RP-HPLC-ELSD法测定逍遥颗粒中柴胡皂苷c、a、d的含量

目的:采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测(RP-HPLC-ELSD)法同时测定逍遥颗粒中柴胡皂苷c、a、d三种成分的含量。方法:采用安捷伦(Agilent)SB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈(A)-水(B)。梯度洗脱程序为0~18min,30%A;18~26min,35%~45%A;26~35min,45%~55%A。流速为1.0ml/min,柱温为30℃,气体流速为2.5L/min,蒸发温度为60℃,进样量为10μl。结果:柴胡皂苷c、a、d分别在0.950~19.000μg、1.088~21.760μg、1.520~30.400μg的范围内线性关系良好。柴胡皂苷c平均回收率为99.49%,RSD为0.35%(n=9);柴胡皂苷a平均回收率为99.99%,RSD为0.66%(n=9);柴胡皂苷d平均回收率为99.12%,RSD为0.47%(n=9)。结论:该方法准确、灵敏、重复性好,可作为逍遥颗粒中柴胡皂苷c、a、d的含量测定方法。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法直接检测20种未衍生基本氨基酸

应用国产蒸发光散射检测器(ELSD),建立了一种采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器(RHPLC-ELSD)直接测定20种未衍生基本氨基酸的分析方法,并将其用于氨基酸注射液中氨基酸含量的测定。采用BISCHOFFTMC18 AQ PLUS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇-0.2%七氟丁酸溶液(含0.1%三氟乙酸)为流动相进行梯度洗脱,流速0.8 mL/min,ELSD飘移管温度40℃,载气流量2.5 L/min,对20种基本氨基酸进行分离检测。氨基酸的质量浓度在30～300 mg/L范围内,其峰面积的对数值与进样质量的对数值呈良好的线性关系;氨基酸的检出限(信噪比(S/N)>3)介于24～100 ng之间,样品加标回收率为90.6%～106.0%。结果表明,该系统及方法操作简便快速、准确可靠,无需依靠专门的氨基酸分析仪或衍生处理氨基酸即可直接测定氨基酸注射液中氨基酸含量,为药品、食品及化工生产等领域混合氨基酸样品的直接检测提供了参考。

反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定阿胶中的17种未衍生氨基酸

建立了反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC—ELSD）同时测定中药阿胶中17种未衍生氨基酸含量的方法。采用Prevail^TM C18色谱柱（250mm×4．6mmi．d．，5μm），以乙腈-0．7％三氟醋酸溶液（含5．0mmol／L七氟丁酸）为流动相进行线性梯度洗脱，流速为0．8mL／min，在漂移管温度115℃、氮气流量2．5L／min条件下，在25min内即可完成对阿胶中17种氨基酸的分离测定。氨基酸质量浓度为0．073～2．327g／L时，其峰面积的对数值与质量浓度的对数值线性关系良好；17种氨基酸的加样回收率为93.5％～104．8％；信噪比为3时，测得氨基酸的最低检测限介于18．2mg／L与54．6mg／L之间。该法快速、简便、准确，可作为阿胶中氨基酸的直接测定方法，亦为其他药物中氨基酸的分析提供了参考。

星点设计-效应面法优化山茱萸总环烯醚萜苷脂质体的制备工艺

目的:优化山茱萸总环烯醚萜苷脂质体的制备工艺,并对其进行表征。方法:采用逆相蒸发法制备山茱萸总环烯醚萜苷脂质体。采用高效液相色谱法测定山茱萸总环烯醚萜苷脂质体中马钱苷和莫诺苷含量。以总皂苷(以马钱苷和莫诺苷总和计)包封率为指标,通过单因素试验筛选制备山茱萸总环烯醚萜苷脂质体的主要工艺因素后,采用星点设计-效应面法优化药物与磷脂的质量比(药脂比)、胆固醇与磷脂的质量比(胆脂比)和水合介质pH值。利用达尔文激光粒径测定仪测定最优处方下所制脂质体的Zeta电位和粒径,并在透射电镜下观察其形态。结果:确定最优处方的药脂比为0.026、胆脂比为0.107、水合介质pH为5.78。所制3批脂质体的平均包封率为11.63%(n=3),与预测值11.48%的相对误差为1.29%;平均粒径为(80.87±0.27)nm,Zeta电位为(-13.60±5.32)mV,脂质体外观呈球形或类球形。结论:优化后山茱萸总环烯醚萜苷脂质体制备工艺简单,所制脂质体粒径较小。

用反相离子对色谱-蒸发光散射检测法研究阿仑膦酸钠及其相关物质的分离

采用反相离子对色谱-蒸发光散射检测法,研究了阿仑膦酸钠及相关物质的色谱分离。选择的色谱条件是:固定相为Intersil C8(150×4.6 mm i.d.,5μm)柱,以52mmol.L-1正戊胺水溶液(用乙酸调节pH至7.0)-甲醇(98∶2,V/V)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,柱温为室温。在该色谱条件下,阿仑膦酸钠与其有关物质(包括合成过程中残余的原料4-氨基丁酸、亚磷酸及分解产物磷酸盐)分离良好。本法简便、快速,为阿仑膦酸钠的常规分析及质量控制提供了一种可靠而有效的手段。

离子对反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定三乙膦酸铝的含量

建立了以正丁胺为离子对试剂的反相高效液相色谱分析三乙膦酸铝含量的方法。采用Symmetry ShieldRP18色谱柱分离,以甲醇-0.5%正丁胺水溶液(冰乙酸调节pH5.0)(体积比为8∶92)为流动相,流速为0.8mL/min,蒸发光散射检测器(ELSD)检测。在上述条件下,三乙膦酸铝与其主要杂质亚磷酸盐、硫酸盐可以获得分离。在100～1 200mg/L范围内,进样质量与峰面积的双对数值呈良好的线性关系。100mg/L和1 000mg/L两种质量浓度添加水平的回收率分别为100.58%和99.53%,其相对标准偏差(RSD)分别为0.62%和0.49%。该方法简便快捷,为三乙膦酸铝的定量分析提供了更加有效可靠的方法。

反相离子对色谱-蒸发光散射法测定帕米膦酸钠及其有关物质

目的:建立用于帕米膦酸钠含量测定及有关物质检查的分析方法。方法:采用反相离子对色谱法,并配以蒸发光散射检测器(ELSD),Inertsil C_8柱为固定相,流动相为52 mmol·L^(-1)正戊胺水溶液(用醋酸调节 pH 至7.0)-甲醇(98:2),流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为室温。结果:方法的线性范围为625.0～125.0μg·mL^(-1),回归方程为 lgA=2.64951gC+0.2445,r=0.9991。方法的平均回收率为100.3%(n=9)。在该色谱条件下,帕米膦酸钠与其有关物质(包括残留的合成原料β-丙氨酸、亚磷酸及氧化分解产物磷酸盐)的分离良好,且样品测定不受辅料干扰。结论:本法不需特殊的样品处理过程,快速,特异性好,适用于帕米膦酸钠的常规检测及有关物质检查,为该药的质量控制提供了新的可靠的分析手段。

反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定紫苏子油中的α-亚麻酸

建立了反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器（RP—HPLC—ELSD）测定紫苏子油中α-亚麻酸含量的方法。紫苏子油样用0．5mol／L的KOH—CH3OH溶液于60℃水浴中皂化20min、6mol／L的盐酸酸化后用无水乙醚萃取。再用氮气流吹干乙醚。用甲醇溶解并定容。然后直接进行RP—HPLC—ELSD分析。结果表明，当α-亚麻酸质量为6．2～45．4μg时。其峰面积A的对数（lgA）与α-亚麻酸质量m（μg）的对数（lgm）呈线性关系，线性方程为lgA=1．3675·lgm—1．628。相关系数为0．9973（n=5）。以信噪比S／N=3计算。方法的检出限为0．11μg。被分析的紫苏子油中α-亚麻酸的含量为6．79％（质量分数），相对标准偏差（RSD）为5．1％（n=5）；平均回收率为102％，RSD为6．3％（n=5）。该方法简单、快速、准确。

白细胞介素-2脂质体的制备及其活性和稳定性的研究

利用逆相蒸发法制备出白细胞介素－2（IL－2）脂质体，其包封率为34．52±1．12％，在电镜下具有典型大单层脂体结构，大小为0．2μm左右。利用“ConA诱导T细胞微量测定法”对其活性进行了测定，结果表明IL－2脂质体，活性提高，稳定性好。

离子对反相液相色谱-蒸发光散射检测法分析钻井液添加剂“小阳离子”的有效含量

建立了离子对反相液相色谱-蒸发光散射检测器测定钻井液添加剂"小阳离子"2,3-环氧丙基三甲基氯化铵(EPTMAC)和3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵(CHPTMAC)有效含量的方法。以AtlantisT3柱(150mm×4.6mm,5μm)为分析柱,流动相为甲醇-5mmol/L七氟丁酸水溶液(10∶90,v/v),流速为1mL/min。蒸发光散射检测器漂移管的温度为50℃,气体压力为206.7kPa(30psi)。样品用超纯水稀释过滤后直接进样分析,10min内EPTMAC和CHPTMAC获得分离和检测。采用二阶方程对标准曲线进行拟合,EPTMAC和CHPTMAC校正曲线的相关系数均为0.9995,检出限(S/N=3)分别为13mg/L和18mg/L,定量限(S/N=10)分别为45mg/L和61mg/L,平均回收率分别为91.2%～98.6%和93.2%～102.3%,相对标准偏差(n=5)分别为1.7%～2.5%和1.2%～1.8%。该方法快速准确,可用于油田钻井液添加剂"小阳离子"的质量控制。

虫草素类似物2’-脱氧腺苷脂质体的制备及表征

虫草素具有多种生物活性,通过与新型药物载体脂质体结合,可解决其临床中的脱氨基作用。2'-脱氧腺苷是虫草素的结构类似物,易制备,具有和虫草素相同的紫外最大吸收波长(259nm),是一种优良的虫草素替代品,研究2'-脱氧腺苷脂质体可为虫草素脂质体的研究提供重要的参考。本文采用逆相蒸发法制得球形、粒径170～350nm、包封率为45%、稳定性良好的2'-脱氧腺苷脂质体。为虫草素脂质体研究提供基础数据。

核壳型色谱柱-反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定饮料中5种人工合成甜味剂

建立了一种同时测定饮料中主要限用人工合成甜味剂:安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、三氯蔗糖和阿斯巴甜的反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法。采用核壳型HALO色谱柱,甲醇/甲酸-三乙胺缓冲溶液(p H=4.5)为流动相,梯度洗脱,ELSD检测,结果表明5种甜味剂在4.5 min内能够实现完全分离。线性范围为5μg/m L^500μg/m L,线性相关性系数大于0.997,方法最低检出限为2μg/m L,定量限为5μg/m L。在3个添加水平下,样品的加标回收率为83.0%~106.7%,相对标准偏差为0.84%~3.37%。该方法方便、快速、适用性强并可快速推广,可实现饮料中多种人工合成甜味剂的同时分离检测,同时也适用于无紫外吸收的甜味剂的检测。

胆酸-黄芩苷脂质体的制备

目的制备胆酸-黄芩苷脂质体。方法逆向蒸发法制备脂质体。在单因素试验基础上,以胆酸用量、磷脂-药物比例、磷脂-胆固醇比例为影响因素,包封率、载药量为评价指标,Box-Behnken设计优化制备工艺。然后,对所得脂质体进行质量评价,测定其体外释放度。结果最佳条件为胆酸用量9.06 mg,磷脂-药物比例7.23∶1,磷脂-胆固醇比例4.55∶1,包封率44.1%,载药量5.05%。所得脂质体为淡黄色球形或类球形,物理稳定性良好,平均粒径142 nm,PDI 0.190,Zeta电位-7.82 mV,6 h内累积释放率为57.83%,体外释放行为符合双相动力学模型。结论该方法稳定可靠,可用于制备具有缓释作用的胆酸-黄芩苷脂质体。

核壳液相色谱-蒸发光散射检测法直接检测20种氨基酸

目的 ：应用蒸发光散射检测器（evaporative light scattering detector,ELSD）、＂HALO＂核-壳型新型填料液相色谱柱,建立一种高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）直接测定20种未衍生氨基酸的分析方法,并将其用于复方氨基酸注射液中氨基酸含量的测定。方法 ：采用核-壳型HALO色谱柱（4.6 mm×150 mm,2.7 mm C18）,以甲醇-九氟戊酸-七氟丁酸-三氟乙酸-水为流动相进行梯度洗脱,流速0.5 ml/min,ELSD飘移管温度40℃,载气流速3.0 L/min,对20种基本氨基酸进行分离检测。结果 ：氨基酸的质量浓度在0.01~1.0 mg/ml范围内,其峰面积的对数值与进样质量的对数值呈良好的线性关系;氨基酸的检出限介于20~50 ng之间,样品加标回收率为89.0%~111.2%。结论 ：该方法操作简便快速、准确可靠,溶剂消耗少,为药品、食品、饲料及化工生产等领域混合氨基酸样品的直接检测提供了参考。

反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定复方中的盐酸葡萄糖胺

建立了应用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器（RP—HPLC—ELSD）测定复方产品中盐酸葡萄糖胺含量的方法。该方法以C18色谱柱为固定相，甲醇-0．3％五氟丙酸为流动相，采用蒸发光检测器，测定了复方中盐酸葡萄糖胺的含量。结果表明，盐酸葡萄糖胺在0．2～1．0mg／mL的质量浓度范围内二次回归的相关系数为0．9999，精密度（以相对标准偏差表示）为0．50％。该方法具有简便、快速、准确、重现性较好的特点。

HPLC-ELSD法测定缬氨酸样品中杂质氨基酸的含量

建立了反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定缬氨酸样品中杂质氨基酸含量的方法。采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6×250mm,5μm),以0.1%三氟乙酸乙腈溶液-0.1%三氟乙酸水溶液为流动相进行线性梯度洗脱,流速为0.8mL.min-1,在漂移管温度60℃,氮气流量1.5L.min-1的条件下,在25min内完成缬氨酸样品中杂质氨基酸的分离测定。在线性范围内,各组分进样质量的常用对数值与峰面积的常用对数值均呈良好的线性关系。精密度和重复性较好,样品的加样回收率为97.5%～98.0%。该方法检测速度快、检测过程简单方便、检测结果准确可信,可以作为缬氨酸样品中杂质氨基酸含量的检测方法,也为其他原料药中氨基酸的分析提供了参考。

胰岛素柔性脂质体经小鼠皮肤给药的降血糖作用

目的 研究胰岛素柔性脂质体的制备及其对正常小鼠经皮给药的降血糖效果。方法 以逆相蒸发 探针式超声法制备胰岛素柔性脂质体 ,对其形态、大小和包封率进行测定 ;以 0 .6 0u·cm-2 的剂量 ,将其非封闭性涂布于小鼠皮肤 ,用酶 苯酚法测定小鼠血糖 ,并与胰岛素普通脂质体、胰岛素溶液比较。结果 胰岛素普通脂质体和柔性脂质体的粒径分别为 (6 1.82±6 .89) ,(74.0± 7.6 5 )nm ,多分散性指数分别为 (5 0 .6 1± 6 .32 ) % ,(14.6 2± 4.0 1) % ,包封率分别为 (31.6 1± 1.2 3) % ,(35 .35±3 .49) % )n =3)。胰岛素柔性脂质体在 1h内降糖百分率为 (2 1.42± 10 .19) % ,5h时达到 (6 1.48± 8.97) % ,维持降糖时间 18h。胰岛素普通脂质体和胰岛素溶液几乎没有降糖作用 ,与给予生理盐水对照组相当。结论 柔性脂质体有较强的皮肤穿透作用 。

茶多酚脂质体的制备研究

目的优化制备茶多酚-维生素E脂质体的配方。方法采用逆相蒸发法制备。以包封率作为考察指标,经正交优化选择,确定制备脂质体的最佳配方。结果最佳配方为:卵磷脂/胆固醇(摩尔比)为2∶1;茶多酚浓度为10 mg/mL;维生素E/卵磷脂(质量比)为1∶8;有机相/水相(体积比)为3∶1,此时包封率可达(50.81±1.92)%。显微镜下观察到了脂质体结构。平均粒径为327 nm。结论此法操作简便可靠,所需设备简单,重现性较好,可适用于包埋水溶性药物。

口服胰岛素纳米脂质体的制备及其降血糖作用

目的 :改进胰岛素纳米脂质体的制备方法 ,考察脂质体经正常大鼠小肠给药和灌胃给药的降血糖效果。方法 :通过改变油相容积及油 /水相比例 ,采用逆相蒸发 -超声法制备了胰岛素纳米脂质体 ;测定了纳米脂质体的包封率 ;通过灌胃和小肠途径 ,给正常大鼠以 350 IU/ kg的剂量 ,用酶 -苯酚法测定大鼠血糖 ,并与空白纳米脂质体、胰岛素溶液及生理盐水相比较。结果 :胰岛素纳米脂质体的平均粒径为 83.3nm,多分散系数为 0 .4 45,包封率为 78.5% ;大鼠灌胃给药后未能显示降血糖作用 ,但小肠给药后 0 .2 5h血糖下降 37.6%± 1 3.9% ,0 .5h血糖下降了 89.3%± 9.5% ,维持 50 %左右降血糖水平 2 h,而同法给予的胰岛素溶液、生理盐水和空白纳米脂质体组均无降血糖作用。结论 :实验初步证实制备的纳米脂质体可以保护胰岛素在小肠中的活性并促进胰岛素吸收。

甲氨碟呤脂质体的几种制备方法比较

目的探讨脂质体的制备方法 ,以便在具体工作中根据不同的目的选择适当的制备方法。方法采用逆相蒸发法、注射法、薄膜法和超声法制备包裹了甲氨喋呤和环胞苷的脂质体。对各种方法的关键步骤进行了讨论。结果被包物质如不稳定 ,采用薄膜法轻轻振摇超过 10h ,包封率可比短时间或震荡激烈提高。被包物质如经过短时间的超声和有机溶剂处理 ,采用逆相蒸发法 ,可获得较高包封率。结论根据被包物质的性质及具体工作不同 ,选择适当的脂质体制备方法 。