐水。12d后检测体质量、腹围、腹水量和肝肾指数,筛选甘草对大戟抗肝癌腹水药效影响显著的配比条件,并采用Western Blot法分析肾组织的水通道蛋白-2(Aquaporin-2,AQP2)和肾加压素受体(Renal vasopressin receptors-2,V2R)的蛋白含量,采用生化法测定小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)和尿肌酐(Cr)的含量。结果与模型组比较,大戟单煎组和大戟∶甘草1∶2组的腹水量、腹围和体质量显著减少(P<0.05~0.01),并降低肾组织AQP2和V2R的表达(P<0.05~0.01),其中,大戟∶甘草1∶2组能增强大戟单煎组的作用(AQP2:P<0.05,V2R:P<0.01),而大戟∶甘草1∶4组则降低单煎组的作用(AQP2:P<0.05,V2R:P<0.01)。结论大戟防治小鼠肝癌腹水的作用可能会因不同比例甘草的配伍而改变:或增强或被抵消,且相关变化可能与其有效调节了肾组织内的AQP2和V2R蛋白表达有关。

大鼠基底动脉和肾动脉血管加压素受体及钙动员特性的比较

用离体小血管分析了大鼠基底动脉（ＢＡ）和肾动脉（ＲＡ）血管内皮及平滑肌上血管加压素受体亚型的分布，及与之耦联的平滑肌细胞钙动员之特征。结果表明，精氨酸血管加压素（ＡＶＰ）对内皮完整和去内皮之ＢＡ和ＲＡ均有强烈的收缩作用，后者可被Ｖ＿１受体选择性拮抗剂ｄ（ＣＨ＿２）＿５Ｔｙｒ（Ｍｅ）ＡＶＰ所拮抗。未观察到ＡＶＰ对ＢＡ和ＲＡ的内皮依赖性舒张作用。提示在ＢＡ和ＲＡ之平滑肌细胞上均有Ｖ＿１受体分布，介导ＡＶＰ的直接缩血管作用，这在ＡＶＰ对ＢＡ和ＲＡ的作用中占主导地位。在Ｖ＿１受体所耦联的平滑肌细胞钙动员方面，ＢＡ和ＲＡ有所不同：ＢＡ的ＡＶＰ敏感钙池明显小于ＲＡ，ＢＡ的收缩对胞外钙内流的依赖性较之ＲＡ大。硝苯吡啶不仅抑制ＡＶＰ诱发的Ｃａ￣（２＋）内流，而且可明显抑制胞内钙池的释放。ＢＡ对硝苯吡啶比ＲＡ敏感。蛋白激酶Ｃ参与了ＡＶＰ对ＢＡ和ＲＡ的钙动员和收缩作用。

真武汤调控AVP/AQP2通路改善自发性高血压大鼠肾损伤研究

目的:探讨真武汤对自发性高血压大鼠(SHR)基于AVP/AQP2通路调控对肾损伤的保护作用。方法:50只SHR随机分为模型对照组、依那普利0.67 mg/kg组、真武汤2.1、8.4 g/kg组,Wistar Kyoto大鼠(WKY)为正常对照组,连续灌胃给予相应药物或蒸馏水8 w。每两周测大鼠尾动脉血压;实验末,记录24 h尿量,进行尿渗透压、Na^(+)、K^(+)离子浓度、HE染色、肾脏指数检测;全自动生化仪测定尿液总蛋白(UTP)、β2-微球蛋白(β2-MG);ELISA试剂盒测定尿液水通道蛋白2(AQP2)和血清精氨酸加压素(AVP)、醛固酮(ALD)含量,免疫印迹法检测肾组织AQP2蛋白表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠24 h尿量、Na^(+)、Na^(+)/K^(+)比值显著降低(P<0.01),尿液渗透压、K^(+)、UTP、β2-MG、AQP2含量、血清ALD、AVP含量、肾脏指数及肾组织AQP2蛋白表达显著增加(P<0.01)。与模型对照组比较,真武汤两个剂量组给药后能明显降低UTP、β2-MG的含量(P<0.05或P<0.01),改善SHR肾小球病变,明显降低血清ALD、AVP含量(P<0.05或P<0.01),明显促进尿液排出、明显降低渗透压、明显升高Na^(+)/K^(+)比值(P<0.05或P<0.01),显著降低肾组织AQP2蛋白表达和尿液AQP2含量(P<0.01),以真武汤8.4 g/kg组改善最明显。结论:真武汤通过调节AVP/AQP2通路保护高血压肾损伤。

甘草对芫花抗小鼠肝癌腹水作用的影响

目的:观察不同配比甘草-芫花煎剂对肝癌腹水模型小鼠的干预影响,并探讨其作用机制。方法:取昆明种雄性小鼠135只,随机分为正常组、模型组、芫花单煎组、芫花-甘草(1∶0.25,1∶0.5,1∶1,1∶2,1∶4)组和甘草单煎组。除正常组外,其他组小鼠腹腔均接种肝癌腹水瘤细胞系H22,并分别灌胃给药,正常组和模型组给予等容积生理盐水。12 d后分别测量各组小鼠的腹水量、腹围和体重及肝肾指数,蛋白质免疫印迹(Western blot)法测定肾脏组织中水通道蛋白2(AQP2)和肾加压素受体(V2R)的蛋白表达,生化法测定小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),尿素氮(BUN)和尿肌酐(Cr)的水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠的腹水量、腹围、体重、肝指数及血清中ALT,AST,BUN,Cr水平均显著升高(P<0.01),肾指数显著降低(P<0.01),AQP2,V2R蛋白的表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,芫花单煎组和芫花-甘草1∶0.5,1∶1和1∶2组均能显著降低小鼠的腹水量和体重(P<0.05,P<0.01);芫花单煎组和芫花-甘草1∶1组同时能显著降低小鼠的腹围(P<0.05,P<0.01),降低AQP2,V2R蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。与芫花单煎组比较,芫花-甘草1∶1组能显著降低小鼠的腹水量、腹围和体重(P<0.05,P<0.01),降低AQP2,V2R的表达(P<0.05),芫花-甘草1∶4组则使其显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:不同比例甘草的配伍能增强或抵消芫花抗小鼠肝癌腹水的作用,且相关变化可能与其有效调节了肾组织内的AQP2和V2R蛋白表达有关。