Notch信号对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞凋亡的保护作用

目的探讨Notch1信号对高糖情况下多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[Poly(ADPribose)polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的p50亚单位(NF-κB50)介导的人视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVECs)凋亡的抑制作用。方法体外培养人RVECs及HEK293T细胞,并进行传代,同时构建高糖(葡萄糖浓度为30 mmol·L-1)人RVECs细胞模型。构建p CMV-ScriptNotch1和p CMV-Script-DLL4质粒,酶切鉴定后Western Blot法检测重组质粒表达目的基因的效果,同时合成si Notch1并转染高糖培养的人RVECs,Western Blot法检测Notch基因敲除效果。应用免疫共沉淀及Western Blot法检测si Notch1对高糖下PARP-1和NF-κB的相互作用的影响;应用Western Blot法检测高糖条件下Notch1/DLL4上调和下调后人RVECs中PARP-1、p-AKT、NF-κB50及caspase-3的表达变化。结果人RVECs复苏后24 h贴壁,细胞呈扁平梭形,3 d左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象。免疫共沉淀结果显示高糖组培养的人RVECs其PARP-1结合的NF-κB50的量较正常对照组增加;将si Notch1转染高糖组培养的人RVECs后或同时加入DLL4,则人RVECs中PARP-1结合的NF-κB50的量较前增加显著,提示Notch能抑制高糖下PARP-1和NF-κB50的相互作用。Western Blot检测结果显示高糖条件下,Notch1和DLL4上调后其PARP-1及caspase-3表达量较前显著降低;Notch1下调后其PARP-1及caspase-3表达量较前增加;p-AKT表达量则相反;提示Notch信号能抑制高糖诱导的PARP-1及caspase-3的激活及表达。结论高糖情况下Notch信号可调控PARP-1和NF-κB的相互作用,并抑制PARP-1激活引起的人RVECs的凋亡。

脂联素对RF/6A细胞增殖、迁移及管腔形成的影响

目的研究脂联素(adiponectin,APN)对体外培养的猴脉络膜/视网膜内皮细胞(RF/6A)增殖、迁移和管腔形成的影响,探讨APN对脉络膜和视网膜新生血管的抑制作用。方法取体外培养的生长良好的RF/6A细胞用于实验,将细胞随机分为对照组、不同浓度重组APN组(5 pg·mL^(-1)、50 pg·mL^(-1)、500 pg·mL^(-1)预处理1 h)。培养24 h后采用MTT法检测细胞增殖,细胞划痕法检测细胞迁移,基质胶(Matrigel)法检测管腔形成。结果不同浓度重组APN组24 h的细胞增殖均弱于对照组(均为P<0.05),不同浓度重组APN组细胞24 h的迁移面积均小于对照组(均为P<0.05),不同浓度重组APN组管腔形成数均明显少于对照组(均为P<0.05),且细胞增殖、迁移和管腔形成均随着重组APN浓度的升高而降低。结论 APN能够明显抑制RF/6A细胞的血管生成过程,提示APN对于脉络膜和视网膜新生血管具有一定的保护作用。

复方血栓通胶囊治疗视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿及对眼血流动力学的影响

目的分析复方血栓通胶囊对视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿术后的疗效及对患眼血流动力学的影响。方法回顾性分析视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿患者42例(42眼),随机分为中药组和联合组各21例(21眼),均单眼患病。42眼均接受玻璃体腔内注射康柏西普后1~2周内进行视网膜光凝和/或黄斑格栅状光凝治疗,同时眼内注射康柏西普。术后中药组给予复方血栓通胶囊(口服1.5 g/次,3次/d)治疗3个月,联合组未予任何药物治疗。对治疗1周、1月、3月2组最佳矫正视力、黄斑厚度、血流动力学变化进行比较,并行安全性评估。结果2组治疗后最佳矫正视力高于治疗前(P<0.05);中药组治疗1月、3月后最佳矫正视力高于联合组(P<0.05);2组患者治疗1周、1月、3月视网膜厚度均低于治疗前(P<0.05);中药组治疗后收缩期峰值流速、舒张末期血流速度高于联合组,且2组治疗后均高于治疗前(P<0.05);2组阻力指数、搏动指数均低于治疗前,且中药组低于联合组(P<0.05)。随访期间仅见4例球结膜下出血,其余未见其他不良反应发生。结论玻璃体腔注射康柏西普联合视网膜光凝,辅助复方血栓通胶囊口服比单纯联合治疗更有助于改善眼底血液循环,延缓黄斑水肿复发,改善视网膜功能。

应用海德堡视网膜断层扫描仪对高眼压症视盘结构参数的测定

目的应用海德堡视网膜断层扫描仪（HRT）对高眼压症患者视盘结构进行测试，观察眼压大于25mmHg和小于25mmHg的高眼压症视盘结构参数的异同。方法对27例（50只眼）高眼压症患者和27名（50只眼）正常人进行HRT检查，并将高眼压症患者分为眼压≥25mmHg（23只眼）。和眼压〈25mmHg（27只眼）两组。将获得的视盘结构参数分为三组进行比较：①高眼压症眼与正常眼②眼压≥25mmHg和〈25mmHg的高眼压症眼。③眼压25mmHg的高眼压症眼与正常眼。结果高眼压症眼与正常眼比较视盘参数中盘沿面积、盘沿体积、最大杯深、轮廓线高度变化值、神经纤维截面面积差异有显著性（P〈0.05）：眼压大于和小于25mmHg的高眼压症眼比较盘沿面积、盘沿体积、平均网膜神经纤维层厚度、神经纤维截面面积差异有显著性（P〈0．05）；眼压〈25mmHg的高眼压症眼与正常眼比较各视盘参数间差异无显著性（P〉0．05）。结论眼压〈25mmHg高眼压症的HRT视盘结构无明显变化，而眼压≥25mmHg高眼压症的HRT视盘结构参数中盘沿面积、盘沿体积、平均视网膜神经纤维层厚度及神经纤维截面面积发生了较明显改变，这四个参数可作为诊断早期青光眼的重要参考指标。