51例APL患者PML/RARα mRNA转录本的检测及其意义

目的建立实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)方法并检测初诊急性早幼粒细胞白血病(APL)患者甲幼粒细胞白血病/维甲酸受体(PML/RARα)融合基因含量,评价检测结果的临床意义。方法采用"欧洲抗癌计划"推荐的引物和探针建立RQ-PCR方法,检测51例初诊APL患者的PML/RARα融合基因含量,并分析其临床意义。结果 APL初诊患者的年龄与外周血白细胞(WBC)数呈负相关(r=-0.376,P=0.014),相关性主要见于长型和变异型患者(r=-0.51,P=0.005)。51例APL初诊患者中,长型患者33例,变异型患者3例,长型和变异型36例。APL初诊患者PML/RARα转录本绝对含量为3.75×102～6.20×105拷贝/50ng(中位7.24×103拷贝/50ng);相对含量为0.51%～676.87%(中位9.31%)。15例短型患者PML/RARα转录本绝对含量为2.26×103～2.33×106拷贝/50ng(中位1.17×105拷贝/50ng);相对含量为12.04%～802.68%(中位95.26%)。短型患者外周血WBC数明显高于长型患者(P=0.041),其融合基因含量也明显高于长型患者(P<0.01),而在性别、年龄、外周血Hb、PLT,骨髓原粒及异常早幼粒细胞比例、血液学缓解时间和分子生物学缓解时间等方面比较差异无统计学意义。33例初诊患者血液学缓解时间、分子生物学缓解时间与患者的年龄、WBC数及融合基因含量无相关性。结论 RQ-PCR方法敏感、可靠,可以对APL初诊患者进行诊断和分型。

全反式维甲酸对慢性酒精性肝损伤大鼠肝脏TGF-β1、CTGF和Col1a1表达的影响

目的:通过观察全反式维甲酸对慢性酒精性肝损伤大鼠肝脏TGF-β1、CTGF和Collal表达的影响,探讨该药物对酒精性肝纤维化形成的作用．方法:大鼠24只随机分为3组:酒精组(J组),给予酒精-玉米油混悬液灌胃;治疗组(A组),给予上述混悬液灌胃8 wk后加用0,15 mg／(kg·d) 的全反式维甲酸灌胃;对照组(N组),给予等量的生理盐水和玉米油灌胃．16 wk后处死大鼠．光、电镜下观察肝组织病理改变,高压液相色谱法(HPLC)测肝组织中维甲酸的含量,免疫组化法检测肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中TGF-β1、CTGF和Ⅰ型胶原前胶原α1(Collal)的mRNA水平．结果:光镜下酒精组及治疗组均呈不同程度的酒精性肝炎改变,电镜下酒精组肝细胞线粒体肿胀,内质网扩张,脱颗粒,而治疗组改变轻于酒精组．肝组织中维甲酸含量:酒精组低于正常组,治疗组接近对照组水平．Collal 的mRNA表达在酒精组中较对照组明显增高 (0．18±0．03 vs 0．10±0．02,P<0．01),治疗组较酒精组表达下降(0．14±0．03 vs 0．18±0．03,P <0．05)．TGF-β1的mRNA及蛋白表达在酒精组中增高(0．53±0．17 vs 0．34±0．05,105．93 ±10．12 vs 149．27±10．17,P<0．01),治疗组相对于酒精组有所下降(0．41±0．06 vs 0．53± 0．17,130．80±6.23 vs 105．93±10．12,P<0．05)． CTGF的mRNA及蛋白表达在酒精组中增高 (0．41±0．13 vs 0．17±0．05,130．84±5．72 vs 158.37±6．64,P<0．05),治疗组对于酒精组有所下降(0.30±0．04 vs 0．41±0．13,149．23± 6．65 vs 130．84±5．72．P<0．05)．结论:小剂量全反式维甲酸通过降低慢性酒精性肝损伤大鼠肝脏致纤维化因子TGF-β1, CTGF和Collal的表达抑制早期酒精性肝纤维化的形成．

KAI1基因转染ATRA诱导对小细胞肺癌细胞株恶性特征的抑制作用

背景与目的 :探讨新抑癌基因KAI1与全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid,ATRA)对小细胞肺癌NCI-H446细胞株抑制增殖和诱导分化的作用。材料与方法 :用脂质体介导的基因转染方法 ,借助质粒表达载体(PCMV -NEO -XhoI),将抑癌基因KAI1转入小细胞肺癌NCI-H446细胞中 ,经G418筛选 ,获得稳定表达的细胞克隆。用10-6 mol/LATRA作用于转染及未转染KAI1基因的小细胞肺癌NCI-H446细胞株,集落形成率检测细胞体外增殖能力 ,流式细胞仪进行细胞周期和凋亡分析,间接免疫荧光染色结合流式细胞仪检测转染前后细胞CD82蛋白的表达。免疫组化测定MYC的表达 ,放射免疫测定LN(层连蛋白)表达。结果 :ATRA处理脂质体 -KAI1基因转染的小细胞肺癌细胞CD82表达降低 ,细胞增殖能力下降 ,凋亡增加 ,更多的细胞被阻止于G1/G0 期 ,MYC及LN表达下降。结论 :抑癌基因KAI1与ATRA对抑制小细胞肺癌NCI-H446细胞株的增殖和促分化有协同作用。

全反式维甲酸对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响

目的观察全反式维甲酸(ATRA)对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响,探讨其抑制肿瘤生长的作用方式。方法建立急性前髓性白血病细胞HL60的裸鼠皮下实体瘤模型,经尾静脉隔日给予ATRA,第14天测量肿瘤大小;体外实验中,用免疫荧光法检测分化相关抗原CD11b的表达,观察ATRA对HL60分化水平的影响,用碘化丙啶(PI)染色法观察ATRA对HL60的细胞周期的影响。结果 ATRA治疗14 d后,ATRA组瘤体体积为(0.5±0.6)cm3,对照组为(1.9±1.7)cm3(P<0.05);体外实验中,ATRA处理HL60细胞72 h后,细胞分化相关抗原CD11b的表达为(27.3±3.2)%,对照组(5.1±3.2)%(P<0.01);ATRA处理HL60细胞24 h后,检测细胞周期分布比例,ATRA处理组静止期(G0/G1期)细胞比例为(57.6±1.5)%,对照组(43.0±2.0)%(P<0.01)。结论 ATRA能够有效抑制HL60实体瘤的生长;体外实验证实,ATRA抑制HL60生长的作用机制是诱导细胞G0/G1期阻滞,诱导细胞分化。

亚砷酸联合维甲酸化疗治疗急性早幼粒细胞白血病疗效观察

目的:研究急性早幼粒细胞白血病行亚砷酸和维甲酸、化疗联合治疗效果。方法:资料取本院2008年4月至2015年4月急性早幼粒细胞白血病90例患者予回顾分析,按治疗方案分成两组,对照组行维甲酸与化疗,观察组联合亚砷酸,对比两组疗效。结果:观察组早幼粒细胞比例与总白细胞数改善效果比对照组优(P<0.05)。结论:急性早幼粒细胞白血病患者行亚砷酸和维甲酸、化疗联合治疗效果满意。

不同浓度维甲酸与氢醌协同治疗黄褐斑的临床研究

目的:根据前期研究的结论配制不同浓度的维甲酸、氢醌霜对黄褐斑进行治疗,并对其疗效和安全性进行评价。方法:配制治疗药美白A(0.015%维甲酸+0.015%氢醌)及美白B(0.03%维甲酸+0.03%氢醌),对照药美白C(20%壬二酸)及美白D(3%氢醌)。把360例黄褐斑病人分为男性、女性与妊娠有关、女性与妊娠无关3组,每组120例。每组病人采用随机单盲的方法使用A、B、C、D药物各30例。连续观察4周并判断疗效及不良反应。结果:A、B、C、D4种药物治疗黄褐斑的有效率分别为78.16%,94.38%,81.60%,81.18%,4种药物疗效差别有统计学意义(P<0.05),B组药物疗效明显高于A、C、D组。不良反应率分别为1.15%,4.49%,20.68%,15.29%,不良反应率差别有统计学意义(P<0.05),A、B不良反应率明显低于C、D药物。结论:0.03%维甲酸+0.03%氢醌霜在临床上是一个相对比较安全,对黄褐斑疗效显著的外用制剂。

全反式维甲酸对酒精性肝损伤大鼠肝脏retinoids含量和CYP2E1表达的影响

目的:研究补充小剂量全反式维甲酸(ATRA)对酒精喂养大鼠肝脏维生素A类物质(reti- noids,主要是维生素A和RA)含量、维生素A类物质极性代谢产物(PRMs)形成,细胞色素P4502E1(CYP2E1)表达和肝细胞损伤的影响。方法:将30只SD大鼠随机分为A组(正常对照组),B组(单纯乙醇组)、C组(无水乙醇8 g/kg ig8wk+150μg/kg ATRA)、D组(无水乙醇8 g/kg ig 8 wk+1.5 mg/kg ATRA ig 4 wk)四组.光镜下观察肝组织病理变化,高效液相色谱(HPLC)技术测定肝组织中Vitamin A类物质(retinoids)的含量,Western blotting检测肝脏CYP2E1的表达.结果:B组大鼠肝脏RA、维生素A(Retinol)和维生素A棕榈酸酯(retinyl palmitate)与A组相比含量显著降低(0.077±0.029 nmol/g vs 0.183±0.037 nmol/g,8.13±1.379 nmol/g vs 21.43±2.944 nmol/g,132.6±6.472 nmol/g vs 221.1±10.35 nmol/g,P<0.01),且肝脏中出现明显的PRMs.C组RA和Retinol含量恢复至A组水平,retinyl palmitate含量也部分恢复.D组RA和retinyl Dalmilate完全恢复至正常水平,而Retinol水平较A组升高(27.26±3.149 nmol/g vs 21.43±2.944 nmol/g,P<0.05).两种剂量的ATRA均可完全阻止PRMs形成.病理组织学检查显示补充ATRA可明显减轻肝细胞肿胀、脂肪变性,但对CYP2E1的表达没有明显影响。结论:小剂量ATRA能恢复酒精性肝病(ALD)大鼠肝脏retinoids含量,阻止PRMs产生,从而减轻肝细胞损伤.

转移因子胶囊联合消疣汤治疗扁平疣的临床观察

目的 观察转移因子胶囊联合消疣汤治疗扁平疣的疗效。方法 将 6 0例扁平疣患者随机分为治疗组 34例和对照组2 6例。治疗组口服转移因子胶囊 ,中药消疣汤内服及外搽 ,对照组口服转移因子胶囊 ,外用 0 0 3%维A酸霜。观察两组总有效率和不良反应。结果 治疗组总有效率为 91 1 8% ,对照组总有效率为 6 9 2 3% ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 转移因子联合消疣汤有良好的抗病毒、增强机体免疫力的作用 。

全反式维甲酸逆转家兔颊黏膜癌前病变实验研究

目的评价全反式维甲酸逆转兔颊黏膜鳞状上皮癌前病变的效果。方法在已制备的兔鳞状上皮癌前病变模型上,贴附全反式维甲酸(ATRA)药膜,分别采用病理组织学、免疫组织化学及流式细胞术观察病理变化、癌基因及抑癌基因蛋白的表达,以及细胞的凋亡及增殖情况。结果 12周后,对照组16只家兔中2只逆转,6只病情稳定,8只恶化;ATRA组16只家兔中7只逆转,7只稳定,2只恶化;免疫组织化学显示,随ATRA逆转实验进行,增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2蛋白表达下降,P53蛋白表达上升,凋亡率上升,增殖指数降低。结论 ATRA有望成为有效的颊黏膜鳞状上皮癌前病变阻断药物。

急性早幼粒细胞白血病凝血紊乱机制及诱导治疗期间凝血纤溶参数的变化

急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者极易发生出血及血栓并发症,其凝血紊乱的临床表现和实验室检查特征与传统的脓毒性弥散性血管内凝血明显不同。研究认为APL凝血紊乱的主要发生机制包括外源凝血通路激活和原发纤溶亢进,直接依据包括组织因子、癌性促凝物及膜联蛋白Ⅱ表达增加。常见的诱导缓解药物有全反式维甲酸、亚砷酸及蒽环类药物为主的化疗,且各疗法诱导治疗过程中凝血纤溶参数的变化各有差异。现就APL凝血紊乱发生机制的研究进展及诱导治疗期间凝血纤溶参数的变化作一综述。

先天性肾上腺发育不良家系中DAX-1新突变的发现

目的探讨1个先天性肾上腺发育不良家系的临床特征,检测患者及其家属中是否存在剂量敏感的性别反转-先天性肾上腺发育不良基因1(DAX-1)突变。方法对1个家系的两例患者相关医学检查获取临床资料,并取得含患者在内的20名家系成员的外周血液标本;PCR 扩增 DAX-1的全部外显子,扩增产物经纯化后直接测序进行基因检测。结果 2例患者 DAX-1第一外显子处均存在 T785C 半合子突变,家系中有5例女性为此突变的携带者。结论在1个中国人先天性肾上腺发育不良家系中发现 DAX-1新的点突变 T785C。

全反式维甲酸联合VADT方案治疗多发性骨髓瘤临床疗效观察

对于全反式维甲酸（ATRA）用于多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）的治疗尚存争议,争议的焦点为ATRA是否为提高化疗疗效或诱导耐药[1-2]。鉴于热休克蛋白（HSP）在MM中过度表达并与耐药有关,且ATRA可上调成骨细胞转化生长因子-β导致HSP27的蓄积及水平上升[3-7]。有鉴于此,本研究通过MM治疗前后HSP27、RARα2基因的表达及临床指标评估以探讨ATRA对MM的疗效及潜在机制。

全反式维甲酸增强单纯疱疹病毒胸苷激酶基因对前列腺癌PC-3细胞旁观者效应的研究

目的观察全反式维甲酸(ATRA)对单纯疱疹病毒胸苷激酶基因结合更昔洛韦(HSV-tk/GCV)旁观者效应的增强作用及与Cx43表达的关系。方法用携带HSV-tk基因的腺病毒液感染人前列腺癌PC-3细胞,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSV-tk基因整合情况,噻唑蓝(MTT)方法观察ATRA对前列腺癌PC-3,PC-3/TK^+细胞旁观者效应,RT-PCR检测AT- RA诱导Cx43 mRNA表达的作用。结果ATRA显著提高PC-3/TK对GCV的敏感性。在100μmol/L更昔洛韦(GCV)作用下,以10^(-8)mmol/L ATRA与不加ATRA的作用比较,在PC-3,PC-3/TK不同比例混合的各组中,细胞的存活率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。并观察到10^(-8) mmol/LATRA对GCV旁观者效应的增强作用。RT-PCR结果表明,经ATRA处理的PC-3细胞,其Cx43 mRNA的相对拷贝数比值增高约10倍。结论前列腺癌PC-3细胞中,10^(-6)mmol/L ATRA具有明显增强HSV-tk/GCV旁观者效应的作用。其主要机制是通过ATRA在转录水平诱导Cx43 mR- NA表达上调。

急性早幼粒细胞性白血病的复发机制及微小残留病灶的监测

急性早幼粒细胞性白血病（APL）是急性髓系白血病（AML）所有亚型中预后最好的一种,以骨髓及其他造血器官中异常早幼粒细胞浸润、异常染色体t（15;17）、PML-RARα融合基因为特征。