白藜芦醇诱导前列腺癌细胞系PC-3凋亡的实验研究

目的探讨白藜芦醇(resveratroi,Res)诱导人前列腺癌细胞系PC-3凋亡及其机制。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、软琼脂集落生长试验和流式细胞术测定Res对PC-3的增殖抑制、集落生长抑制、周期阻滞和诱导凋亡作用,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测对凋亡相关基因bcl-2和bax表达的影响。结果Res具有时间和剂量依赖性增殖抑制、G0/G1期阻滞和诱导凋亡作用,作用72 h IC50为0.39 g/L,Res 0.1 g/L作用2天对PC-3细胞集落生长抑制率为88.9%,Res 0.5 g/L作用2天G0/G1期细胞比例从42.30%增高至75.20%。Res可以下调bcl-2基因/蛋白,上调bax的表达。结论Res可能通过抑制PC-3细胞的集落生长、增殖抑制、G0/G1期阻滞、下调bcl-2基因,上调bax基因表达等作用机制诱导前列腺癌细胞凋亡。

白藜芦醇对HeLa细胞蛋白质组影响的研究

[目的]应用双向电泳及质谱技术研究白藜芦醇(Resveratrol,Res)对宫颈癌HeLa细胞蛋白质组的影响。[方法]经磺基罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法筛选对宫颈癌HeLa细胞有效的白藜芦醇浓度,流式细胞仪检测有效白藜芦醇浓度对HeLa细胞周期和凋亡的影响。HeLa细胞经白藜芦醇处理后,提取细胞总蛋白,应用双向电泳技术建立蛋白质组图谱,筛选白藜芦醇处理前后差异在2倍以上的蛋白质作为差异蛋白,进行质谱鉴定和生物信息学分析。[结果]50μmol/L以上浓度白藜芦醇24小时对HeLa细胞的活性产生影响,将细胞阻滞在S期,诱导HeLa细胞的早期凋亡,并呈剂量依赖性。通过差异蛋白质组分析筛选出12个差异蛋白质,包括原肌球蛋白、细胞核糖核蛋白C、锌指蛋白、钙连接蛋白、微管蛋白β、热休克蛋白70、α烯醇化酶、丙酮酸激酶、雌激素受体β、氨基甲酰磷酸合成酶,HeLa细胞经白藜芦醇处理后这些蛋白表达量均增加。[结论]白藜芦醇可能通过参与调节细胞的转移分化、凋亡、能量代谢等过程而起到抗肿瘤作用。

正交法研究虎杖白藜芦醇提取工艺

采用正交实验法,以提取物中白藜芦醇的提取率为评价指标,研究虎杖白藜芦醇的最佳提取分离工艺。结果表明:丙酮为提取剂的最佳提取工艺是100%丙酮,液料比为1:20,温度为40℃,时间为36h,虎杖中白藜芦醇提取率可达0.950%。

白藜芦醇促TRAIL诱导PC-3细胞凋亡的作用

目的研究白藜芦醇(Res)促进肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白诱导人前列腺癌细胞PC-3凋亡的作用。方法实验分为TRAIL蛋白组以及联合应用白藜芦醇和TRAIL蛋白的联合用药组;采用CCK8法检测细胞增殖情况,确定白藜芦醇的用药浓度;通过CCK8法、流式细胞术检测TRAIL蛋白组、联合用药组细胞增殖和凋亡情况;分光光度法检测两组细胞caspase-8、caspase-3活性。结果 CCK8结果提示白藜芦醇的用药浓度为50μmol/L;联合用药组PC-3细胞的增殖率明显低于TRAIL蛋白组(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,联合用药组PC-3细胞的凋亡率明显高于TRAIL蛋白组(P<0.05);caspase活性检测结果显示,联合用药组PC-3细胞caspase-8、caspase-3的活性明显高于TRAIL蛋白组(P<0.05)。结论白藜芦醇能够促进TRAIL蛋白诱导的PC-3细胞凋亡,为肿瘤的生物学治疗提供新的材料。

白藜芦醇合成工艺研究

白藜芦醇具有明显的抗氧化、抗自由基和延缓人体机能衰老的作用,具有显著的抗癌、消炎、杀菌、降血脂、抗血栓、抗动脉粥样硬化、预防心血管疾病的药理活性。介绍了一种白藜芦醇的全合成工艺,给出了每步反应的收率以及使用TLC监测反应过程、判断反应终点的方法。

白藜芦醇和槲皮素对高脂膳食小鼠股骨性能的影响

目的探讨不同时期高脂日粮小鼠股骨性能变化,及白藜芦醇、槲皮素的干预效果。方法 4 w龄C57BL/6雌性小鼠,随机分成4组:正常日粮组(C)、高脂日粮组(HFD,含20%脂肪)、高脂日粮+0.06%白藜芦醇组(HFD+0.06%R)和0.01%槲皮素组(HFD+0.01%Q)。分别在实验3w、6w、13w、26w末处死小鼠,测定股骨参数、氧化应激指标、荧光定量PCR检测6w、26w相关基因ctsk、BGLAP2、col1a1表达。结果与同期C组相比,HFD组股骨丙二醛6w至26w显著增高,GSH/GSSG在6w、26w显著降低(P<0.05)、13w时略有恢复;HFD组小鼠股骨灰分与GSH/GSSG呈现相似趋势;股骨钙含量自13w开始显著低于C组,持续到26w(P<0.05);股骨长度和骨强度在26w显著低于C组(P<0.05);HFD组股骨成骨相关基因col1a1、BGLAP2显著下调、骨基质降解相关基因ctsk显著上调(P<0.05)。白藜芦醇和槲皮素减轻同期高脂组股骨氧化应激,调节ctsk、BGLAP2、collal表达并改善股骨性能参数。结论在长期高脂膳食饲喂中,小鼠自身股骨发育存在周期性调节;白藜芦醇和槲皮素在各个时期通过改善氧化还原状态保护股骨性能。